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非洲猪瘟病毒C84L蛋白通过激活NLRP3炎症小体上调炎症因子的表达

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中国兽医科学 2024年第1期54卷 1-11页

作者：唐静马旭升石正旺代军飞叶得河王萌马永华郑海学甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000

探索非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)调控细胞因子产生和细胞死亡的机制。利用NLRP3炎症小体表达系统,筛选发现ASFV-C84L蛋白诱导NLRP3炎症小体介导的IL-1β的分泌上调。首先,利用生物信息学分析C84L的结构信息,通过实时... 详细信息

探索非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)调控细胞因子产生和细胞死亡的机制。利用NLRP3炎症小体表达系统,筛选发现ASFV-C84L蛋白诱导NLRP3炎症小体介导的IL-1β的分泌上调。首先,利用生物信息学分析C84L的结构信息,通过实时荧光定量PCR(qPCR)和间接免疫荧光试验(IFA)确定C84L蛋白在ASFV感染后的表达时序,细胞内定位;同时,用荧光素酶活性检测和蛋白免疫印迹(Western-blot)确定C84L蛋白参与调控p65的磷酸化以及IL-1β的成熟和细胞焦亡;然后,用碘化丙啶(PI)染色观察C84L蛋白诱导细胞的死亡情况;最后,使用qPCR和酶联免疫吸附试验检测C84L蛋白对IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子转录和分泌的影响。结果显示:C84L为亲水性蛋白,与沙门菌效应蛋白Sif A具有同源性;ASFV感染原代猪肺泡巨噬细胞4 h后,C84L m RNA表达水平逐渐上调,后续持续表达,第8小时达到顶峰;而且IFA结果显示,C84L蛋白在细胞质和细胞核中均有定位。荧光素酶和Western-blot结果显示,C84L促进p65的磷酸化并激活NF-κB启动子的活化。PI染色结果显示,C84L真核质粒转染细胞后诱导细胞死亡,Western-blot结果也显示C84L诱导Caspase-1成熟以及膜孔蛋白N-GSDMD (GSDMD剪切后的N端片段)剪切。将C84L真核质粒转染细胞后,IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子转录水平呈剂量依赖性升高;与转录水平相似,C84L表达诱导IL-1β、IL-6、TNF-α分泌水平上调。结论:ASFV C84L蛋白通过激活NF-κB以及NLRP3炎症小体诱导IL-1β、IL-6、TNF-α等促炎细胞因子表达水平上调以及细胞焦亡的发生。

关键词：非洲猪瘟病毒细胞因子 C84L NF-κB NLRP3

常山散对雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段的防治效果

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畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 1278-1289页

作者：王贺郭志廷李建喜张景艳王磊张康孙继文尚小粉马永华甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省中兽药工程技术研究中心兰州730050

旨在研究中药常山散对雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段抗球虫效果和免疫功能的影响。试验设置6大组,分别为攻虫前1天、攻虫当天、第2天、第3天、第4天和第5天给药时间点设计组,每个设计组包括3个处理组,分别为Ⅰ组(健康对照组)和Ⅱ... 详细信息

旨在研究中药常山散对雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段抗球虫效果和免疫功能的影响。试验设置6大组,分别为攻虫前1天、攻虫当天、第2天、第3天、第4天和第5天给药时间点设计组,每个设计组包括3个处理组,分别为Ⅰ组(健康对照组)和Ⅱ组(感染对照组),饲喂基础饲粮;Ⅲ组(常山散推荐剂量组),按照0.1g·kg^(-1)在基础饲粮中拌料饲喂,连续给药4 d,每组10只鸡,共180只。16日龄时,Ⅱ组和Ⅲ组每只鸡口服5×10^(4)个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊。结果表明:与Ⅰ组相比,Ⅲ组的日均增重(average dialy gain, ADG)在球虫发育前期(攻虫前1天、攻虫当天)差异不显著(P>0.05),发育后期显著降低(P<0.05),Ⅱ组在球虫发育的整个时期ADG均显著降低(P<0.05),降低幅度大于Ⅲ组。与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅲ组的日均采食量(average daily feed intake, ADFI)有所下降,其中Ⅱ组下降最为明显,Ⅲ组有所改善。与Ⅱ组相比,中药常山散显著(P<0.05)降低感染雏鸡每克粪便卵囊数(oocysts per gram, OPG)。球虫感染破坏盲肠黏膜的完整性,使盲肠肌膜增厚。中药常山散可减轻球虫感染引起的肠黏膜损伤。与Ⅱ组相比,饲粮中添加常山散可降低盲肠病变评分(P<0.05)。攻虫前1天、攻虫当天和第2天试验组中Ⅲ组的抗球虫指数(anticoccidial index, ACI)分别为198.83、190.23、165.49,攻虫第3、4和5天试验组中Ⅲ组的ACI分别为150.53、155.00和146.18,说明在球虫发育的前期给药,常山散具有良好的抗球虫效果,后期随着球虫在鸡体内的发育,常山散的治疗效果降低。与Ⅱ组相比,常山散增加血液中免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量,提高脾脏指数和法氏囊指数。综上所述,常山散可改善感染雏鸡的生长性能,显著降低感染雏鸡OPG和盲肠病变评分,增强感染雏鸡免疫功能。

关键词：中药常山散柔嫩艾美耳球虫鸡

汉中地区仔猪腹泻性大肠埃希氏菌的分离鉴定及生物学特性研究

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动物医学进展 2024年第5期45卷 14-17页

作者：王玉龙王峰马永华蒋野李颖蒋桂林贾镛李超吕妮汉中职业技术学院陕西汉中723000 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 铜川市耀州区动物疫病预防控制中心陕西铜川727100

为分析汉中地区仔猪腹泻性大肠埃希氏菌的血清型及耐药性等情况,2021-2022年采集汉中地区腹泻仔猪肛拭子及粪便样本72份,分离培养后经生化试验、16S rRNA PCR鉴定、O血清型鉴定及药物敏感性试验。结果显示,分离到58株大肠埃希氏菌;58株... 详细信息

为分析汉中地区仔猪腹泻性大肠埃希氏菌的血清型及耐药性等情况,2021-2022年采集汉中地区腹泻仔猪肛拭子及粪便样本72份,分离培养后经生化试验、16S rRNA PCR鉴定、O血清型鉴定及药物敏感性试验。结果显示,分离到58株大肠埃希氏菌;58株大肠埃希氏菌包含12种血清型,其中主要的流行血清型为O80、O138、O141;58株大肠埃希氏菌对氨苄西林、红霉素、氯霉素、克林霉素、四环素、环丙沙星、头孢噻吩、头孢曲松、阿米卡星9种药物的耐药率在50%以上。研究结果可为汉中地区有效防治仔猪大肠埃希氏菌病提供科学依据。

关键词：仔猪大肠埃希氏菌血清型耐药性

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一种不锈钢涡轮壳毛坯铸造工艺探讨

中国铸造装备与技术 2024年第3期59卷 102-107页

作者：周建章尹国宝马永华袁道军王潘兴康跃科技(山东)有限公司山东潍坊262718 潍柴重机股份有限公司山东潍坊261041

根据一种新开发的奥氏体增压器涡轮壳材质及结构特点,对毛坯铸造工艺进行探讨,确定浇注位置并设计了半封闭式浇注系统、冒口补缩与冷铁激冷相结合的工艺,采用AnyCasting软件对钢水填充和凝固过程进行模拟计算,经综合分析确定工艺方案并... 详细信息

根据一种新开发的奥氏体增压器涡轮壳材质及结构特点,对毛坯铸造工艺进行探讨,确定浇注位置并设计了半封闭式浇注系统、冒口补缩与冷铁激冷相结合的工艺,采用AnyCasting软件对钢水填充和凝固过程进行模拟计算,经综合分析确定工艺方案并设计制作工艺装备。针对试生产工艺验证过程中出现的缩松、裂纹、冷隔等铸造缺陷,采取应对措施加以改进,最终生产出满足质量要求的铸件,为类似毛坯的工艺开发、生产提供参考。

关键词：不锈钢涡轮壳缩松裂纹冷隔

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兴安盟科尔沁右翼前旗水稻产业发展实践与启示

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基层农技推广 2024年第5期 47-49页

作者：马永华巢静治路桂香杨洋王汉朋关丽宇汪丽军科尔沁右翼前旗索伦镇人民政府科尔沁右翼前旗巴日嘎斯台乡人民政府科尔沁右翼前旗农牧业科学技术发展中心

水稻是内蒙古自治区科右前旗主要粮食作物之一，种植面积常年稳定在10 000 hm;2;左右。近年来，科右前旗把水稻产业振兴作为乡村振兴的重要抓手，借助袁隆平院士专家工作站和国家水稻产业技术体系兴安盟综合试验站的科技平台力量，在“... 详细信息

水稻是内蒙古自治区科右前旗主要粮食作物之一，种植面积常年稳定在10 000 hm;2;左右。近年来，科右前旗把水稻产业振兴作为乡村振兴的重要抓手，借助袁隆平院士专家工作站和国家水稻产业技术体系兴安盟综合试验站的科技平台力量，在“兴安盟大米”品牌的加持下，按照“外引内扶”“育新调旧”的思路，重点攻关品种品质、品种布局、种植面积、生产管理、稻谷加工、品牌注册、成品包装、销售网络等瓶颈环节，推动水稻产业产加销一体化发展，不断延链补链，形成了全产业链发展新模式。以制约科右前旗水稻产业高质量发展瓶颈问题为导向，结合科右前旗当前水稻产业发展采取的主要措施，总结科右前旗水稻产业一二三产融合发展经验和启示，为相似生态区域发展高效水稻产业提供借鉴。

关键词：水稻产业融合水稻产业

斜生栅藻对全氟辛酸和Zn^(2+)联合胁迫的生理生化响应

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广东海洋大学学报 2024年第1期44卷 64-75页

作者：杨顺航李立杰余佳妮葛恒马永华廖木兰尤德雨李慧明谭凤霞柴毅汪正刚长江大学湿地生态与农业利用教育部工程研究中心湖北荆州434025 长江大学动物科学技术学院湖北荆州434025 长江大学农学院湖北荆州434025 荆州市渔都特种水产养殖公司湖北荆州434000

【目的】探究全氟辛酸(PFOA)与重金属锌(Zn^(2+))单一及联合暴露对斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)的急性毒性效应和作用机制,为全氟化合物(Perfluorinated compounds,PFCs)和重金属在水生生态系统中的联合风险评估提供理论基础。【方... 详细信息

【目的】探究全氟辛酸(PFOA)与重金属锌(Zn^(2+))单一及联合暴露对斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)的急性毒性效应和作用机制,为全氟化合物(Perfluorinated compounds,PFCs)和重金属在水生生态系统中的联合风险评估提供理论基础。【方法】将1×10^(6)mL^(-1)斜生栅藻分别在0~16 mg/L Zn^(2+)、0~350 mg/L PFOA单一处理组及0~1.5 TU联合处理组暴露96 h,分析暴露条件对斜生栅藻的细胞浓度、藻细胞叶绿素a(Chl a)、总蛋白(TP)含量、抗氧化系统、细胞外部形态、转化氨氮能力、Zn^(2+)与PFOA去除率等指标的影响。【结果与结论】处理96 h,Zn^(2+)与PFOA单一胁迫抑制斜生栅藻生长的半最大效应质量浓度(96 h-EC_(50))分别为14.17 mg/L和198.98 mg/L;二者联合胁迫96 h-EC_(50)为0.97 TU,作用模式为部分相加作用。Zn^(2+)和PFOA单一及联合胁迫下,藻细胞Chl a含量和TP含量均显著下降(P<0.05),表明藻细胞光合作用受阻;活性氧(ROS)活性和丙二醛(MDA)含量显著上升(P<0.05),促使细胞膜通透性增强,线粒体膜电位降低;T-AOC和SOD活性也因ROS的过度积累而呈现升高趋势。扫描电镜结果表明,联合胁迫会破坏藻细胞的外部形态。暴露液中总氮和氨氮含量都随污染物暴露浓度的增加而增加,联合暴露组与对照组相比差异更为明显;硝态氮含量始终保持低水平。斜生栅藻对PFOA的去除率仅有2%,对Zn^(2+)去除率为37.5%且随暴露浓度的增加而逐渐降低,表明斜生栅藻可以有效去除锌污染,但对全氟辛酸污染去除效果欠佳。

关键词：斜生栅藻重金属锌全氟辛酸暴露急性毒性效应转化氨氮去除

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林麝源蜡样芽孢杆菌分离鉴定及致病性试验

动物医学进展 2024年第3期45卷 141-144页

作者：吕妮李颖李蔚胡清霞陈雪梅张琰杰马永华王玉龙王兴龙西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 铜川市王益区疫病预防控制中心陕西铜川727000 汉中职业技术学院陕西汉中723000

陕西省某林麝养殖基地林麝出现体温升高、食欲废绝等症状,病死率10%左右。为分析林麝死亡原因,采集死亡林麝肺脏、肝脏等病变组织进行病原分离纯化,进行PCR检测、生化试验、16S rRNA测序鉴定、药物敏感性试验和致病性试验。结果显示,致... 详细信息

陕西省某林麝养殖基地林麝出现体温升高、食欲废绝等症状,病死率10%左右。为分析林麝死亡原因,采集死亡林麝肺脏、肝脏等病变组织进行病原分离纯化,进行PCR检测、生化试验、16S rRNA测序鉴定、药物敏感性试验和致病性试验。结果显示,致病菌为蜡样芽孢杆菌。生化鉴定试验显示,该菌能分解葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等,但不分解甘露醇、硫化氢、尿素等;药物敏感性试验显示,该菌对哌拉西林、头孢氨苄、丁胺卡那、庆大霉素和环丙沙星等抗菌药敏感,对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、羧苄西林和复方新诺明等抗菌药耐药;致病性试验表明,该菌对小鼠有较强致病力。论文从林麝体内分离出蜡样芽孢杆菌,为进一步了解蜡样芽孢杆菌病在林麝养殖中的危害并对该病的诊断和防治提供理论依据。

关键词：林麝蜡样芽孢杆菌生化试验药物敏感性试验致病性试验

汉中地区某猪场仔猪腹泻性大肠埃希氏菌的分离鉴定及耐药性检测

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陕西农业科学 2024年第8期70卷 95-99页

作者：王玉龙蒋野李颖王峰蒋桂林贾镛李超吕妮马永华汉中职业技术学院陕西汉中723000 西北农林科技大学陕西杨凌712100 铜川市耀州区动物疫病预防控制中心陕西铜川727100

为明确汉中某猪场仔猪腹泻的病原菌及其耐药情况,试验无菌采集腹泻仔猪病料,分离培养后经生化试验、16S rRNA PCR鉴定、药物敏感性试验以及小鼠致病性试验等研究进行探索。试验结果显示该分离株在各培养基上的菌落特征、革兰氏染色镜检... 详细信息

为明确汉中某猪场仔猪腹泻的病原菌及其耐药情况,试验无菌采集腹泻仔猪病料,分离培养后经生化试验、16S rRNA PCR鉴定、药物敏感性试验以及小鼠致病性试验等研究进行探索。试验结果显示该分离株在各培养基上的菌落特征、革兰氏染色镜检结果及生化特性与大肠埃希氏菌相吻合;分离菌株16S rRNA序列与GenBank中登录的大肠埃希氏菌同源性达99%以上;分离菌株对氨苄西林、多黏菌素B、氯霉素、头孢曲松、头孢噻吩、头孢唑林等耐受,对头孢他啶、米诺环素、阿米卡星3种药物敏感,同时对多种抗生素产生耐药性;在小鼠致病性试验中发现48 h内试验组小鼠全部死亡且对照组无死亡,并从死亡小鼠组织中得到该菌株,说明分离菌有较强的致病力。结果表明,本试验所分离的病原菌为多重耐药致病性大肠埃希氏菌。本研究结果可为该猪场仔猪腹泻性大肠埃希氏菌病的临床防治提供科学依据。

关键词：仔猪大肠埃希氏菌分离鉴定耐药性

Ni3(HCOO)6/还原氧化石墨烯复合电极材料的制备及电容性能

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高等学校化学学报 2016年第8期37卷 1485-1490页

作者：付蓉蓉罗民马永华杨顺宁夏大学化学化工学院能源化工国家重点实验室培育基地银川750021

以氧化石墨烯(GO)为前驱体,Ni(NO_3)_2·6H_2O为镍源,甲酸为配体,N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,通过一步溶剂热法制备了Ni_3(HCOO)_6/rGO复合电极材料.研究结果表明,通过金属镍离子和配体在氧化石墨烯表面超分子自组装成核,形成了"三明治"式... 详细信息

以氧化石墨烯(GO)为前驱体,Ni(NO_3)_2·6H_2O为镍源,甲酸为配体,N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,通过一步溶剂热法制备了Ni_3(HCOO)_6/rGO复合电极材料.研究结果表明,通过金属镍离子和配体在氧化石墨烯表面超分子自组装成核,形成了"三明治"式的夹心复合结构;不同的GO浓度对复合材料的物相结构、晶体尺寸大小、形貌及电化学性能有很大的影响;当GO的浓度为8 mg/m L时,在100℃下反应24 h得到的Ni_3(HCOO)_6/rGO复合材料在电解液为1 mol/L KOH,5 m V/s下比电容高达940 F/g,经过500次充放电循环后电容的保持率为96.28%.

关键词： Ni3(HCOO)6/还原氧化石墨烯复合材料超级电容器超分子自组装溶剂热法