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慢性粒细胞白血病树突状细胞的体外无血清培养及杀瘤效应

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西安交通大学学报（医学版） 2002年第5期23卷 464-467页

作者：赵文理邢佩霓魏续仓王彤杨娣娣李梅生西安交通大学陕西医院血液科西安710068

目的　建立慢性粒细胞白血病 (CML)树突状细胞 (DCs)体外无血清培养体系。方法　小牛血清 (FCS)、无血清 (SFM)及自体血清分别培养CML病人CD34 + 细胞或单个核细胞 (MNCs) ,以SCF、GM CSF、TNF α、IL 4 (A)与GM CSF、TNF α、IL 4 (B)... 详细信息

目的　建立慢性粒细胞白血病 (CML)树突状细胞 (DCs)体外无血清培养体系。方法　小牛血清 (FCS)、无血清 (SFM)及自体血清分别培养CML病人CD34 + 细胞或单个核细胞 (MNCs) ,以SCF、GM CSF、TNF α、IL 4 (A)与GM CSF、TNF α、IL 4 (B)两组不同的细胞因子作对照。结果　CML DCsHLA DR高表达 ,CD80、CD83和CD86表达比例不高 ,异体混合淋巴细胞反应能力不强。SFM同FCS体系相比无显著差异。 5例CML DCsPh染色体比例与培养前MNCsPh染色体比例基本吻合 ;同时以CML DCs同自身T细胞、自体Ph+ MNCs共孵育 ,测其杀伤率为 (38.5± 6 .5 ) %。结论　CML DCs携带Ph染色体 ,能刺激自体T细胞杀伤自身白血病细胞 ,但需进一步改善其功能。

关键词：慢性粒细胞白血病树突状细胞无血清培养 Ph染色体细胞毒效应

Serum-free culture of dendritic cells from patients with chronic myeloid leukemia in vitro and estimation of their cytotoxicity

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Chinese Medical Journal 2002年第9期115卷 1296-1300,143-144页

作者：赵文理邢佩霓魏续仓王彤杨娣娣李梅生陕西省人民医院即西安交通大学陕西医院血液科西安710068

OBJECTIVE: To establish a serum-free culture system of dendritic cells (DCs) from chronic myeloid leukemia (CML) cells so that DCs vaccine may be applied to the adoptive immunotherapy of CML in the near future. METHODS: Fetal calf serum, serum-free medium and autologous serum were used for culture of DCs. The usage of cytokines was classified into two groups: group A (stem cell factor, granulocyte/macrophage colony-stimulating-factor, tumor necrosis factor-alpha and interleukin-4) and group B (granulocyte/macrophage colony-stimulating-factor, tumor necrosis factor-alpha and interleukin-4). The phenotypes of DCs were analyzed by using indirect immunofluorescence and flow cytometry. Mixed leukocyte responses were performed by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. Chromosome analysis of DCs can be achieved by displaying G banding. T cells from CML patients were stimulated with autologous DCs and T-cell cytotoxicity was measured by (MTT) assay. RESULTS: CD34(+) cells or mononuclear cells were obtained from peripheral blood or bone marrow samples of eight patients of chronic-phase CML. Group A of serum-free medium was better than group B in expansion of total cell numbers and the rate of DCs. These results of serum-free medium were not significantly different from those of fetal calf serum medium, but the results of autologous serum medium were inferior to two groups above. The expression of major histocompatibility complex class II antigen on the surface of DCs was notable (> 50%), but the expression of CD83 and the costimulatory molecules CD86 was not noticeable (10% - 50%). Although CD1a(+)/CD14(-) DCs were potent stimulators of allogeneic lymphocytes, expansion of T cells from normal volunteers were not significant (average 27.2 fold at DCs: T cells ratio of 1:10). At day 12, CD1a(+) cells from three patients were studied by displaying G banding and Ph(+) cells in these populations were 100%, 98% and 60%, respectively. At an effector: target ratio of 40:1, 32% to

关键词： Cells, Cultured Culture Media, Serum-Free Cytotoxicity, Immunologic Dendritic Cells Humans Immunotherapy, Adoptive Leukemia, Myeloid, Chronic Research Support, Non-U.S. Gov't T-Lymphocytes

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人卵黄囊造血的探讨

细胞生物学杂志 1999年第1期21卷 37-39页

作者：邢佩霓韩秀蕊杨娣娣魏续仓李梅生陕西省人民医院血液病研究室西安710068

采用卵黄囊组织切片、涂片的形态学、细胞化学染色、造血干/祖细胞体外培养及CD_(34)单克隆抗体免疫荧光检测等方法研究表明:人卵黄囊中存在造血岛,造血岛内由于造血微环境的特点致使此期造血主要向红系分化。血岛中检测出CD_(34)^+细胞... 详细信息

采用卵黄囊组织切片、涂片的形态学、细胞化学染色、造血干/祖细胞体外培养及CD_(34)单克隆抗体免疫荧光检测等方法研究表明:人卵黄囊中存在造血岛,造血岛内由于造血微环境的特点致使此期造血主要向红系分化。血岛中检测出CD_(34)^+细胞,比例高于胎肝及成人骨髓,干/祖细胞于体外培养形成红系集落。结论:人胚胎期造血源于卵黄囊。

关键词：卵黄囊造血岛干/祖细胞

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人脐血树突状细胞体外无血清培养

中国实验血液学杂志 1999年第4期7卷 296-301页

作者：赵文理邢佩霓魏续仓李梅生杨娣娣陕西省人民医院血液科西安710068

树突状细胞(dendritic cell,DC)作为体内功能最强的抗原递呈细胞,已试用于肿瘤的免疫治疗,但多数实验室培养DC的体系中包含血清,使其临床应用受到限制。本研究以人脐血为来源,建立了无血清培养DC体系,以期将来用于临床。首先,用rhGM-CSF... 详细信息

树突状细胞(dendritic cell,DC)作为体内功能最强的抗原递呈细胞,已试用于肿瘤的免疫治疗,但多数实验室培养DC的体系中包含血清,使其临床应用受到限制。本研究以人脐血为来源,建立了无血清培养DC体系,以期将来用于临床。首先,用rhGM-CSF加rhTNF-α,进行有血清液体悬浮培养,14天后,从(1±0.5)×10~4/ml CD34^+细胞或(5±2)×10~5/ml单个核细胞中,总细胞数扩增5倍,DC分别占(25±5)％和(17±5)％。第二,以无血清培养基代替有血清培养基,培养21天,(2±1)×10~6/ml单个核细胞没有数量的扩增,DC占(7±2)％。最后,对上述培养体系,在第5天(有血清培养基)或第12天(无血清培养基)后加入rhIL-4,DC产率及细胞总数均未增加。本研究结论:①根据液体悬浮培养中观察到粒、巨噬细胞和DC的混合集落及DC小丛,证实DC与粒、巨噬细胞有共同祖先,均来源于CD34^+造血干/祖细胞;②脐血单个核细胞虽较CD34^+细胞产生DC的比率稍低,但分离方便,花费少;③无血清体系的培养效果不如有血清体系,培养所需时间也长,细胞产率也低,有待进一步完善;④未证实rhIL-4能增加DC产率。

关键词：树突状细胞脐带血 CD34^+细胞无血清培养细胞因子

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人脐带血造血祖细胞生物学特性研究

西安医科大学学报 1998年第2期19卷 269-270页

作者：邢佩霓杨娣娣韩秀蕊魏续仓李梅生陕西省人民医院血液病研究室西安710068

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人脐血造血祖细胞与脐血浆依赖性的研究

医学研究杂志 1997年第6期31卷 39-40页

作者：邢佩霓相娣娣韩秀蕊魏续仓李梅生陕西省人民医院血研室西安710068

人脐带血中含有较骨髓细胞更原始更早期的造血干细胞群,使人们对脐血替代骨髓移植寄予极大的关注。本文通过造血祖细胞体外培养,观察来自人脐带血、外周血、骨髓的粒-单系祖细胞（CFU-GM）不同的生物学特性。材料与方法 1.标本采集脐带... 详细信息

人脐带血中含有较骨髓细胞更原始更早期的造血干细胞群,使人们对脐血替代骨髓移植寄予极大的关注。本文通过造血祖细胞体外培养,观察来自人脐带血、外周血、骨髓的粒-单系祖细胞（CFU-GM）不同的生物学特性。材料与方法 1.标本采集脐带血来自本院产房正常孕妇足月分娩后脐静脉采血、肝素20u/ml抗凝。骨髓、外周血采自正常献髓者。 2.实验方法依照本室各系祖细胞体外培养常规方法。培养体系:粒单系集落刺激因子（GM-CSF）20ng/ml,20％脐血浆（CB）,5×105单个核细胞/ml。将培养皿置于37℃、5％CO2、饱和湿度的培养箱中培养。第14天计数CFU-GM集落（>40个细胞为一个集落）。

关键词：脐血浆造血祖细胞人脐带血体外培养外周血造血干细胞生物学特性粒单系集落刺激因子培养体系骨髓移植

重组人G-CSF、EPO对白血病及骨髓增生异常综合征细胞的作用

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中国实验血液学杂志 1994年第2期2卷 161-164页

作者：邢佩霓李梅生魏续仓陈秀生李杞侠陕西省人民医院血研室西安710000

近年,有关造血因子对造血调控的研究比较活跃。本文应用体外半固体培养,就重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)、重组人红细胞生成素(rhEPO)及PHA-MNCCM对15例初诊急性粒细胞白血病(AML)、4例慢性粒细胞白血病(CML)和7例骨髓增生异常综合... 详细信息

近年,有关造血因子对造血调控的研究比较活跃。本文应用体外半固体培养,就重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)、重组人红细胞生成素(rhEPO)及PHA-MNCCM对15例初诊急性粒细胞白血病(AML)、4例慢性粒细胞白血病(CML)和7例骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓细胞的体外增殖作用以及刺激因子间联合作用进行了观察。实验结果显示AML细胞对各种刺激因子的反应均不完全相同,表现在集落、丛的数量和大小的变化。rhG-CSF、PHA-MNCCM均有刺激白血病细胞增殖与诱导分化作用。MDS骨髓细胞对造血因子的反应与白血病细胞有所不同,表现在对各种造血因子反应程度较一致。且3种生长因子同时加入有协同作用。对PHA有依赖性,但不如白血病细胞敏感。另外,观察到rhG-CSF对正常人CFU-GM、BFU-E的增殖分化有较强的刺激作用。

关键词：生长因子体外培养骨髓细胞

急性粒细胞白血病细胞体外长期液体培养中增殖的研究

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中国实验血液学杂志 1993年第2期1卷 123-126页

作者：邢佩霓李梅生魏续仓韩秀蕊李杞侠陕西省人民医院血液病研究室西安710068

白血病研究提示人急性粒细胞白血病是发生于多向干细胞水平的肿瘤性变,而另一些可发生在晚些阶段致细胞成熟停滞。本研究为来自11例AML的骨髓或血的单个核细胞的液体培养研究。实验结果表明CFU-AML有2种亚群。一种呈指数性生长并形成集... 详细信息

白血病研究提示人急性粒细胞白血病是发生于多向干细胞水平的肿瘤性变,而另一些可发生在晚些阶段致细胞成熟停滞。本研究为来自11例AML的骨髓或血的单个核细胞的液体培养研究。实验结果表明CFU-AML有2种亚群。一种呈指数性生长并形成集落。另一种是指数性生长不形成集落,以至于甲基纤维素培养中亦同样具有足够的自我更新能力(指数性增殖)一个长时间,这些细胞在适当的体系中不形成BFU-E、CFU-TL、CFU-GEMM和CFU-MK集落。细胞化学染色为阴性,淋巴细胞单抗荧光染色为阴性。两种亚群在PHA依赖性、形态及体外生存时间方面均有区别。我们考虑后者可能为白血病干细胞。

关键词：液体培养自我更新白血病干细胞

不同水生植物对水产养殖尾水氮磷去除效果研究

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生态环境学报 2025年

作者：梅耀萍吴本丽黄龙吴仓仓陈静陈夏君何吉祥水产增养殖安徽省重点实验室安徽省农业科学院水产研究所

为了多角度分析水生植物利用养殖尾水不同形态氮磷过程，揭示营养元素循环利用规律，优化水产生态养殖模式。通过监测黄花美人蕉（Canna indica var. flava）、芦苇（Phragmites australis）、香蒲（Typha orientalis）和菖蒲（Acorus c... 详细信息

为了多角度分析水生植物利用养殖尾水不同形态氮磷过程，揭示营养元素循环利用规律，优化水产生态养殖模式。通过监测黄花美人蕉（Canna indica var. flava）、芦苇（Phragmites australis）、香蒲（Typha orientalis）和菖蒲（Acorus calamus）对中华鳖（Pelodiscus sinensis）养殖尾水净化过程中不同形态氮（铵态氮NH4+-N、亚硝态氮NO2--N和硝态氮NO3--N）和磷（可溶态磷DP、可溶活性态磷SRP、可溶态有机磷DOP和颗粒态磷PP）含量，结合水生植物生物量和元素累积情况，进一步分析其对尾水净化效果和利用机制。黄花美人蕉组对总氮、总磷的去除率最高，分别为27.5%和21.9%；所有处理组对NH4+-N和NO2--N去除率均达到95.0%以上，对NO3--N去除率为25.4%-26.9%，黄花美人蕉组对不同形态氮去除率最高；芦苇、黄花美人蕉和香蒲组分别对DP、SRP和PP去除率最高。黄花美人蕉组总氮累积量、地上部分总磷累积量显著高于其他组，菖蒲组地下部分总磷累积量显著高于其他组；氮和磷累积量与总氮、总磷去除率之间具有显著的正相关关系（r=0.763,p=0.000;r=0.443,p=0.013）。总之，黄花美人蕉组净化效果更好，其次是芦苇、菖蒲和香蒲组；水生植物会选择优先利用铵态氮，其次是亚硝态氮和硝态氮，其地上部分与地下部分吸收利用表现出不同的响应规律。

关键词：水生植物养殖尾水营养盐累积氮磷吸收净化效果健康养殖