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1,25-(OH)_2D_3抑制人肝癌细胞增殖的研究

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中国公共卫生 2002年第3期18卷 310-311页

作者：骆文静王文亮陈景元王枫李波陈耀明第四军医大学劳动与环境卫生学教研室西安710033

目的　探讨 1,2 5 - (OH) 2 D3 抑制肝癌细胞增殖的机制。方法　体外培养肝癌细胞株SMMC - 772 1,培养基添加 10、5 0及 10 0 (nmol/L) 1,2 5 - (OH) 2 D3 作用 2d、4d、6d后 ,用四唑盐比色试验 (MTT)和平板克隆形成实验检测细胞的存活... 详细信息

目的　探讨 1,2 5 - (OH) 2 D3 抑制肝癌细胞增殖的机制。方法　体外培养肝癌细胞株SMMC - 772 1,培养基添加 10、5 0及 10 0 (nmol/L) 1,2 5 - (OH) 2 D3 作用 2d、4d、6d后 ,用四唑盐比色试验 (MTT)和平板克隆形成实验检测细胞的存活和生长 ;台盼蓝拒染法绘制生长曲线 ;DNA凝胶电泳检测肝癌细胞凋亡。结果　MTT和平板克隆形成实验检测结果显示 10～ 10 0nmol/L的 1,2 5 - (OH) 2 D3 均对SMMC - 772 1细胞株有显著的抑制作用 ,且呈剂量 -效应关系。DNA凝胶电泳结果显示 1,2 5 - (OH) 2 D3 能够诱导SMMC - 772 1细胞凋亡。结论　 1,2 5 - (OH) 2 D3 对于人肝癌细胞株SMMC - 772 1的增殖具有显著的抑制作用 ,其机理可能是通过干扰肝癌细胞的DNA代谢和诱导肝癌细胞凋亡。

关键词： 1,25-(OH)2D3 肿瘤细胞凋亡细胞周期肝癌维生素D3

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次声暴露对大鼠脾、肝脏某些酶活性的影响

中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 176-179页

作者：陈耀明叶琳高双斌朱东海骆文静刘秀红陈景元陈景藻第四军医大学劳动与环境卫生学教研室陕西西安710033 西安市新城区卫生防疫站陕西西安710032 第四军医大学西京医院物理治疗与康复医学科陕西西安710033

目的 :观察 8Hz,130dB次声暴露不同时间对大鼠脾、肝脏某些酶活性的影响。方法 :35只SD大鼠随机分为5组 ,即对照组 ,1周 ,2周 ,3周 ,4周组。每天次声暴露 1次 ,每次 2h。实验后 ,观察大鼠脾、肝脏组织中MAO ,GSH - px ,SOD活性和MDA含... 详细信息

目的 :观察 8Hz,130dB次声暴露不同时间对大鼠脾、肝脏某些酶活性的影响。方法 :35只SD大鼠随机分为5组 ,即对照组 ,1周 ,2周 ,3周 ,4周组。每天次声暴露 1次 ,每次 2h。实验后 ,观察大鼠脾、肝脏组织中MAO ,GSH - px ,SOD活性和MDA含量的变化。结果 :大鼠脾脏MAO活性 1周 ,2周时显著增高 (P 0 .0 5 )。脾脏组织中GSH px活性在 4周时明显增高 (P 0 .0 5 )。脾脏组织中MDA含量在 3周至 4周时有显著性增高 (P <0 .0 5 )。肝脏组织在 1至 2周时有非常显著的增高 (P <0 .0 1) ,在 3周时下降 ,到 4周时又显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :8Hz ,130dB次声暴露 ,大鼠脾、肝脏组织活性氧自由基、脂质过氧化物增高 ,抗氧化能力降低 ,造成对组织的损伤。

关键词：次声脾脏肝脏酶活性大鼠应激

提高地方入伍大学生《军队卫生学》教学效果的体会

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现代医药卫生 2014年第1期30卷 132-133页

作者：郑刚骆文静陈景元第四军医大学军事预防医学院劳动卫生与环境卫生学教研室西安710032

地方大学入伍大学生是未来军队干部的重要组成部分。军队卫生学是部队入伍大学生军事医学教育的重要组成部分,对于促进地方大学入伍大学生向合格军事医学后备人才的转变起到重要作用。该文将从教学内容、方式等方面论述提高地方大学入... 详细信息

地方大学入伍大学生是未来军队干部的重要组成部分。军队卫生学是部队入伍大学生军事医学教育的重要组成部分,对于促进地方大学入伍大学生向合格军事医学后备人才的转变起到重要作用。该文将从教学内容、方式等方面论述提高地方大学入伍大学生《军队卫生学》教学效果的一些体会。

关键词：教学方法军队卫生卫生学学生

急性恐惧应激对大鼠行为、激素水平及脑Erk1/2活化表达的影响

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中国应用生理学杂志 2007年第3期23卷 270-274页

作者：郑刚陈耀明张雪平张云骆文静陈景元第四军医大学军事预防医学系劳动与环境卫生学教研室陕西西安710032

目的:探讨急性恐惧应激对大鼠情感行为、激素水平及不同脑区Erk1/2活化表达的影响。方法:采用足电击+白噪声刺激方式建立急性恐惧应激大鼠模型,观察其情感行为的改变;放射免疫法及荧光分光光度法检测血浆和脑组织激素水平;Westernblot检... 详细信息

目的:探讨急性恐惧应激对大鼠情感行为、激素水平及不同脑区Erk1/2活化表达的影响。方法:采用足电击+白噪声刺激方式建立急性恐惧应激大鼠模型,观察其情感行为的改变;放射免疫法及荧光分光光度法检测血浆和脑组织激素水平;Westernblot检测Erk1/2的活化表达。结果:应激后大鼠旷场活动性降低、拒俘反应性增加、惊吓反应增强(P<0.01);血浆及脑组织去甲肾上腺素、5-羟色胺、皮质醇水平增高,而肾上腺髓质素水平降低(P<0.01);海马、纹状体、前额皮质、小脑等脑区磷酸化Erk1/2蛋白的表达均显著增高(P<0.01)。结论:急性恐惧应激可以显著影响大鼠的情感行为和激素水平,Erk1/2蛋白磷酸化水平的增高可能参与了急性恐惧应激所致的情感行为异常。

关键词：恐惧应激大鼠,情感行为激素细胞外信号调节激酶(Erk)

锰对PC12细胞增殖及蛋白酶体活性的抑制作用

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现代预防医学 2006年第3期33卷 257-260页

作者：蔡同建陈景元李妍程司季爱玲陈耀明骆文静第四军医大学军事预防医学系军事劳动与环境卫生学教研室第四军医大学军事预防医学系军事营养与食品卫生教研室第四军医大学药学系化学教研室

目的:探讨锰对PC12细胞蛋白酶体20s复合物活性的影响。方法:以MTT以及平板克隆形成实验筛选作用浓度,不同时间以及不同浓度作用之后,提取细胞总蛋白,分别检测总蛋白提取液中20s复合物3种酶的活性。结果:含有MnCl2300μmol/L的培养基对... 详细信息

目的:探讨锰对PC12细胞蛋白酶体20s复合物活性的影响。方法:以MTT以及平板克隆形成实验筛选作用浓度,不同时间以及不同浓度作用之后,提取细胞总蛋白,分别检测总蛋白提取液中20s复合物3种酶的活性。结果:含有MnCl2300μmol/L的培养基对蛋白酶体3种酶活性的抑制率随着作用时间的延长而增高。作用3 d后,对3种酶活性的抑制率均超过20%。在作用时间相同的条件下,随着作用浓度的增高,锰对PC12细胞蛋白酶体活性的抑制作用逐渐增强。同样作用3 d后,当MnCl2浓度达到500μmol/L时,锰对3种酶活性的抑制率均超过40%。结论:蛋白酶体20s活性的抑制可能在锰所诱导的神经毒性过程中发挥着一定的作用。

关键词：锰蛋白酶体20s PC12细胞

Wnt信号通路抑制剂对人神经胶质瘤细胞增殖活力和生长迁移的影响

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神经解剖学杂志 2015年第3期31卷 303-308页

作者：何东杰胡静梁军张洁琼康蓓佩骆文静石梅魏丽春第四军医大学西京医院放射治疗科西安710032 第四军医大学唐都医院放射治疗科西安710038 第四军医大学劳动与环境卫生教研室西安710032

目的：探讨Wnt信号通路在胶质瘤细胞增殖和生长迁移中的可能作用。方法：建立U251胶质瘤细胞培养体系、并给予不同浓度Wnt信号通路的抑制剂（IWR-1 0,2.5,5.0,10μmol/L）处理后,MTT测定增殖活力、划痕实验测定生长迁移、Western Blot测... 详细信息

目的：探讨Wnt信号通路在胶质瘤细胞增殖和生长迁移中的可能作用。方法：建立U251胶质瘤细胞培养体系、并给予不同浓度Wnt信号通路的抑制剂（IWR-1 0,2.5,5.0,10μmol/L）处理后,MTT测定增殖活力、划痕实验测定生长迁移、Western Blot测定Wnt5a、β-catenin蛋白表达水平,分析IWR-1的生物作用与效应途径。结果：MTT表明胶质瘤细胞的IWR-1 5.0、10μmol/L处理24 h、48 h组,细胞增殖活力显著低于对照组（P〈0.05~0.01）。划痕检测表明IWR-1 5.0、10μmol/L处理48 h组胶质瘤细胞的生长迁移能力低于对照组（P〈0.05~0.01）。Western Blot表明IWR-1处理48 h组胶质瘤细胞的β-catenin蛋白表达水平低于对照组（P〈0.05~0.01）。结论：Wnt信号抑制剂IWR-1能够明显抑制人胶质瘤细胞增殖和生长迁移,提示Wnt/β-catenin信号途径可能具有胶质瘤干预治疗靶点的潜在价值。

关键词： Wnt信号通路胶质瘤细胞增殖迁移

NLRP3/Caspase-1炎症体通路活性反应在锰诱导的中枢神经系统退行性病变中的作用

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NLRP3/Caspase-1炎症体通路活性反应在锰诱导的中枢神经系统退行...

冷应激对大鼠垂体前叶离体细胞ACTH分泌和POMC基因表达的影响及锌的保护作用

中国毒理学会第七次全国会员代表大会暨中国毒理学会第六次...

作者：王迪雅曹子鹏赵芳骆文静空军军医大学军事预防医学系军队劳动与环境卫生学教研室

【目的】研究慢性锰中毒引起的神经炎症反应对大脑中枢神经系统学习与记忆能力的影响。以慢性锰中毒的小鼠动物模型为基础,分析锰刺激下中枢神经系统中海马区以NLRP3/caspase-1炎症体所介导的固有免疫反应,具体分析该炎症体通路的激活... 详细信息

【目的】研究慢性锰中毒引起的神经炎症反应对大脑中枢神经系统学习与记忆能力的影响。以慢性锰中毒的小鼠动物模型为基础,分析锰刺激下中枢神经系统中海马区以NLRP3/caspase-1炎症体所介导的固有免疫反应,具体分析该炎症体通路的激活机制及神经炎症反应的通路机制;阐明神经炎症对大脑中枢神经系统学习与记忆能力的影响;进而为寻找控制炎症发展的关键靶点提供实验依据。【材料和方法】通过皮下注射氯化锰构建亚急性的小鼠锰中毒模型,采用原子荧光光谱法检测小鼠血锰和脑锰的浓度,采用条件恐惧箱实验法评估小鼠学习和记忆能力;通过免疫荧光化学法检测NLRP3炎症体在小鼠海马区的表达和分布;通过Western blot检测NLRP3、caspase-1炎症体,IL-1β,组织蛋白酶B（cathepsin B）蛋白的变化;通过透射电镜检测海马区细胞溶酶体损伤的情况。【结果】皮下注射氯化锰7天后,小鼠的血锰和脑锰与对照组（注射氯化钠组）相比明显升高,条件恐惧箱实验证明实验组小鼠学习与记忆能力与对照组相比明显下降;免疫荧光化学染色表明:实验组小鼠海马区的小胶质细胞活化,大量活化的小胶质细胞强烈表达NLRP3炎症体;透射电镜显示:与对照组相比,实验组海马区细胞出现了大量功能紊乱的溶酶体,其表现为溶酶体内出现高密度的微粒,自噬小体增加。而蛋白实验证明:与对照组相比,实验组中海马组织cathepsin B的蛋白表达明显升高, NLRP3蛋白表达升高;caspase-1在未被激活的情况下以pro-caspase-1的形式（45kDa）存在于细胞浆中,而在实验组中caspase-1蛋白发生剪切,出现活化状态下的caspase-1（p20）,同时胞浆中的pro-IL-1β（36kDa）也发生剪切,成为成熟的IL-1β（17kDa）。【结论】慢性锰中毒导致小鼠学习记忆能力下降,而中枢神经系统中海马区与学习记忆能力密切相关;锰刺激能激活小鼠海马区的小胶质细胞活化,并激活以NLRP3/caspase-1所介导的炎症体通路,释放炎性因子IL-1β,参与固有免疫反应。我们进一步深入研究了锰激活NLRP3/caspase-1炎症体通路的激活机制。cathepsin B的释放证明了在锰刺激下,海马区出现了大量功能紊乱的溶酶体,且cathepsin B是激活NLRP3/caspase-1炎症体通路的重要分子。因此,我们推断锰刺激下,海马区出现了大量功能紊乱的溶酶体,溶酶体的损伤释放cathepsin B激活NLRP3/caspase-1炎症体通路释放IL-1β,诱发神经炎症。大量的IL-1β蓄积,慢性刺激中枢神经系统的海马区,进而引起学习记忆能力的下降。

关键词： NLRP3炎症体神经炎症锰中毒固有免疫反应

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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第四军医大学学报 2004年第2期25卷 114-117页

作者：骆文静陈耀明刘秀红杨瑞华陈景元第四军医大学预防医学系劳动与环境卫生学教研室陕西西安710033

目的 :研究冷应激对大鼠垂体前叶离体细胞ACTH分泌和POMC基因表达的影响及锌的保护作用 .方法 :采用原代培养的大鼠垂体前叶离体细胞 ,培养液中加入不同剂量的锌 ,并给予低温处理 .放射免疫法测定培养液中的ACTH ,斑点杂交法 (Dotblot)... 详细信息

目的 :研究冷应激对大鼠垂体前叶离体细胞ACTH分泌和POMC基因表达的影响及锌的保护作用 .方法 :采用原代培养的大鼠垂体前叶离体细胞 ,培养液中加入不同剂量的锌 ,并给予低温处理 .放射免疫法测定培养液中的ACTH ,斑点杂交法 (Dotblot)检测POMCmRNA水平 .结果 :一定浓度的锌对垂体前叶离体细胞ACTH的分泌有明显的促进作用 ;冷刺激后 ,垂体前叶细胞ACTH的分泌明显增加 ,加锌组ACTH增加的幅度有所降低 ;冷刺激使POMCmRNA的表达明显增强 ,补锌可使冷暴露大鼠垂体前叶POMCmRNA的表达水平有所下降 .结论

关键词：锌垂体前叶促肾上腺皮质激素阿黑皮质素基因表达冷应激

JNK通路在MPP^+诱导PC12细胞凋亡中的作用

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卫生研究 2011年第1期40卷 109-111页

作者：郑刚骆文静张雪平赵芳王基野陈耀明陈景元第四军医大学预防医学系劳动与环境卫生学教研室西安710032

目的研究1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)对PC12细胞的毒性作用及其机制。方法 PC12细胞体外培养,以100、300、500μmol/L MPP+进行染毒。Western blot法检测JNK1/2磷酸化水平;使用JNK通路阻断剂SP60012预处理细胞,TUNEL法观察其对MPP+诱... 详细信息

目的研究1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)对PC12细胞的毒性作用及其机制。方法 PC12细胞体外培养,以100、300、500μmol/L MPP+进行染毒。Western blot法检测JNK1/2磷酸化水平;使用JNK通路阻断剂SP60012预处理细胞,TUNEL法观察其对MPP+诱导的细胞凋亡的影响。结果 MPP+染毒可以引起细胞JNK1/2的磷酸化水平增高,使用JNK通路阻断剂SP600125可以抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡。结论激活JNK通路可能是MPP+诱导PC12细胞凋亡、产生多巴胺能神经毒性的重要分子机制。

关键词： 1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+) 大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡 JNK通路