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FGF8b在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

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中华内分泌外科杂志 2019年第3期13卷 229-232页

作者：孙涛韩鹏黎李凤梅郑州大学附属郑州中心医院药学部河南450007 郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南450007 郑州大学附属郑州中心医院妇产科河南450007

目的探讨卵巢癌组织中人类成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)的表达及其与患者临床特征的关系。方法采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测28例卵巢癌组织及其对应的癌旁正常组织中FGF8b mRNA的表达水平,蛋白免疫... 详细信息

目的探讨卵巢癌组织中人类成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)的表达及其与患者临床特征的关系。方法采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测28例卵巢癌组织及其对应的癌旁正常组织中FGF8b mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)方法检测FGF8b蛋白的表达水平,并分析其与患者临床特征的关系。结果卵巢癌组织中FGF8b mRNA(0.23±0.08)表达高于癌旁组织(0.71±0.11),差异有统计学意义(P<0.05);癌组织中FGF8b蛋白(0.27±0.03)表达高于癌旁组织(0.44±0.03),差异有统计学意义(P<0.05)。在卵巢癌组织中,Ⅲ~Ⅳ期患者FGF8b阳性率(76.9%)表达高于Ⅰ~Ⅱ期患者(33.3%),差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移组阳性率(60.0%)表达高于无淋巴转移组(27.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FGF8b在卵巢癌组织中高表达,并与患者临床分期相关。

关键词：成纤维细胞生长因子8 卵巢癌 RT-PCR Western blot

新型金属铜络合物对SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响

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中国药理学通报 2012年第3期28卷 417-421页

作者：张艳韩鹏黎徐霞程旭芳王宁戈士文河南省医药科学研究院河南省肝病药理重点实验室河南郑州450052 郑州大学药学院

目的研究新型金属铜络合物(N-Cu)在体外对人肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法将不同浓度的N-Cu(0.3～24μmol.L-1)作用于体外培养的SMMC-7721细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,FCM法检测细胞周期及凋亡率,RT-PCR和... 详细信息

目的研究新型金属铜络合物(N-Cu)在体外对人肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法将不同浓度的N-Cu(0.3～24μmol.L-1)作用于体外培养的SMMC-7721细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,FCM法检测细胞周期及凋亡率,RT-PCR和Western blot法检测细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达的变化。结果 N-Cu可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,呈明显的量效与时效关系。随着药物浓度的增加,G0/G1期的细胞比率上升,G2/M和S期细胞比率下降,并促进凋亡率增加。N-Cu可上调细胞中Bax、Caspase-3基因及蛋白的表达,抑制Bcl-2基因及蛋白的表达,且均呈剂量依赖性。结论一定浓度的N-Cu可抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期。上调Bax、Caspase-3基因及蛋白的表达,降低Bcl-2/Bax比值,可能是其诱导细胞凋亡的重要机制。

关键词： N-Cu SMMC-7721 肝癌 Bcl-2 Bax Caspase-3

靶向ESCCAL_1基因的siRNA纳米复合物的制备及体外对食管癌EC-9706细胞的抑制作用

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中国药理学通报 2017年第12期33卷 1749-1753页

作者：韩鹏黎孙蕾吕朋举龚芬芬夏天曹巍郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南郑州450007 加州大学纳米研究所

目的制备装载靶向ESCCAL_1基因的siRNA纳米复合物,并考察其体外对食管癌EC-9706细胞增殖的抑制作用及对ESCCAL_1表达的影响。方法采用溶胶-凝胶法制备MSNP,通过表面修饰阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)使其带有正电荷,能... 详细信息

目的制备装载靶向ESCCAL_1基因的siRNA纳米复合物,并考察其体外对食管癌EC-9706细胞增殖的抑制作用及对ESCCAL_1表达的影响。方法采用溶胶-凝胶法制备MSNP,通过表面修饰阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)使其带有正电荷,能够与带负电的ESCCAL_1siRNA相结合;纳米粒度仪、透射电镜测定纳米复合物的粒径和电位;凝胶电泳测定其对siRNA的包封率;MTT法检测纳米复合物体外对EC-9706细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察纳米复合物中siRNA被EC-9706细胞摄取的情况;RT-PCR法检测其对EC-9706细胞中ESCCAL_1 LncRNA表达的影响。结果纳米粒度仪、透射电镜测得所合成的MSNP表面介孔直径约3~5 nm,分散性较好,尺寸较均一;能明显抑制EC-9706细胞的增殖(P<0.05),72h抑制率为(54.93±2.6)%;其装载的siRNA能被EC-9706细胞有效摄取;能有效沉默EC-9706细胞中ESCCAL_1,沉默效率为69.5%。结论采用该方法可制备包封率较高的肿瘤靶向纳米复合物,其介导的siRNA能有效抑制食管癌EC-9706细胞的体外增殖和沉默EC-9706细胞中ESCCAL_1表达。

关键词：食管鳞状细胞癌特异相关LncRNA转录物1 siRNA 肿瘤靶向性基因治疗食管癌 EC-9706细胞

miR-19b-3p靶向MTUS1调控甲状腺髓样癌细胞凋亡的分子机制

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中国癌症杂志 2021年第5期31卷 390-396页

作者：陈国韩鹏黎陈柯茹李明闯张青松陈征董汉华钱跃军吕晶郑州大学附属郑州中心医院甲状腺外科河南郑州450007 郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南郑州450007

背景与目的:miR-19b-3p在胃癌、前列腺癌等恶性肿瘤中均呈高表达,其可能作为肿瘤早期诊断及评估患者预后的潜在生物标志物。利用TargetScan靶基因预测软件筛选出的微管相关肿瘤抑制基因1(microtubule-associated tumor suppressor gene ... 详细信息

背景与目的:miR-19b-3p在胃癌、前列腺癌等恶性肿瘤中均呈高表达,其可能作为肿瘤早期诊断及评估患者预后的潜在生物标志物。利用TargetScan靶基因预测软件筛选出的微管相关肿瘤抑制基因1(microtubule-associated tumor suppressor gene 1,MTUS1)可能为miR-19b-3p的靶基因,发现MTUS1的3’非翻译区(3’-untranslated region,3’-UTR)可能是miR-19b-3p的结合位点。探讨miR-19b-3p是否通过靶向MTUS1表达影响甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer,MTC)细胞凋亡。方法:MTC-TT细胞分为anti-miR-19b-3p组、anti-miR-NC组、pcDNA-MTUS1组、pcDNA组、anti-miR-19b-3p+si-MTUS1组、anti-miR-19b-3p+si-NC组、miR-19b-3p组和miR-NC组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测miR-19b-3p和MTUS1的表达水平,采用双荧光素酶报告基因实验验证MTUS1是否为miR-19b-3p的靶基因;采用Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3的表达水平。结果:miR-19b-3p在MTC组织及细胞系中的表达水平显著升高,而MTUS1的表达水平显著降低。转染anti-miR-19b-3p或pcDNA-MTUS1后可显著增强MTC细胞凋亡能力,促进Bax、cleaved caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达。双荧光素酶报告实验证实MTUS1是miR-19b-3p的靶基因。抑制MTUS1表达逆转了抑制miR-19b-3p表达对MTC-TT细胞凋亡的作用。结论:沉默miR-19b-3p表达可上调MTUS1表达从而诱导MTC细胞凋亡。

关键词： miR-19b-3p 微管相关肿瘤抑制基因1 甲状腺髓样癌凋亡

纳米颗粒对人食管癌EC-9706、EC-109细胞增殖和凋亡的影响

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中国药理学通报 2016年第6期32卷 789-794页

作者：韩鹏黎孙蕾吕朋举龚芬芬马超陈国朱怡然夏天曹巍郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南郑州450007 华中师范大学生命科学学院湖北武汉430000

目的研究氧化铜(CuO)、氧化锌(ZnO)、二氧化钛(TiO_2)纳米颗粒在体外对人食管鳞状癌细胞系EC-9706和EC-109增殖的影响及其部分作用机制。方法使用透射电镜(TEM)、动态光散射(DLS)鉴定纳米颗粒物的理化性质,然后将不同浓度的TiO_2、CuO、... 详细信息

目的研究氧化铜(CuO)、氧化锌(ZnO)、二氧化钛(TiO_2)纳米颗粒在体外对人食管鳞状癌细胞系EC-9706和EC-109增殖的影响及其部分作用机制。方法使用透射电镜(TEM)、动态光散射(DLS)鉴定纳米颗粒物的理化性质,然后将不同浓度的TiO_2、CuO、ZnO(5~80 mg·L^(-1))与体外培养的EC-9706和EC-109细胞孵育,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)法检测细胞周期及凋亡率,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,蛋白免疫印迹法检测细胞中Bcl-2和caspase-3蛋白表达情况。结果实验所用的纳米CuO、ZnO、TiO_2颗粒为球形,粒径分别为12、20.6、12 nm。在水中与细胞培养液中聚集成较大颗粒并带负电。随着纳米颗粒浓度的增加,纳米CuO和ZnO颗粒可剂量依赖性抑制食管鳞癌细胞的增殖,G_0/G_1期细胞的比率上调,G_2/M期的比率下降,并促进凋亡率增加,侵袭力下降;纳米颗粒处理48 h后,与对照组相比,活化caspase-3表达量明显升高,Bcl-2表达量明显下降(P<0.05)。纳米TiO_2颗粒对食管鳞癌细胞的增殖、凋亡和侵袭能力无明显的影响。结论与纳米TiO_2相比,一定浓度的CuO和ZnO纳米颗粒可有效抑制食管鳞癌细胞的生长,阻滞细胞周期于G_0/G_1期,并诱导其凋亡,这可能是其抑制食管癌细胞功能的作用机制之一。

关键词：食管癌氧化铜纳米颗粒氧化锌纳米颗粒二氧化钛纳米颗粒细胞增殖凋亡

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卵巢癌组织中FGF8b的表达及其临床意义

卵巢癌组织中FGF8b的表达及其临床意义

全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议

作者：韩鹏黎李凤梅柯洋郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心郑州大学附属郑州中心医院妇产科郑州大学附属郑州中心医院肿瘤科

背景与目的:人类成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子(FGFs)家族的成员之一,在正常成人的肾脏、前列腺、睾丸、乳腺、骨髓和外周血白细胞中的表达水平受到严格的限制,呈低水平表达,但在许多人类... 详细信息

背景与目的:人类成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子(FGFs)家族的成员之一,在正常成人的肾脏、前列腺、睾丸、乳腺、骨髓和外周血白细胞中的表达水平受到严格的限制,呈低水平表达,但在许多人类恶性肿瘤中异常高表达。本研究旨在探讨卵巢癌组织中FGF8b的表达及其与患者临床特征的关系。方法:从临床上收集28例卵巢癌组织及对应的癌旁组织标本,其中Ⅰ期15例,Ⅲ期13例。采用逆转录-聚合酶链式反应(reversetranscription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测卵巢癌组织及癌旁组织中FGF8b mRNA的表达水平,Western blot方法检测FGF8b蛋白的表达水平,并分析其与患者临床特征的关系。结果:FGF8b mRNA和蛋白在卵巢癌组织中的表达水平均高于对应的癌旁组织(P0.05)。结论:FGF8b在卵巢癌组织中高表达,并与患者临床分期相关。

关键词： FGF8b 卵巢癌 RT-PCR Western blot 临床特点

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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食管鳞状细胞癌癌内异质性与化疗疗效的关系

中华肿瘤杂志 2017年第9期39卷 657-663页

作者：孙蕾吴伟闫明韩鹏黎展翔马西文曹新广赵松高飞齐宇曹巍郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心 450007 郑州大学基础医学院 450001 河南省肿瘤医院腔镜中心郑州450003 郑州大学第一附属医院胸外科 450052

目的研究食管鳞状细胞癌（ESCC）的癌内异质性与化疗药物耐药性的关系。方法选取临床食管癌术后切除的肿瘤标本10例，在每一瘤体5个不同区域（R1-R5）和手术断端相对正常食管黏膜区域（R6）取材进行体外培养，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT... 详细信息

目的研究食管鳞状细胞癌（ESCC）的癌内异质性与化疗药物耐药性的关系。方法选取临床食管癌术后切除的肿瘤标本10例，在每一瘤体5个不同区域（R1-R5）和手术断端相对正常食管黏膜区域（R6）取材进行体外培养，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测ESCC临床常用化疗药物顺铂对不同区域肿瘤细胞增殖的影响，流式细胞仪检测顺铂对不同区域肿瘤细胞的细胞周期和凋亡的影响，实时荧光定量PCR法检测顺铂泵出基因ATP7A和ATP7BmRNA的表达。结果每例标本不同区域细胞对顺铂的敏感性均表现出不同，且R6区域细胞的存活率均高于其他区域。第10例标本R3区域的细胞存活率为（81．42±8．84）％，而R5区域细胞的存活率为（11．90±2．75）％，差异有明显统计学意义（P〈0．01）。流式细胞术检测结果显示，6例标本的不同区域细胞在顺铂杀伤后，表现出了早期凋亡及晚期凋亡的差异性，且差异均有统计学意义（均P〈0．05）；7例标本的不同区域细胞在顺铂杀伤后，表现出了细胞周期的差异性，且7例标本中G，期细胞的差异有统计学意义（均P〈0．05）。实时荧光定量PCR检测结果显示，ATP7AmRNA在R1、R2、R3、R4和R5区域中的相对表达水平分别为（100．00±3．42）％、（118．10±2．21）％、（75．40±4．15）％、（95．40±3．32）％和（41．70±2．57）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；在R6区域中的相对表达水平为（175．20±5．32）％，明显高于R1～R5区域（P〈0．05）。ATP7BmRNA在R1、R2、R3、R4和R5区域中的相对表达水平分别为（100．00±4．89）％、（73．60±2．65）％、（175．60±6．12）％、（46．10±4．62）％和（363．70±8．67）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；在R6区域中的相对表达水平为（1165．40±7．25）％，明显高于Rl～R5区域（P〈0．05）。结论ESCC癌内异质性的存在导致了肿瘤对顺铂耐药的异质性，从而影响了化疗疗效。

关键词：食管鳞状细胞癌癌内异质性顺铂化疗药物敏感性细胞凋亡细胞周期

靶向沉默FGF8b基因对卵巢癌SKOV-3细胞增殖和凋亡的影响

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中华内分泌外科杂志 2018年第6期12卷 514-517页

作者：韩鹏黎张晶敏李凤梅河南郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心 450007 河南郑州大学附属郑州中心医院妇产科郑州大学第一附属医院药学部 450007

目的探讨靶向沉默FGF8b基因对卵巢癌SKOV-3细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法设计合成靶向FGF8b的小干扰RNA(siRNA),转染卵巢癌SKOV-3细胞后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力,TUNEL试剂盒检测细胞的凋亡情况;... 详细信息

目的探讨靶向沉默FGF8b基因对卵巢癌SKOV-3细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法设计合成靶向FGF8b的小干扰RNA(siRNA),转染卵巢癌SKOV-3细胞后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力,TUNEL试剂盒检测细胞的凋亡情况;采用Westernblot法检测细胞中Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果FGF8bsiRNA可明显抑制卵巢癌SKOV-3细胞中FGF8b蛋白的表达,实验组显示有高比例的TUNEL阳性细胞(22.33±2.517)(P<0.01)。FGF8b蛋白表达下调后显著抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖活性,降低Bcl-2的表达(0.586±0.025)(P<0.01),同时提高Bax的表达(0.334±0.019)(P<0.01)。结论下调FGF8b表达可抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,并诱导细胞的凋亡,可能与Bcl-2、Bax蛋白表达变化相关,提示FGF8b在卵巢癌的发展中具有重要作用。

关键词：人类成纤维细胞生长因子8 卵巢癌 RNA干扰细胞增殖细胞凋亡

蒺藜防白丸对体外培养黑素细胞生物学特性的影响

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中国皮肤性病学杂志 2016年第9期30卷 895-898,910页

作者：龚芬芬吕朋举韩鹏黎孙蕾琚杰昌刘敏曹巍郑州大学附属郑州中心医院河南郑州450007

目的研究蒺藜防白丸对黑素细胞（melanocytes，MC）的形态、增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法采用倒置显微镜观察细胞形态，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定蒺藜防白丸对黑素细胞增殖的影响，多巴氧化法测定酪氨酸酶活性，NaOH法... 详细信息

目的研究蒺藜防白丸对黑素细胞（melanocytes，MC）的形态、增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法采用倒置显微镜观察细胞形态，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定蒺藜防白丸对黑素细胞增殖的影响，多巴氧化法测定酪氨酸酶活性，NaOH法测定黑素含量。结果随着蒺藜防白丸浓度的升高，黑素细胞树突变粗短，且数量减少；低浓度（0．001—0．5mg/mL）的蒺藜防白丸对黑素细胞增殖影响不显著（P〉0．05），高浓度时（1mg／mL和5mg／mL）抑制作用明显（P〈0．05）；低浓度的蒺藜防白丸可以提高酪氨酸酶活性，其中0．05mg/mL时酪氨酸酶活性最高（P〈0．05），然而当蒺藜防白丸浓度继续增大，则会对酪氨酸酶活性产生抑制作用；蒺藜防白丸对黑素细胞黑素合成也有类似的影响。结论蒺藜防白丸高浓度时抑制黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成；低浓度时促进酪氨酸酶活性及黑素合成。

关键词：蒺藜防白丸黑素细胞酪氨酸酶黑素