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YHem1基因转化香蕉提高其抗冷性的研究

YHem1基因转化香蕉提高其抗冷性的研究

作者：韩丽晓南京农业大学

学位级别：硕士

香蕉是世界上最重要的热带和亚热带经济作物之一。低温是影响香蕉品质、产量及种植范围的重要限制因子。栽培香蕉多为三倍体,芥能形成可育的种子,因而,通常只能依靠无性繁殖。这一特殊的生物学特性使其很难利用传统的实生育种方法进行... 详细信息

香蕉是世界上最重要的热带和亚热带经济作物之一。低温是影响香蕉品质、产量及种植范围的重要限制因子。栽培香蕉多为三倍体,芥能形成可育的种子,因而,通常只能依靠无性繁殖。这一特殊的生物学特性使其很难利用传统的实生育种方法进行遗传改良。相反,近年来组织培养技术和基因工程技术的出现使香蕉的品种改良得以实现且更加容易。人们早就发现,在植物体内普遍存在着5-氨基乙酰丙酸(ALA)。上世纪末,国内外学者研究发现,低浓度ALA能够调节植物生长发育,提高作物产量,增强作物抗逆性。前人创造性地将拟南芥HemA1基因光敏型启动子与酿酒酵母菌ALA合酶编码基因Hem构建在一起,形成一个光控制的Hem1基因(YHem1)。将YHem1转入烟草、拟南芥以及草莓等作物中,可以提高植物叶片光合能力,增加植株耐盐性。但是YHem1是否能够转入香蕉,并且提高植株耐冷性的研究尚未见有报道。本研究拟将YHem基因转入香蕉假茎薄片中,通过优化再生体系和遗传转化体系,筛选抗性不定芽,通过GUS染色与分子检测,获得转基因香蕉植株。所获得的主要结果如下。1以‘巴西’香蕉(Musa nana cv.'Brazil')假茎横切薄片为外植体,通过对植物生长调节剂、外植体和暗培养时间比较,优化了香蕉不定芽再生体系。实验结果表明,本实验条件下香蕉薄片再生率最高可达到95%,首先要选择5代以前的香蕉植株,其次在MS基本培养基中附加0.1mg/L NAA、3mg/L6-BA和2.0mg/LAgNO3,最后要经过2周的暗培养时间。将得到的长至2-3cm的不定芽切下置于MS+0.4mg/LNAA的生根培养基中生根可得到完整的植株。2在上述再生体系基础上,研究了影响香蕉遗传转化的几个因素,如：浸染辅助方法、Km浓度以及共培养条件等,优化了香蕉遗传转化体系。研究结果表明：在含有拟南芥HemAl基因启动子控制的酿酒酵母ALA合酶基因(Hem1)质粒的农杆菌液(OD600=0.8-1)中侵染30min(震荡侵染10min后静置20min),且在添加100nmol/LAS和2mg/LPro的共培养基中暗培养4-6d,250mg/L卡那霉素和500mg/L羧苄青霉素筛选3周,获得了7株卡那霉素抗性植株。3利用以上实验得到的香蕉再生和遗传转化体系,共得到15个抗性芽(抗性芽再生率约为20%),7株香蕉抗性苗,经GUS染色检测得到5株GUS+植株;经PCR凇测证明3株苗同时转入了HemA1启动子基因和Hem1目的基因;经过RT-PCR检测YHemI在其中的2株中得到过量表达。内源ALA含量测定表明,转基因植株可以过量合成ALA,其内源ALA含量显著高于野生型植株。4对转基因植株与野生型植株在25℃常温和7℃低温胁迫1.5h后的香蕉叶片叶绿素相对含量(SPAD)、快速叶绿素荧光诱导曲线(OJIP)及820nm光吸收曲线分析结果发现,转基因植株的SPAD值显著高于野生性植株。低温胁迫后,野生型的OJIP相明显下降,但转基因株系各相仍保持了较高的荧光值;利用多功能植物效率仪(M-PEA)测定结果表明,低温胁迫前后,转基因香蕉叶片单位面积吸收的(ABS/CS).捕获的(TRo/CS).传递的(ETo/CS)能量以及光合性能指数(PIABS和PIcs)均高于野生型;低温胁迫后,PSI反应中心的氧化速率和再还原速率均不同程度的高于野生型,同时以热量形式耗散的能量(DIo/RC)下降,这些都表明过量合成ALA保护了逆境条件下香蕉叶片光合电子传递和能量转换,保护光合产物的积累,也就是提高了香蕉植株的抗低温能力。

关键词：香蕉薄片 YHem1基因 ALAS(ALA合酶) 转基因叶绿素荧光低温胁迫

高校外语教材中的隐性课程研究——以《新编英语语法教程》为例

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高校外语教材中的隐性课程研究——以《新编英语语法教程》为例

作者：韩丽晓天津理工大学

学位级别：硕士

隐性课程自产生以来就引起了国内外教育界学者的广泛关注。隐性课程以其内容的无限性,对学生的德育、智育培养起到了重要影响。目前,国内外的外语教材中隐性课程的研究多集中在基础教育领域,国内高校外语教材的研究则侧重于显性课程。... 详细信息

隐性课程自产生以来就引起了国内外教育界学者的广泛关注。隐性课程以其内容的无限性,对学生的德育、智育培养起到了重要影响。目前,国内外的外语教材中隐性课程的研究多集中在基础教育领域,国内高校外语教材的研究则侧重于显性课程。本文以《新编英语语法教程》为例,通过对使用教材的教师和学生进行访谈以及对教材内容进行分析,探索该教材中的隐性课程。研究发现《新编英语语法教程》教材中存在着大量的隐性课程内容,主要表现四个方面:物质形态、精神影响、专业知识能力提高、素质能力培养。这四个方面可进一步分为八个方向:外观、内容、语言综合运用、文学、文化、其他领域知识、价值观、思辨创新能力培养。此四个方面八个方向可用来探索高校外语教材中的隐性课程,也是本文提出的分析高校外语教材中隐性课程的理论框架。为验证这一框架的有效性,本文设计相关调查问卷对使用教材的学生进行调查。结论发现:上述理论框架有效。最后本文探讨了隐性课程对学生的影响及外语教材中的隐性课程对高校外语教育的启示。

关键词：隐性课程外语教材高校外语教育

试论如何做好园林工程施工安全管理——以综合型园林工程为例

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农村科学实验 2019年第33期 44-46页

作者：韩丽晓北京安海之弋园林古建工程有限公司北京102607

随着城市化进程的不断推进,我国的园林工程建设也在不断发展。园林工程建设代表了一个城市的外在形象,是城市建设的重要环节之一。在园林工程建设中,施工安全是工程项目建设长期稳定推进的首要因素。只有在施工安全环节加强管理,才能保... 详细信息

随着城市化进程的不断推进,我国的园林工程建设也在不断发展。园林工程建设代表了一个城市的外在形象,是城市建设的重要环节之一。在园林工程建设中,施工安全是工程项目建设长期稳定推进的首要因素。只有在施工安全环节加强管理,才能保证园林工程施工的进行。目前,我国在园林工程建设时依然存在施工安全问题,本文以分析这些问题为重点,同时提出相关的解决办法,确保园林工程建设的施工安全,加强园林建设的施工效率和管理程度。

关键词：园林工程施工建设安全管理问题现状解决措施

重组ALA合酶基因(YHem1)转化草莓提高叶片光合能量转化能力的效应

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果树学报 2011年第6期28卷 1038-1044,F0003页

作者：林晓慧张治平韩丽晓吴震汪良驹南京农业大学园艺学院南京210095

为了培育高光合抗逆草莓新品种,以红颊草莓试管苗叶片为外植体,研究了植物生长调节剂对草莓叶片再生的影响,然后将拟南芥HemA1基因启动子控制的酿酒酵母ALA合酶基因(Hem1)的重组基因(YHem1)通过农杆菌介导法转入草莓离体叶片中。经卡那... 详细信息

为了培育高光合抗逆草莓新品种,以红颊草莓试管苗叶片为外植体,研究了植物生长调节剂对草莓叶片再生的影响,然后将拟南芥HemA1基因启动子控制的酿酒酵母ALA合酶基因(Hem1)的重组基因(YHem1)通过农杆菌介导法转入草莓离体叶片中。经卡那霉素筛选,PCR和RT-PCR检测,证明外源基因已经转入草莓体内,获得3株转基因植株。叶片快速叶绿素荧光特性测定显示,转基因草莓叶片PSII最大光化学效率(Fv/Fm)、光合性能指数(PIABS)和捕获的激子将电子传递到QA-下游的其他电子受体的概率(ψo)显著高于野生型,而QA被还原的最大速率(Mo)则低于野生型,说明转入YHem1基因提高了草莓叶片光合能量转化能力。

关键词：红颊草莓重组ALA合酶基因(YHem1) 遗传转化转基因植株叶绿素荧光

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YHem1基因转化香蕉提高植株抗冷性研究

热带作物学报 2014年第9期35卷 1663-1670页

作者：韩丽晓张治平李茂富汪良驹南京农业大学园艺学院江苏南京210095 海南大学园艺园林学院海南海口570228

用含质粒pYF8631的根癌农杆菌EHA105菌株转化‘巴西’香蕉(Musa AAA Cavendish subgroup cv.‘Brazil’)的假茎横切薄片,在含有250 mg/L卡那霉素和500 mg/L羧苄青霉素的MS培养基上诱导不定芽,获得5株GUS阳性苗。经PCR、RT-PCR检测,发现... 详细信息

用含质粒pYF8631的根癌农杆菌EHA105菌株转化‘巴西’香蕉(Musa AAA Cavendish subgroup cv.‘Brazil’)的假茎横切薄片,在含有250 mg/L卡那霉素和500 mg/L羧苄青霉素的MS培养基上诱导不定芽,获得5株GUS阳性苗。经PCR、RT-PCR检测,发现其中2株可以合成ALAS mRNA,表明YHem1基因已经整合到基因组中并且能够正常表达。测定香蕉内源ALA含量、ALAS活性和叶绿素相对含量(SPAD)表明,转基因植株具有ALAS活性,其ALA含量和叶绿素含量均显著高于野生型对照。7℃低温处理后的叶绿素快速诱导荧光动力曲线测定表明,转基因香蕉叶片光合电子转换能力显著高于野生型,表明转化YHem1基因可以提高香蕉耐冷性。

关键词： 5-氨基乙酰丙酸(ALA) YHem1 香蕉遗传转化叶绿素快速荧光动力学低温胁迫

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北京地区规模化苗圃建设初探——以北京西白塔苗圃为例

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现代农业科技 2016年第9期 170-172,174页

作者：赵玉斌韩丽晓北京安海之弋园林工程有限公司北京102607

北京安海之弋园林工程有限公司西白塔基地规模化苗圃在充分利用自然资源、地理优势的基础上,确定了规划设计理念和建设方案。通过合理地规划地建设,该苗圃形成了集苗木生产与观光休闲的规模化苗圃,对北京地区规模化苗圃的建设具有参考... 详细信息

北京安海之弋园林工程有限公司西白塔基地规模化苗圃在充分利用自然资源、地理优势的基础上,确定了规划设计理念和建设方案。通过合理地规划地建设,该苗圃形成了集苗木生产与观光休闲的规模化苗圃,对北京地区规模化苗圃的建设具有参考价值。

关键词：规模化苗圃规划设计苗圃建设北京

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紫斑牡丹胚培养及幼苗生长的研究

湖南农业科学 2012年第5期 103-106页

作者：王莹何桂梅韩丽晓北京林业大学园林学院北京100083 北京市林业碳汇工作办公室北京100013

为缩短紫斑牡丹育种周期,建立牡丹胚培养研究的最佳体系,通过培养基的筛选,选择不同采收期的种子通过不同外植体类型进行紫斑牡丹胚培养试验。结果表明:紫斑牡丹胚培养最适启动培养基为1/2 MS+1.0 mg/L IAA+1.0 mg/L GA3,最适根诱导培... 详细信息

为缩短紫斑牡丹育种周期,建立牡丹胚培养研究的最佳体系,通过培养基的筛选,选择不同采收期的种子通过不同外植体类型进行紫斑牡丹胚培养试验。结果表明:紫斑牡丹胚培养最适启动培养基为1/2 MS+1.0 mg/L IAA+1.0 mg/L GA3,最适根诱导培养基为1/2 MS+0.05%AC+0.1 mg/L IBA,最适继代生长培养基为1/2 MS+0.05%AC;种子成熟度的不同会影响幼苗的伸长生长;外植体不同类型会影响种子的萌发情况。

关键词：紫斑牡丹胚培养培养基采种时间外植体

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基于扩散模型和爬坡趋势分类的风电功率自适应区间预测

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电网技术 2024年第6期48卷 2448-2457,I0051-I0054页

作者：韩丽程颖洁王施琪陈硕中国矿业大学电气工程学院江苏省徐州市221116

扩散模型基于马尔可夫链的概率性质,能够定量描述风电的随机性和不确定性。然而,传统基于扩散模型的时序预测方法以当前输入前一段样本的均值作为基准进行特征缩放,导致预测区间在高峰时段过大、低谷时段过小。因此,提出一种基于扩散模... 详细信息

扩散模型基于马尔可夫链的概率性质,能够定量描述风电的随机性和不确定性。然而,传统基于扩散模型的时序预测方法以当前输入前一段样本的均值作为基准进行特征缩放,导致预测区间在高峰时段过大、低谷时段过小。因此,提出一种基于扩散模型和爬坡趋势分类的风电功率自适应区间预测方法。首先,利用基于扩散模型的区间预测框架获取初始预测区间。然后,将风电波动过程划分为6种模式,对不同模式下的预测区间采取自适应规整策略,进而获得初始改进区间。接着,针对高出力模式中非爬坡时段的区间带宽不匹配问题,建立爬坡趋势分类评估模型,并结合所属出力模式进行区间修正,获得最终的区间预测结果。最后,实验结果表明所提方法的区间预测效果更优。

关键词：扩散模型自适应规整波动特征爬坡趋势分类区间预测

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新时代中国动画电影的文化想象、技术赋能与美学建构策略

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电影评介 2024年第12期 69-74页

作者：韩丽安徽师范大学文学院安徽师范大学音乐学院

中国动画电影通过采用文化叙事策略,杂糅喜剧、历史和青春等多种类型元素,密切关注现实社会,传递真实的人文情感,利用电影工业美学的规范流程及技术优势,对中华优秀传统文化进行创新表达,讲述符合全龄化观众的动画故事,为观众提供了精... 详细信息

中国动画电影通过采用文化叙事策略,杂糅喜剧、历史和青春等多种类型元素,密切关注现实社会,传递真实的人文情感,利用电影工业美学的规范流程及技术优势,对中华优秀传统文化进行创新表达,讲述符合全龄化观众的动画故事,为观众提供了精品质的动画电影作品。面对大众对动画电影的多元审美期待,我国动画电影应坚持以中华优秀传统文化为叙事内核,以智慧动画技术为动力,通过关联现实社会,塑造鲜活、立体的人物形象,表达真情实感,在彰显中华优秀传统文化丰富想象力的同时,构建了新的“中国动画学派”。通过对中国动画电影的发展状况进行梳理,分析文化叙事与美学建构策略,以期为我国动画电影进一步发展提供借鉴。

关键词：文化想象技术赋能中国动画电影文化叙事美学建构

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