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Thermobifida fusca葡萄糖异构酶在枯草杆菌中的表达

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食品与发酵工业 2015年第12期41卷 31-35页

作者：邓辉陈存武孙传伯韦传宝皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012 六安市蛋白质分离与纯化研究中心安徽六安237012

为研究葡萄糖异构酶(GIase)在枯草杆菌中的表达效果,通过PCR扩增Thermobifida fusca GIase基因xyl A,分别克隆该基因序列到不同诱导表达方式的穿梭载体:p HCMC04、p MA09、p AL12,并转化枯草杆菌WB600。结果表明,含重组质粒p MA09-xyl ... 详细信息

为研究葡萄糖异构酶(GIase)在枯草杆菌中的表达效果,通过PCR扩增Thermobifida fusca GIase基因xyl A,分别克隆该基因序列到不同诱导表达方式的穿梭载体:p HCMC04、p MA09、p AL12,并转化枯草杆菌WB600。结果表明,含重组质粒p MA09-xyl A的枯草杆菌产酶最优,达到1.8 U/m L。对该重组枯草杆菌发酵产酶条件进行优化,以TB为发酵培养基,初始p H 7.0,温度为30℃时,摇瓶培养24 h后,GIase的产量达到5.6 U/m L。

关键词：枯草芽孢杆菌 Thermobifida fusca葡萄糖异构酶枯草杆菌中表达发酵优化

韭葱黄条病毒、洋葱黄矮病毒和胡葱黄条病毒六安分离物CP基因克隆及同源性分析

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广西植物 2012年第2期32卷 231-237,172页

作者：韦传宝华俊雅杨宇隗洋洋史利利皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012 安徽省植物生物技术实训中心安徽六安237012

设计特异性引物PCR扩增了六安大蒜病样中的韭葱黄条病毒(Leek yellow stripe virus,LYSV)、洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarf virus,OYDV)和胡葱黄条病毒(Shallot yellow stripe virus,SYSV)的全长CP基因,插入到pGEM-T载体并测序。分别比较3种病毒CP基因种内变异性和种间亲缘关系。结果表明LYSV六安分离物CP基因由864个碱基组成,与Genbank上已报道的68个LYSV不同分离物CP基因的核苷酸序列同源性为76.12%～84.31%;OYDV的CP基因由771个碱基组成,与Genbank上已报道的86个OYDV不同分离物同源性为81.06%～90.40%;SYSV的CP基因由774个碱基组成,与Genbank上已报道的11个SYSV不同分离物CP基因同源性为88.63%～94.32%;从分析结果来看,LYSV的CP基因不同分离物之间变异性较大,OYDV CP变异性不大,SYSV变异性很小;3种病毒都有1个以上的宿主,病毒种内不同宿主分离物之间CP序列差异很小。进化分析显示OYDV和SYSV的CP基因亲缘性较近并成簇,LYSV的CP基因与OYDV和LYSV的CP基因亲缘性较远。

关键词：韭葱黄条病毒洋葱黄矮病毒胡葱黄条病毒 CP基因序列分析

安徽省高校与企业进行产、学、研、用合作模式初探

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皖西学院学报 2010年第2期26卷 51-52页

作者：韦传宝皖西学院化学与生命科学系安徽六安237012 安徽省植物生物技术实训中心安徽六安237012

由于高校与企业的联系较少,许多新技术得不到推广,企业技术革新速度缓慢。高校与企业广泛进行产学研合作是解决问题的途径之一。探讨了高校与企业之间对接存在的障碍、所需要的条件、"产、学、研、用"合作运行机制等。

关键词：高校企业产学研合作模式

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Al^(3+)沉淀法制备茶多酚工艺研究

安徽农业科学 2011年第22期39卷 13503-13505页

作者：何晓梅刘体云魏梦洁韦传宝皖西学院生物与制药工程学院安徽省植物生物技术实验实训中心安徽六安237012 安徽省六安市裕安区农村能源办公室安徽六安237008

[目的]为开发利用茶多酚提供试验依据。[方法]以绿茶为原料,用乙醇作提取剂,通过超声波辅助提取得到茶多酚浸提液,然后通过单因素试验和正交试验确定Al3+沉淀法制备茶多酚的最佳沉淀条件。[结果]单因素试验结果表明:乙醇的浸提效果优于... 详细信息

[目的]为开发利用茶多酚提供试验依据。[方法]以绿茶为原料,用乙醇作提取剂,通过超声波辅助提取得到茶多酚浸提液,然后通过单因素试验和正交试验确定Al3+沉淀法制备茶多酚的最佳沉淀条件。[结果]单因素试验结果表明:乙醇的浸提效果优于沸水;茶叶与AlCl3.6H2O的质量比为1∶0.50时,茶多酚的沉淀率最高,为96.13%;pH为5.7时,茶多酚的沉淀率最高;20 min以内,茶多酚的沉淀率随时间的延长而增加,20 min以后,沉淀时间对茶多酚沉淀率的影响不大。正交试验结果表明:茶多酚的最佳沉淀条件为茶叶与沉淀剂AlCl3.6H2O质量之比1∶0.50,pH 5.7,沉淀时间20 min,该工艺条件下茶多酚的沉淀率达97.38%±0.35%。[结论]该提取工艺简单,无毒性,产品得率较高,纯度好。

关键词：绿茶 Al3+沉淀茶多酚

大豆基因组保守序列及综合保守序列扩增多态性分子标记(ICSAP)的设计

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安徽农业科学 2013年第36期41卷 13847-13850页

作者：詹少华韦传宝皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012

采用VBA程序查找了大豆基因组保守序列——在基因组中出现次数较多的碱基序列片段,分析了这类保守序列的基本特性,在此基础上,设计了一种新型分子标记——综合保守序列扩增多态性分子标记。碱基数目越多,保守序列种类数和出现次数越少,... 详细信息

采用VBA程序查找了大豆基因组保守序列——在基因组中出现次数较多的碱基序列片段,分析了这类保守序列的基本特性,在此基础上,设计了一种新型分子标记——综合保守序列扩增多态性分子标记。碱基数目越多,保守序列种类数和出现次数越少,从10个碱基到27个碱基,保守序列的GC含量先是逐渐增加,达到一个平台后又逐渐降低。碱基离保守序列3’端越近,出现A或T的可能性越大,碱基在保守序列中的分布具有非随机性。不同长度的保守序列具有明显的进化关系。筛选出10个碱基的保守序列和长度为8个碱基的填充序列用来设计引物,共得到566对引物组合。该新型分子标记有望在条带多态性、引物一致性等方面超越现有分子标记,同时具有成本低廉等优点。该研究旨在为基因组保守序列查找和分子标记设计方面提供新的思路,分析这些保守序列特性有助于进一步探索分子进化机理。该新型分子标记有可能在大豆种质资源鉴定和基因图位克隆等方面得到应用,同时该分析方法也适用对其他物种。

关键词：大豆基因组勘探序列保守序列综合保守序列综合保守序列扩增多态性

对生物工程专业学生实践教学差别培养模式的研究

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皖西学院学报 2012年第2期28卷 34-35页

作者：韦传宝刘昌利皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012 安徽省植物生物技术实训中心安徽六安237012

生物工程具有鲜明的实践性和应用性,应用型本科院校承担着为社会培养大批应用型人才的重任。学校和国家希望培养的学生能够直接进入社会并在各行业中发挥作用,但部分学生希望考研继续深造。就业和考研学生的人生定位不同,对实践性教学... 详细信息

生物工程具有鲜明的实践性和应用性,应用型本科院校承担着为社会培养大批应用型人才的重任。学校和国家希望培养的学生能够直接进入社会并在各行业中发挥作用,但部分学生希望考研继续深造。就业和考研学生的人生定位不同,对实践性教学的需求也有差异,总结了对生物工程专业两类学生在实践性教学方面差别培养模式的研究经验。

关键词：生物工程专业差别培养模式

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白眉蝮蛇蛇毒精氨酸酯酶的致突变研究

癌变．畸变．突变 2003年第4期15卷 237-239页

作者：韦传宝余茂耘浙江大学生命科学学院浙江杭州310027 皖西学院生物系安徽六安237000

目的与方法 :采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验研究白眉蝮蛇(Agkistrodonhalysussurien sis)蛇毒中精氨酸酯酶有无致突变毒性 ,为临床应用提供安全性依据。结果与结论 :3项试验均为阴性 ,精氨酸酯酶对所... 详细信息

目的与方法 :采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验研究白眉蝮蛇(Agkistrodonhalysussurien sis)蛇毒中精氨酸酯酶有无致突变毒性 ,为临床应用提供安全性依据。结果与结论 :3项试验均为阴性 ,精氨酸酯酶对所试菌株、小鼠体细胞及雄性生殖细胞均无诱变性。从致突变角度考虑。

关键词：精氨酸酯酶 Ames试验微核试验精子畸形试验

尖吻蝮蛇出血毒素Ⅰ与小鼠血管壁靶蛋白结合的研究

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皖西学院学报 2017年第5期33卷 99-101页

作者：韦传宝邓辉皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012 抗体制备及其质量检测中心安徽六安237012

为了检测小鼠血管壁上是否含有与尖吻蝮蛇出血毒素Ⅰ(AaHⅠ)结合的靶蛋白,按照前人的方法纯化出血毒素Ⅰ,制备其抗血清,采用免疫组织化学的方法检测动物血管壁上是否含有与尖吻蝮蛇AaHⅠ结合的靶蛋白。显微镜观察表明,血管壁出现显色环... 详细信息

为了检测小鼠血管壁上是否含有与尖吻蝮蛇出血毒素Ⅰ(AaHⅠ)结合的靶蛋白,按照前人的方法纯化出血毒素Ⅰ,制备其抗血清,采用免疫组织化学的方法检测动物血管壁上是否含有与尖吻蝮蛇AaHⅠ结合的靶蛋白。显微镜观察表明,血管壁出现显色环,说明尖吻蝮蛇AaHⅠ与血管壁上的某种蛋白质特异性结合。因此,小鼠血管壁上存在结合尖吻蝮蛇AaHⅠ的靶蛋白,尖吻蝮蛇AaHⅠ进入动物体内先结合靶蛋白,然后进一步引起出血。

关键词：尖吻蝮蛇出血毒素Ⅰ 靶蛋白免疫组织化学检测

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蝎毒的生理活性成分及临床应用

中国临床康复 2004年第9期8卷 1754-1755页

作者：余茂耘韦传宝皖西学院生物系安徽省六安市237000 皖西学院生物糸

蝎毒的应用研究在中国发展很快,已经制成包括蝎毒注射粉剂、蝎毒口服胶囊和蝎毒药膏等多种制剂并应用于临床。用于镇痛、治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎的蝎毒生物制品已经在临床中应用;治疗抗癌、溶栓和抗癫痫的蝎毒生物制品正在研... 详细信息

蝎毒的应用研究在中国发展很快,已经制成包括蝎毒注射粉剂、蝎毒口服胶囊和蝎毒药膏等多种制剂并应用于临床。用于镇痛、治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎的蝎毒生物制品已经在临床中应用;治疗抗癌、溶栓和抗癫痫的蝎毒生物制品正在研制之中,有的药物已经接近临床应用。文章对蝎毒中的生理活性成分进行了简单的叙述,综述了近年来国内外以蝎毒为原料生物制药的现状。对蝎毒生物药品的种类和临床应用进行了重点论述,认为蝎毒生物制药的前景光明,指出目前蝎毒生物制药存在的问题。

关键词：蝎毒生理活性成分临床应用种类疼痛抗肿瘤