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纳米流式检测技术用于益生菌产品的细菌活性及上消化道耐受性分析

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分析化学 2023年第4期51卷 502-525页

作者：薛乘风王文婷毛翠萍吴丽娜颜晓梅厦门大学化学化工学院化学生物学系谱学分析与仪器教育部重点实验室化学生物学福建省重点实验室

活菌含量和上消化道耐受性是益生菌产品的两个重要指标，共同影响最终定植于人体肠道的活菌数，准确评估这两个指标对于消费者选择产品和生产者提升产品质量具有重要的指导意义。基于本研究组研发的纳米流式检测技术（Nano-flow cytomet... 详细信息

活菌含量和上消化道耐受性是益生菌产品的两个重要指标，共同影响最终定植于人体肠道的活菌数，准确评估这两个指标对于消费者选择产品和生产者提升产品质量具有重要的指导意义。基于本研究组研发的纳米流式检测技术（Nano-flow cytometry, nFCM）在单颗粒水平对细菌进行高灵敏度、高通量分析的独特优势，本研究利用SYTO 9和碘化丙啶（Propidium iodide, PI）两种核酸染料共染的方法标记总菌和识别死菌，对益生菌产品的活菌含量及其经模拟胃液（Simulated gastric juice, SGJ）、肠液（Simulated intestinal juice, SIJ）或上消化道消化处理后的益生菌活性进行测定，从而实现对益生菌产品的细菌活性及其上消化道耐受性的定量评估。本研究对18款益生菌产品（包括16款粉末冲剂和2款胶囊产品）的活菌含量及上消化道耐受性进行考察，结果表明，18款产品的活菌含量均大于1010cells/package，平均活菌比例为61.7%，均符合国际标准（107cfu/g），但是其中有一款产品未达到其活菌含量的标注值。其次，使用pH=3的SGJ和胆盐浓度为0.3%(m/V)的SIJ考察益生菌产品的胃液、肠液及上消化道耐受性，根据模拟消化处理后益生菌的存活率可将产品分为耐胃液型（12款）和耐肠液型（6款）两类，上消化道模拟消化处理后大部分产品的活菌数大于108cells/package，平均存活率为15.6%。最后，考察了胃溶型和肠溶型胶囊对益生菌的保护作用，结果表明，肠溶型胶囊可提升益生菌的胃液耐受性，但是，所包覆的益生菌需要同时具有较强的肠液耐受性才能提升其在上消化道的存活率。

关键词：益生菌益生菌产品纳米流式检测技术细菌活性上消化道耐受性

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细胞外囊泡的单颗粒分析技术

分析测试学报 2022年第9期41卷 1345-1354页

作者：胡芸芸底浩楠赖辉燕李雨柔陈晨田野颜晓梅厦门大学化学化工学院化学生物学系谱学分析与仪器教育部重点实验室化学生物学福建省重点实验室福建厦门361005

细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是细胞分泌到细胞外基质中的纳米尺度的脂质小膜泡,携带着母细胞来源的各种生物活性分子,如蛋白质、核酸、脂质等,是细胞间沟通交流的信使。EVs参与免疫调控、血管新生、疾病发生、肿瘤转移等生... 详细信息

细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是细胞分泌到细胞外基质中的纳米尺度的脂质小膜泡,携带着母细胞来源的各种生物活性分子,如蛋白质、核酸、脂质等,是细胞间沟通交流的信使。EVs参与免疫调控、血管新生、疾病发生、肿瘤转移等生理病理过程,广泛存在于各种体液中,在液体活检、疾病治疗中显示出巨大的应用前景,也因此成为生命科学领域炙手可热的前沿研究方向。然而EVs在粒径、生化组成等方面具有高度的个体差异性和多样性。因此,迫切需要发展EVs的单颗粒分析技术以精准表征EVs亚群的分子组成,深入了解其生物学功能,促进EVs临床诊断与治疗应用的发展。该文针对近年来发展的EVs的单颗粒分析技术进行综述,从检测原理、性能和应用范围等方面对这些技术进行讨论,并对单颗粒表征技术未来的发展趋势进行了展望。

关键词：细胞外囊泡单颗粒分析技术荧光显微成像技术流式细胞术纳米流式检测技术

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生物制药领域蛋白质团聚检测技术的研究进展

分析化学 2018年第10期46卷 1507-1517页

作者：高恺旻颜晓梅厦门大学化学化工学院化学生物学系谱学分析与仪器教育部重点实验室化学生物学福建省重点实验室

21世纪是生物制药的黄金时代,以重组蛋白药物和治疗性抗体为代表的蛋白质药物已成为生物技术药物的重要组成部分,其对恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染等重大疾病的治疗效果和生物安全性远高于小分子化学药物。但是蛋白质稳定性差,... 详细信息

21世纪是生物制药的黄金时代,以重组蛋白药物和治疗性抗体为代表的蛋白质药物已成为生物技术药物的重要组成部分,其对恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染等重大疾病的治疗效果和生物安全性远高于小分子化学药物。但是蛋白质稳定性差,在生产、纯化、运输和储存等过程中,容易因环境刺激或自身稳定性等因素产生团聚,从而导致药效降低,并可能引发免疫反应。发展灵敏度高、分辨率好、简便实用的蛋白质团聚检测技术和方法,对蛋白质药物的研发和改良可起到积极的推动作用。本文针对蛋白质团聚的检测技术和方法进行综述,从检测原理、性能和应用范围等方面,对体积排阻色谱法、凝胶电泳法、分析超速离心法、场流分离法、浊度法、动态光散射法、纳米颗粒跟踪分析技术、流式细胞术和电子显微技术等进行分析比较,并对蛋白质团聚检测技术未来的发展趋势进行了展望。

关键词：蛋白质药物蛋白质团聚尺寸分离光散射流式细胞术评述

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贺黄本立院士九十华诞

光谱学与光谱分析 2015年第9期35卷 2371-2376页

作者：林俊越颜晓梅杭纬厦门大学化学化工学院福建厦门361005

黄本立院士,1925年9月21日出生于香港,祖籍广东新会;光谱化学家,厦门大学教授。1945年—1949年就读于岭南大学。1950年—1986年任职于中国科学院长春应用化学研究所,历任助理研究员、副研究员、研究员;1986年调厦门大学任教至今。曾任... 详细信息

黄本立院士,1925年9月21日出生于香港,祖籍广东新会;光谱化学家,厦门大学教授。1945年—1949年就读于岭南大学。1950年—1986年任职于中国科学院长春应用化学研究所,历任助理研究员、副研究员、研究员;1986年调厦门大学任教至今。曾任中国化学会理事长、中国光谱学会副理事长、分析化学学科委员会主任委员、《光谱学与光谱分析》主编,《分析化学》、《分析科学学报》、《分析试验室》、《冶金分析》、《化学进展》等十多种国内期刊编委或顾问,

关键词：黄本立厦门大学教授光谱化学分析科学学报期刊编委冶金分析分析试验室岭南大学化学进展广东新会

过渡金属硫化物复合碳纳米材料的制备及其电化学性能研究

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过渡金属硫化物复合碳纳米材料的制备及其电化学性能研究

作者：颜晓梅深圳大学

学位级别：硕士

超级电容器,也称为电化学电容器,是一种具有无限寿命周期和高功率密度的能量存储装置,通常以双电层或超级电容的形式存储能量。超级电容器是一种新型的电力设备,其能量密度和功率密度介于电池和传统的电容器之间,目前已应用于电脑电源... 详细信息

超级电容器,也称为电化学电容器,是一种具有无限寿命周期和高功率密度的能量存储装置,通常以双电层或超级电容的形式存储能量。超级电容器是一种新型的电力设备,其能量密度和功率密度介于电池和传统的电容器之间,目前已应用于电脑电源恢复系统、电动汽车及动力电子设备等领域。电极材料是影响电容器性能优劣的核心因素,因此在超级电容器的研究工作中,制备性能优异的电极材料一直是科研工作者的工作重心。本文采用水热法制备硫化钴和二硫化钼两种金属硫化物,并将其应用于超级电容器电极材料。此外,为了克服过渡金属硫化物的缺点,将其与碳纳米材料复合,充分发挥复合材料各组分的协同作用,研究复合材料的制备及其电化学性能。本论文主要研究内容及研究结论如下:采用葡萄糖作为还原剂,通过水热反应和冷冻干燥过程制备CoS@CNTs/rGO三元复合材料,并对复合材料进行结构表征和性能测试。FESEM图显示,在CoS@CNTs/rGO三元复合材料中,片状CoS均匀的分散于三维CNTs和rGO导电框架结构中,形成三维立体结构。这种结构促进了电解质离子的传输,有利于电化学性能的提高。电化学性能测试表明:CoS@CNTs/rGO三元复合材料在1.0 A/g的电流密度下,其比电容为295F/g,在相同电流密度下经过2000次的恒电流充放电后,比电容保持率为77.41%。在5.0 A/g的电流密度下的比电容为235 F/g,表明该三元复合材料具有较好的电容性能。通过一种简单的水热法和还原过程原位合成MoS@CNTs/rGO三元复合材料。表征测试结果显示,MoS@CNTs/rGO三元复合材料中三种组分均匀分布,石墨烯-碳纳米管作为碳框架有效承载MoS@CNTs/rGO三元复合材料,使得超级电容器性能得到有效提升。电化学性能测试表明:当扫描速度达到100 mV/s时,MoS@CNTs/rGO的比电容达到218 F g。在10 mV/s扫描速率下循环3000次后比电容仍能达到364 F g,具有较高的比电容保持率(83.1%)。

关键词：超级电容器过渡金属硫化物还原氧化石墨烯碳纳米管

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重力坝溢流坝段动力特性及地震响应研究

重力坝溢流坝段动力特性及地震响应研究

作者：颜晓梅武汉大学

学位级别：硕士

本文采用有限元动力分析方法，分析了重力坝溢流坝段的动力特性和地震动力响应，研究了重力坝溢流坝段的频谱分布规律、地震动位移和地震动应力的分布规律。从理论上而言，对动力分析中所涉及的相关理论进行了简明扼要的... 详细信息

本文采用有限元动力分析方法，分析了重力坝溢流坝段的动力特性和地震动力响应，研究了重力坝溢流坝段的频谱分布规律、地震动位移和地震动应力的分布规律。从理论上而言，对动力分析中所涉及的相关理论进行了简明扼要的阐述。介绍了动力分析中的基本概念、多自由度体系的运动方程及其解法、以及本文中所采用的反应谱法。对重力坝动力分析中的一些特殊问题进行了研究。有限元计算时，计算模型的选取;库水与坝体的耦合振动;坝基体系的相互作用。特别对库水与坝体耦合振动问题进行了详细的阐述。针对向家坝溢流坝段，运用大型有限元软件ANSYS，采用模态分析，研究了溢流坝段的自振特性，依据反应谱理论，分析了其地震动力响应规律。在工程常见范围内变动坝高，研究了不同坝高对溢流坝动力特性及地震反应的影响规律，丰富了高坝设计理论。在工程常见的范围内变动坝基弹模，研究地基刚度变化对溢流坝动力特性及地震反应的影响规律，对水工建筑物规范建议采用刚性地基的观点提出了质疑。最后，对本论文的工作进行了总结，并提出了进一步工作的发展方向与前景。

关键词：重力坝溢流坝动力特性地震反应

窥探纳米世界:纳米流式检测技术的研发及单颗粒水平表征应用

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中国生物工程杂志 2023年第12期43卷 1-13页

作者：蔡年桂陈欣张清源底浩楠詹小贞陈军岩陈昊颜晓梅厦门大学化学化工学院、谱学分析与仪器教育部重点实验室、福建省化学生物学重点实验室厦门361005

纳米颗粒的准确表征对于推动生命科学认知、改善疾病诊断和治疗以及促进纳米科技的发展至关重要。由于纳米颗粒存在高度的个体差异性和异质性,迫切需要开发单颗粒水平的快速检测技术。基于瑞利散射与鞘流单分子荧光检测技术研发的纳米... 详细信息

纳米颗粒的准确表征对于推动生命科学认知、改善疾病诊断和治疗以及促进纳米科技的发展至关重要。由于纳米颗粒存在高度的个体差异性和异质性,迫切需要开发单颗粒水平的快速检测技术。基于瑞利散射与鞘流单分子荧光检测技术研发的纳米流式检测技术(nano⁃flow cytometry,nFCM),能够以每分钟高达10000颗粒的速率实现对人工合成纳米颗粒(7~500 nm)以及细胞外囊泡、病毒等天然生物纳米颗粒的粒径分布、颗粒浓度和生化性状的高灵敏、高选择性、高通量多参数分析。通过讨论nFCM研发的重要性、挑战、进展以及产业转化,回顾该技术在纳米颗粒研究中的应用,并展望其未来的应用前景。

关键词：纳米流式检测技术单颗粒分析纳米颗粒病毒细胞外囊泡

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用于癌症病人初级临床诊断的化学计量学研究

化学学报 1993年第11期51卷 1094-1098页

作者：王小如朱尔一颜晓梅杨芃原黄本立庄峙厦厦门大学化学系分析研究所厦门361005 厦门大学环境科学研究中心厦门361005

用感应耦合等离子体原子发射光谱及石墨炉原子吸收测定了正常人及癌症病人头发与血清样品中13个元素。将所得数据送入计算机,分别用化学计量学中PLS及Gram—Schmidt多元分析方法处理了血清与头发样本。在两种情况下均得到了病人与正常... 详细信息

用感应耦合等离子体原子发射光谱及石墨炉原子吸收测定了正常人及癌症病人头发与血清样品中13个元素。将所得数据送入计算机,分别用化学计量学中PLS及Gram—Schmidt多元分析方法处理了血清与头发样本。在两种情况下均得到了病人与正常人分类极其清晰的二维判别图。头发样本的判别失误率低于血清样本。头发样品取样、存储及运输容易,也宜于进行光谱分析,因此可将头发用作癌症初级临床诊断中的分析样品。

关键词：癌诊断毛发血清

高灵敏、宽动态范围纳米流式检测装置的研制及应用

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分析化学 2020年第7期48卷 838-846页

作者：毛翠萍林垚牛倩薛乘风颜晓梅厦门大学化学化工学院化学生物学系谱学分析与仪器教育部重点实验室化学生物学福建省重点实验室

基于纳米颗粒固有的多分散性,对其粒径及分布快速地进行高分辨表征是纳米颗粒相关研究和产品开发所面临的重大挑战。与电子显微镜、原子力显微镜、动态光散射、纳米颗粒追踪分析等常规使用的纳米颗粒表征技术相比,流式细胞术具有可单颗... 详细信息

基于纳米颗粒固有的多分散性,对其粒径及分布快速地进行高分辨表征是纳米颗粒相关研究和产品开发所面临的重大挑战。与电子显微镜、原子力显微镜、动态光散射、纳米颗粒追踪分析等常规使用的纳米颗粒表征技术相比,流式细胞术具有可单颗粒检测、快速、多参数、统计精确性高等优势。然而,由于检测灵敏度的局限性,商品化流式细胞仪难以检测粒径小于200 nm的聚苯乙烯纳米颗粒。结合瑞利散射和鞘流单分子荧光检测技术,本研究组研制了纳米流式检测装置（Nano-flow cytometer, nFCM）,采用单光子计数雪崩光电二极管（Single photon counting avalanche photodiode, APD）作为检测器,低折射率二氧化硅纳米颗粒（SiO;NPs）的检测下限可达到24 nm,可基线分辨47、59、74、94和123 nm的SiO;NPs混合样本。由于nFCM散射光检测动态范围受限于单光子探测器的最大光子计数值,而纳米颗粒的散射光强度随粒径的增大呈指数上升,为实现纳米颗粒更全面的粒径分布检测,仪器的检测动态范围有待提升。本研究采用激光光束整形、双光阑降低背景信号、高量子效率光电倍增管检测器等策略对仪器进行多方位改进,以研制高灵敏、宽动态范围的nFCM。改进后的nFCM可实现直径59 nm SiO;NPs的高信噪比检测（S/N=119）,可基线分辨59、74、94、123、160、180和222 nm的SiO;NPs混合样本,相比以APD为检测器的nFCM,粒径检测范围扩展约100 nm,并成功用于鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡（Outer membrane vesicles, OMVs）粒径分布的快速测定。

关键词：单颗粒检测光散射粒径分布纳米流式检测技术细菌外膜囊泡