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负压吸引对兔眼视网膜和视神经的影响

中华眼科杂志 2003年第3期39卷 136-139页

作者：叶阿里庞国祥韩晔华中国医学科学院眼科研究中心中国协和医科大学北京协和医院眼科 100730

目的　探讨准分子激光原位角膜磨镶术 (laserinsitukeratomileusis,LASIK)中眼压急剧升高对视网膜和视神经的影响。方法　将LASIK术中使用的巩膜负压环置于兔眼 ,瞬时压力达到 6 5mmHg( 1mmHg =0 133kPa) ,分别持续 30s、1min及 3min ... 详细信息

目的　探讨准分子激光原位角膜磨镶术 (laserinsitukeratomileusis,LASIK)中眼压急剧升高对视网膜和视神经的影响。方法　将LASIK术中使用的巩膜负压环置于兔眼 ,瞬时压力达到 6 5mmHg( 1mmHg =0 133kPa) ,分别持续 30s、1min及 3min ,在光镜和电镜下观察负压吸引后即刻摘除的 (即刻组 )和 2周后摘除的 (修复组 )兔眼视神经和视网膜组织 ,并与正常兔眼 (对照组 )进行比较。结果　负压吸引 30s,视神经和视网膜细胞改变轻微 ;负压吸引 1min ,部分视神经纤维改变 ,视网膜视细胞出现异常 ;负压吸引 3min ,神经纤维和视网膜视细胞结构明显异常。即刻组和修复组组织改变基本相同。结论　LASIK术中眼压急剧升高 ,可导致视网膜和视神经细胞的亚细胞结构改变 ,且持续时间越长改变越明显。

关键词：负压吸引兔眼视网膜视神经准分子激光原位角膜磨镶术 LASIK

临床诊断的SARS患者鼻咽拭子采集、SARS冠状病毒分离及鉴定

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中国医学科学院学报 2003年第5期25卷 520-524,T002页

作者：倪安平王仲刘勇刘世德韩晔华沈岩强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科北京100730 Department of Emergency PUMC HospitalCAMS and PUMCBeijing Department of Orthopedics PUMC HospitalCAMS and PUMCBeijing Electron Microscopy Room CAMS and PUMCBeijing Institute of Basic Medical Sciences CAMS and PUMCBeijing

目的从临床诊断的严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome,SARS)患者鼻咽拭子标本分离并鉴定SARS冠状病毒。方法SARS患者鼻咽拭子标本接种于含Vero及MRC-5单层细胞的24孔培养板中。分离物使用血清学方法、电镜及基因测序进... 详细信息

目的从临床诊断的严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome,SARS)患者鼻咽拭子标本分离并鉴定SARS冠状病毒。方法SARS患者鼻咽拭子标本接种于含Vero及MRC-5单层细胞的24孔培养板中。分离物使用血清学方法、电镜及基因测序进行鉴定。结果2003年4月～5月北京协和医院共采集79例临床诊断SARS患者的158份鼻咽拭子标本。3例接种Vero细胞孔的鼻拭子标本发现细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)。用分离物感染细胞做为抗原,免疫荧光血清学发现SARS患者急性期和恢复期血清标本存在SARS冠状病毒抗体(IgG和IgM)阳转和/或4倍及以上升高。分离物上清液负染电镜观察到冠状病毒。基因测序证实3株分离物是SARS冠状病毒。结论3株自79例SARS患者鼻咽拭子标本的病毒分离物是SARS冠状病毒。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒间接免疫荧光电镜基因测序

中国人乳头瘤病毒 6型L1、L2表达及产物自动装配成病毒样颗粒(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第1期35卷 27-34页

作者：王淼王立良陈莲凤韩晔华邹宇宏司静懿宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

为研究我国人乳头瘤病毒 6型 (HPV 6 )基因组晚期区序列变异及衣壳蛋白装配特性 ,从中国尖锐湿疣患者病损组织克隆了HPV 6L1和L2序列 ,经测序、拼接 ,获得HPV 6基因组晚期区序列。获得的两条长 2 86 9bp的序列 (GenBank登录号为AY0 15 0... 详细信息

为研究我国人乳头瘤病毒 6型 (HPV 6 )基因组晚期区序列变异及衣壳蛋白装配特性 ,从中国尖锐湿疣患者病损组织克隆了HPV 6L1和L2序列 ,经测序、拼接 ,获得HPV 6基因组晚期区序列。获得的两条长 2 86 9bp的序列 (GenBank登录号为AY0 15 0 0 6和AY0 15 0 0 8) ,属于HPV 6b亚型 ,与原型序列比较 ,在L1和L2ORF中共有 9个核苷酸变异 ,其中错义突变 4个。将L1和L2分别重组到杆状病毒 (AcNPV)表达载体 ,在Sf9细胞中探讨L1和L2的表达及装配规律。当L1和L2分别表达于Sf9细胞时 ,L1可以在细胞核中装配成病毒样颗粒 (VLP) ,而L2不能。从L1重组杆状病毒单独感染和L1、L2重组杆状病毒同时感染的细胞分别纯化VLP ,获得L1 VLP和L1+L2 VLP。二者在大小及形态上无明显差异 ,直径约 5 0nm ,与真实的病毒粒子相似。L1+L2 VLP包含摩尔比例约为 4∶1的L1和L2 ,具有HPV 6L1VLP构象表位。当用不同比例重组病毒同时感染细胞时 ,一定水平的L2表达可以使L1表达量及VLP产量提高。HPV 6基因组晚期区序列变异率 <0 .2 8% ,70 81位的A→G和 70 99位的G→A两处突变在我国HPV 6分离物中具有代表性。克隆的HPV 6L1和L2序列可以用于表达 ,表达产物 (L1或L1+L2 )可以自发装配成VLP。

关键词：人乳头瘤病毒6型 L1 L2 杆状病毒载体病毒样颗粒

重组人乳头瘤病毒6型病毒样颗粒的免疫原性分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第2期23卷 81-86页

作者：王淼陈莲凤韩晔华邹宇宏霍淑敏司静懿宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005 北京协和医院

目的　研究重组人乳头瘤病毒 6型 (humanpapillomavirustype 6 ,HPV 6 )病毒样颗粒(virus likeparticle ,VLP)的免疫原性。方法　重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV 6L1VLP(L1 VLP)和HPV 6L1+L2VLP(L1+2 VLP)经鉴定后 ,用于免疫BA... 详细信息

目的　研究重组人乳头瘤病毒 6型 (humanpapillomavirustype 6 ,HPV 6 )病毒样颗粒(virus likeparticle ,VLP)的免疫原性。方法　重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV 6L1VLP(L1 VLP)和HPV 6L1+L2VLP(L1+2 VLP)经鉴定后 ,用于免疫BALB/c小鼠 ,对诱导的体液免疫和细胞免疫反应进行了检测。结果　电镜观察显示L1 VLP和L1+2 VLP二者形态上无明显差异 ,为圆形颗粒 ,直径约 5 0nm ,SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,L1+2 VLP中L1和L2蛋白摩尔比例为 4∶1。用ELISA法测定免疫小鼠血清抗体滴度 ,加佐剂L1 VLP免疫组和加佐剂L1+2 VLP免疫组血清针对HPV 6L1VLP的滴度在 1∶10 0 0 0以上 ,高于未加佐剂组免疫血清滴度 (1∶2 0 0 0 ) ,L1+2 VLP免疫诱导出了特异于L2抗原的抗体。血清抗体主要识别HPV 6构象依赖性抗原表位 ,与HPV 11抗原显示出一定的交叉反应 ,而与HPV 16无明显交叉反应。免疫小鼠脾淋巴细胞体外经HPV 6L1VLP再激活后出现了特异性增殖反应 ,3H TdR掺入值与未免疫组之间差异有显著性 (P 0 .0 5 ) ,L1 VLP和L1+2 VLP免疫组刺激指数 (SI)分别为 6 .4和 6 .2 ,阴性对照组SI为 1.1。HPV 6L1VLP再刺激特异地诱导免疫组脾淋巴细胞IL 2和IL 10分?

关键词：人乳头瘤病毒6型病毒样颗粒免疫原性 HPV 重组杆状病毒尖锐湿疣预防性疫苗

慢性不可预知性应激刺激对大鼠下颌关节超微结构的影响

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中华口腔医学杂志 2008年第1期43卷 30-33页

作者：梁军胡敏韩晔华肖红喜张佳莉解放军总医院口腔科北京100853 中国医学科学院中国协和医科大学电镜室解放军第309医院口腔科

目的观察慢性不可预知性应激刺激下，大鼠下颌关节的超微结构改变。方法12周龄雄性Wistar大鼠16只，应用完全随机分组方法分为实验组和对照组各8只，实验组建立慢性不可预见性应激实验模型。6周后动物分别断头处死，完整解剖分离下颌髁... 详细信息

目的观察慢性不可预知性应激刺激下，大鼠下颌关节的超微结构改变。方法12周龄雄性Wistar大鼠16只，应用完全随机分组方法分为实验组和对照组各8只，实验组建立慢性不可预见性应激实验模型。6周后动物分别断头处死，完整解剖分离下颌髁突及关节盘，戊二醛固定、喷金、扫描电镜观察。结果扫描电镜下显示：实验组髁突表面凝胶不完整，胶原纤维紊乱、断裂、暴露深层胶原组织等，关节盘近髁突关节面表面凝胶样物质覆盖仍较完整，但沟回排列不规则，沟回隆起缩窄降低，沟变浅，而对照组无此改变。结论长期慢性不可预知性应激刺激可造成大鼠下颌关节超微结构的损伤。

关键词：颞下颌关节应激心理学超微结构

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探索信号设备故障应急处理方法

铁道通信信号 2015年第3期51卷 35-37页

作者：韩晔华北京电务段助理工程师北京100055

分析了信号故障处理的基本原则,着重探索了电务信号常见故障的快速处理方法及技巧,意在快速查找故障,以缩短故障延时。

关键词：信号故障处理

单纯疱疹病毒I型糖蛋白D核酸疫苗的构建及初步研究

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中国医学科学院学报 2002年第1期24卷 67-70页

作者：朱明昭刘宏伟刘晓娟韩晔华杨宝玲宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室北京100005

目的构建、制备Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白Ｄ重组质粒ＤＮＡ疫苗，初步检测其诱导机体产生体液免疫应答的效果，为研制ＨＳＶ－１新型疫苗奠定基础。方法用ＰＣＲ的方法从ＨＳＶ－１病毒基因组中扩增糖蛋白Ｄ（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　... 详细信息

目的构建、制备Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白Ｄ重组质粒ＤＮＡ疫苗，初步检测其诱导机体产生体液免疫应答的效果，为研制ＨＳＶ－１新型疫苗奠定基础。方法用ＰＣＲ的方法从ＨＳＶ－１病毒基因组中扩增糖蛋白Ｄ（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｄ，ｇＤ）基因，利用基因重组技术构建重组质粒；将重组质粒体外转染真核细胞ＣＯＳ－７，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测表达产物；于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠后腿胫前肌注射免疫，０、２周各免疫１次，１００μｇ／次。初次免疫后０、２、４、６周眼眶采血，ＥＬＩＳＡ间接法检测抗体。结果重组质粒酶切出相应大小片段，经测序证实为ＨＳＶ－１ｇＤ序列。Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ证实能够在体外真核细胞中表达。免疫小鼠后，产生特异性抗体，抗体滴度１∶２０００。结论ＨＳＶ－１ｇＤ重组质粒ＤＮＡ有可能作为ＨＳＶ－１的ＤＮＡ疫苗，用于防治ＨＳＶ－１感染及其相关疾病。

关键词：单纯疱疹病毒角膜炎 DNA疫苗糖蛋白D 构建

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中药指纹图谱研究的某些进展与展望

色谱 2008年第2期26卷 142-152页

作者：韩晔华霍飞凤杨悠悠廖一平刘虎威北京大学化学与分子工程学院分析化学研究所北京100871

在中药现代化的过程中,中药的质量控制标准直接影响到中药的国际化问题。近年来,国内很多学者对中药指纹图谱用于质量控制的问题进行了深入的研究,取得了很多成果。本文着重就近几年来中药指纹图谱的某些进展进行了综述,内容包括气相色... 详细信息

在中药现代化的过程中,中药的质量控制标准直接影响到中药的国际化问题。近年来,国内很多学者对中药指纹图谱用于质量控制的问题进行了深入的研究,取得了很多成果。本文着重就近几年来中药指纹图谱的某些进展进行了综述,内容包括气相色谱指纹图谱、液相色谱指纹图谱以及其他指纹图谱。最后就指纹图谱研究的发展提出了几点看法。共引用文献161篇。

关键词：中药指纹图谱气相色谱液相色谱毛细管电泳光谱质量控制

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基于离子淌度质谱的石油烃类生标化合物表征

基于离子淌度质谱的石油烃类生标化合物表征