检索结果-南通市图书馆

线粒体呼吸链复合体Ⅱ+Ⅲ的电子传递与质子转移的偶联

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生物化学杂志 1995年第5期11卷 593-599页

作者：魏影允焦选茂刘树森中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室

研究了鼠肝线粒体内膜体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ的Ｈ~＋／２ｅ比与Δψ的相关性及其调节因素。证明：（１）用光谱法测得复合体Ⅱ＋Ⅲ的电子传递与质子转移初速度的Ｈ~＋／２ｅ比值接近４，与铁氰化钾脉冲法测得的结果相同。Ｈ~＋／２ｅ随... 详细信息

研究了鼠肝线粒体内膜体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ的Ｈ~＋／２ｅ比与Δψ的相关性及其调节因素。证明：（１）用光谱法测得复合体Ⅱ＋Ⅲ的电子传递与质子转移初速度的Ｈ~＋／２ｅ比值接近４，与铁氰化钾脉冲法测得的结果相同。Ｈ~＋／２ｅ随着ΔμＨ~＋升高而逐渐下降。荧光透析法测定不同Ｆｅ^（３＋）还原速率建立的不同Δψ时，证明Ｈ~＋回漏对Δψ和Ｈ~＋泵出速度的依赖性。讨论了呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ电子传递与质子转移之间的偶联以及“Ｒｅｄｏｘｓｌｉｐ”和“ｐｒｏｔｏｎｌｅａｋ”的现象。（２）抑制剂实验说明线粒体内膜中Ｃａ^（２＋）、Ｐｉ与Ｈ~＋的协同运输系统对线粒体内膜Ｈ~＋泵出及Ｈ~＋回漏作用有一定的调控作用。

关键词：线粒体呼吸链复合体质子转移电子传递

人α-乳白蛋白在转基因小鼠乳汁中的动态表达图貌

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中国科学（C辑） 2003年第4期33卷 317-322页

作者：刘思国魏影允胡国法高虹刘思金劳为德中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100080

利用人α-乳白蛋白基因(hα-Lac)探针从8×105个噬斑中筛选出两个阳性克隆,以此构建了包含有7.3kb的hα-lac的5′调控序列、2.0kb的编码区和227 bp的牛生长激素3′UTR的乳腺表达框架.通过显微注射方法获得5只hα-Lac转基因整合雌性小鼠... 详细信息

利用人α-乳白蛋白基因(hα-Lac)探针从8×105个噬斑中筛选出两个阳性克隆,以此构建了包含有7.3kb的hα-lac的5′调控序列、2.0kb的编码区和227 bp的牛生长激素3′UTR的乳腺表达框架.通过显微注射方法获得5只hα-Lac转基因整合雌性小鼠.对其中1只转基因表达量较高(达到0.3 mg/mL)的小鼠的一个泌乳期中人乳白蛋白的表达过程分析表明:转基因并不遵从小鼠内源的α-Lac的表达图貌,而是以转基因特异的方式表达,表现为在分娩后的前3天转基因的表达低,自第4天开始逐渐增高,到第13～14天达到峰值后渐趋稳定,并持续到泌乳期结束.在第2个泌乳期中,转基因的表达量与首次泌乳期的水平相当.此外,转基因表达小鼠的泌乳量较正常小鼠和非表达整合小鼠有一定的增加,提示泌乳过程中较高浓度的α-Lac可能引发了产乳量的增加.

关键词：人α-乳白蛋白转基因小鼠乳汁基因表达乳腺表达产乳量

位点特异性重组酶Cre的克隆、表达、纯化及体外活性鉴定

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高技术通讯 2002年第6期12卷 31-33页

作者：高虹张传生魏影允胡国法劳为德中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100080

克隆了Cre基因 ,分别构建了真核表达载体 pEF EBFP Cre和 pGEX Cre,在大肠杆菌中表达了Cre重组酶 ,并证明了重组酶的删除特性。

关键词：位点特异性重组酶Cre 克隆纯化体外活性鉴定 Cre/loxp系统原核表达 Cre基因基因表达大肠杆菌

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外卖配送电动自行车换电柜选址定容实证研究

交通运输系统工程与信息 2024年第1期24卷 230-239,252页

作者：孙小慧黄诚允新疆大学建筑工程学院乌鲁木齐830017 新疆大学商学院乌鲁木齐830091

针对外卖配送电动自行车换电柜布局不合理带来的部分换电柜利用率低与部分换电需求得不到及时满足的供需矛盾问题,本文通过聚类POI(Point of Interest)数据确定外卖配送起止点,并通过仿真模拟外卖骑手配送路径预测外卖配送电动自行车换... 详细信息

针对外卖配送电动自行车换电柜布局不合理带来的部分换电柜利用率低与部分换电需求得不到及时满足的供需矛盾问题,本文通过聚类POI(Point of Interest)数据确定外卖配送起止点,并通过仿真模拟外卖骑手配送路径预测外卖配送电动自行车换电需求时空分布,构建换电柜运营商总成本最低和用户满意度最高的多目标换电柜选址定容模型,并以新乡市主城区为例,采用NSGA-II(Non-dominated Sorting Genetic Algorithm II)算法得到换电柜选址定容方案。研究结果表明:仿真模拟得出的换电需求时间分布预测值与实际值基本吻合,换电需求在11:00,14:00,17:00和20:00左右急剧增长,且11:00和14:00左右的换电需求量显著高于17:00和20:00左右的换电需求量,外卖骑手配送路径仿真模拟方法在换电需求预测上具有较高的预测精度;换电柜选址方案不能同时满足运营商和用户利益均为最优,用户满意度的提高需以增加运营商总成本为代价;同时,兼顾运营商和用户利益的新乡市主城区外卖配送电动自行车换电柜最佳建设数量为26,其中,容量为11的换电柜11个,容量为22的换电柜8个,容量为33的换电柜7个;新乡市主城区应按照备选点编号15-7-19-17依次新增换电柜至30个,此时,用户满意度最大,若继续增加换电柜建设数量,只会增加运营商总成本。

关键词：城市交通换电柜选址 POI聚类配送路径模拟电动自行车惩罚成本

小鼠乳清酸蛋白启动区指导人促红细胞生成素在转基因小鼠乳腺的表达

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科学通报 1999年第14期44卷 1524-1527页

作者：张旭晨成国祥陈建泉成勇魏影允姚乌兰徐少甫劳为德中国科学院发育生物学研究所北京100080 扬州大学畜牧兽医学院扬州225009

以小鼠乳清酸蛋白基因 (mWAP)调控区与人促红细胞生成素基因 (hEPO)构建融合基因 ,经动物个体暂态表达方法确证hEPO可在乳腺特异表达后 ,用显微注射方法将融合基因导入小鼠受精卵 ,再将受精卵移植到假孕小鼠 ,获得 86只G0 代小鼠 ,经PCR... 详细信息

以小鼠乳清酸蛋白基因 (mWAP)调控区与人促红细胞生成素基因 (hEPO)构建融合基因 ,经动物个体暂态表达方法确证hEPO可在乳腺特异表达后 ,用显微注射方法将融合基因导入小鼠受精卵 ,再将受精卵移植到假孕小鼠 ,获得 86只G0 代小鼠 ,经PCR Southernblot及Southernblot证实 ,有 5 8只整合阳性小鼠 ,整合率为 6 7% ,ELISAkit,dotELISA等方法检测小鼠39只 ,有 1 6只表达阳性 ,乳汁中人hEPO的表达量高于 1 5 μg/mL .

关键词：促红细胞生成素乳腺乳清酸蛋白基因启动区

鼠肝线粒体呼吸链质子泵高能质子流向膜表面及其在能量偶联中的作用

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动物学报 1996年第1期42卷 96-104页

作者：焦选茂须梅魏影允李林江刘树森中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100080

利用面 △ψ感的荧光探针Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３，测定了琥珀酸脉冲引起的鼠肝线粒体内膜体 △ψ 时相的变化，同时用高精度ｐＨ电极测定了相应体系介质ｐＨ时相的变化。结果表明：线粒体跨膜电位的变化速率，快于介质ｐＨ的变化速... 详细信息

利用面 △ψ感的荧光探针Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３，测定了琥珀酸脉冲引起的鼠肝线粒体内膜体 △ψ 时相的变化，同时用高精度ｐＨ电极测定了相应体系介质ｐＨ时相的变化。结果表明：线粒体跨膜电位的变化速率，快于介质ｐＨ的变化速率，并发现琥珀酸氧化时建立的 △ψ 所维持的时间，短于介质酸化所维持的时间，后者是个缓慢的回复过程，这两者之间存在有时间差。随着温度、Ｋ＋浓度和线粒体蛋白浓度的降低及琥珀酸浓度的增加，此两者的时间差亦相应增大。提示：线粒体内膜表面在能化时存在有被束缚的高能质子。利用铁氰化钾脉冲法证明线粒体内膜体呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）的Ｈ＋／２ｅ比随着温度、Ｋ＋浓度及线粒体蛋白浓度的增高而降低，也支持上述观点。与此同时，线粒体内膜体的呼吸控制率随温度的下降而升高，说明膜表面质子对干线粒体的能量偶联具有更为重要的作用。

关键词：啮齿目鼠高能质子膜表面钱粒体能量偶联

茶黄素的分离纯化及TFDG对肝癌和结肠腺癌细胞的抑制作用

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中国食品学报 2024年第6期24卷 107-116页

作者：卓允允蔡为荣汪玉玲王晴晴安徽工程大学安徽芜湖241000

茶黄素是红茶的优质成分,具有良好的保健功能。本文通过高速逆流色谱(SCCC)分离技术批量提取茶黄素(TFs),选择茶黄素-3,3'-没食子酸酯(TFDG)研究其对肝癌细胞(HepG-2)、结肠腺癌细胞(Caco-2)的作用。HSCCC分离制备得到6个组分,通过高效... 详细信息

茶黄素是红茶的优质成分,具有良好的保健功能。本文通过高速逆流色谱(SCCC)分离技术批量提取茶黄素(TFs),选择茶黄素-3,3'-没食子酸酯(TFDG)研究其对肝癌细胞(HepG-2)、结肠腺癌细胞(Caco-2)的作用。HSCCC分离制备得到6个组分,通过高效液相(HPLC)检测,可确定组分F4中含有茶黄素(TF),F5含有茶黄素-3-没食子酸酯(TF-3-G)和茶黄素-3'-没食子酸酯(TF-3'-G),F6中含有茶黄素-3,3'-没食子酸酯(TFDG)。选择TFDG研究对癌细胞的抑制作用,CCK-8法检测其对HepG-2和Caco-2的作用,发现TFDG随着浓度的增大,时间的延长,对HepG-2和Caco-2细胞有明显的抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。本文从分配系数K和分离因子α研究筛选出可大批量制备茶黄素的溶剂系统。有研究证实癌症的预防和醌还原酶(QR)存在某种关系,将试验数据和理论联合,采用分子对接技术验证TFDG和QR能够形成稳定的络合物,诱导QR的活性,可以增强抗癌效果,研究结果为以后深入研究茶黄素对癌细胞的作用提供参考。

关键词：高速逆流色谱肝癌细胞结肠腺癌细胞分子对接

人类骨桥蛋白(hOPN)在细胞增殖中的功能研究

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高技术通讯 2003年第2期13卷 25-28,40页

作者：刘思金胡国法刘思国魏影允薛延劳为德中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100080 北京积水潭医院创始骨科研究所北京100035

为了研究人类骨桥蛋白 (hOPN)与 2 93细胞增殖、细胞周期及与细胞周期有关基因表达的关系 ,并对其机制进行探讨 ,成功地构建了hOPN真核表达载体并获得了稳定表达hOPN的细胞系 ,也同时获得了稳定表达EGFP的细胞系。hOPN对 2 93细胞具有... 详细信息

为了研究人类骨桥蛋白 (hOPN)与 2 93细胞增殖、细胞周期及与细胞周期有关基因表达的关系 ,并对其机制进行探讨 ,成功地构建了hOPN真核表达载体并获得了稳定表达hOPN的细胞系 ,也同时获得了稳定表达EGFP的细胞系。hOPN对 2 93细胞具有促增殖效应 ,hOPN蛋白激活了 2 93细胞细胞周期蛋白A的表达。实验结果表明 :hOPN通过一定的信号通路刺激了细胞周期蛋白A的表达 ,加快了细胞进入并通过S期 ,从而促进了细胞的增殖。

关键词：细胞增殖功能肿瘤基因表达骨桥蛋白 293细胞流式细胞术细胞周期蛋白A 细胞周期发生学

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清代回屯京旗生活述论

吉林师范大学学报（人文社会科学版） 2024年第2期52卷 1-8,F0002,F0003页

作者：魏影黑龙江大学历史文化旅游学院黑龙江哈尔滨150080

为解决驻京八旗的生计问题,清政府曾于乾隆、嘉庆、道光、光绪几朝移驻京旗满洲闲散回屯至东北地区的拉林、阿勒楚喀、双城堡、呼兰从事屯田活动。为了使这些京旗更好地适应回屯生活,在乾隆朝移驻初期,清政府给予京旗优厚的待遇,出发前... 详细信息

为解决驻京八旗的生计问题,清政府曾于乾隆、嘉庆、道光、光绪几朝移驻京旗满洲闲散回屯至东北地区的拉林、阿勒楚喀、双城堡、呼兰从事屯田活动。为了使这些京旗更好地适应回屯生活,在乾隆朝移驻初期,清政府给予京旗优厚的待遇,出发前发给置装银,到屯后发给立业银,用于采买衣服、籽种、农具、车辆和碾磨等,但由于京旗素来不知节俭,银钱到手随即荡尽,为此,嘉庆、道光时期,清廷改变了对回屯京旗的管理模式,其所用器物均由吉林地方事先代为准备。此外,京旗到屯后所需的米粮、庭院和住房等也都事先配给齐整,并在回屯区内建有相应的水井、街道、桥梁、驿站等基础设施。京旗的到来加强了东北与中原地区的联系,种植棉花和养蚕等技术相继传入东北地区,加速了东北地区的开发。

关键词：清代回屯京旗京旗生活