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食品中转基因成分的检测

食品科学 2001年第7期22卷 59-62页

作者：覃文董洁高东微吴宏中广州出入境检验检疫局广州510623

本研究建立了从多种精加工和深加工食品中提取 DNA的简便、易操作的方法。根据转基因农作物最常使用的外源基因设计引物，采用荧光 PCR－ GeneScan技术，在食品中检测出 35S启动子、 NOS终止子、 nptII标记基因以及目的基因 Cry和 EPSP... 详细信息

本研究建立了从多种精加工和深加工食品中提取 DNA的简便、易操作的方法。根据转基因农作物最常使用的外源基因设计引物，采用荧光 PCR－ GeneScan技术，在食品中检测出 35S启动子、 NOS终止子、 nptII标记基因以及目的基因 Cry和 EPSPS等转基因成分，并对 PCR产物进行测序或酶切分析确认，防止假阳性。

关键词：转基因食品检测食品DNA提取荧光PCR-Genscan

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PCR法定性检测食用油脂中转基因成分

中国油脂 2002年第2期27卷 4-6页

作者：覃文董洁邓鸿铃高东微广州出入境检验检疫局食品实验室

食用油脂 (尤其是精炼油 )被认为几乎不含DNA和蛋白质等生物大分子。针对食用油脂中DNA含量极低、破坏严重的特点 ,成功地建立了食用油脂中DNA提取方法 ,并从中检测出玉米、大豆内源基因 (IVR、Lectin)以及外源抗虫基因 [CryIA(b) ]和... 详细信息

食用油脂 (尤其是精炼油 )被认为几乎不含DNA和蛋白质等生物大分子。针对食用油脂中DNA含量极低、破坏严重的特点 ,成功地建立了食用油脂中DNA提取方法 ,并从中检测出玉米、大豆内源基因 (IVR、Lectin)以及外源抗虫基因 [CryIA(b) ]和抗除草剂基因 (EPSPS) ,为油脂进行核酸类生物性检测提供了一种简捷有效的方法。

关键词：食用油脂 DNA 提取转基因检测 PCR法

MGBG对苜蓿愈伤组织生长、体细胞胚胎诱导及其乙烯生物合成的影响

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Acta Botanica Sinica 1998年第7期40卷 635-641页

作者：黄学林徐九龙高东微叶文红李筱菊中山大学生命科学学院生物系

在苜蓿（ＭｅｄｉｃａｇｏｓａｔｉｖａＬ．）愈伤组织继代之初加入不同浓度的甲基乙二醛双（脒腙）（ＭＧＢＧ）（０．５，１，２ｍｍｏｌ／Ｌ），可不同程度地抑制愈伤组织及其后体胚诱导悬浮培养物的生长和体胚形成；若在体胚诱导... 详细信息

在苜蓿（ＭｅｄｉｃａｇｏｓａｔｉｖａＬ．）愈伤组织继代之初加入不同浓度的甲基乙二醛双（脒腙）（ＭＧＢＧ）（０．５，１，２ｍｍｏｌ／Ｌ），可不同程度地抑制愈伤组织及其后体胚诱导悬浮培养物的生长和体胚形成；若在体胚诱导阶段加入，则上述的抑制作用更为强烈。ＭＧＢＧ不但促进愈伤组织乙烯释放量、内源ＡＣＣ（１氨基环丙烷１羧酸）水平和ＡＣＣ合成酶活性，也促进体胚诱导悬浮培养物的ＡＣＣ水平及ＡＣＣ合成酶的活性，但降低体胚诱导悬浮培养物的ＭＡＣＣ（丙二酰ＡＣＣ）水平。ＭＧＢＧ对体胚诱导和培养物的生长的抑制作用与其上述的对ＡＣＣ和乙烯生成促进作用及降低ＡＣＣ转化成ＭＡＣＣ的效应有关。

关键词：苜蓿体胚发生乙烯生物合成 MGBG

运用SYBR GreenⅠ荧光实时RT-PCR法检测草莓中甲肝病毒

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食品科学 2010年第14期31卷 153-157页

作者：莫雪梅高东微暨南大学药学院基因组药物研究所广东广州510632 广东检验检疫技术中心广东广州510623

针对甲肝病毒的vp3/vp1壳蛋白区域设计引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测甲肝病毒的反应体系。此方法的病毒检测下限达到101TCID50,标准曲线为Ct=-3.052lg(TCID50)+34.57,线形范围101～105TCID50,相关系数0.9961。该方法对甲肝... 详细信息

针对甲肝病毒的vp3/vp1壳蛋白区域设计引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测甲肝病毒的反应体系。此方法的病毒检测下限达到101TCID50,标准曲线为Ct=-3.052lg(TCID50)+34.57,线形范围101～105TCID50,相关系数0.9961。该方法对甲肝病毒检测特异,与轮状病毒、腺病毒、诺如病毒、星状病毒无交叉反应。针对甲肝病毒标准品检测的批内试验变异系数(CV)为0.85%～1.71%(n=5)、批间试验CV为0.76%～1.98%(n=3)。运用此方法随机检测45份草莓样品,检测出3份阳性样品。该检测方法灵敏、特异、重复性好,可应用于水果和蔬菜中甲肝病毒的快速检测。

关键词：甲肝病毒 SYBR GreenⅠ荧光实时RT-PCR 检测草莓

MPCR检测食品中霍乱弧菌和副溶血性弧菌的研究

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卫生研究 2005年第1期34卷 115-118页

作者：许龙岩周宏斌高东微阳静谢钧宪广州出入境检验检疫局食品实验室广州510623

目的建立一种快速、敏感的方法,用于检测食品中O1群(EVC)、O139群霍乱弧菌和副溶血性弧菌。方法针对霍乱弧菌O139特异基因(T139)、肠毒素A亚单位基因(ctxA)、毒力协调A亚单位基因(tcpA),副溶血性弧菌热稳定性直接溶血素基因(tdh)为靶序... 详细信息

目的建立一种快速、敏感的方法,用于检测食品中O1群(EVC)、O139群霍乱弧菌和副溶血性弧菌。方法针对霍乱弧菌O139特异基因(T139)、肠毒素A亚单位基因(ctxA)、毒力协调A亚单位基因(tcpA),副溶血性弧菌热稳定性直接溶血素基因(tdh)为靶序列,建立MPCR检测方法,相应扩增片段依次为417bp、564bp、471bp和202bp。结果用该方法对EVC、O139VC、副溶血性弧菌的标准菌株和野生株,扩增片段出现极好的特异性,而35株非O1非O139群霍乱弧菌、沙门氏菌等未见扩增带。人工污染的罗非鱼、牡蛎、鱼肠和鳃混合物的检出限EVC为22cfug、O139为50cfug、副溶血性弧菌为65cfug,整个实验过程8～10h完成。结论实验结果表明MPCR是敏感、省时、省力的检测方法。

关键词：霍乱弧菌副溶血性弧菌 MPCR检测