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乐果对大鼠大脑分区多巴胺神经递质的影响

卫生研究 2007年第1期36卷 5-8页

作者：阮国洪吴强恩吴庆郑力行顾锡安顾平周志俊复旦大学公共卫生学院教育部公共卫生安全重点实验室上海200032

目的观察乐果染毒对大鼠大脑分区单胺类神经递质多巴胺（DA）及其代谢物（DOPAC）浓度变化的影响。方法104只雄性SD大鼠随机分为对照组（生理盐水）和乐果染毒低（38．9mg／kg）、中（83．7mg／kg）、高（180．0mg／kg）3个剂量组，腹... 详细信息

目的观察乐果染毒对大鼠大脑分区单胺类神经递质多巴胺（DA）及其代谢物（DOPAC）浓度变化的影响。方法104只雄性SD大鼠随机分为对照组（生理盐水）和乐果染毒低（38．9mg／kg）、中（83．7mg／kg）、高（180．0mg／kg）3个剂量组，腹腔一次注射染毒，给药后0．5、2、8和24h断头处死并分离脑组织（大脑皮层、纹状体、海马、脑干和小脑5部分）。用正丁醇、正庚烷、高氯酸、三氯甲烷处理脑组织样品，用高效液相色谱电化学检测法检测。结果不同时程的染毒组（低、中、高剂量组）大脑DA浓度及其代谢物DOPAC与对照组相比差异均有显著性（P〈0．05）。DA及其代谢物DOPAC在纹状体分别增加了28％～122％、89％～538％；DA在其它分区变化差异没有显著性。DOPAC在大脑皮层有的剂量和时程增加了50％～72％、有的剂量和时程减少了31％～51％；在海马差异没有显著性；在脑干有的剂量和时程增加了4％～102％、有的剂量和时程减少了10％-16％；在小脑有的剂量和时程增加了6％～39％、有的剂量和时程减少了6％-23％。DA和DOPAC浓度在不同时程的低、中、高剂量组间差异均有显著性（P〈0．05）。结论DA和DOPAC浓度有随染毒剂量和时程的增加而增加的趋势，存在剂量-效应和时程-效应关系。因此乐果的中毒存在非胆碱能机制。多巴胺类能机制。

关键词：乐果多巴胺大脑分区

乐果接触工人外周血淋巴细胞M_3受体mRNA水平的研究

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中华劳动卫生职业病杂志 2004年第1期22卷 3-6页

作者：孙运光周志俊张雪梅顾锡安金泰廙复旦大学公共卫生学院劳动卫生与毒理学教研室上海200032

目的　研究乐果接触工人外周血淋巴细胞毒蕈碱型乙酰胆碱受体 (M3)基因表达情况 ,初步探讨M3 受体mRNA水平在有机磷农药毒性效应中起的作用。方法　选取乐果接触工人 3 3人和对照人群 15人 ,分离其外周血淋巴细胞后体外用乐果处理 ,用... 详细信息

目的　研究乐果接触工人外周血淋巴细胞毒蕈碱型乙酰胆碱受体 (M3)基因表达情况 ,初步探讨M3 受体mRNA水平在有机磷农药毒性效应中起的作用。方法　选取乐果接触工人 3 3人和对照人群 15人 ,分离其外周血淋巴细胞后体外用乐果处理 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法扩增其M3 受体mRNA ,计算mRNA基础水平和诱导水平。结果　乐果接触工人和对照人群外周血淋巴细胞M3 受体mRNA基础水平相近 ,相对值分别为 (1.49± 0 .2 0 )和 (1.49± 0 .45)。经体外乐果诱导后 ,乐果接触组mRNA水平为 1.92± 1.0 7,明显高于对照组 (1.2 2± 0 .19)与自身基础水平 (1.49± 0 .45) ,差异均有显著性 (P 2 5年者为 (2 .0 9± 1.2 5) [与工龄 <5年者差异有显著性 (P <0 .0 5) ]。结论　长期接触乐果后 ,工人外周血淋巴细胞M3 受体mRNA基础水平与对照人群差异不明显 ,但体外诱导后其M3 受体mRNA诱导水平明显上升。

关键词：乐果外周血淋巴细胞 M3受体 mRNA 乙酰胆碱受体

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乐果染毒对大鼠心血管系统的影响

中国工业医学杂志 2010年第5期23卷 327-331页

作者：徐甫张雪梅顾锡安周志俊复旦大学公共卫生学院/教育部公共卫生安全重点实验室上海200032

目的观察乐果28天染毒对雄性SD大鼠心血管系统的影响,探讨乐果诱导其毒性的可能机制。方法雄性SD大鼠,乐果灌胃染毒,每天1次,连续28 d。每5天测定大鼠外周血AChE活力,每周测定2次血压。染毒结束后测定心脏AChE、Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATP... 详细信息

目的观察乐果28天染毒对雄性SD大鼠心血管系统的影响,探讨乐果诱导其毒性的可能机制。方法雄性SD大鼠,乐果灌胃染毒,每天1次,连续28 d。每5天测定大鼠外周血AChE活力,每周测定2次血压。染毒结束后测定心脏AChE、Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATPase酶活力,以及M2受体、Ca2+-ATPase和兰尼碱受体基因表达水平。结果乐果28天染毒SD大鼠心肌和外周血AChE活力显著下降。染毒初期,乐果可以引起SD大鼠血压升高,染毒剂量越高,血压升高越显著,但到染毒后期,血压呈现下降趋势。染毒结束后,SD大鼠心肌Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力以及mRNA表达,均未见显著性改变,50 mg/kg染毒组大鼠的M2受体和RyR的mRNA表达均明显下调,分别达到0.64±0.02和0.61±0.03。结论接触一定剂量的乐果可以引起SD大鼠血压的改变,可能同M2受体基因和兰尼碱受体基因表达水平有关。

关键词：乐果血压乙酰胆碱酯酶 ATP酶兰尼碱受体

乐果染毒28天对大鼠脑组织及外周血淋巴细胞M受体mRNA水平的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2004年第1期22卷 7-10页

作者：孙运光周志俊张雪梅顾锡安金泰廙复旦大学公共卫生学院劳动卫生与毒理学教研室上海200032

目的　研究低剂量乐果预处理诱导大鼠产生耐受及再暴露于高剂量乐果时其脑组织与外周血淋巴细胞毒蕈碱型乙酰胆碱受体 (M受体 )变化情况 ,探索耐受产生的机制。方法　大鼠分两个阶段染毒 :连续 2 8d皮下注射 2 5mg/kg乐果后 ,分别再给... 详细信息

目的　研究低剂量乐果预处理诱导大鼠产生耐受及再暴露于高剂量乐果时其脑组织与外周血淋巴细胞毒蕈碱型乙酰胆碱受体 (M受体 )变化情况 ,探索耐受产生的机制。方法　大鼠分两个阶段染毒 :连续 2 8d皮下注射 2 5mg/kg乐果后 ,分别再给以生理盐水及 50、10 0mg/kg乐果激发。记录大鼠的中毒症状 ,测其全血乙酰胆碱酯酶 (AChE)活力。激发后 2 4h ,测大鼠脑AChE活力和M1、M2 受体亚型密度和受体mRNA水平 ;测大鼠外周血淋巴细胞M3 受体mRNA基础水平和诱导水平。结果　乐果 2 8d染毒过程中 ,大鼠全血AChE活力持续下降 ,第 13天达最低 ,乐果激发染毒使其活力进一步下降 ;乐果预处理组大鼠脑组织AChE活力远低于对照组 ,且随激发剂量升高而下降。对照组、2 5mg/kg乐果预处理组和预处理后 50、10 0mg/kg乐果激发组大鼠脑组织M1受体密度分别为 979.15、856.54、53 9.46、53 9.14fmol/mgpro ,M1受体mRNA水平相对数值分别为 2 .59、2 .47、2 .2 0和 1.81,同M1受体密度变化基本一致 ,但激发剂量增加 ,其水平继续下降 ;M2 受体密度分别为 50 7.3 8、611.11、548.42、3 3 7.47fmol/mgpro ,预处理对之影响不明显 ,但随激发剂量升高 ,其密度下降 ,M2 受体mRNA水平则变化不明显。这 4组外周血淋巴细胞M3

关键词：乐果染毒大鼠脑组织外周血淋巴细胞 M受体 mRNA 胆碱能

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美金刚对急性毒鼠强中毒小鼠的实验治疗研究

中国工业医学杂志 2004年第1期17卷 1-3页

作者：唐颖石峻岭顾锡安戴旭峰周志俊复旦大学公共卫生学院上海200032

目的　研究非竞争性NMDA受体拮抗剂美金刚对急性毒鼠强中毒小鼠的治疗作用。方法　根据正交实验设计原理 ,选用L9( 3 4)正交表 ,以存活时间、惊厥出现时间和抽搐出现时间为指标 ,测试美金刚对急性毒鼠强中毒小鼠的治疗效果。结果　美金... 详细信息

目的　研究非竞争性NMDA受体拮抗剂美金刚对急性毒鼠强中毒小鼠的治疗作用。方法　根据正交实验设计原理 ,选用L9( 3 4)正交表 ,以存活时间、惊厥出现时间和抽搐出现时间为指标 ,测试美金刚对急性毒鼠强中毒小鼠的治疗效果。结果　美金刚明显延长急性毒鼠强中毒小鼠的存活时间 ,改善惊厥症状 ,延缓抽搐的出现 ,及早用药治疗效果好。结论　美金刚对急性毒鼠强中毒有治疗作用 ,建议可在临床上试用。但在正确掌握中毒指征及给药剂量方面。

关键词：美金刚急性毒鼠强中毒小鼠实验治疗非竞争性NMDA受体拮抗剂

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羧基酯酶多态和有机磷农药接触者的易感性

中华劳动卫生职业病杂志 2005年第2期23卷 83-86页

作者：郑捷周志俊郑光戴旭锋顾锡安复旦大学公共卫生学院/公共卫生安全教育部重点实验室上海200032

目的　研究参与有机磷农药代谢的羧基酯酶的多态与有机磷接触者易感性的关系。方法　用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR RFLP)确定75例长期接触有机磷农药工人的丁酰胆碱酯酶(BChE)和对氧磷酶(PonE)的基因型,以症状积分和乙酰... 详细信息

目的　研究参与有机磷农药代谢的羧基酯酶的多态与有机磷接触者易感性的关系。方法　用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR RFLP)确定75例长期接触有机磷农药工人的丁酰胆碱酯酶(BChE)和对氧磷酶(PonE)的基因型,以症状积分和乙酰胆碱酯酶(AChE)活力(mmol·h-1·ml-1)作为反映其健康状况的指标。分析单基因位点多态工人的健康状况,确定其易感基因型,进行多基因综合分析,考虑年龄、性别以及接触时间的影响,建立多元线性回归方程。结果　BChE基因K位点(BChE K)正常纯合子(6 1例)、杂合子(12例)和异常纯合子(2例)的AChE活力为10 5 .0±2 3.0、84 .4±16 .4和79.0±9.9,症状积分为3.7±3.8、9.2±3.0和12 .5±0 .7;PonE 192位(PON 192 )正常纯合子(37例)、杂合子(2 7例)和异常纯合子(11例)的AChE活力为116 .8±15 .1、91.2±15 .6和72 .3±2 1.4 ,症状积分为2 .0±3.2、6 .7±3.3和9.7±1.8;PonE 5 5位(PON 5 5 )正常纯合子(70例)、杂合子(5例)的AChE活力为10 2 .4±2 3.0、82 .8±2 2 .0 ,症状积分为4 .5±4 .2、9.2±3.6。3个位点的杂合子和(或)异常纯合子与正常纯合子的症状积分差异都有统计学意义(P <0 .0 5 ) ;异常纯合子的症状积分最高、健康状况最差。3个基因位点没有交互作用;

关键词：羧基酯酶多态有机磷农药接触者易感性疾病遗传易感性

用MCF-7细胞检测有机磷农药拟雌激素样活性

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中国工业医学杂志 2004年第5期17卷 273-276页

作者：郑光周志俊戴旭峰孙运光顾锡安复旦大学公共卫生学院上海200032

目的　观察常用有机磷农药对MCF 7细胞增殖以及对雌激素受体基因和pS2基因表达的影响。方法　选用乐果、乙酰甲胺磷、久效磷、马拉硫磷、对硫磷、对氧磷 6种有机磷农药进行MCF 7人乳腺癌细胞增殖实验和转录活化实验。结果　 6种有机磷... 详细信息

目的　观察常用有机磷农药对MCF 7细胞增殖以及对雌激素受体基因和pS2基因表达的影响。方法　选用乐果、乙酰甲胺磷、久效磷、马拉硫磷、对硫磷、对氧磷 6种有机磷农药进行MCF 7人乳腺癌细胞增殖实验和转录活化实验。结果　 6种有机磷农药不能诱导MCF 7人乳腺癌细胞增殖 ,但乐果却能使pS2基因表达上调。结论　乐果可能具有拟雌激素样活性 ,且引起pS2基因表达上调不通过雌激素受体介导。

关键词：雌激素样活性 MCF-7人乳腺癌细胞增殖实验转录活化实验有机磷农药

核因子-kB及细胞因子在百草枯致大鼠肺损伤中的动态变化

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中华劳动卫生职业病杂志 2009年第8期27卷 463-467页

作者：黄敏张平常秀丽顾锡安吴庆周志俊复旦大学公共卫生学院劳动卫生教研室上海200032

目的观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠细胞因子白介素-1β（IL-1β）、转化生长因子一B1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血小板源性生长因子（PDGF）和肺组织核因子-kappaB（NF-KB）的变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯（PDTC）的... 详细信息

目的观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠细胞因子白介素-1β（IL-1β）、转化生长因子一B1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血小板源性生长因子（PDGF）和肺组织核因子-kappaB（NF-KB）的变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯（PDTC）的干预效果，以探讨百草枯致肺损伤机制。方法SD大鼠随机分为对照组6只、PQ染毒组56只、PDTC干预组46只。染毒组和干预组给予生理盐水稀释PQ80mg／kg一次性灌胃后2h，染毒组给予等量生理盐水腹腔注射，PDTC干预组给予PDTC100mg／kg一次性腹腔注射；对照组给予生理盐水1ml／kg灌胃后2h，给予等量生理盐水腹腔注射。ELISA法测定大鼠血清IL-1β、TGF-β1、TNF-α及PDGF水平，并分析它们分别与肺脏系数、羟脯氨酸含量的关系；电泳迁移率改变分析法测定肺组织NF—KB活性。结果与对照组比较，染毒组IL-1β含量1、3．7d明显升高，TGF—β1、TNF-α含量各时段均明显升高，PDGF含量7、14、28、56d明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．01）；IL-1β、TNF—α分别与肺脏系数成正相关（r=0．37，0．46，P〈O．05或P〈O．01），TGF—β1、PDGF分别与羟脯氨酸含量成正相关（r=0．56，0．89，P〈0．01）；与对照组比较，染毒组肺组织NF—KB活性1、3、7、14d明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。与染毒组比较，干预组血清IL-1β、TGF—β1、TNF-β、PDGF含量明显降低，相应时点差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；肺组织NF—KB活性1、3、7、14d明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论NF—KB活化及细胞因子IL-1β、TGF-β1、TNF—α、PDGF的过度表达是参与PO致肺损伤的重要机制；PDTC通过抑制NF—KB活化进而抑制上述细胞因子的表达，减轻PQ中毒大鼠的肺损伤。

关键词：百草枯 NF-KB 细胞因子急性肺损伤肺纤维化

敌敌畏对大鼠脑组织N-甲基-D-天门冬氨酸受体活性的影响

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中国工业医学杂志 2003年第5期16卷 270-273页

作者：戴旭锋顾锡安孙运光郑光郑捷周志俊复旦大学公共卫生学院上海200032

目的　研究敌敌畏 (DDVP)染毒后大鼠脑组织中N 甲基 D 天门冬氨酸 (NMDA)受体的变化规律 ,探讨其在有机磷农药中毒中的作用。方法　 5 5只雄性SD大鼠分为 11组 ,每组 5只 ,一组为生理盐水 (NS)组 ,高剂量组( 2 5mg/kg)和低剂量组 ( 15m... 详细信息

目的　研究敌敌畏 (DDVP)染毒后大鼠脑组织中N 甲基 D 天门冬氨酸 (NMDA)受体的变化规律 ,探讨其在有机磷农药中毒中的作用。方法　 5 5只雄性SD大鼠分为 11组 ,每组 5只 ,一组为生理盐水 (NS)组 ,高剂量组( 2 5mg/kg)和低剂量组 ( 15mg/kg)各 5组 ,染毒组分别以敌敌畏腹腔注射 ,染毒后 4h、 8h、 16h、 2 4h、 48h处死 ,测定大鼠全血和脑组织的乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性以及脑组织中NMDA受体的活性。结果　DDVP染毒后大鼠全血和脑组织的AChE活性显著下降 ,且脑组织AChE活性下降更多 ,抑制率大于 80 % ,恢复更迟缓。脑组织中NMDA受体的最大结合容量 (Bmax)在 4h便明显下降 ,于 2 4h达到最低 ,然后逐渐升高 ,受体的平衡解离常数 (Kd)在 4h时明显上升 ,于 2 4h达到最高 ,然后逐渐下降。结论　DDVP染毒对大鼠脑组织AChE活性抑制严重 ,说明中枢神经系统对DDVP的毒作用敏感。同时DDVP染毒对大鼠脑组织中NMDA受体产生下降调节 ,表现为受体数量减少、亲和力降低。推测这是机体的一种自身调节机制。

关键词：敌敌畏大鼠脑组织 DDVP N-甲基D-天门冬氨酸受体乙酰胆碱酯酶 NMDA 急性中毒