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LAMP-CRISPR/Cas应用于禽类结构变异检测的方法研究及其评价

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LAMP-CRISPR/Cas应用于禽类结构变异检测的方法研究及其评价

作者：雷艳茹河南农业大学

学位级别：硕士

禽类基因组中的结构变异对物种的适应性演化和复杂性状形成具有重要影响。这些变异包括大片段DNA序列的插入、缺失、倒位和易位等,可以改变基因的编码序列和数量,同时影响调控元件如启动子和增强子的功能。目前已知禽类定位的经济性状... 详细信息

禽类基因组中的结构变异对物种的适应性演化和复杂性状形成具有重要影响。这些变异包括大片段DNA序列的插入、缺失、倒位和易位等,可以改变基因的编码序列和数量,同时影响调控元件如启动子和增强子的功能。目前已知禽类定位的经济性状原因突变以结构变异形式为主,因此精准快的结构变异分型技术在家禽育种生产工作具有巨大的应用前景。但当前单个结构变异检测主要依赖于聚合酶链式反应(PCR)结合琼脂糖凝胶电泳,其在生产现场的应用受到限制。CRISPR/Cas系统结合恒温扩增(LAMP)具有温度恒定、反应迅速、便携性强等特点,该系统提供了一种高特异性和可视化核酸检测手段,更适用于野外或现场环境。因此,本研究以LAMP联合CRISPR/Cas12a技术为基础建立一种新型禽类结构变异检测方法:一是通过LAMP技术于恒温条件下迅速扩增目标核酸,二是利用CRISPR/Cas12a技术特异性识别LAMP产物中的目标序列,三是在Cas12a被激活后对F-Q探针进行切割以输出荧光,实现检测结果的可视化。最后,通过扩增曲线和荧光信号辨别检测结果,并与普通PCR检测结果进行一致性检验,评估该检测方法的灵敏性和特异度。本研究通过以鸭白羽性状MITF基因、鸭生长性状IGF2BP1基因、鸡绿壳蛋性状SLCO1B3基因及鸡生长性状IGF2BP1基因原因突变(均为结构变异)为研究对象,构建LAMP-CRISPR/Cas结构变异检测方法,随后以普通PCR为标准进行检测方法准确性评估。具体研究结果如下:1)利用引物设计网站成功设计针对以上四个基因的LAMP引物,完成了目的基因的扩增,并成功建立LAMP的可视化反应;2)成功设计并构建了针对目的基因的cr RNA;3)成功建立了LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法;4)以PCR为标准的LAMP可视化反应检测各基因结构变异的一致率分别为:鸭MITF基因D等位基因83%、I等位基因87%,鸭IGF2BP1基因D等位基因83%、I等位基因89%,鸡SLCO1B3基因W等位基因81%,鸡IGF2BP1基因W等位基因93%、L2等位基因88%;5)以PCR为标准LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法对各基因结构变异敏感度和特异性均为100%,一致率分别为:鸭MITF基因D等位基因和I等位基因均为92%;鸭IGF2BP1基因D等位基因87%、I等位基因92%,鸡SLCO1B3基因W等位基因91%;鸡IGF2BP1基因W等位基因96%、L2等位基因93%;综上所述,本研究基于LAMP恒温扩增技术和CRISPR/Cas12a技术成功建立了同时满足现场可视分析和高特异性的禽类结构变异检测方法,该方法在45min内便可通过蓝光照射肉眼观察到结果,具有良好的灵敏性和特异性,且操作简便、无需昂贵设备,为实现现场、快速、特异的禽类结构变异可视化分析提供了切实可行的技术支持,具有广泛的应用前景。

关键词： LAMP CRISPR/Cas12a 基因组结构变异检测方法

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初中英语阅读课堂深度学习现状的调查研究

初中英语阅读课堂深度学习现状的调查研究

作者：雷艳玲河北科技师范学院

学位级别：硕士

随着新一轮课程改革持续深化,深度学习逐渐成为教育研究者和一线教师关注的焦点。深度学习致力于培养学生的核心素养,强调学习的整合性、关联性和发展性,对英语阅读教学具有不可忽视的影响。因此,有必要对初中生在英语阅读课上的深度学... 详细信息

随着新一轮课程改革持续深化,深度学习逐渐成为教育研究者和一线教师关注的焦点。深度学习致力于培养学生的核心素养,强调学习的整合性、关联性和发展性,对英语阅读教学具有不可忽视的影响。因此,有必要对初中生在英语阅读课上的深度学习情况进行分析和研究,以提高英语阅读课堂教学质量。本研究基于建构主义学习理论、布鲁姆认知目标分类理论以及元认知理论,采用问卷调查、课堂观察和访谈的方法,对初中生在英语阅读课堂上深度学习的情况开展调查与研究。本研究主要回答以下三个问题:(1)英语阅读课堂上,初中生深度学习的现状如何?(2)初中生在英语阅读课堂上深度学习的影响因素有哪些?(3)促进初中生在英语课堂上深度学习的策略有哪些?本研究得出以下结论:(1)在英语阅读课堂上,初中生还未完全达到深度学习,部分仍处于浅层水平,且各维度表现水平参差不齐,存在缺陷和差异。具体来讲,初中生在英语阅读课堂上的学习目前存在着知识建构能力不强,缺乏批判性思维、知识迁移和问题解决经验相对匮乏、缺乏主动反思和评价的意识、交流协作的效果不佳、学习动机不强,欠缺主动性和积极性等多方面的不足。在认知、人际和情感三个领域中,情感领域的表现整体高于认知和人际领域。情感领域中初中生的学习的兴趣高于积极性和主动性;认知领域中初中生的迁移创新能力最为薄弱;人际领域中初中生均更认同团队合作。在相关性方面,深度学习各维度间均存在显著正向相关关系,学习动机与反思评价的相关性最弱,分析理解与反思评价的相关性最强。在差异性方面,不同性别或年级的初中生在深度学习的表现上存在显著差异,且女生深度学习的表现优于男生。高年级在深度学习的表现整体好于低年级。(2)初中生在英语阅读课堂上深度学习的影响因素有7种,即学生的学习理念、学习动机、自我效能感和学习参与度和课堂上教师的教学方法、教学组织形式以及课堂互动,其中学习者的学习理念和学习参与度占主导地位。(3)针对以上发现,本研究提出了促进初中生在英语阅读课堂上进行深度学习的策略:建构知识体系,培养批判性思维;促进学习迁移,提升知识运用能力;优化教学评价,提高评价质量;提高课堂参与度,改善教学体验以及培养内在学习动机,挖掘学习潜力。

关键词：深度学习阅读课堂初中英语

中国全民健身公共服务供给水平的区域差异及收敛性研究——基于更高水平的全民健身公共服务视角

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成都体育学院学报 2024年第2期50卷 34-41页

作者：薄腾飞雷艳云北京体育大学奥林匹克高等研究院北京100084 湖南工业大学体育学院湖南株洲412007

为推进全民健身公共服务均等化发展,提升人民群众参与体育运动的“幸福感”“获得感”。文章在熵权法对全民健身公共服务供给水平进行量化评估的基础上,运用核密度非参数估计法、Dagum基尼系数及其分解法探析全国及东、中、西部供给水... 详细信息

为推进全民健身公共服务均等化发展,提升人民群众参与体育运动的“幸福感”“获得感”。文章在熵权法对全民健身公共服务供给水平进行量化评估的基础上,运用核密度非参数估计法、Dagum基尼系数及其分解法探析全国及东、中、西部供给水平的区域差异,并运用计量经济模型分析β收敛特征。研究认为:(1)从绝对差异看,全国及东、中、西部区域全民健身公共服务均表现出供给水平提升和绝对差异减小的趋同特征;(2)从相对差异看,全国及东、中、西部区域全民健身公共服务供给水平的均等化程度均有显著提高,各区域内的均等化程度依次为西部>东部>中部区域,各区域间的均等化程度依次为中-西部>东-西部>东-中部区域。(3)全国及东、中、西部区域均存在显著的β收敛特征,供给弱势地区呈现明显的“追赶”态势,各区域全民健身公共服务供给水平会随时间的推移逐步趋于同一稳态水平。

关键词：全民健身公共服务均等化区域差异收敛性

基于属性的概念化:制度本体研究的必要性与路径

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厦门大学学报（哲学社会科学版） 2024年第2期74卷 27-36页

作者：雷艳红王宝恒厦门大学公共事务学院福建厦门361005 厦门大学管理学院福建厦门361005

制度本体的研究现状与制度之于人类生活的重要性并不相称,制度研究有必要返回本体,明确存在。解读制度理论的制度理解并指出它所引发的本体认知困惑,确立了制度本体研究的必要性。本体在于内涵,内涵首要是本质,有抱负的研究者都试图给... 详细信息

制度本体的研究现状与制度之于人类生活的重要性并不相称,制度研究有必要返回本体,明确存在。解读制度理论的制度理解并指出它所引发的本体认知困惑,确立了制度本体研究的必要性。本体在于内涵,内涵首要是本质,有抱负的研究者都试图给出事物的本质性定义,但此定义往往可欲难求。一个可行的操作化步骤是,确定本体的属性。制度学界普遍接受的“制度即结构”可以明确为“制度即要素结构”,并可解构为要素之制、载体之制与结构之制。确定本体属性、要素化属性并将其概念化,应是可行的本体研究策略或路径。由此获得的概念语言暨制度本体词汇有助于校准本体描述,同时可作为中介术语沟通制度研究,推动制度知识的共享与交流。

关键词：制度本体要素结构属性要素化概念语言

基于RF-GWO的水利工程地质渗透系数智能反演分析

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水资源与水工程学报 2024年第2期35卷 139-148页

作者：雷艳温立峰赵明仓殷乔刚中国电建集团西北勘测设计研究院有限公司陕西西安710065 西安理工大学省部共建西北旱区生态水利国家重点实验室陕西西安710048

地质渗透系数是准确分析水利工程渗流的关键参数。针对传统反演方法计算效率低、精度差的问题,采用有限元正演模型和正交试验设计构建渗透系数反演样本集,建立了基于随机森林(RF)算法的渗流计算代理模型;在此基础上,引入灰狼优化(GWO)算... 详细信息

地质渗透系数是准确分析水利工程渗流的关键参数。针对传统反演方法计算效率低、精度差的问题,采用有限元正演模型和正交试验设计构建渗透系数反演样本集,建立了基于随机森林(RF)算法的渗流计算代理模型;在此基础上,引入灰狼优化(GWO)算法,提出了基于RF-GWO的渗透系数智能反演方法,并以Z抽水蓄能电站为研究案例进行了验证。结果表明:RF模型对各钻孔水位预测结果均接近实测值,性能优于CART和BP模型;GWO可搜寻到地质最佳渗透系数,钻孔水位反演结果合理,相对误差最大为0.42%,精度满足工程要求,计算的天然渗流场分布形态也符合一般山体渗流场分布规律。建立的反演模型能够快速准确地推断工程区地层渗透系数,具有实际工程应用价值。

关键词：地质渗透系数反演分析正交试验设计随机森林灰狼优化

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楚天都市报“图说”专版的定位及作用

新闻前哨 2024年第3期 55-56页

作者：雷艳楚天都市报·极目新闻

在信息发达、传播飞速的快阅读时代,如何言简意赅而且用直观的方式吸引读者去阅读?楚天都市报自2022年开始探索,结合时政新闻或者社会热点,创新推出了“图说”专版,即用整版制图配合提炼的文字新闻要素,准确向读者传递新闻信息,提升了... 详细信息

在信息发达、传播飞速的快阅读时代,如何言简意赅而且用直观的方式吸引读者去阅读?楚天都市报自2022年开始探索,结合时政新闻或者社会热点,创新推出了“图说”专版,即用整版制图配合提炼的文字新闻要素,准确向读者传递新闻信息,提升了文字新闻报道的视觉传达效果。

关键词：图说视觉效果

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油品调和对改进油品质量的作用分析

中国科技期刊数据库工业A 2024年第6期 0048-0051页

作者：雷艳中国石化江西石油分公司江西南昌330000

在能源需求持续增长的时代背景下,油品质量的提升显得尤为关键。油品调和作为一种高效的质量改进手段,正逐渐受到业界的广泛重视。油品作为现代工业的“生命之液”,其质量不仅关乎机械设备的安全稳定运行,更直接影响到企业的经济效益和... 详细信息

在能源需求持续增长的时代背景下,油品质量的提升显得尤为关键。油品调和作为一种高效的质量改进手段,正逐渐受到业界的广泛重视。油品作为现代工业的“生命之液”,其质量不仅关乎机械设备的安全稳定运行,更直接影响到企业的经济效益和市场竞争力。本文旨在深入剖析油品调和对油品质量提升的重要作用,以期为从业人员提供有益的参考与启示,共同推动油品行业的持续健康发展。

关键词：油品油品调和油品质量

以学习任务群为导向,跟着名著去旅行——《西游记》整本书阅读教学例谈

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陕西教育（教学） 2024年第5期 17-18页

作者：雷艳西北工业大学附属小学

语文核心素养是“学生在积极的语言实践活动中积累、建构并在真实的语言运用情境中表现出来的”,只有让学生置身于真实的语言情境中,用语文能力解决生活中的问题,其语文素养才能得到发展和提高。在《西游记》整本书阅读教学中,我们设置... 详细信息

语文核心素养是“学生在积极的语言实践活动中积累、建构并在真实的语言运用情境中表现出来的”,只有让学生置身于真实的语言情境中,用语文能力解决生活中的问题,其语文素养才能得到发展和提高。在《西游记》整本书阅读教学中,我们设置这样的情境:同学们,一年一度的校园读书节就要来临,今年的主题是“跟着名著去旅行”。读书节那天,五年级的学生要向全校师生展示、分享阅读名著的收获和成果,并用独特的方式向大家推荐这本名著。围绕这一内容,笔者以“旅行”为主线,设计了如下学习活动。

关键词：语言实践活动读书节整本书阅读语文核心素养语言情境语文素养语文能力阅读名著

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财务风险防范中的企业内控管理研究

中国集体经济 2024年第8期 157-160页

作者：雷艳重庆振和建筑工程有限公司

文章旨在研究基于财务风险防范下的企业内控管理。在当今复杂多变的商业环境中,财务风险对企业经营稳定和可持续发展构成重大挑战。因此,企业需要建立强有力的内控管理系统来预防和应对财务风险。文章通过理论分析,阐述了财务风险的本... 详细信息

文章旨在研究基于财务风险防范下的企业内控管理。在当今复杂多变的商业环境中,财务风险对企业经营稳定和可持续发展构成重大挑战。因此,企业需要建立强有力的内控管理系统来预防和应对财务风险。文章通过理论分析,阐述了财务风险的本质和特征,探讨了内控管理在财务风险防范中的作用。研究发现,企业必须加强风险识别、风险评估和风险控制,通过建立有效的内部控制措施来减少财务风险对企业的影响。

关键词：财务风险内控管理风险预防