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创新、实践铸就成功——访“从毒论理”、“从通论治”、“以调求平”理论创立人姜良铎教授

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中国医药导报 2009年第3期6卷 6-6页

作者：马淑花《中国医药导报》记者

秋天是北京最美的季节，墨绿、深黄、绯红……诸多绚烂的色彩美不胜收。在这收获的季节里，记者拜访了北京中医药大学东直门医院姜良铎教授，他一生都辛勤耕耘在中医这块土地上，并收获了累累硕果。

关键词：姜良铎从通论治北京中医药大学论理东直门医院季节收获

抗脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原单克隆抗体的制备及其初步应用

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中国生物制品学杂志 2012年第1期25卷 82-86页

作者：张中洋郭会杰赵敏杨永娟郝春生李懿马淑花刘宇宁海京张晨陈明田龙李秀玲北京生物制品研究所第二研究室北京100024

目的制备脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)Ⅰ型D抗原单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA检测方法。方法采用Vero细胞培养脊髓灰质炎病毒Ⅰ型,柱层析纯化病毒抗原,SDS-PAGE鉴定病毒蛋白,HPLC分析抗原纯度,Western blot分析抗原的反应原性。以... 详细信息

目的制备脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)Ⅰ型D抗原单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA检测方法。方法采用Vero细胞培养脊髓灰质炎病毒Ⅰ型,柱层析纯化病毒抗原,SDS-PAGE鉴定病毒蛋白,HPLC分析抗原纯度,Western blot分析抗原的反应原性。以纯化的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合,筛选可分泌脊髓灰质炎病毒I型D抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。单克隆抗体经纯化后,采用间接ELISA法检测小鼠腹水抗体效价、单抗的特异性及相对亲和力。分别以纯化的单抗作为捕获抗体和酶标抗体,进行配对试验,建立用于脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原检测的双抗体夹心ELISA方法,确定方法的最佳线性范围,并验证方法的特异性。结果纯化的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原经SDS-PAGE分析,共显示4条蛋白条带,相对分子质量分别为约40 000、35 000、32 000和28 000;经HLPC分析,纯度达99%;小鼠免疫血清可与相对分子质量约为35 000的VP1蛋白发生特异性反应。共筛选出5株可稳定分泌脊髓灰质炎病毒I型D抗原单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,纯化的单抗仅与D抗原发生反应;2H1和3B5株单抗的效价分别为2×107和2×106,且亲和力高于其他3株单抗。采用2H1和3B5株单抗配对,可以特异性检测D抗原,而与C抗原不反应;D抗原最佳线性范围为4.300～0.071 DU/ml,R2为0.994 6。该法仅可检出脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原,而与脊髓灰质炎病毒Ⅱ型、Ⅲ型D抗原和脊髓灰质炎病毒Ⅰ型C抗原、EV71抗原、Vero细胞培养上清不发生交叉反应。结论制备了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原单克隆抗体,建立了可用于脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原特异性检测的双抗体夹心ELISA方法。

关键词：脊髓灰质炎病毒 D抗原 C抗原抗体单克隆酶联免疫吸附测定

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粉煤灰中汞的水浸脱除研究

矿产保护与利用 2020年第3期40卷 85-89页

作者：任坤金生祥张奇王六虎王晓辉张劲松马淑花中国矿业大学(北京)化学与环境工程学院北京100083 北京京能电力股份有限公司北京100025 内蒙古岱海发电有限责任公司内蒙古乌兰察布012000 中国科学院过程工程研究所湿法冶金清洁生产技术国家工程试验室北京100190

粉煤灰中存在重金属汞,在环境中具有迁移的可能性,限制了粉煤灰在生态修复领域的利用。基于汞的赋存状态及其特性,提出了粉煤灰水浸脱汞新思路,采用单因素试验对脱汞新工艺进行了工艺条件的优化,并提出了原位合成水合氧化铝吸附剂的方... 详细信息

粉煤灰中存在重金属汞,在环境中具有迁移的可能性,限制了粉煤灰在生态修复领域的利用。基于汞的赋存状态及其特性,提出了粉煤灰水浸脱汞新思路,采用单因素试验对脱汞新工艺进行了工艺条件的优化,并提出了原位合成水合氧化铝吸附剂的方法对脱汞废液进行净化。结果表明,在优化条件下,即温度为75℃、脱汞时间为2 h、液固比为5时,粉煤灰中汞的脱除率可达80%以上,汞含量可降至约0.1μg/g,远低于土壤环境质量标准(GB 15618—2018)中土壤污染风险筛选值,大幅降低了粉煤灰生态利用的环境风险。原位合成的吸附剂对脱汞废液中汞的脱除率达到85%左右,净化液中汞的浓度降至2.267μg/L,低于企业水污染物排放标准限值。

关键词：粉煤灰水浸脱汞吸附

脊髓灰质炎病毒中和抗体检测血清参考品的制备及稳定性

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国际生物制品学杂志 2017年第5期40卷 219-222页

作者：宋冬梅张越郭会杰马淑花刘宇温智恒张中洋李秀玲北京生物制品研究所有限责任公司第二研究室 101111

目的制备抗脊髓灰质炎（脊灰）病毒血清作为检测参考品，并研究其稳定性。方法用1、2、3型脊灰病毒分别接种非洲绿猴肾细胞，收获病毒液，超滤浓缩后纯化病毒抗原，并进行蛋白含量和纯度检测。用纯化的病毒抗原免疫新西兰大白兔获... 详细信息

目的制备抗脊髓灰质炎（脊灰）病毒血清作为检测参考品，并研究其稳定性。方法用1、2、3型脊灰病毒分别接种非洲绿猴肾细胞，收获病毒液，超滤浓缩后纯化病毒抗原，并进行蛋白含量和纯度检测。用纯化的病毒抗原免疫新西兰大白兔获得分别抗3个型别的血清，过滤、分装、冻干后，进行无菌检验、支原体检验、水分测定，并通过观察细胞病变抑制法进行特异性检测。3名实验员各标定5次候选参考品的中和抗体效价，计算变异系数。血清放置于-20 ℃进行稳定性分析。结果纯化的1、2、3型脊灰病毒抗原蛋白含量分别为12.3、10.4、9.8 μg/ml。电泳检测中蛋白条带的相对分子质量与文献报道一致。高效液相色谱法检测的1、2、3型蛋白纯度分别为100%、99%和96%。抗各型脊灰病毒血清仅可中和对应型别，而不能中和另两个型别脊灰病毒或肠道病毒。无菌检验、支原体检验结果及水分含量（均低于3%）均符合药典要求。血清参考品的抗1、2、3型脊灰病毒中和抗体效价分别为73 587 、3 264、34 857。候选参考品在-20 ℃放置5年后中和抗体效价未降低（t=-1.25，P=0.225）。结论制备的抗1、2、3型脊灰病毒冻干血清参考品稳定性好，适用于检测Sabin株脊灰灭活疫苗免疫原性及脊灰病毒特异性中和抗体。

关键词：参考标准脊髓灰质炎病毒疫苗灭活抗体中和稳定性

外来务工子弟学校学生乙肝病毒感染状况及防治对策

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首都公共卫生 2007年第6期1卷 243-245页

作者：刘海博李冬梅高洁甘亚弟侯文俊韩庆英马淑花北京市大兴区疾病预防控制中心北京102600

目的了解外来打工子弟学校学生乙肝病毒感染情况,为制定防治策略提供依据。方法采用多阶段整群系统抽样法,检测调查对象HBsAg和抗-HBc两项指标。结果外来打工子弟学校学生HBsAg和抗-HBc阳性率高于本市儿童水平;2项指标阳性率在性别间差... 详细信息

目的了解外来打工子弟学校学生乙肝病毒感染情况,为制定防治策略提供依据。方法采用多阶段整群系统抽样法,检测调查对象HBsAg和抗-HBc两项指标。结果外来打工子弟学校学生HBsAg和抗-HBc阳性率高于本市儿童水平;2项指标阳性率在性别间差异均无统计学意义(χ2=0.143,P=0.705;χ2=0.025,P=0.873);2项指标阳性率呈现随年龄增长而上升趋势(χ2=6.733,P=0.009;χ2=22.04,P<0.01);不同经济发达程度的现居住地间,2项指标阳性率差异无统计学意义(χ2=0.111,P=0.739;χ2=2.92,P=0.087)。结论外来打工子弟学校学生乙肝病毒感染状况较本地学生严重,应将流动人口纳入本地人口的管理体系。

关键词：流动人口乙肝表面抗原抗-HBc

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肠道病毒71型抗原定量检测方法的建立

国际生物制品学杂志 2017年第1期40卷 18-23页

作者：陈蕾吴蕴怡鲁卫卫马淑花郭会杰刘宇宁海京田龙陈明戴新宪李秀玲国药中生生物技术研究院有限责任公司第二研究室北京101111

目的建立肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）抗原的定量检测方法,用于EV71疫苗生产过程中EV71抗原含量的监测.方法用EV71抗原免疫新西兰兔制备抗EV71多克隆抗体,纯化后用辣根过氧化物酶标记.采用双抗体夹心ELISA法建立抗原检测系统.... 详细信息

目的建立肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）抗原的定量检测方法,用于EV71疫苗生产过程中EV71抗原含量的监测.方法用EV71抗原免疫新西兰兔制备抗EV71多克隆抗体,纯化后用辣根过氧化物酶标记.采用双抗体夹心ELISA法建立抗原检测系统.以EV71国家抗原标准品为定量标准,建立剂量反应曲线,确定该方法的线性范围和定量限,并对该方法的特异性、精密度、准确性、稳定性及适用性等进行验证.结果建立的ELISA法的线性范围为5～80 U/ml,定量限为5 U/ml,线性决定系数均大于0.990 0;不同浓度样品回收率为85.0％～110.0％,变异系数均小于15％;置于2～8℃及37℃3、6d的抗体包被板对不同浓度样品的检测值变异系数均小于15％;该方法可特异性检测EV71原液,与非EV71样品无交叉反应.结论建立了EV71抗原定量检测方法,为EV71疫苗生产工艺过程的质量控制奠定了基础.

关键词：肠道病毒A型,人定量分析酶联免疫吸附测定

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循化县核桃苗木育苗技术

农业与技术 2016年第6期36卷 223-223页

作者：韩桂莲韩德强马淑花循化县农科局青海循化811100 循化县推广中心青海循化811100

核桃是一种含有多种营养成分的干果,属于木本油科,也是众所周知延年益寿、营养保健的佳品,重要的营养价值使得核桃及其制品成为广大群众喜爱购买的食品。本文主要通过核桃苗木繁殖、核桃苗木栽植、土壤管理,核桃苗木修剪整形、防治核桃... 详细信息

核桃是一种含有多种营养成分的干果,属于木本油科,也是众所周知延年益寿、营养保健的佳品,重要的营养价值使得核桃及其制品成为广大群众喜爱购买的食品。本文主要通过核桃苗木繁殖、核桃苗木栽植、土壤管理,核桃苗木修剪整形、防治核桃病虫害5部分介绍了适合循化县的核桃苗木育苗技术。

关键词：循化县核桃苗木育苗技术

Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA方法的建立及应用

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国际生物制品学杂志 2018年第3期41卷 113-117页

作者：鲁卫卫郭会杰张中洋张越刘善茹赵中翔宋冬梅马淑花李秀玲北京生物制品研究所有限责任公司第二研究室 101111

目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin strain inactivated poliovirus vaccine，sIPV）D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA方法，用于sIPV的体外效力评价。方法以纯化D抗原分别免疫西门塔尔牛和BALB／c小鼠，获得牛免疫血清和小鼠单... 详细信息

目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin strain inactivated poliovirus vaccine，sIPV）D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA方法，用于sIPV的体外效力评价。方法以纯化D抗原分别免疫西门塔尔牛和BALB／c小鼠，获得牛免疫血清和小鼠单克隆抗体（单抗）杂交瘤细胞株，以杂交瘤细胞株免疫小鼠制备单抗腹水。牛血清和小鼠腹水分别经沉淀和亲和层析后得到纯化牛多克隆抗体（多抗）和小鼠单抗。以多抗为包被抗体、单抗为检测抗体进行配对筛选，建立D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA。对方法的线性、范围、特异性、准确度、精密度以及在sIPV制备过程中样品检测的适用性进行验证。结果纯化多抗和单抗均具有中和抗体活性，纯度分别达到80％和90％以上。经抗体配对筛选，确定3H10、901、1H10作为检测抗体，分别用于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA的建立。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型包被抗体的使用浓度分别为1：8000、1：8000、1：10000，3H10、901、1H10检测抗体的使用浓度分别为1：10000、1：20000、1：10000。建立的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原检测方法的检测范围分别为0．4～13．0、0．4～12．0和0．4～20．0DU／ml，线性回归决定系数≥0．99。该法能特异性检出D抗原，与C抗原、不同型别D抗原以及生产过程中的其他物质无交叉反应。用该法对高、中、低浓度样品进行测定，I、Ⅱ、Ⅲ型测定值／理论值（×100％）分别为97％～111％、91％～104％和95％～102％、相对标准偏差分N〈7％、≤9％和≤10％；采用该法检测sIPV生产过程中的样品，显示出抗原纯化趋势。结论建立了脊髓灰质炎病毒工、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA方法，可有效用于sIPV的体外效力评价。

关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗灭活酶联免疫吸附测定 D抗原 C抗原

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循化县核桃产业发展探讨

现代农业科技 2016年第2期 314-314,327页

作者：韩桂莲韩德强马淑花青海省循化县农科局青海循化811100 循化县农业推广中心

20世纪因盛产核桃而闻名的循化县由于种种原因渐渐淡出核桃市场,直到20世纪90年代后期才打破核桃产业衰退局面,形成循化县核桃特色产业。本文研究分析了循化县核桃产业发展的概况,总结出了核桃产业发展的现状以及存在的主要问题,并提出... 详细信息

20世纪因盛产核桃而闻名的循化县由于种种原因渐渐淡出核桃市场,直到20世纪90年代后期才打破核桃产业衰退局面,形成循化县核桃特色产业。本文研究分析了循化县核桃产业发展的概况,总结出了核桃产业发展的现状以及存在的主要问题,并提出了以后的发展思路与对策。

关键词：核桃产业发展现状对策青海循化