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肝纤维化的形成机制、动物模型及治疗进展

药物分析杂志 2007年第3期27卷 470-475页

作者：孙楠高尚先中国药品生物制品检定所北京100050

肝纤维化(hepatic fibrosis)是许多慢性肝病的共同病理过程。随着对肝纤维化尤其是免疫性肝纤维化(immune hepaticfibrosis)形成机制研究的不断深入,肝的巨噬细胞在肝纤维化中的重要作用再次被提出,本文主要对免疫性肝纤维化形成机制,... 详细信息

肝纤维化(hepatic fibrosis)是许多慢性肝病的共同病理过程。随着对肝纤维化尤其是免疫性肝纤维化(immune hepaticfibrosis)形成机制研究的不断深入,肝的巨噬细胞在肝纤维化中的重要作用再次被提出,本文主要对免疫性肝纤维化形成机制,尤其是巨噬细胞在肝纤维化形成中的作用、各种肝纤维化模型及抗肝纤维化药物的研究进展进行了综述。

关键词：肝纤维化巨噬细胞动物模型治疗

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体外诊断试剂标准物质国内外现状

药物分析杂志 2008年第7期28卷 1207-1213页

作者：高尚先黄杰中国药品生物制品检定所体外诊断试剂与培养基室北京100050

概述临床检验量值溯源体系和体外诊断试剂标准物质的国内外现状,分别叙述了血脂、酶学、血液学、分子生物学、免疫学、微生物学等方面的检测标准化。阐明加强体外诊断试剂标准物质建设的蘑要意义,不仅有利于诊断结果的准确一致,而且是... 详细信息

概述临床检验量值溯源体系和体外诊断试剂标准物质的国内外现状,分别叙述了血脂、酶学、血液学、分子生物学、免疫学、微生物学等方面的检测标准化。阐明加强体外诊断试剂标准物质建设的蘑要意义,不仅有利于诊断结果的准确一致,而且是做好体外诊断试剂技术监督的有力保证。

关键词：体外诊断试剂溯源性标准物质标准化

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库普弗细胞在肝纤维化中作用的研究进展

药物分析杂志 2007年第11期27卷 1840-1843页

作者：刘艳高尚先中国药品生物制品检定所北京100050

本文综述了肝纤维化的发生机制、库普弗细胞的结构及其分泌的生物活性因子的主要作用,重点讨论了库普弗细胞在肝纤维化过程中的调控作用,探讨抗纤维化治疗可行的新途径。

关键词：库普弗细胞肝纤维化

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短小棒状杆菌CpG-DNA提取方法的研究

药物分析杂志 2009年第3期29卷 448-451页

作者：孙彬裕高尚先山东大学免疫学研究所济南250012 中国药品生物制品检定所北京100050

目的:建立一种高效纯化CP-CpG-DNA的方法,为研究DNA免疫增强佐剂功能奠定基础。方法:应用经超声破碎、蛋白酶K消化、CTAB沉淀及酚、氯仿抽提等步骤从短棒杆菌(Corynebacterium parvum,CP)中提取基因组DNA(CP-CpG-DNA)。结果:琼脂糖凝胶... 详细信息

目的:建立一种高效纯化CP-CpG-DNA的方法,为研究DNA免疫增强佐剂功能奠定基础。方法:应用经超声破碎、蛋白酶K消化、CTAB沉淀及酚、氯仿抽提等步骤从短棒杆菌(Corynebacterium parvum,CP)中提取基因组DNA(CP-CpG-DNA)。结果:琼脂糖凝胶电泳检测,CP-CpG-DNA主要集中在2.3Mb;CP-CpG-DNA经限制性内切酶HpaII酶切后,琼脂糖凝胶电泳检测,得到小于1000bp的片断。结论:建立的高效纯化CP-CpG-DNA方法,获得的CP-CpG-DNA纯度较好,而且CP-CpG-DNA中存在大量非甲基化CpG位点,可用于DNA免疫增强佐剂的应用。

关键词：短小棒状杆菌基因组提取 HpaⅡ CpG基序

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肿瘤标志物免疫测定的标准化

药物分析杂志 2010年第9期30卷 1800-1803页

作者：黄杰曲守方高尚先中国药品生物制品检定所北京100050

参考国内外的标准和文献,总结了临床肿瘤标志物免疫测定过程中肿瘤标志物免疫测定标准化的各个因素。临床标本采集、运送和保存的标准化、检测试剂和方法的标准化、检测结果分析的标准化以及标准物质是肿瘤标志物免疫测定标准化的4个要... 详细信息

参考国内外的标准和文献,总结了临床肿瘤标志物免疫测定过程中肿瘤标志物免疫测定标准化的各个因素。临床标本采集、运送和保存的标准化、检测试剂和方法的标准化、检测结果分析的标准化以及标准物质是肿瘤标志物免疫测定标准化的4个要素。在肿瘤标志物免疫测定标准化各要素中,标准物质是获得具有可比性结果的前提,试剂方法、结果分析和工作程序的标准化,也是不可或缺的要素。标准化是实现肿瘤标志物免疫测定结果可比性的前提,而标准化并非是单一因素,其由诸多关键性环节组成,核心是标准物质的研制及应用。通过阐明肿瘤标志物免疫测定标准化的各个因素,为提高肿瘤标志物免疫测定的准确性和结果的可比性提出了建议。

关键词：肿瘤标志物标准化标准物质

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原位杂交试剂盒在临床诊断领域的应用

中国生物制品学杂志 2014年第7期27卷 968-973,980页

作者：刘艳孙楠高尚先中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050

原位杂交(in situ hybridization,ISH)技术是用于细胞内检测和定位某一特定靶核苷酸的新兴分子诊断技术,随着荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization,CISH)技术的问世和发展,其在灵敏度、特异性、实验室安全性等方面均有了较大进步,并逐渐开发出商品化的试剂盒,应用于微生物检测、产前诊断、肿瘤的鉴别诊断及个体化用药等多个领域。本文将对ISH技术的概况、特点及该类试剂盒在临床诊断中的应用作一综述。

关键词：荧光原位杂交显色原位杂交临床诊断

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人乳头瘤病毒基因分型检测方法进展

药物分析杂志 2010年第8期30卷 1562-1566页

作者：黄杰曲守方包蕾高尚先中国药品生物制品检定所北京100050

人乳头瘤病毒基因分型检测对子宫颈病变的早期发现、宫颈细胞学异常的评估和管理,病程的进展,高度宫颈上皮内瘤变治疗后的随访,以及人群的流行病学状态和病毒疫苗的研制有重要意义.目前国内外对人乳头瘤病毒进行基因分型的方法主要集中... 详细信息

人乳头瘤病毒基因分型检测对子宫颈病变的早期发现、宫颈细胞学异常的评估和管理,病程的进展,高度宫颈上皮内瘤变治疗后的随访,以及人群的流行病学状态和病毒疫苗的研制有重要意义.目前国内外对人乳头瘤病毒进行基因分型的方法主要集中在以靶序列扩增为基础的检测和以信号放大为基础的检测技术两方面,本文就这两方面的检测技术加以叙述。

关键词：人乳头瘤病毒基因分型

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反向杂交法检测HPV基因分型质控品

药物分析杂志 2010年第9期30卷 1680-1683页

作者：曲守方黄杰徐任高尚先中国药品生物制品检定所体外诊断试剂与培养基室北京100050 长春理工大学长春130022

目的:反向杂交法检测HPV基因分型质控品。方法:采用我室建立的HPV基因分型质控品,以单一型质粒DNA和混合质粒DNA为模板扩增,将扩增好的PCR产物进行导流杂交。结果:以单一型质粒DNA为模板扩增时,HPV基因分型结果正确的亚型有18种,该方法... 详细信息

目的:反向杂交法检测HPV基因分型质控品。方法:采用我室建立的HPV基因分型质控品,以单一型质粒DNA和混合质粒DNA为模板扩增,将扩增好的PCR产物进行导流杂交。结果:以单一型质粒DNA为模板扩增时,HPV基因分型结果正确的亚型有18种,该方法的试剂盒对HPV39,52,53亚型的质粒DNA有漏检。以相同百分比的混合质粒DNA为模板扩增时,试剂盒对HPV35,39,42,68亚型的质粒DNA有漏检;以不同百分比的混合质粒DNA为模板扩增时,试剂盒对混合质粒中百分比低(5%或者2%)的质粒DNA存在着漏检现象。结论:建立的HPV基因分型质控品能够对反向杂交法的试剂盒性能指标进行有效评价,能够满足国内诊断试剂质量监督管理的需要。

关键词：人乳头状瘤病毒基因分型质控品反向杂交法

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人类EGFR基因突变体质控品的建立

药物分析杂志 2011年第9期31卷 1758-1763页

作者：黄杰曲守方徐任徐超高尚先中国食品药品检定研究院体外诊断试剂与培养基室北京100050 长春理工大学长春130022

目的:构建了29种人类EGFR基因突变体质控品,为人类EGFR基因突变检测试剂盒的性能评价提供了可靠的质控物质。方法:根据人类EGFR全基因序列,应用Primer Premier 5.0软件在选取的序列区域设计引物,通过PCR介导的定点突变技术引入突变位点... 详细信息

目的:构建了29种人类EGFR基因突变体质控品,为人类EGFR基因突变检测试剂盒的性能评价提供了可靠的质控物质。方法:根据人类EGFR全基因序列,应用Primer Premier 5.0软件在选取的序列区域设计引物,通过PCR介导的定点突变技术引入突变位点、PCR产物与克隆载体连接,转化感受态细菌,筛选阳性克隆等,建立了包含不同人类EGFR基因突变体的质控品。结果:对29种人类EGFR基因突变体质控品进行序列测定,并将测序结果进行BLAST比对,结果表明成功建立了人类EGFR基因突变体质控品。结论:本研究建立的EGFR基因突变体质控品涵盖了EGFR基因的29种突变位点,覆盖了目前最常见的EGFR基因突变类型,能够用于评价国内大多数EGFR基因突变检测试剂盒。

关键词：人类表皮生长因子受体(EGFR) 基因突变质控品 PCR