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杀线虫苏云金芽胞杆菌NBIN-863高含量悬浮剂的研制

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中国生物防治学报 2023年第1期39卷 54-61页

作者：廖先清闵勇饶犇周荣华陈伟刘晓艳湖北省农业科学院湖北省生物农药工程研究中心/湖北省农业科技创新中心生物农药分中心/国家生物农药工程技术研究中心武汉430064

目前我国微生物农药原药生产技术已达到甚至超过发达国家水平,但制剂技术却存在较大差距,主要体现在剂型结构不合理、制剂质量差、农药助剂种类及品种少、剂型加工工艺总体水平还比较落后等方面。苏云金芽胞杆菌(Bt)等功能微生物产品的... 详细信息

目前我国微生物农药原药生产技术已达到甚至超过发达国家水平,但制剂技术却存在较大差距,主要体现在剂型结构不合理、制剂质量差、农药助剂种类及品种少、剂型加工工艺总体水平还比较落后等方面。苏云金芽胞杆菌(Bt)等功能微生物产品的市场容量及应用效果与剂型是密切相关的。为了明确新型生物杀线剂NBIN-863的最佳施用剂型,特开展此试验。通过对防腐剂、分散剂、悬浮剂等不同助剂的选择,研制了一种高含量Bt悬浮剂(5.2×10~9~7.9×10^(9)CFU/mL)。配方优化试验表明,在Bt发酵液中加入0.4%防腐剂山梨酸钾、1.0%分散剂硅酸镁铝、4.0%悬浮剂木质素磺酸钙,用盐酸调节p H至4.5,54℃热储前芽胞数最高为7.9×10~9 CFU/mL,对秀丽隐杆线虫活性最高,LC_(50)为2.83 mg/L,对黄瓜根结线虫田间防效达68.64%。综合各指标,尤其是对秀丽隐杆线虫的半致死浓度,杀线虫NBIN-863悬浮剂(7.9×10~9CFU/mL)效果最好,不仅流动性好,而且耐贮藏,是防治作物根结线虫病的理想药剂。

关键词：苏云金芽胞杆菌生物杀线剂高含量悬浮剂

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甾类化合物微生物转化与分解代谢机制研究进展

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微生物学通报 2019年第10期46卷 2743-2762页

作者：阳飞闵勇刘晓艳饶犇王开梅杨自文武汉大学生命科学学院湖北武汉430072 湖北省农业科学院湖北省生物农药工程研究中心湖北武汉430064

甾类化合物具有重要的生理医药作用,市场需求巨大。甾类化合物及其关键甾类药物通过微生物转化制备工艺较化学合成法具有区域立体选择性、减少合成步骤、缩短生产周期、提高收率以及生态友好等优点逐步被应用,然而甾类物质微生物分解代... 详细信息

甾类化合物具有重要的生理医药作用,市场需求巨大。甾类化合物及其关键甾类药物通过微生物转化制备工艺较化学合成法具有区域立体选择性、减少合成步骤、缩短生产周期、提高收率以及生态友好等优点逐步被应用,然而甾类物质微生物分解代谢机制还有待进一步深入探索研究并确定。本文从甾类化合物结构种类与主要来源、生理功能、微生物转化与分解代谢机制的研究等方面进行了归纳,着重解析甾类化合物分解代谢过程关键酶系及其分子作用机制,为甾药化合物生产菌种改造与工程菌构建,以及微生物转化工业化生产工艺的开发提供参考。

关键词：甾类化合物微生物转化侧链降解核心环降解代谢机制

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香灰木聚糖酶基因的克隆及序列分析

香灰木聚糖酶基因的克隆及序列分析

响应面法优化贝莱斯芽胞杆菌YC11的液体发酵培养基

2006年度学术研讨会

作者：饶犇张桂敏马立新湖北大学分子微生物与基因工程实验室

利用Blast搜索GenBank上的木聚糖酶,寻找保守氨基酸序列,设计了一对简并引物,以真菌香灰总DNA为模板进行PCR扩增,扩增产物经测序,Blast分析判定为新的木聚糖酶基因片段。再通过基因组步行PCR(Genomic walking PCR,简称GWPCR法)法获得全...

利用Blast搜索GenBank上的木聚糖酶,寻找保守氨基酸序列,设计了一对简并引物,以真菌香灰总DNA为模板进行PCR扩增,扩增产物经测序,Blast分析判定为新的木聚糖酶基因片段。再通过基因组步行PCR(Genomic walking PCR,简称GWPCR法)法获得全长木聚糖酶基因3’端的序列,然后通过SEFA-PCR方法获得该基因的5’端序列。

关键词：

来源： cnki会议评论

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中国生物防治学报 2023年第4期39卷 915-923页

作者：刘芳黎妍妍陈伟曹春霞温少华饶犇黄大野湖北省生物农药工程研究中心武汉430064 湖北省烟草科学研究院武汉430030

为提高对烟草黑胫病具有良好防治效果的贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis YC11菌株的芽胞产生水平,通过Plackett-Burman试验筛选出影响YC11摇瓶发酵芽胞产量的3个显著因子:玉米粉、酵母粉和硫酸镁;再结合最陡爬坡试验、Box-Behnken(BB... 详细信息

为提高对烟草黑胫病具有良好防治效果的贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis YC11菌株的芽胞产生水平,通过Plackett-Burman试验筛选出影响YC11摇瓶发酵芽胞产量的3个显著因子:玉米粉、酵母粉和硫酸镁;再结合最陡爬坡试验、Box-Behnken(BB)响应面法拟合显著因子与芽胞产量的非线性方程求解,得到优化的YC11菌株发酵产胞培养基配方。结果表明,优化后的最佳配方为玉米粉13.74 g/L、鱼粉15.00 g/L、酵母粉15.73 g/L、玉米浆5.00 g/L、硫酸镁0.59 g/L和磷酸二氢钾0.30 g/L,此时模型预测发酵液芽胞最佳产量为114.4亿芽胞/m L,验证值为116.6亿芽胞/m L,预测值与验证值之间吻合较好,较优化前芽胞产量(70.8亿芽胞/m L)提高了64.7%。采用500 L发酵罐进行发酵验证,菌株YC11的芽胞产量为150亿芽胞/m L。盆栽试验结果表明,菌株YC11发酵液对烟草黑胫病的防效可达到100%。

关键词：贝莱斯芽胞杆菌发酵培养基优化响应面法芽胞产量

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溶氧对多粘芽孢杆菌发酵影响的研究

湖北农业科学 2014年第23期53卷 5745-5747页

作者：饶犇王亚平李娜周荣华廖先清刘芳陈伟张光阳杨自文湖北省农业科学院生物农药工程研究中心武汉430064 湖北大学湖北省工业生物技术重点实验室武汉430062 云南省红河学院生命科学与技术学院/云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661100

探讨溶氧对于多粘芽孢杆菌发酵的影响。结果表明,溶氧量为40%时,多粘芽孢杆菌的芽孢数和抑菌物质产量均达到最高值,分别为10×109个/g和1.2%。在此基础上又进行了通过补料技术控制溶氧的试验,结果表明,补料能较好的提高多粘芽孢杆菌的... 详细信息

探讨溶氧对于多粘芽孢杆菌发酵的影响。结果表明,溶氧量为40%时,多粘芽孢杆菌的芽孢数和抑菌物质产量均达到最高值,分别为10×109个/g和1.2%。在此基础上又进行了通过补料技术控制溶氧的试验,结果表明,补料能较好的提高多粘芽孢杆菌的芽孢数和抑菌物质产量,分别达到15×109个/g和1.5%。

关键词：多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa) 溶氧补料发酵

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巨大芽孢杆菌发酵培养基的优化

湖北农业科学 2014年第15期53卷 3539-3542页

为了得到巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)发酵的最佳培养基,在单因子试验的基础上,应用Plackett-Burman设计法对影响芽孢产量的基本培养基组分中的关键因子进行了筛选,并进一步采用响应面分析法(RSM)对影响芽孢产量的关键因素最佳水... 详细信息

为了得到巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)发酵的最佳培养基,在单因子试验的基础上,应用Plackett-Burman设计法对影响芽孢产量的基本培养基组分中的关键因子进行了筛选,并进一步采用响应面分析法(RSM)对影响芽孢产量的关键因素最佳水平作了深入的研究。结果表明,影响巨大芽孢杆菌芽孢产量的关键因素是豆粕和淀粉的浓度。通过RSM的拟合和推算得到在豆粕和淀粉浓度分别为48.85和19.67 g/L时,此时模型预测发酵最佳产量为43.16×108CFU/mL,验证值为42.2×108CFU/mL,预测值与验证值之间吻合较好,比原始培养基提高了约10倍。

关键词：巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium) Plackett-Burman设计法响应面分析法(RSM)

粘质沙雷氏菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的体外表达

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湖北农业科学 2013年第10期52卷 2431-2435页

作者：王亚平周荣华饶犇马立新湖北大学湖北省工业生物技术重点实验室武汉430062 湖北省农业科学院生物农药工程研究中心武汉430064

根据GenBank中α-乙酰乳酸脱羧酶的基因序列(slaA)设计引物,以粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)HU1基因组DNA为模板通过PCR扩增得到了目标基因,全长为780 bp。将该基因分别连接到大肠杆菌表达载体pET30a和毕赤酵母表达载体pPICZαA上,... 详细信息

根据GenBank中α-乙酰乳酸脱羧酶的基因序列(slaA)设计引物,以粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)HU1基因组DNA为模板通过PCR扩增得到了目标基因,全长为780 bp。将该基因分别连接到大肠杆菌表达载体pET30a和毕赤酵母表达载体pPICZαA上,构建表达质粒pET30a-slaA和pPICZα-A-slaA,并在对应的宿主中进行了表达。结果表明,大肠杆菌和毕赤酵母的表达产物的最适温度和pH均分别为40℃和7,两者在不同pH下的稳定性也相似,只不过毕赤酵母的表达产物的热稳定性要略强于大肠杆菌的表达产物。

关键词：粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens) α-乙酰乳酸脱羧酶体外表达

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粘质沙雷氏菌发酵生产D-乳酸的研究

工业微生物 2014年第5期44卷 19-22页

作者：苏刚饶犇沈亚领华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所上海200237

本文对粘质沙雷氏菌发酵生产D-乳酸进行了研究。以粘质沙雷氏菌G1(Serratia marcescens G1)为出发菌种,摇瓶试验确定了发酵培养方式:前12 h为菌体生长阶段,有氧培养,温度28℃,pH值7.0;后36 h为D-乳酸合成积累阶段,无氧培养,温度44℃,pH... 详细信息

本文对粘质沙雷氏菌发酵生产D-乳酸进行了研究。以粘质沙雷氏菌G1(Serratia marcescens G1)为出发菌种,摇瓶试验确定了发酵培养方式:前12 h为菌体生长阶段,有氧培养,温度28℃,pH值7.0;后36 h为D-乳酸合成积累阶段,无氧培养,温度44℃,pH值6.0。且发现使用葡萄糖为碳源时更有利于D-乳酸的合成积累。采用缺失2,3-丁二醇合成能力的基因工程菌株R1为出发株,经筛选后得到耐受较高浓度乳酸盐的菌株R150,以R150为发酵菌种,在3.7 L发酵罐上采用两阶段发酵法,并通过增加起始菌体浓度的方法,发酵生成的D-乳酸浓度达到83.5 g/L,光学纯度达到98.9%。本研究成果为使用粘质沙雷氏菌发酵生产D-乳酸的深入研究打下了基础。

关键词： D-乳酸粘质沙雷氏菌葡萄糖发酵

交链孢木聚糖酶基因的克隆和在毕赤酵母的表达

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交链孢木聚糖酶基因的克隆和在毕赤酵母的表达