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VD/VDR调控RAAS在骨质疏松症中的机制及黄芪干预作用

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贵州中医药大学学报 2024年第3期46卷 8-12页

作者：牛建均陈雨佳吴大梅顾春松苗得庆李倩范志梁李文陈云志柴艺汇德江县民族中医院贵州铜仁565200 贵州中医药大学贵州贵阳550025 贵州食品工程职业学院贵州贵阳551400

骨质疏松症是一种由于各种原因导致骨量流失的全身性骨病。骨组织局部的肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)过度激活是骨质疏松症的重要发生机制,不仅直接参与骨代谢,还具有介导细胞发生增殖、分化、凋亡、炎性反应和血管生成等作用。维... 详细信息

骨质疏松症是一种由于各种原因导致骨量流失的全身性骨病。骨组织局部的肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)过度激活是骨质疏松症的重要发生机制,不仅直接参与骨代谢,还具有介导细胞发生增殖、分化、凋亡、炎性反应和血管生成等作用。维生素D对RAAS的负调节作用是预防和治疗骨质疏松症的重要靶点,当维生素D缺乏时可导致RAAS过度激活。基于前期研究发现,黄芪治疗骨质疏松症的机制与提高成骨细胞活性及调节维生素D相关基因与蛋白表达水平相关。据此推测,黄芪防治骨质疏松症的作用机制与通过对维生素D系统的调控,进而干预RAAS的表达水平密切相关,为药物预防和治疗骨质疏松提供新的治疗靶点和新的思路。

关键词：骨质疏松症肾素-血管紧张素-醛固酮系统维生素D 黄芪

骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架的热源试验评估

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黔南民族医专学报 2024年第3期37卷 253-255页

作者：彭雅覃裕曹启辉顾春松吉杰付英杰欧凡崔静李丽莉贵州省骨科医院贵州贵阳550002 贵州省中医药大学第二附属医院贵州贵阳550002

目的:对兔骨髓间充质干细胞复合海螵蛸生物支架进行热源试验检测,观察白兔的发热反应,通过对白兔体温温度变化的评估来判断复合支架植入生物体内的安全性。方法:本测试依据《医疗器械生物学评价标准》,选取3只健康成年新西兰白兔,从耳... 详细信息

目的:对兔骨髓间充质干细胞复合海螵蛸生物支架进行热源试验检测,观察白兔的发热反应,通过对白兔体温温度变化的评估来判断复合支架植入生物体内的安全性。方法:本测试依据《医疗器械生物学评价标准》,选取3只健康成年新西兰白兔,从耳缘静脉缓慢将复合支架浸提液注入白兔体内,对比注射前后白兔体温变化。结果:每只新西兰大白兔的体温升高值均<0.6℃,三只白兔体温升高总值为1.2℃<1.4℃,符合热原试验检测要求。结论:骨髓间充质干细胞复合海螵蛸生物支架未含明显致热原物质,达到生物材料应用安全性标准。

关键词：热源试验生物复合支架海螵蛸骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞复合海螵蛸支架的部分生物学安全性评估

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中国生物医学工程学报 2016年第5期35卷 555-561页

作者：彭雅覃裕顾春松易洪城贵州省骨科医院骨内二科贵阳550002 贵阳中医学院第二附属医院骨二科贵阳550002

制作与鉴定自体兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架,进行生物学安全性评估。采用密度梯度离心联合贴壁筛选法,体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs);采用沉淀法,构建BMSCs-海螵蛸复合支架;通过电镜扫描及MTT试验,对复合支架进行检测。选... 详细信息

制作与鉴定自体兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架,进行生物学安全性评估。采用密度梯度离心联合贴壁筛选法,体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs);采用沉淀法,构建BMSCs-海螵蛸复合支架;通过电镜扫描及MTT试验,对复合支架进行检测。选取40只新西兰兔,分两组分别植入BMSCs-海螵蛸复合支架(试验组)或海螵蛸支架(对照组),通过肌肉植入试验评估复合支架的生物学安全性。密度梯度离心联合贴壁筛选分离培养出干细胞,其免疫细胞化学检测表面抗原CD29(+)。电镜扫描测得海螵蛸支架孔隙率为81.730%±6.770%。扫描电镜下见细胞黏附于海螵蛸支架爬行生长,分泌胞间基质。MTT检测:复合培养第1、3、5、7天之间吸光值两两比较,均有显著性差异(P<0.05),细胞呈逐渐增殖趋势;第7、8天比较无显著差异,表明第8天细胞无明显增殖。肌肉植入试验的血常规、血生化检测,复合支架组(试验组)与海螵蛸组(对照组)检测结果无显著差异,复合支架的各项指标达标。病理切片:第7天,试验组与对照组的组织炎症反应为III^IV级;第14天,二者的组织炎症反应为II^III级;第28天,二者的组织炎症反应为I^II级;第56天,二者的组织炎症反应为0~I级:均符合肌肉植入试验结果评定标准。自体BMSCs能与中药海螵蛸联合培养构建复合支架,支架上的细胞数量随培养时间延长而增多,第7天时达增殖高峰。研究表明,此复合支架的组织相容性良好,符合生物材料的应用要求。

关键词：兔骨髓间充质干细胞海螵蛸复合支架生物安全性骨组织工程

骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架的细胞毒性评估

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中国组织工程研究 2020年第25期24卷 3943-3946页

作者：彭雅覃裕易洪城顾春松李丽莉贵州省骨科医院骨内二科贵州省贵阳市550002 贵阳中医学院第二附属医院骨二科贵州省贵阳市550002

背景:作为骨组织工程的修复材料,应具有良好的生物相容性及降解吸收性,许多学者在此方面也做了较深入的研究,但中药复合细胞生物支架的研究较少。目的:参照《医疗器械生物学评价标准》,对兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物复合支架进行体... 详细信息

背景:作为骨组织工程的修复材料,应具有良好的生物相容性及降解吸收性,许多学者在此方面也做了较深入的研究,但中药复合细胞生物支架的研究较少。目的:参照《医疗器械生物学评价标准》,对兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物复合支架进行体外细胞毒性检测,评估复合支架的毒性等级,为临床应用生物支架提供实验依据。方法:依照ISO标准按“材料面积∶浸提介质体积=3-6 cm 2∶1 mL”制作骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物复合支架材料浸提液。制备L-929细胞悬液,将细胞浓度调整至1×107 L-1进行接种培养,设置阳性对照组(含苯酚的DMEM培养液)、实验组(材料浸提液)、阴性对照组(新鲜DMEM培养液)。培养24,48,72 h采用MTT法检测L-929细胞吸光度值,计算各组细胞的相对增殖率,评估复合支架毒性等级。结果与结论:实验组、阴性对照组、阳性对照组吸光度值在不同时间点不完全相同(P=0.000<0.01),各时间点内比较,实验组与阴性对照组吸光度值均明显高于阳性对照组(P<0.01);兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物支架细胞毒性为1级。结果说明兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物支架无明显毒性作用,符合生物材料应用要求。

关键词：海螵蛸兔骨髓间充质干细胞复合支架细胞毒性生物复合支架

黄芪多糖对地塞米松诱导的MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制及Bax、Caspase-3、VDR、CYP24A、CYP27B蛋白表达的影响

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时珍国医国药 2020年第12期31卷 2850-2853页

作者：蒲翔田兴中顾春松陈云志李文高洁柴艺汇贵州中医药大学贵州贵阳550025 河北省张家口市第五医院河北张家口075000 贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550000

目的通过研究黄芪多糖(APS)对地塞米松诱导的成骨细胞增殖抑制及B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene, Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、维生素D受体(vitamin D receptor, VDR)、1α羟化酶(CYP2... 详细信息

目的通过研究黄芪多糖(APS)对地塞米松诱导的成骨细胞增殖抑制及B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene, Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、维生素D受体(vitamin D receptor, VDR)、1α羟化酶(CYP27B)、24-羟基化酶(CYP24A)蛋白表达情况的影响对其治疗继发性骨质疏松症作用机制进行初步探讨。方法实验分为6组,正常组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组、维生素D组。用噻唑蓝(MTT)比色法检测地塞米松诱导的不同浓度的黄芪多糖在不同时间(24h、36h、48h)对MC-3T3-E1成骨细胞增殖率的影响。蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测黄芪多糖对地塞米松诱导的MC-3T3-E1成骨细胞Caspase-3、Bax、VDR、CYP27B、CYP24A蛋白的表达情况。结果 MTT法显示,与模型组比较,黄芪多糖高剂量组在24h、36h、48h可显著改善地塞米松对MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制作用(P松对MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制作用效果与黄芪多糖中剂量组接近(P松诱导的MC-3T3-E1成骨细胞中Bax、Caspase-3蛋白表达均有显著抑制作用(P松诱导的继发性骨质疏松的机制与通过抑制促细胞凋亡因子Bax、Caspase-3蛋白表达,降低地塞米松对MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制作用相关,VDR蛋白在其中或发挥积极作用。

关键词：黄芪多糖地塞米松成骨细胞 Bax Caspase-3

全骨髓贴壁培养兔骨髓间充质干细胞的初步研究

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黔南民族医专学报 2013年第3期26卷 157-161页

作者：彭雅顾春松易洪城贵阳中医学院研究生院贵州贵阳550002 贵阳中医学院第二附属医院骨科贵州贵阳550002

目的:探讨兔骨髓间充质干细胞作为组织工程种子细胞修复骨缺损的可能性。方法:选取2月龄约2.5 kg重健康新西兰兔8只,采用全骨髓贴壁培养法体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,通过倒置相差显微镜观察、MTT检测、细胞贴壁率检测观察细胞... 详细信息

目的:探讨兔骨髓间充质干细胞作为组织工程种子细胞修复骨缺损的可能性。方法:选取2月龄约2.5 kg重健康新西兰兔8只,采用全骨髓贴壁培养法体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,通过倒置相差显微镜观察、MTT检测、细胞贴壁率检测观察细胞生物学特性。结果:全骨髓贴壁培养法培养出的原代骨髓间充质干细胞活力良好,细胞数量经传代后扩增,且细胞纯度提高,但细胞扩增速度较慢。结论:全骨髓贴壁培养法简便易行,能有效的在体外获得原代骨髓间充质干细胞。所提取的细胞活性良好、纯度较高,能用作组织工程种子细胞治疗骨缺损。

关键词：骨髓间充质干细胞全骨髓贴壁培养法兔骨组织工程

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人工全膝关节置换术后常见并发症及预防对策

黔南民族医专学报 2013年第4期26卷 261-262,265页

作者：顾春松易洪城彭雅熊屹唐良华贵阳中医学院第二附属医院骨二科贵州贵阳550002

全膝关节置换术后并发症是影响手术成败的重要因素,通过分析全膝关节置换术后常见并发症(腓总神经麻痹、血栓栓塞、假体松动、关节不稳、感染、假体周围骨折、术后疼痛、假体磨损)探讨建立指导性预防措施,提高手术质量,减少并发症的发生。

关键词：人工全膝关节置换并发症预防

日本近代“文学”概念的生成基于东京大学文学学科成立史的考察

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现代传播（中国传媒大学学报） 2024年第6期46卷 52-66页

作者：顾春李彤北京工业大学外国语学院武汉大学中国传统文化研究中心

东京大学作为日本第一所近代大学,是孕育日本近代学科的摇篮。对东京大学文学部创立及变迁的考察,可以揭示日本近代“文学”概念在文学建制过程中的意义演变与生成。“文学”一词从古典趋同于中国古义的“文章”与“学问”之义,衍生出... 详细信息

东京大学作为日本第一所近代大学,是孕育日本近代学科的摇篮。对东京大学文学部创立及变迁的考察,可以揭示日本近代“文学”概念在文学建制过程中的意义演变与生成。“文学”一词从古典趋同于中国古义的“文章”与“学问”之义,衍生出代表一切学问或与自然科学之“理学”相对应的意涵,在用西方学科框架重塑古典、创造新知的过程中,转变为学科编制上涵纳人文社会科学诸学领域,内涵上发生包括体例分类、价值评判等一系列以“literature”为基本尺度的演化,这既是古典学自我革新的机缘,亦规制了“文学”之后百余年的走向。日本近代“文学”概念及其分科经验,对晚清中国文学建制产生了重要的影响,将视线拉回原点,检审其历史经验的得失,势必对当下新文科的建构有所启示。

关键词： “文学” 东京大学文学部学科成立史中国文学 literature

黄芪对D-半乳糖诱导骨髓间充质干细胞钙结节数、骨钙素mRNA及蛋白表达水平的影响

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时珍国医国药 2020年第11期31卷 2586-2590页

作者：李文顾春松管连城吴雍真李倩陈云志柴艺汇贵州中医药大学贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550003

目的运用黄芪含药血清干预D-半乳糖诱导的骨髓间充质干细胞,观察其衰老程度、钙结节数、骨钙素mRNA及蛋白表达的变化,探讨黄芪对老年性骨质疏松的防治的作用。方法实验分为6组,正常组、模型组、黄芪低剂量组、黄芪中剂量组、黄芪高剂量... 详细信息

目的运用黄芪含药血清干预D-半乳糖诱导的骨髓间充质干细胞,观察其衰老程度、钙结节数、骨钙素mRNA及蛋白表达的变化,探讨黄芪对老年性骨质疏松的防治的作用。方法实验分为6组,正常组、模型组、黄芪低剂量组、黄芪中剂量组、黄芪高剂量组、维生素D组。β-半乳糖苷酶染色法观察黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞的阳性染色率,茜素红染色观察黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞的钙结节计数,实时荧光定量法(RT-PCR)检测黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞骨钙素mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化细胞骨钙素蛋白表达。结果与正常组比较,模型组衰老骨髓间充质干细胞细胞β-半乳糖苷酶染色率显著升高(P松提供实验基础及依据。

关键词：黄芪老年性骨质疏松骨髓间充质干细胞骨钙素