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石斛提取物及丁香酸对H2O2损伤的HLEC的防护作用

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石斛提取物及丁香酸对H2O2损伤的HLEC的防护作用

作者：马伟凤广州中医药大学

学位级别：硕士

目的探讨中药金钗石斛提取物中四种不同极性的生物碱(脂溶性、水溶性、低极性、弱极性)及丁香酸对人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤防护作用的影响。为开发抗白内障新药进行了早期研究。方法1、不同极性生物碱的提取,金钗石斛粉末经乙醇... 详细信息

目的探讨中药金钗石斛提取物中四种不同极性的生物碱(脂溶性、水溶性、低极性、弱极性)及丁香酸对人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤防护作用的影响。为开发抗白内障新药进行了早期研究。方法1、不同极性生物碱的提取,金钗石斛粉末经乙醇提取、降膜浓缩、酸化、盐析、萃取后;水洗、回收可得脂溶性生物碱;酸化、氯仿萃取回收获得弱极性生物碱;将酸化后并用氯仿萃取的酸水层浓缩再碱化回收得低极性生物碱;碱化后用正丁醇萃取、饱和水洗回收获得水溶性生物碱。通过单因素实验,确定影响金钗石斛生物碱提取率的因素。2、HLEC生长曲线的绘制,HLEC用含10%胎牛血清的DMEM培养液,置于37℃、5%CO2培养箱内培养,常规消化,按每个小方瓶5×104／mL密度传代接种细胞,共接种21瓶细胞,24h后开始计数细胞,后每隔24h计数一次,每次取3瓶细胞,分别进行计数。计算平均值。连续计数7 d。根据细胞计数结果,以单位细胞数(细胞数／mL)为纵坐标,以时间为横坐标绘制生长曲线。3、将H2O2与传代培养的HLEC共同孵育复制氧化损伤模型,同时加入不同极性的金钗石斛提取物作用24h后,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测HLEC的增殖情况,流式细胞术检测其凋亡情况,并探讨不同极性及同一极性不同浓度的金钗石斛提取物对氧化损伤后细胞增殖及凋亡的影响。4、将H2O2与传代培养的HLEC共同孵育复制氧化损伤模型,同时加入白内停、脂溶性生物碱和不同浓度的丁香酸作用24h后,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测HLEC的增殖情况,流式细胞术检测其细胞周期情况,并探讨不同浓度丁香酸对氧化损伤后细胞增值及周期的影响。比较白内停、脂溶性生物碱低剂量与丁香酸对氧化损伤后细胞增殖及周期的影响的不同。结果1、分离得到金钗石斛不同极性生物碱,通过单因素实验,确定影响金钗石斛生物碱提取率的因素分别是提取溶剂的浓度、提取次数和提取时间。2、根据细胞计数结果可得HLEC的生长曲线呈“S”型。3、H2O2组抑制HLEC增殖,金钗石斛脂溶性生物碱和水溶性生物碱高剂量组可促进氧化损伤的HLEC的增殖,其中脂溶性生物碱可显著促进氧化损伤的HLEC的增殖(p0.05)。4、H2O2组抑制HLEC增殖,丁香酸较低剂量组可促进氧化损伤的HLEC的增殖,其作用与白内停和脂溶性生物碱低剂量组差异无统计学意义(p>0.05),丁香酸抗氧化损伤的最佳有效剂量为0.2mg／ml,0.8mg／ml具有细胞毒性作用。H2O2组S%所占比例较小,丁香酸、白内停和脂溶性生物碱可以对其进行调节三者之间差异无统计学意义(p>0.05)。结论金钗石斛各极性生物碱用80%乙醇提取3次,每次提取3h时提取效果较好。HLEC的生长曲线呈“S”型。金钗石斛脂溶性生物碱低剂量组通过抗氧化损伤作用促进HLEC的增殖,抑制HLEC的调亡。其抑制HLEC的凋亡作用与白内停差异无统计学意义。丁香酸通过抗氧化损伤作用促进HLEC的增殖的最佳有效剂量为0.2mg/ml,0.8mg/ml的丁香酸具有细胞毒性作用,丁香酸能调节氧化损伤HLEC的细胞周期,作用与白内停和石斛脂溶性生物碱三者差异无统计学意义(P>0.05)。

关键词：石斛丁香酸氧化损伤细胞凋亡细胞周期

金钗石斛提取物对晶状体上皮细胞氧化损伤防护作用

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国际眼科杂志 2010年第4期10卷 650-652页

作者：马伟凤徐勤广州中医药大学基础医学院中西医结合中国广东省广州市510405

目的:探讨中药金钗石斛提取物中4种不同极性的生物碱(脂溶性、水溶性、低极性、弱极性)对人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤防护作用的影响。方法:将H2O2与传代培养的HLEC共同孵育复制氧化损伤模型,同时加入不同极性的金钗石斛提取物作用... 详细信息

目的:探讨中药金钗石斛提取物中4种不同极性的生物碱(脂溶性、水溶性、低极性、弱极性)对人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤防护作用的影响。方法:将H2O2与传代培养的HLEC共同孵育复制氧化损伤模型,同时加入不同极性的金钗石斛提取物作用24h后,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测HLEC的增殖情况,流式细胞术检测其凋亡情况,并探讨不同极性及同一极性不同浓度的金钗石斛提取物对氧化损伤后细胞增殖及凋亡的影响。结果:H2O2组LEC增殖下降,金钗石斛脂溶性生物碱和水溶性生物碱高剂量组可促进氧化损伤的LEC的增殖,其中脂溶性生物碱显著增强氧化损伤的LEC的增殖(P<0.01)。脂溶性生物碱可以明显抑制H2O2诱导的LEC凋亡(P<0.01)。结论:金钗石斛脂溶性生物碱低剂量组通过抗氧化损伤而促进LEC的增殖,抑制LEC的调亡。

关键词：金钗石斛生物碱氧化损伤

放大内镜结合窄带成像技术和醋酸-靛胭脂染色联合多层螺旋CT对早期胃癌及癌前病变的诊断效能及临床意义

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中国内镜杂志 2024年第2期30卷 9-16页

作者：杨亮冯志华马为灵马伟凤陈帅张立霞吴吉海保定市第四中心医院消化内镜科河北保定072350 保定市第四中心医院中西医科河北保定072350 保定市第四中心医院消化内科河北保定072350 保定市第四中心医院普外科河北保定072350

目的分析放大内镜结合窄带成像技术(ME-NBI)和醋酸-靛胭脂染色联合多层螺旋CT对早期胃癌及癌前病变的诊断效能及临床意义。方法选取2019年2月-2022年3月于该院就诊的202例疑似早期胃癌及癌前病变患者作为研究对象,所有患者均进行ME-NB... 详细信息

目的分析放大内镜结合窄带成像技术(ME-NBI)和醋酸-靛胭脂染色联合多层螺旋CT对早期胃癌及癌前病变的诊断效能及临床意义。方法选取2019年2月-2022年3月于该院就诊的202例疑似早期胃癌及癌前病变患者作为研究对象,所有患者均进行ME-NBI、醋酸-靛胭脂染色和多层螺旋CT检测;采用受试者操作特征曲线(ROC curve),分析不同检查方法对早期胃癌及癌前病变的诊断价值,以胃癌病理结果为金标准,采用四格表,分析ME-NBI、醋酸-靛胭脂染色联合多层螺旋CT和三者联合对早期胃癌及癌前病变的诊断价值。结果 ME-NBI和醋酸-靛胭脂染色两者联合检查的图像质量明显高于各自单独检查,差异均有统计学意义(P <0.05)。早期胃癌及癌前病变患者临床特征中的分化程度比较,差异有统计学意义(P <0.05)。ME-NBI诊断早期胃癌及癌前病变的曲线下面积(AUC)为0.853,准确度为85.64%,敏感度为88.37%,特异度为83.62%,醋酸-靛胭脂染色诊断早期胃癌及癌前病变的AUC为0.814,准确度为81.68%,敏感度为83.72%,特异度为80.17%,多层螺旋CT诊断早期胃癌及癌前病变的AUC为0.804,准确度为80.69%,敏感度为82.56%,特异度为79.31%,三者联合诊断早期胃癌及癌前病变的AUC为0.893,准确度为89.60%,敏感度为93.02%,特异度为87.07%。结论 ME-NBI和醋酸-靛胭脂染色联合多层螺旋CT,对早期胃癌及癌前病变具有较高的诊断效能,可在临床中推广使用。

关键词：放大内镜结合窄带成像技术(ME-NBI) 醋酸-靛胭脂染色多层螺旋CT 早期胃癌癌前病变诊断

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2型糖尿病患者HbA1C、25(OH)VD水平与骨密度的相关性研究

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中国骨质疏松杂志 2012年第8期18卷 704-705,699页

作者：邢清王亮陈琼费英明马伟凤何岩杨帆解放军第309医院综合骨科.北京100091

目的观察2型糖尿病患者HbA1C、25(OH)VD水平与骨密度(Bone Mineral Density,BMD)的相关性。方法收集我院160例住院患者资料,以HbA1C水平分组,HbA1C8.5%为组2(平均年龄56.38±9.84岁),测定HbA1c、身高、体重、体重指数(Body Mass Index,BMI),采用美国Norland双能X线骨密度检测仪测定患者L2-4和左侧股骨近端(Neck、Troch、Ward’s三角区)BMD,采用酶联免疫吸附法检测血清25(OH)VD,分析HbA1c、25(OH)VD、BMD三者的相关性。结果两组患者身高、体重、BMI无显著性差异,2型糖尿病患者血清25(OH)VD水平与HbA1C呈负相关(r=-0.758,P0.05),与髋部骨密度呈明显正相关(P<0.05)。结论糖尿病患者血糖控制水平对25(OH)VD与骨密度有不良影响。

关键词： 2型糖尿病 HbA1C 25(OH)VD 骨密度

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让学生走进生活,学好数学

学周刊（下旬） 2011年第9期 178-179页

作者：马伟凤廊坊市第五小学河北廊坊065000

从事小学数学教学工作．已经有几十年了。数学教学的真正目的是什么？怎样让学生更好地学好数学？一直是我多年以来思考的问题。“数学来源于生活，应用于生活”，只有把数学教学和实际生活相结合，学生才能真正学好数学，数学才能在实... 详细信息

从事小学数学教学工作．已经有几十年了。数学教学的真正目的是什么？怎样让学生更好地学好数学？一直是我多年以来思考的问题。“数学来源于生活，应用于生活”，只有把数学教学和实际生活相结合，学生才能真正学好数学，数学才能在实际生活中体现自身的价值。

关键词：小学数学实际生活学生数学教学教学工作才能

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让学生走进生活,学好数学

学周刊 2011年第27期 178-179页

作者：马伟凤廊坊市第五小学

从事小学数学教学工作,已经有几十年了。数学教学的真正目的是什么?怎样让学生更好地学好数学?一直是我多年以来思考的问题。"数学来源于生活,应用于生活",只有把数学教学和实际生活相结合,学生才能真正学好数学,数学才能在实际生活中... 详细信息

从事小学数学教学工作,已经有几十年了。数学教学的真正目的是什么?怎样让学生更好地学好数学?一直是我多年以来思考的问题。"数学来源于生活,应用于生活",只有把数学教学和实际生活相结合,学生才能真正学好数学,数学才能在实际生活中体现自身的价值。一、在生活中认识数学数学,有着丰富的内涵,它与社会生活息息相关。数学是对现实世界的认识与思考,它的目的是发掘现实生活中所蕴含的

关键词：数学源于生活走进生活

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阿仑膦酸钠治疗男性骨质疏松症临床研究

中国骨质疏松杂志 2013年第7期19卷 725-727页

作者：王亮马远征白颖陈琼陈烨马伟凤金毅杨帆解放军第309医院全军骨科中心骨内科北京100091 第二炮兵指挥学院门诊部武汉430012

目的探讨阿仑膦酸钠对男性骨质疏松症患者骨密度、血生化及骨标志物的影响。方法选择2012年1月～2013年1月在我科门诊及住院50岁以上男性骨质疏松患者共169例,每人每天服用元素钙600 mg,活性维生素D0.25μg作为基础补充剂,每周服用阿仑... 详细信息

目的探讨阿仑膦酸钠对男性骨质疏松症患者骨密度、血生化及骨标志物的影响。方法选择2012年1月～2013年1月在我科门诊及住院50岁以上男性骨质疏松患者共169例,每人每天服用元素钙600 mg,活性维生素D0.25μg作为基础补充剂,每周服用阿仑膦酸钠70 mg,共治疗12个月。观察骨密度、骨标志物等指标,骨密度测定采用双能X线吸收法,骨标志物测定采用酶联免疫吸附法。结果研究结果显示,治疗1年后,L2、L3、L2～4、Neck、Ward’s三角骨密度分别为0.791±0.150 g/cm2、0.817±0.149 g/cm2、0.827±0.154 g/cm2、0.875±0.153 g/cm2、0.703±0.138 g/cm2、0.522±0.133 g/cm2,均较治疗前0.772±0.144 g/cm2、0.800±0.156 g/cm2、0.861±0.168 g/cm2、0.685±0.109 g/cm2、0.490±0.121 g/cm2有明显提高,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后血清CTX、BGP、BAP为0.20±0.11 ng/ml、7.73±4.11 ng/ml、14.57±7.20 ng/ml,较治疗前0.32±0.23 ng/ml、11.39±5.6 ng/ml、16.17±8.81 ng/ml显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论阿仑膦酸钠能有效降低破骨细胞活性,抑制骨破坏,显著提高骨量,对老年男性骨质疏松疗效显著。

关键词：骨质疏松阿仑膦酸钠骨密度骨标志物

老年男性骨质疏松性骨折患者血清25羟维生素D水平研究

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中国骨质疏松杂志 2013年第9期19卷 941-943页

作者：陈琼王亮马远征白颖王文娇马伟凤金毅杨帆解放军第309医院全军骨科中心骨内科北京100091

目的探讨老年男性性骨质疏松合并骨折血清25羟维生素D的水平。方法选择2011年3月至2013年5月我科住院的78例患者,包括老年男性骨质疏松性骨折患者38例,年龄76.78±6.47岁,不伴骨折老年男性骨质疏松患者40例,年龄73.74±5.09岁。采用美国... 详细信息

目的探讨老年男性性骨质疏松合并骨折血清25羟维生素D的水平。方法选择2011年3月至2013年5月我科住院的78例患者,包括老年男性骨质疏松性骨折患者38例,年龄76.78±6.47岁,不伴骨折老年男性骨质疏松患者40例,年龄73.74±5.09岁。采用美国Norland双光能X线骨密度检测仪对所有患者进行腰椎L2-L4和左侧股骨近端(包括Neck、Troch、Ward三角区)骨密度测量,并测定身高、体重、血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)。采用酶联免疫吸附法测定两组患者血清25羟维生素D,比较两组25羟维生素D水平。结果老年男性骨质疏松性骨折组患者血清25羟维生素D3(16.11±4.46)ng/ml,较老年男性非骨折骨质疏松患者(18.73±6.47)ng/ml低,差异具有统计学意义(P0.05);老年骨质疏松性骨折患者L2-4、Neck、Troch、ward’s三角区的骨密度分别为(0.81±0.21)g/cm2、(0.68±0.15)g/cm2、(0.74±0.63)g/cm2、(0.52±0.15)g/cm2与对照组(0.95±0.20)g/cm2、(0.67±0.09)g/cm2、(0.63±0.85)g/cm2、(0.54±0.17)g/cm2相比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论老年男性骨质疏松合并骨折患者较未合并骨折骨质疏松患者维生素D缺乏更严重。

关键词：老年男性骨质疏松性骨折骨密度维生素D

类风湿性关节炎合并骨质疏松的老年患者骨转换生化标志物水平的研究

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中国骨质疏松杂志 2015年第12期21卷 1441-1444页

作者：王文娇王亮马远征白颖陈琼马伟凤杨帆谢媛媛解放军第309医院骨科中心骨内科北京100091

目的探讨类风湿性关节炎合并骨质疏松的老年患者骨转换生化标志物的水平。方法选择2008年1月至2014年4月在我科住院的73例患者,包括类风湿性关节炎合并骨质疏松患者35例,年龄(64.51±13.27)岁,原发性骨质疏松患者38例,年龄(65.42±8.86... 详细信息

目的探讨类风湿性关节炎合并骨质疏松的老年患者骨转换生化标志物的水平。方法选择2008年1月至2014年4月在我科住院的73例患者,包括类风湿性关节炎合并骨质疏松患者35例,年龄(64.51±13.27)岁,原发性骨质疏松患者38例,年龄(65.42±8.86)岁。采用美国Norland双光能X线骨密度检测仪对所有患者进行腰椎L2-4和左侧股骨近端(包括Neck、Troch、Ward’s三角区)骨密度测量,并测定身高、体重、血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)。采用酶联免疫吸附法测定两组患者血清骨钙素(OC)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、I型胶原交联C-末端肽(SCTX),比较两组血清OC、BAP、S-CTX水平。结果类风湿性关节炎合并骨质疏松组患者骨形成指标血清OC(13.5654±8.8701)ng/ml,较原发性骨质疏松患者(9.3113±6.7816)ng/ml高,差异具有统计学意义(P0.05);类风湿性关节炎合并骨质疏松组患者骨吸收指标S-CTX(0.7746±0.7149)ng/ml,比原发性骨质疏松患者(0.3346±0.1668)ng/ml高,差异具有统计学意义(P0.05);类风湿性关节炎合并骨质疏松患者L2-4、Neck、Troch、Ward’s三角区的骨密度分别为(0.8600±0.1637)g/cm2、(0.6840±0.0.1355)g/cm2、(0.5831±0.1225)g/cm2、(0.5181±0.1304)g/cm2,与原发性骨质疏松组(0.8744±0.1668)g/cm2、(0.7426±0.1686)g/cm2、(0.5995±0.1088)g/cm2、(0.5459±0.1088)g/cm2相比,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论类风湿性关节炎合并骨质疏松患者较原发性骨质疏松患者骨转换活跃。

关键词：类风湿性关节炎骨质疏松骨转换生化标志物骨钙素骨特异性碱性磷酸酶 I型胶原交联C-末端肽