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二至方改善糖皮质激素对原代皮层神经元细胞损伤的作用及机制研究

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二至方改善糖皮质激素对原代皮层神经元细胞损伤的作用及机制研究

作者：韩国英天津中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究首先应用均相时间分辨荧光法（Homogeneous Time-Resolved Flurescence,HTRF）探讨二至方在体外对11β-羟基类固醇脱氢酶1（11β-hydroxysteroid dehydrogenase 1,11β-HSD1）活性的影响,其次建立糖皮质激素诱导的原代皮层... 详细信息

目的:本研究首先应用均相时间分辨荧光法（Homogeneous Time-Resolved Flurescence,HTRF）探讨二至方在体外对11β-羟基类固醇脱氢酶1（11β-hydroxysteroid dehydrogenase 1,11β-HSD1）活性的影响,其次建立糖皮质激素诱导的原代皮层神经元细胞损伤模型模拟体外应激状态,从细胞凋亡和突触损伤两方面探讨二至方是否通过11β-HSD1-GC/GR通路发挥神经保护作用,为二至方的临床应用提供实验室依据。方法:选取肝脏微粒体为研究对象,以皮质酮（Corticosterone,CORT）为底物,甘草次酸（Glycyrrhetinic acid,GA）为阳性对照,建立药物筛选模型,采用HTRF法探讨二至方对11β-HSD1活性的影响。体外培养原代皮层神经元细胞,建立地塞米松（Dexamethasone,DEX）损伤模型模拟体外应激状态;采用甲基噻唑基四唑（Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法检测神经元细胞的细胞活力,乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）法检测LDH的释放量,筛选二至方对原代神经元细胞的安全作用浓度;通过TDT介导的脱氧尿嘧啶缺口末端标记（TDT mediated d UTP nick end labeling,TUNEL）法检测神经元细胞的凋亡率,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测活化型半胱天冬酶-3（Cleaved caspase-3）/半胱天冬酶-3（caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）/Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）的表达;通过免疫荧光染色法检测微管相关蛋白2（Microtuble associated protein 2,MAP-2）的荧光表达,Western blot法检测突触相关蛋白突触素（synaptophysin,SYN）和突触后致密蛋白95（postsynaptic density protein 95,PSD95）的表达;应用免疫荧光染色、Western blot和磷酸钙沉淀法检测11β-HSD1-GC/GR信号通路相关蛋白的表达,探讨二至方的神经保护作用机制。结果:1.二至方0.1-100μg/m L对肝脏微粒体11β-HSD1活性具有显著的抑制作用（P0.05）;二至方100μg/m L可显著降低神经元细胞的细胞活力（P0.05）;10、10 mol/L的DEX处理神经元时细胞活力显著降低（P0.05）;后续实验选取二至方0.1-10μg/m L用于研究。5.与DEX组相比,二至方0.1-10μg/m L显著降低神经元细胞凋亡（P0.05）。7.免疫荧光染色结果显示GR主要表达于原代皮层神经元细胞的胞质。与DEX组相比,GR受体阻断剂RU486显著上调GR蛋白表达（P0.05）,11β-HSD1抑制剂CBX可明显下调11β-HSD1蛋白表达（P<0.05）;与CBX组相比,CBX+

关键词：二至方神经元细胞应激糖皮质激素药效研究机制研究凋亡突触可塑性

利鲁唑拮抗胆红素引起的听觉核团神经元兴奋毒性

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利鲁唑拮抗胆红素引起的听觉核团神经元兴奋毒性

作者：韩国英上海交通大学

学位级别：硕士

目的：听觉中枢神经系统对胆红素高度敏感，因此听觉损伤常常是新生儿胆红素脑病最主要甚至唯一的临床表现。目前，临床上对胆红素脑病患儿尚缺乏有效的治疗药物。既往研究提示，谷氨酸介导的兴奋性毒性是胆红素神经毒性的关键机制，而... 详细信息

目的：听觉中枢神经系统对胆红素高度敏感，因此听觉损伤常常是新生儿胆红素脑病最主要甚至唯一的临床表现。目前，临床上对胆红素脑病患儿尚缺乏有效的治疗药物。既往研究提示，谷氨酸介导的兴奋性毒性是胆红素神经毒性的关键机制，而临床处方药物利鲁唑在谷氨酸兴奋毒性相关的多种疾病的治疗中具有重要地位的。本项研究旨在探索利鲁唑能否拮抗胆红素所引起的腹侧耳蜗核神经元超兴奋性、兴奋毒性及其可能机制，从而为未来该药在胆红素脑病听觉损伤中的应用提供实验依据。方法：急性单离出生后12-15日的Sprague Dawley (SD)大鼠腹侧耳蜗核(ventralcochlear nucleus, VCN)神经元，采用穿孔膜片钳技术，记录利鲁唑对谷氨酸能突触传递、神经元兴奋性以及胆红素引起的神经元超兴奋性的影响;采用Rhod-2-AM钙成像技术，观察胆红素、利鲁唑、胆红素联合利鲁唑以及谷氨酸抑制剂对神经元内钙离子浓度的影响;采用PI/hochest染色，记录胆红素、利鲁唑、胆红素联合利鲁唑对原代培养神经元活性的影响。结果：利鲁唑能显著减少VCN神经元自发性兴奋性突触后电流（spontaneousexcitatory postsynaptic currents, sEPSCs)以及动作电位的频率，但并不影响sEPSCs及谷氨酸突触后电流（IGlu)的幅度。并且，在胆红素作用前后使用利鲁唑均能显著抑制其引起的VCN神经元sEPSCs及动作电位频率的增加，及随后的胞内钙离子超载以及神经元的凋亡和坏死。结论：利鲁唑可能通过减少突触前谷氨酸的过度释放及随后的钙离子超载，从而抑制胆红素引起的VCN神经元超兴奋性和兴奋毒性。利鲁唑有望成为预防和治疗胆红素引起的听觉障碍的有效药物。

关键词：胆红素利鲁唑兴奋性突触后电流自发性动作电位兴奋性毒性

棉铃虫和HaCHS和CDA基因的克隆、表达及Feeding RNAi分析

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棉铃虫和HaCHS和CDA基因的克隆、表达及Feeding RNAi分析

作者：韩国英河北大学

学位级别：硕士

棉铃虫(Helicoverpa armigera)是棉花的重要害虫,采用种植Bt棉和化学方法进行防治导致害虫出现抗性等一系列问题。RNAi技术因具有特异和高效的特点,而成为新型的害虫防治策略。靶基因的选择是成功的重要关键之一。几丁质是昆虫表皮和围... 详细信息

棉铃虫(Helicoverpa armigera)是棉花的重要害虫,采用种植Bt棉和化学方法进行防治导致害虫出现抗性等一系列问题。RNAi技术因具有特异和高效的特点,而成为新型的害虫防治策略。靶基因的选择是成功的重要关键之一。几丁质是昆虫表皮和围食膜的主要成分之一,植物和高等动物中不存在;其代谢是昆虫的重要生化代谢过程之一。因此几丁质代谢相关基因有可能是RNAi技术防治害虫的理想靶标,具有重要的研究价值。本研究以棉铃虫体内的几丁质代谢相关基因CHS和CDA作为靶标基因,对其进行基因克隆和表达特征分析,并采用RNAi技术对其表型进行分析。从而为实现棉铃虫的有效控制提供科学依据。具体内容如下:1.棉铃虫几丁质合酶基因的克隆与表达分析通过RT-PCR技术首次在棉铃虫克隆出两个几丁质合酶基因:Ha CHS1和Ha CHS2;并得到了Ha CHS1的两个剪接变体,分别命名为Ha CHS1A和Ha CHS1B。Ha CHS1的两个交替外显子序列,只有177 bp的差异,核苷酸和氨基酸水平上相似度分别为64%和69%。Ha CHS1读码框4698 bp,编码1565个氨基酸;Ha CHS2读码框4587 bp,编码l528个氨基酸。RT-q PCR结果显示:Ha CHS2只在肠道表达,在前肠中表达量最高,其次是中肠和后肠,而在其他组织则表达量极低;Ha CHS1A主要在表皮中高表达,前肠和后肠也检测到少量的表达,而Ha CHS1B在表皮,前肠和后肠中都高表达。Ha CHS1A和Ha CHS1B在幼虫期,蛹期和蛾期都有表达,其中蛹期表达量最高;而Ha CHS2基因在卵期和幼虫期表达量高。2.棉铃虫几丁质脱乙酰基酶2基因的克隆与表达分析克隆了棉铃虫四个几丁质脱乙酰基酶基因(Ha CDA1,Ha CDA2,Ha CDA5a和Ha CDA5b),其中Ha CDA2为新基因,该基因ORF为1611 bp,编码536个氨基酸,推测的蛋白分子量约为60.78 k Da,理论等电点为5.31。基于序列比对以及系统发育确认Ha CDA2基因属于几丁质脱乙酰基酶1家族。RT-q PCR检测发现:Ha CDA2基因只在脂肪体高表达;Ha CDA2基因在幼虫期和蛹期表达量高。3.目的基因RNAi干扰效率检测及表型观察分别构建表达Ha CHS、Ha CDA的ds RNA的载体;用表达ds RNA(Ha CHS1、Ha CHS1A、Ha CHS1B、Ha CHS2、Ha CDA1、Ha CDA2、Ha CDA5a和Ha CDA5b)的HT115菌液喂食。RT-q PCR检测喂食处理2 d的幼虫发现,棉铃虫的靶标基因表达量都出现了下调,但是下降的幅度不同(以对照为100%,分别为73.1%、23.8%、14.0%、8.3%、82.9%、79%、38%、和51%)。在肠道有所表达的基因比非肠道基因沉默效率高。此外与对照组相比,ds CHS1、ds CHS1A、ds CHS1B、ds CHS2、ds CDA5a和ds CDA5b进行的饲料添加和叶片涂抹实验处理后,均可以在一定程度上抑制棉铃虫的生长发育;在棉叶上涂抹表达这些基因ds RNA的菌液,可以增加叶片对幼虫的抗性。以上研究将为以Ha CHS,Ha CDA5a和Ha CDA5b基因为靶标的棉铃虫的防治提供科学依据。

关键词：棉铃虫几丁质合酶几丁质脱乙酰基酶 RNAi

我国财政收入和财政支出之间的时变非线性特征——基于TVP-VAR模型的实证研究

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经济问题探索 2018年第12期 135-142页

作者：黄凤羽韩国英天津财经大学天津300222 天津市经济发展研究院天津300202

财政收支关系一直是学界和政界关注的热点问题。本文从非线性视角,采用TVP-VAR模型,基于等间隔和特定时点脉冲响应分析,实证研究了财政收入和支出之间的时变非线性特征,及其对经济增长的影响。通过研究发现:第一,我国财政收入和财政支... 详细信息

财政收支关系一直是学界和政界关注的热点问题。本文从非线性视角,采用TVP-VAR模型,基于等间隔和特定时点脉冲响应分析,实证研究了财政收入和支出之间的时变非线性特征,及其对经济增长的影响。通过研究发现:第一,我国财政收入和财政支出之间彼此相互影响,但在不同阶段影响的程度和方向均有所不同,具有时变和非对称特征;第二,财政收入风险的增加对财政收支表现出抑制作用,而财政支出风险短期在一定程度上能够促进财政收支,长期则会抑制财政收入增长;第三,财政收入政策和财政支出政策对短期拉动经济增长有一定作用,且二者表现出松紧搭配的反向组合特征,但政策长期作用效果有限。尊重市场规律,推进供给侧结构性改革,才是保障经济持续稳定健康发展的良方。

关键词：财政收入财政支出时变非线性

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不同施肥处理对土壤养分变化的影响

北方园艺 2010年第22期 154-156页

作者：韩国英天津市园林绿化研究所天津300181

以土壤周年养分变化为研究的对象,探讨了不同施肥处理,特别是磷肥的合理施用对土壤养分变化的影响。结果表明:对含有速效钾养分较高的土壤,合理施用有机肥和无机氮肥及磷肥,是土壤肥力水平、土壤生产能力、土壤可持续利用性的根本保证。

关键词：土壤养分施肥处理养分变化

从传统到当下：试论中国传统春节的文化表述 ——以晋南襄汾丁村为个案

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从传统到当下：试论中国传统春节的文化表述 ——以晋南襄汾丁村...

作者：韩国英中央民族大学

学位级别：硕士

本文选取山西襄汾县丁村作为调查与研究的地点,以“国家口头与非物质文化遗产”的传统春节作为研究对象,以田野考察为主,结合文献学方法、口述史方法把现代情境下的春节放在村落这个文化空间中进行分析,试图为现代情境下春节的淡化提出... 详细信息

本文选取山西襄汾县丁村作为调查与研究的地点,以“国家口头与非物质文化遗产”的传统春节作为研究对象,以田野考察为主,结合文献学方法、口述史方法把现代情境下的春节放在村落这个文化空间中进行分析,试图为现代情境下春节的淡化提出保护性建议。正文包括绪论、四个章节及结论三大部分。绪论部分交待了选题的意义、研究现状、资料来源和对相关概念的界定。第一章通过对丁村的历史背景和环境状况的介绍,分析了丁村春节的生成、发展的环境,为下文的研究做出铺垫。第二章通过追溯丁村传统春节的红火热闹,分析传统春节与村落生活的关联,传统春节又是怎样建构村落文化,为民众生活服务。第三章从丁村春节的变化脉络探寻其春节的现状,以及民众对春节的地方性解释等方面探讨春节在现代情境下的淡化趋势。第四章分析丁村春节淡化的表现形式以及原因,春节禁忌观念的淡化、习俗技艺的失传、民众信仰的趋于解体以及集体记忆的部分丧失淡化了春节的味道,从村落自然环境的变化、政府行政手段的干预以及民众思想观念的转变探讨了春节淡化的原因。文章的结论部分,结合田野调查的实际情况,分析现代情境下春节的前景,有针对性地提出了解决问题的现实途径。本选题具有以下两方面的意义:首先,从文化史的角度来说,本文为研究现代情景下的春节提供可参考的资料,因为本文掌握大量的第一手的田野调查资料,研究的是村落民众的春节生活,具有节日文化的研究意义。其次,从民俗文化的应用角度来说,本选题具有一定的现实意义。研究春节在现代情境下的淡化状况,能引起我们对春节的更多关注,以及对春节价值的重新评估。所以本文对传统节日的重新认定与保护方面具有现实意义。

关键词：现代情境春节淡化

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高校教学设备管理系统设计与实现

高校教学设备管理系统设计与实现

作者：韩国英石家庄铁道大学

学位级别：硕士

进入二十一世纪以来,高等院校的信息化建设有了很大的发展,无论从规模上还是从条件上,都得到了很大程度的改善,伴随着各类高校快速发展的步伐,高校的各种教学仪器和实训设备的数量也逐年增加。但是,目前一些院校的设备管理工作仍然还是... 详细信息

进入二十一世纪以来,高等院校的信息化建设有了很大的发展,无论从规模上还是从条件上,都得到了很大程度的改善,伴随着各类高校快速发展的步伐,高校的各种教学仪器和实训设备的数量也逐年增加。但是,目前一些院校的设备管理工作仍然还是以人工为主的管理模式,这种模式存在着数据和信息重复率高、执行效率低、更新周期长等缺点。显然,这种人工为主的管理已经不再适合现代化管理的需求,对这种模式的改革迫在眉睫。伴随着当今电脑硬件的配置发展,以及互联网与通信技术的应用,高等院校在推动教学设备的信息科学化管理工作方面有了强有力的技术支撑。针对石家庄工程职业学院实际管理过程中教学设备管理的现状,本论文从国内外高校教学设备管理系统应用现状的研究出发,剖析了现今高等院校在教学设备使用与管理方面存在的需求,然后在此基础上,综合应用了UML统一建模语言、B/S三层结构、MVC设计模式、数据库技术和网络技术等多方面知识,采用了以Java语言作为脚本语言的JSP技术,以及Struts、Spring、Hibernate三大框架和MySQL数据库的技术组合,设计了从设备申请购买到无价值设备报废出库全流程控制的设备管理模块,日常借还管理模块及各级统计审核功能模块。通过高校教学设备管理系统的使用,对设备资源进行合理配置,很大程度上解决了传统设备管理模式中存在的数据更新不同步、信息共享程度低等问题。系统的运行结果显示,系统整体运行稳定,操作简单易行,优化了学院教学设备的管理流程,工作效率得到明显提升,在提高教学设备使用率的同时,也延长了设备的使用寿命。

关键词：设备管理查询维护 Java MySQL

新型1,8-萘酰亚胺类光控双色荧光分子开关的合成及性质

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有机化学 2018年第2期38卷 425-431页

作者：杨素华闫素君杨静张策韩国英赤峰学院化学化工学院内蒙古自治区光电功能重点实验室赤峰024000 中山大学化学与化学工程学院广州510275

设计合成了三种新型键合螺吡喃单元的1,8-萘酰亚胺类化合物.光致变色性质研究结果表明:三种化合物与经典螺吡喃相比,其开环过程光响应时间较长或难以检测到其开环的部花菁结构,分析了其光响应时间变长的原因.SP3分子中由于存在强吸电子... 详细信息

设计合成了三种新型键合螺吡喃单元的1,8-萘酰亚胺类化合物.光致变色性质研究结果表明:三种化合物与经典螺吡喃相比,其开环过程光响应时间较长或难以检测到其开环的部花菁结构,分析了其光响应时间变长的原因.SP3分子中由于存在强吸电子基,其在固体介质以及有机溶剂中光致变色现象较为明显,在不同的有机溶剂中显示出了负的溶剂效应,螺吡喃单元开环体的吸收波长没有明显的改变.荧光性能检测发现:化合物SP1、SP2在硅胶中光照前后有较为明显的荧光颜色改变,在聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)中和有机溶剂中检测不到其光照前后荧光的变化.未检测到化合物SP3光照前后在丙酮中的荧光改变,但是在聚乙二醇(200)中光照前发射绿色荧光,光照后变为橙黄色荧光,荧光光谱也检测到了其变化过程.SP3在薄层硅胶中光照前后发生的荧光颜色改变更为明显,随着照射时间的延长其荧光由绿色变为黄绿色,橙黄色最后变为红色,化合物在PMMA膜中的荧光光谱也表明了化合物SP3具有光控双色荧光分子开关性能.

关键词：光致变色螺吡喃 1,8-萘二甲酰亚胺双色荧光分子开关

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老年性聋防治的研究进展

听力学及言语疾病杂志 2014年第5期22卷 464-467页

作者：韩国英接惠群殷善开上海交通大学附属第六人民医院耳鼻咽喉科上海交通大学耳鼻咽喉科研究所上海200233

老年性聋是伴随着年龄增长出现的听觉器官退行性改变，其病理表现主要为耳蜗毛细胞和螺旋神经节细胞的凋亡，临床表现为由高频向言语频率缓慢进行的双侧对称性感音神经性聋，伴或不伴耳鸣，多数人言语识别率降低，特别是在噪声中言语识... 详细信息

老年性聋是伴随着年龄增长出现的听觉器官退行性改变，其病理表现主要为耳蜗毛细胞和螺旋神经节细胞的凋亡，临床表现为由高频向言语频率缓慢进行的双侧对称性感音神经性聋，伴或不伴耳鸣，多数人言语识别率降低，特别是在噪声中言语识别更加困难，严重影响老年人的生活质量。据估计，全世界65～75岁的老年人中有25％受到老年性聋的困扰，而在75岁以上的老年人中，该比例高达70％～80％，到2050年，全世界将有9亿老年人罹患老年性聋［1］。目前尚无可以逆转人类毛细胞和神经元细胞损伤的方法和药物，老年性聋仍无有效治疗方法，防治的主要手段是针对致病因素的预防和听觉康复，并辅以药物治疗。近年来，社会对老年性聋的关注力度逐渐增大，老年性聋的发病机制和防治措施都有了一定的进展，本文就近年来老年性聋的防治进行综述。

关键词：老年性聋防治螺旋神经节细胞神经元细胞损伤耳蜗毛细胞言语识别率感音神经性聋药物治疗