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克氏原螯虾胚胎与母体的依附关系及胚胎免疫

克氏原螯虾胚胎与母体的依附关系及胚胎免疫

作者：隗阳南京农业大学

学位级别：硕士

克氏原螯虾（Procambarus clarkii）俗称淡水龙虾、小龙虾,隶属于甲壳纲（Crustacea）,鳌虾科（Cabaridae）。克氏原螯虾目前是世界上分布最广、养殖最普遍的淡水鳌虾。该虾肉味鲜美、营养丰富,深受国内外市场欢迎。随着近年来,人们对... 详细信息

克氏原螯虾（Procambarus clarkii）俗称淡水龙虾、小龙虾,隶属于甲壳纲（Crustacea）,鳌虾科（Cabaridae）。克氏原螯虾目前是世界上分布最广、养殖最普遍的淡水鳌虾。该虾肉味鲜美、营养丰富,深受国内外市场欢迎。随着近年来,人们对克氏原螯虾消费需求的快速上升极大推动了其养殖业的发展,克氏原螯虾的野生资源已远远不能满足市场的需求,克氏原螯虾的人工养殖与苗种繁育逐渐受到人们的重视。克氏原螯虾以抱卵孵化的方式孵化和培育后代。因此抱卵孵化期间亲虾（抱卵虾）的生存环境、营养水平、孵化空间及护理照顾等等因素极大地影响了胚胎的孵化率及孵出幼苗的存活率。胚胎的孵化受限于母虾这一点成为苗种繁育的难点。发展离体孵化技术能有效规避母虾的限制,可实现同步化、高效益、可控化、规模化培育虾苗,缓解苗种短缺的瓶颈,具有非常广阔的应用前景。目前,克氏原螯虾的离体孵化技术处于探索及小试阶段,核心技术难点尚未攻克。因此,研究克氏原螯虾胚胎发育及孵化机制,探讨抱卵母体对胚胎的生命支持及内在依恋关系,有助于提出提高离体孵化率及苗种存活率的措施,为大力发展克氏原螯虾的离体孵化技术提供理论依据。本研究选用江苏省盱眙县龙虾产业集团龙虾养殖基地处于繁殖季节体格健壮、规格一致的克氏原螯虾抱卵虾和尚未抱卵的母虾作为实验动物。对尚未抱卵的母虾连续观察,从母虾开始产卵至幼苗脱离母体,隔天采样,采集胚胎进行克氏原螯虾胚胎发育过程中免疫能力的研究及作为扫描电镜拍摄样品;采集产卵时分泌的孵化液进行质谱分析。对已抱卵的抱卵虾进行胚胎离体孵化操作,探究不同温度对克氏原螯虾胚胎离体孵化期间抗氧化酶活性的影响。此外,本研究还观察了高PH和盐度胁迫对胚胎表面形貌的影响。本研究得到以下结果:1.克氏原螯虾胚胎的形态变化及卵膜表面结构的观察用光学显微镜和扫描电镜技术观察了克氏原螯虾成熟卵、自然受精产出附着于腹肢上的受精卵及环境胁迫下的受精卵。成熟卵只有初级卵膜,上密布微孔及颗粒物,较脆弱易破损。受精卵较光滑不易破损,内部致密且富有弹性。高PH和高盐度胁迫下的受精卵次级卵膜表面形貌发生了变化。次级卵膜在胚胎发育过程中起着重要的作用。2.克氏原螯虾孵化液的SDS-PAGE凝胶电泳及质谱分析克氏原螯虾腹肢上的粘液腺分泌的孵化液在胚胎发育过程中起着重要的作用。本实验通过SDS-PAGE及质谱分析鉴定了克氏原螯虾孵化液中蛋白质的酶解产物,结合数据库检索,共鉴定得到30种蛋白质。通过蛋白质检索,对鉴定到的蛋白质的亚细胞中定位以及COG功能注释进行了归纳总结。结果表明,在克氏原螯虾胚胎发育早期,孵化液至少对胚胎的成功附着、次级卵膜的形成及隔绝外界环境的伤害这三个方面发挥着重要的作用。3.克氏原螯虾胚胎不同发育阶段抗氧化酶和NaK-ATP酶的活性变化及温度对其的影响为探究克氏原螯虾胚胎发育阶段非特异性免疫机制与渗透压调节能力,利用生物化学的方法测定了克氏原螯虾胚胎发育阶段体内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）和NaK-ATP酶（NKA酶）的水平。结果显示,克氏原螯虾在胚胎发育过程中SOD一直发挥着抗氧化作用,CAT只在克氏原螯虾胚胎破膜前后发挥抗氧化作用,克氏原螯虾胚胎发育过程中MDA含量的变化与SOD活性变化类似,随着胚胎发育持续升高。克氏原螯虾胚胎受精卵至破膜前的整个过程中,NKA酶活性很低且无显著变化,但是在胚胎破膜后,苗Ⅰ期至幼苗阶段,克氏原螯虾与外界环境直接接触,为了调节体内渗透压平衡适应外界环境与抗应激,NKA酶活性出现显著升高。温度对克氏原螯虾胚胎离体孵化期间抗氧化酶活性影响的研究中,发现在克氏原螯虾胚胎发育的不同时期,温度对其胚胎发育有不同的影响。在克氏原螯虾胚胎离体孵化期间,本实验设置的温度仅对克氏原螯虾胚胎苗Ⅰ期和苗Ⅱ期的CAT活性有显著影响,对其MDA含量的影响较小。综上所述,克氏原螯虾孵化液在其胚胎依附关系中发挥着重要的作用,次级卵膜与外界环境直接接触,其表面会附着大量菌群,同时后期出现较多的损伤,以便胚胎破膜而出。克氏原螯虾胚胎发育过程中,前期主要依靠母源性SOD发挥作用,免疫能力较弱,后期胚胎免疫相关基因开始表达,免疫能力得到显著提升。其中,原肠期和苗Ⅰ期为克氏原螯虾胚胎孵化的关键时期,在此时期一定要强化管理,避免胚胎受到各种因素的干扰,同时要保持适宜的水质条件,以保持胚胎正常的发育进程,环境条件不宜突变。温度对克氏原螯虾胚胎离体孵化期间抗氧化酶活性的影响较小。本研究为进一步揭示克氏原螯虾胚胎孵化机制提供基本资料,同时对进一步研究该动物离体人工授精及人工孵化也具有重要参考价值。

关键词：克氏原螯虾离体孵化胚胎卵膜抗氧化

克氏原螯虾胚胎发育与离体孵化的研究进展及展望

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江苏农业科学 2021年第15期49卷 25-32页

作者：隗阳水燕朱光艳徐钢春南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业农村部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

克氏原螯虾是世界上分布最广、养殖最普遍的淡水螯虾。该虾肉味鲜美、营养丰富,深受国内外市场欢迎,消费量巨大。克氏原螯虾具有广阔的产业化前景,然而苗种供应不足的问题一直制约着克氏原螯虾产业的可持续发展。因此,规模化的人工繁殖... 详细信息

克氏原螯虾是世界上分布最广、养殖最普遍的淡水螯虾。该虾肉味鲜美、营养丰富,深受国内外市场欢迎,消费量巨大。克氏原螯虾具有广阔的产业化前景,然而苗种供应不足的问题一直制约着克氏原螯虾产业的可持续发展。因此,规模化的人工繁殖是克氏原螯虾产业化的起点和突破口。本文概述了克氏原螯虾胚胎发育的形态结构变化、生化组成及营养代谢、酶活研究、分子和组学研究以及生态因子对克氏原螯虾胚胎发育的影响,并且概述了胚胎离体孵化的相关技术进展,探讨了克氏原螯虾离体孵化的思路和方法以及对未来克氏原螯虾育种的展望。

关键词：克氏原螯虾胚胎发育离体孵化甲壳动物人工繁殖

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浅谈小户型住宅空间的拓展性设计

缤纷 2016年第12期 106-107页

作者：隗阳沈阳师范大学

随着人们物质生活水平的提高，对住宅空间的要求也越来越高，目前大户型住宅越来越受欢迎。但是受经济条件所限，仍有很大一部分人只能选择购买小户型住宅，而拓展性设计可以有效提升小户型住宅的空间利用率，为人们的生活提供方便，给... 详细信息

随着人们物质生活水平的提高，对住宅空间的要求也越来越高，目前大户型住宅越来越受欢迎。但是受经济条件所限，仍有很大一部分人只能选择购买小户型住宅，而拓展性设计可以有效提升小户型住宅的空间利用率，为人们的生活提供方便，给予人们更空阔的住宅空间享受。本文将对小户型住宅空间的拓展性设计进行探究,

关键词：小户型住宅空间拓展性设计

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浅析侦查实践视角下的电子数据取证

公安研究 2016年第7期 45-49页

作者：隗冬阳湖北省荆州市公安局

近年来，随着以审判为中心的司法改革逐步迈向深入，对公安机关侦查工作提出了更高要求，同时随着各类违法犯罪活动线上线下不断融合，给公安机关调查取证带来不小挑战。如何积极适应司法执法理念的新变化，有效破解“大数据”背景下电... 详细信息

近年来，随着以审判为中心的司法改革逐步迈向深入，对公安机关侦查工作提出了更高要求，同时随着各类违法犯罪活动线上线下不断融合，给公安机关调查取证带来不小挑战。如何积极适应司法执法理念的新变化，有效破解“大数据”背景下电子数据取证难题值得我们认真思考。笔者从全面准确认识电子数据入手，简要阐述了当前公安机关电子数据取证工作的现状及不足，继而提出了相关的建议对策，以期对侦查办案实践有所裨益。

关键词：电子数据取证侦查对策

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虾稻共作复合模式技术试验示范

渔业致富指南 2023年第12期 49-52页

作者：周自明叶敬松涂子仪隗阳王磊朱志强湖北省小龙虾产业技术研究院有限公司潜江市张金镇水产技术服务中心潜江市小龙虾产业发展促进中心湖北潜江433100

在小龙虾养殖产业逐级兴起,逐渐火遍大江南北,给农业带来增效,农民增收的同时,小龙虾养殖业也逐渐出现短板,一是小龙虾新品种缺乏,特别是在规格大,抗寒、抗暑、抗病等抗逆新品种缺乏;二是养殖模式亟待创新。2021年,在走访养殖市场时,位... 详细信息

在小龙虾养殖产业逐级兴起,逐渐火遍大江南北,给农业带来增效,农民增收的同时,小龙虾养殖业也逐渐出现短板,一是小龙虾新品种缺乏,特别是在规格大,抗寒、抗暑、抗病等抗逆新品种缺乏;二是养殖模式亟待创新。2021年,在走访养殖市场时,位于潜江市的湖北省小龙虾产业技术研究院工作人员发现,部分碎片化田(不适宜建设环形沟)尚未充分利用,同时虾稻共作(潜江首创)存在虾苗密度过大,密度不可控,往往造成小龙虾规格不大或大规格虾占比不高等问题,无法满足餐饮市场的需求。为此,潜江市水产工作团队在2021年提出了利用虾稻共作模式繁育虾苗,将虾稻共作多余的虾苗转移到虾稻轮作稻田和不适宜建设环形沟的碎片化稻田中进行养殖.

关键词：环形沟虾稻共作养殖模式小龙虾养殖复合模式试验示范虾苗产业技术研究院

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盐度对美洲鲥仔鱼的急性毒性

科学养鱼 2018年第10期40卷 54-56页

作者：邓鸿哲唐智慧隗阳钟国安徐钢春南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

美洲鲥(Alosa sapidissima)又名美洲西鲱,以肉质肥美细嫩著称。因与“长江三鲜”中近乎绝迹的鲥鱼[Macrurareevesii(Rich.)]同属一个亚科,且形态、肉质口感相似,故其市场前景良好。近年来,国内从美国引进的美洲鲥多以淡水养殖为主,海水... 详细信息

美洲鲥(Alosa sapidissima)又名美洲西鲱,以肉质肥美细嫩著称。因与“长江三鲜”中近乎绝迹的鲥鱼[Macrurareevesii(Rich.)]同属一个亚科,且形态、肉质口感相似,故其市场前景良好。近年来,国内从美国引进的美洲鲥多以淡水养殖为主,海水养殖仍处于起步阶段。研究表明,美洲鲥属于溯河产卵洄游性鱼类,既能适应淡水生存,也能适应海水生存,但海水盐度这一水质因子的相关研究较少见报。盐度是制约鱼类生长发育的重要因子之一,当浓度超标时,不但会导致鱼类产生疾病,而且会致死。

关键词：海水盐度美洲鲥急性毒性洄游性鱼类仔鱼水质因子市场前景淡水养殖

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潜江稻田养虾投早苗养殖技术试验

渔业致富指南 2023年第10期 48-50页

作者：周自明隗阳涂子仪王磊叶敬松朱志强刘杰湖北省小龙虾产业技术研究院有限公司潜江市小龙虾产业发展促进中心潜江市张金镇水产技术服务中心湖北潜江433100

近年来,随着潜江小龙虾品牌深入化发展,知名度逐步提高,稻田养虾得到快速开展。然而,稻田养虾普遍存在投苗晚,商品虾上市迟,大量的小龙虾集中在4月下旬到5月下旬,出现供大于求,从而导致价格低,养殖收益下降,为此,开展小龙虾早苗投放试验... 详细信息

近年来,随着潜江小龙虾品牌深入化发展,知名度逐步提高,稻田养虾得到快速开展。然而,稻田养虾普遍存在投苗晚,商品虾上市迟,大量的小龙虾集中在4月下旬到5月下旬,出现供大于求,从而导致价格低,养殖收益下降,为此,开展小龙虾早苗投放试验,力争小龙虾早上市,与市场形成错峰上市,进而提高小龙虾收益。位于潜江市的湖北省小龙虾产业技术研究院有限公司在2022年10月至2023年6月开展稻田养虾投早苗技术试验,取得了一定成效,现总结如下。

关键词：稻田养虾商品虾小龙虾投放试验产业技术研究院养殖收益潜江投苗

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虾稻共作原位田繁养分离模式探讨

渔业致富指南 2023年第4期 56-60页

作者：肖云美隗阳周自明李明波涂子仪彭宣国湖北省小龙虾产业技术研究院湖北潜江433100

“虾稻共作”属于一种稻田综合种养模式,即在稻田中养殖两季小龙虾并种植一季中稻,在水稻种植期间小龙虾与水稻在稻田中同生共长。近年来,“虾稻共作”综合种养发展模式因为有较高的综合效益价值,而在全国范围内大力发展。从发展现状来... 详细信息

“虾稻共作”属于一种稻田综合种养模式,即在稻田中养殖两季小龙虾并种植一季中稻,在水稻种植期间小龙虾与水稻在稻田中同生共长。近年来,“虾稻共作”综合种养发展模式因为有较高的综合效益价值,而在全国范围内大力发展。从发展现状来看,“虾稻共作”模式目前在湖北省尤其是潜江市发展取得了良好的效益,突出表现为提质增效.

关键词：一季中稻虾稻共作水稻种植综合种养小龙虾提质增效综合效益潜江市

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潜江市虾-稻-蛙立体模式养殖可行性探索

中南农业科技 2024年第3期45卷 76-78,142页

作者：周自明陈传龙李明波隗阳涂子仪蒋万强朱志强湖北省小龙虾产业技术研究院有限公司湖北潜江433100 潜江市湖耕食品有限公司湖北潜江433100 湖北省水产科学研究所武汉430071

为提高稻渔综合种养模式的经济效益,进一步提升土地利用率,于2023年在湖北省潜江市利用湖北省小龙虾产业技术研究院有限公司在后湖管理区的立体模式基地,开展虾-稻-蛙立体模式试验,同时与周边传统单一种植水稻模式、虾稻共作模式进行对... 详细信息

为提高稻渔综合种养模式的经济效益,进一步提升土地利用率,于2023年在湖北省潜江市利用湖北省小龙虾产业技术研究院有限公司在后湖管理区的立体模式基地,开展虾-稻-蛙立体模式试验,同时与周边传统单一种植水稻模式、虾稻共作模式进行对比。结果表明,虾-稻-蛙立体模式的经济效益较传统单一种植水稻模式、虾稻共作模式分别提高65370.5元/hm^(2)和34541.6元/hm^(2),具有很好的经济效益,大幅度提高了土地利用率。

关键词：虾-稻-蛙立体模式经济效益潜江市

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