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抗虫基因Cry1Ah的原核表达、玉米遗传转化及突变基因的筛选

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吉林农业大学学报 2024年

作者：韩利圆王凡浩张洪伟焦鹏刘思言关淑艳马义勇吉林农业大学生命科学学院吉林农业大学现代农业技术教育部国际合作联合实验室榆树市农业综合行政执法大队吉林农业大学农学院

玉米是重要的粮食作物和工业原料，对国民经济的发展具有重要意义。每年由于玉米螟等鳞翅目害虫的影响，造成玉米严重减产，大量喷洒化学农药又会使害虫产生抗药性，杀死害虫天敌及有益昆虫，同时还严重影响人类健康和环境安全。因此本... 详细信息

玉米是重要的粮食作物和工业原料，对国民经济的发展具有重要意义。每年由于玉米螟等鳞翅目害虫的影响，造成玉米严重减产，大量喷洒化学农药又会使害虫产生抗药性，杀死害虫天敌及有益昆虫，同时还严重影响人类健康和环境安全。因此本研究利用人工合成方法获得抗虫基因Cry1Ah；构建原核表达载体对其进行SDS-PAGE检测和抗虫鉴定，结果显示Cry1Ah基因编码的杀虫蛋白在大肠杆菌BL21中得到正确表达，Bt蛋白快速检测试纸条检测显示均有明亮测试线条带，利用表达的目的蛋白饲喂亚洲玉米螟幼虫显示其具有显著的毒杀作用；同时构建植物过表达载体，利用农杆菌介导法导入玉米自交系GSH9901愈伤组织中，经PCR鉴定成功获得4株T2转Cry1Ah基因阳性植株；qRT-PCR结果表明，Cry1Ah基因在T2代转基因玉米植株的心叶部位中可以正常转录；ELISA结果表明Cry1Ah蛋白在6叶期、抽穗期和灌浆期的不同组织中均有表达。随后对Cry1Ah基因进行易错PCR技术优化该基因，筛选获得新的抗虫基因Cry1Ah-1。该研究为Cry1Ah基因及新型Cry1Ah-1基因的功能鉴定、抗虫转基因玉米的研发及抗虫玉米新品种的选育奠定基础。

关键词： Cry1Ah基因玉米抗虫

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生物育种在玉米逆境胁迫中的研究进展

吉林农业大学学报 2024年第1期46卷 1-9页

作者：关淑艳姜青平韩利圆魏小童焦鹏刘思言马义勇吉林农业大学农学院长春130118 吉林农业大学生命科学学院长春130118

玉米(Zea mays L.)是重要的粮食作物和饲料作物,不同生长阶段逆境会影响玉米植株的生长,从而对玉米产量产生负面影响。从育种选择到应用生物技术手段方面提高植物对逆境胁迫的适应能力,可以增加农作物产量、保护生态系统的稳定性,并为... 详细信息

玉米(Zea mays L.)是重要的粮食作物和饲料作物,不同生长阶段逆境会影响玉米植株的生长,从而对玉米产量产生负面影响。从育种选择到应用生物技术手段方面提高植物对逆境胁迫的适应能力,可以增加农作物产量、保护生态系统的稳定性,并为全球粮食安全做出贡献。对玉米育种的发展历程及生物育种中不同育种技术的优缺点进行概述,论述了生物育种在生物与非生物胁迫等逆境情况下的研究进展,同时以多学科交叉技术的整合为特征,将育种技术与信息技术相结合,展望了未来育种的发展方向和策略及生物育种在解决全球粮食安全方面所起的重要作用,以期为育种技术的革新提供有意义的帮助。

关键词：生物育种玉米逆境胁迫

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EMS诱变对玉米花期的影响及鉴定分析

吉林农业大学学报 2024年第3期46卷 373-378页

作者：蒋振忠焦鹏齐拙赵贺曲静刘思言马义勇关淑艳吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林农业大学农学院长春130118

为探索玉米花期改变对不同发育时期生长状况的影响,以玉米优良自交系D12164的种子为材料,采用甲基磺酰乙酯(EMS)诱变技术筛选到玉米花期提前突变体M12164,对突变体拔节期发育相关基因表达量、不同生长阶段净光合速率、干物质积累速率、... 详细信息

为探索玉米花期改变对不同发育时期生长状况的影响,以玉米优良自交系D12164的种子为材料,采用甲基磺酰乙酯(EMS)诱变技术筛选到玉米花期提前突变体M12164,对突变体拔节期发育相关基因表达量、不同生长阶段净光合速率、干物质积累速率、玉米子粒营养成分含量、苗期抗旱性、草铵膦的耐药性和孟德尔式遗传分析进行测定。结果表明:与对照D12164相比,突变体M12164在拔节期光合和细胞分裂的相关基因处于高表达状态;不同时期光合速率同比增大,干物质积累较快;子粒蛋白质、淀粉和脂肪含量均有所上升;抗旱性降低,耐草铵膦性增强;孟德尔遗传分离比为3∶1,说明早花表型是通过隐性的方式遗传。该研究结果为调控玉米开花的分子机制研究和培育玉米新品种提供材料。

关键词：玉米突变体早花

消毒方法对PLA电纺组织工程支架理化性能及生物相容性的影响

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消毒方法对PLA电纺组织工程支架理化性能及生物相容性的影响

作者：马义勇锦州医科大学

学位级别：硕士

目的本文主要探讨三种消毒方法（紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡）对聚乳酸（PLA）电纺支架理化性能及生物相容性的影响,从而为组织工程支架消毒方法的选择提供参考依据。方法将一定质量的PLA材料溶于三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶剂,... 详细信息

目的本文主要探讨三种消毒方法（紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡）对聚乳酸（PLA）电纺支架理化性能及生物相容性的影响,从而为组织工程支架消毒方法的选择提供参考依据。方法将一定质量的PLA材料溶于三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶剂,搅拌均匀后制得质量分数为8%的纺丝液,静电纺丝得到PLA电纺支架。然后将PLA电纺支架制成直径为13 mm的圆片状样品,用紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡三种常用方法进行消毒处理后,采用傅里叶变换红外光谱（FTIR）、X射线衍射（XRD）和热重分析（TGA）检测分析支架化学性能、结晶性能和热性能的变化。利用水接触角（WCA）测试检测支架材料表面的亲水性,四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法评估支架材料的细胞毒性,定量分析支架上细胞的增值率。用扫描电镜（SEM）观察支架的微观形貌、纤维的变化以及细胞在支架上黏附及伸展情况。与此同时,用无菌磷酸盐缓冲液（PBS）处理经环氧乙烷消毒后的支架,对比分析其细胞毒性及细胞黏附和伸展情况。结果在消毒后检测PLA电纺支架理化性能的实验中,扫描电镜结果表明对照组PLA支架纤维形态呈圆柱状,纤维之间纵横交错成网状;环氧乙烷组支架纤维融合最为严重,整体呈现出一种海绵状结构,而纤维则呈现条带状,其直径和纤维间孔径都发生了变化;紫外辐射组和乙醇组纤维形态未发生明显变化,接近于对照组。FTIR测试结果显示不同消毒方法处理后的PLA支架的红外光谱特征峰波动趋势相似,各组支架可基本保持其原有的化学特性。XRD测试发现不同消毒方法处理后支架的结晶峰强度有所增强,其中环氧乙烷组最高。TGA结果表明消毒后支架的初始分解温度都有所增加,其中乙醇组最高。由WCA测试结果可知,消毒处理后PLA支架表面的接触角都有所降低,其中乙醇组下降最为显著。在消毒后检测PLA电纺支架生物相容性的实验中,第7天MTT结果表明实验组中乙醇组OD值最高,环氧乙烷-PBS组次之（P＞0.05）,但两者都高于环氧乙烷组（P＜0.001）;紫外辐射组的OD值高于环氧乙烷组（P＜0.001）。扫描电镜观察消毒后支架上细胞生长状态发现,乙醇组支架上细胞黏附、伸展的状态最好,表现出典型雪旺细胞的形态,其次是环氧乙烷-PBS组和紫外辐射组;环氧乙烷组支架上细胞大多呈球形,未能较好的黏附和伸展。结论紫外辐射、环氧乙烷熏蒸、乙醇浸泡三种常用消毒方法均可用于PLA电纺支架的灭菌,但乙醇浸泡法对PLA电纺支架的理化性能影响较小,可明显改善支架的生物相容性,在医学组织工程支架消毒方面具有较高的应用价值。无菌PBS处理后可明显改善经环氧乙烷消毒支架的生物相容性,这对消毒方法的改进具有一定的指导意义。

关键词：紫外辐射环氧乙烷乙醇组织工程支架静电纺丝

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压接式IGBT开关特性测试平台的设计

压接式IGBT开关特性测试平台的设计

作者：马义勇北京交通大学

学位级别：硕士

目前,柔性直流输电在全世界范围内,尤其是我国,都在朝着高电压等级,大容量方向发展,这无疑对其中关键设备换流阀和混合式直流断路器有了更高的要求。同样,作为换流阀和断路器重要组成的开关器件IGBT,其封装性能以及电气性能要求也必然... 详细信息

目前,柔性直流输电在全世界范围内,尤其是我国,都在朝着高电压等级,大容量方向发展,这无疑对其中关键设备换流阀和混合式直流断路器有了更高的要求。同样,作为换流阀和断路器重要组成的开关器件IGBT,其封装性能以及电气性能要求也必然更加严格。作为老式的焊接型IGBT,已经渐渐不能满足现在电力系统的要求,随之产生的一种新的压接型IGBT,在功率等级、开关速度等方面有着明显的优势,已成为柔性直流输电的优选器件。因此,对压接式IGBT开关特性测试有其工程实际意义。本文主要完成以下工作。首先,本文采用公式理论推导与仿真模拟相结合来完成测试平台中恒流充电装置的设计。为改变开关特性测试平台母线电容传统的由市电,经调压器,再通过变压器,最后由整流桥接充电电阻充电方式所引起的充电效率低、难控制电容电压、怕短路等缺点,设计一套基于LC谐振原理的恒流充电系统,并通过MATLAB进行仿真验证。然后,以仿真结果为依托,根据理论分析和器件的实际特性,对系统涉及到的元器件进行选取,完成恒流充电装置的实际搭建。装置中不仅要对电容、电感、变压器、整流硅等主电路器件合理选取,还要确定控制及保护设备,并以实际充电效果验证整个装置的可靠性和实用性。最后,针对ABB公司生产的StakPak型IGBT,采用双脉冲测试原理,完成开关特性测试平台的设计并进行测试。测试平台运行过程中,把充电装置实际应用到测试的预充电环节,验证装置电流电压指标达到测试平台要求。对于IGBT器件的开关特性测试同样采用MATLAB仿真和实测结合对比的方法,给出相关结论。

关键词：压接式IGBT 开关特性恒流充电 LC谐振双脉冲测试

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轮滑运动对中老年人心肺功能的影响

中国老年学杂志 2010年第11期30卷 1590-1591页

作者：马义勇张兴东胡景峰长春理工大学体育部吉林长春130022 长春工业大学体育部

轮滑是集健身,娱乐于一体的全身性运动,它能促进心脑血管系统和呼吸系统机能的改善和代谢作用的加强,能增强肌肉的力量和身体各个关节的灵活性[1].目前对轮滑运动的研究仅局限在肢体形态,延年益寿等方面,对心肺功能的研究处于起步阶段.... 详细信息

轮滑是集健身,娱乐于一体的全身性运动,它能促进心脑血管系统和呼吸系统机能的改善和代谢作用的加强,能增强肌肉的力量和身体各个关节的灵活性[1].目前对轮滑运动的研究仅局限在肢体形态,延年益寿等方面,对心肺功能的研究处于起步阶段.本研究通过观察参与轮滑运动者运动前后的心率,血压,台阶试验,肺活量,最大吸氧量等指标变化,探讨轮滑运动对中老年人的心肺功能的作用

关键词：轮滑运动中老年人心肺功能

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高校女运动员月经相关因素的调查与对策

中国妇幼保健 2008年第18期23卷 2564-2565页

作者：张兴东马义勇张艳明长春理工大学体育与健康部吉林长春130021 吉林大学第二医院护理部

由于女运动员在比赛和训练时经常遇到月经的困扰,影响了技术水平的发挥,冲击了比赛和训练计划.本文从访谈内容中予以关注,协调经期与比赛训练的关系,为在以后的比赛和训练及生活中提供有益的参考.

关键词：女运动员月经训练计划高校比赛

三维斑点追踪成像评价代偿期肝硬化患者左心室收缩功能

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中国医学计算机成像杂志 2018年第1期24卷 78-82页

作者：李洁欣孙志丹马义勇锦州医科大学附属第一医院超声科

目的:探讨应用三维斑点追踪成像(3D-STI)评价代偿期肝硬化患者左心室收缩功能的价值。方法:选取38名诊断明确的代偿期肝硬化患者为肝硬化组,并以40名健康体检者为对照,两组分别进行常规超声心动图检查与3D-STI检查,获得以下参数:左心室... 详细信息

目的:探讨应用三维斑点追踪成像(3D-STI)评价代偿期肝硬化患者左心室收缩功能的价值。方法:选取38名诊断明确的代偿期肝硬化患者为肝硬化组,并以40名健康体检者为对照,两组分别进行常规超声心动图检查与3D-STI检查,获得以下参数:左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVEDs)、室间隔厚度(IVSt)、左心室后壁厚度(LVPWt)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩期整体纵向应变(GLS)、整体圆周应变(GCS)、整体径向应变(GRS)及整体面积应变(GAS),比较两组对应参数间的差异。结果:肝硬化组LVEDd、LVEDs、LVPWt、LVEF与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);相比于对照组,肝硬化组IVSt增厚,LVEDV、LVESV增大,差异有统计学意义(t=-3.049、-3.156、-3.032,P值均<0.05);3D-STI参数中,肝硬化组GLS、GCS、GRS、GAS均减低,差异有统计学意义(t=-2.124、-3.102、2.378、-3.318,P值均<0.05)。结论:代偿期肝硬化患者左室收缩功能受损,应用3D-STI技术能早期、敏感地检测出肝硬化患者左心室整体收缩功能的改变。

关键词：肝硬化超声心动描记术三维斑点追踪心室功能左

玉米BON/CPN基因家族的表达模式分析及ZmBON1基因过表达载体的构建

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吉林农业大学学报 2021年

作者：齐拙焦鹏蒋振忠曲静关淑艳马义勇吉林农业大学生命科学学院吉林农业大学农学院

Copine蛋白也称BONZAI蛋白，是一种在真核生物中广泛分布的Ca;依赖性磷脂膜结合蛋白，在植物的多种生理活动中发挥着重要作用。本研究从玉米B73基因组数据库中筛选出两个BON/CPN家族基因，分别为ZmBON1和ZmBON3，并利用qRT-PCR的方法分... 详细信息

Copine蛋白也称BONZAI蛋白，是一种在真核生物中广泛分布的Ca;依赖性磷脂膜结合蛋白，在植物的多种生理活动中发挥着重要作用。本研究从玉米B73基因组数据库中筛选出两个BON/CPN家族基因，分别为ZmBON1和ZmBON3，并利用qRT-PCR的方法分析该基因家族成员空间与胁迫处理下的表达模式；从玉米中克隆ZmBON1基因，结合生物信息学分析其蛋白质的结构与功能，最后构建过表达载体pCAMBIA3301-ZmBON1-Bar。结果表明，玉米ZmBON1与ZmBON3在空间表达上存在组织特异性，同时二者在高温下表达受到抑制，在SA、JA、ABA、低温和大斑病菌接种处理下表达被诱导。ZmBON1基因的完整CDS区为1732bp，编码577个氨基酸的稳定亲水非分泌蛋白，分子量为63.73kDa，理论等电点为5.37。该蛋白质定位预测在细胞质上，其结构由α-螺旋、延伸链、无规则卷曲三部分组成。本研究为后续 ZmBON1基因在植物生长，温度胁迫与抗病反应中的生物学功能提供理论依据。

关键词：玉米 BON/CPN基因家族表达模式生物信息学