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用液相二次离子质谱技术探测Melittin与磷脂膜的相互作用

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中国科学（B辑） 1997年第5期27卷 445-451页

作者：武轶隋森芳清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室

利用液相二次离子质谱技术(LSIMS)结合特异性蛋白酶降解研究了膜结合Melittin的“抛锚”状态.结果显示,Melittin(蜂毒素)分子在磷脂膜上为平躺α-螺旋结构,其螺旋中含Lys_7,Lys_(21),Arg_(22)的一侧朝向磷脂膜的外部.这一发现对蜂毒素... 详细信息

利用液相二次离子质谱技术(LSIMS)结合特异性蛋白酶降解研究了膜结合Melittin的“抛锚”状态.结果显示,Melittin(蜂毒素)分子在磷脂膜上为平躺α-螺旋结构,其螺旋中含Lys_7,Lys_(21),Arg_(22)的一侧朝向磷脂膜的外部.这一发现对蜂毒素插膜机制的研究具有十分重要的意义.结果还表明,质谱技术与专一性蛋白水解酶的结合为膜插入机制的研究提供了一个崭新的、行之有效的方法.

关键词： Melittin 蛋白取向磷脂膜蜂毒素蛋白毒素蛋白

含有长亲水链团的膜糖蛋白与脂类双分子层的相互作用—脂类-蛋白相互作用的一种模型

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生物物理学报 1991年第4期7卷 546-553页

作者：隋森芳清华大学生物科学与技术系北京100084

基于作者已经发表的实验结果,本文认为脂类—蛋白相互作用自由能可来自脂双层内疏水区的相互作用,也可来自膜表面的吸附作用.本文对含有长亲水链团的膜糖蛋白(如血型糖蛋白和胰岛素受体)与脂双层的相互作用的热力学估计(正则溶液近似)表... 详细信息

基于作者已经发表的实验结果,本文认为脂类—蛋白相互作用自由能可来自脂双层内疏水区的相互作用,也可来自膜表面的吸附作用.本文对含有长亲水链团的膜糖蛋白(如血型糖蛋白和胰岛素受体)与脂双层的相互作用的热力学估计(正则溶液近似)表明,脂类—蛋白相互作用自由能可能主要来自胰蛋白的亲水链团在膜表而吸附的贡献.本文理论分析的结论与已经发表的实验结果相一致.

关键词：膜糖蛋白脂类相互作用热力学

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生物三维电子显微学进入全新高速发展时期

生物物理学报 2007年第4期23卷 228-239,295页

作者：隋森芳清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100084

生物三维电子显微学主要由三个部分组成——电子晶体学、单颗粒技术和电子断层成像术,其结构解析对象的尺度范围介于X射线晶体学与光学显微镜之间,适合从蛋白质分子结构到细胞和组织结构的解析。以冷冻电镜技术与三维重构技术为基础的... 详细信息

生物三维电子显微学主要由三个部分组成——电子晶体学、单颗粒技术和电子断层成像术,其结构解析对象的尺度范围介于X射线晶体学与光学显微镜之间,适合从蛋白质分子结构到细胞和组织结构的解析。以冷冻电镜技术与三维重构技术为基础的低温电子显微学代表了生物电子显微学的前沿。低温单颗粒技术对于高度对称的病毒颗粒的解析最近已达到3.8"分辨率,正在成为解析分子量很大的蛋白质复合体高分辨结构的有效技术手段。低温电子断层成像技术目前对于真核细胞样品的结构解析已达到约40#的分辨率,在今后5年有望达到20$。这样,把X射线晶体学、NMR以及电镜三维重构获得的蛋白质分子及复合体的高分辨率的结构,锚定到较低分辨率的电子断层成像图像中,从而在细胞水平上获得高精确的蛋白质空间定位和原子分辨率的蛋白质相互作用的结构信息。这将成为把分子水平的结构研究与细胞水平的生命活动衔接起来的可行途径。

关键词：三维电子显微学低温电子显微学电子晶体学单颗粒技术电子断层成像术

原位椭圆偏振术研究牛血清清蛋白在固/液界面的吸附

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生物物理学报 1992年第2期8卷 245-251页

作者：吴桦隋森芳清华大学生物科学与技术系北京100084

用原位椭圆偏振术系统研究了硅片表面因素及缓冲液环境因素对牛血清清蛋白在固/液界面吸附的影响。在生理条件下,疏水表面与亲水表面相比BSA吸附量较大。随着硅片表面电荷密度增加,BSA吸附量增加。BSA吸附量当体溶液pH值等于BSA等电点... 详细信息

用原位椭圆偏振术系统研究了硅片表面因素及缓冲液环境因素对牛血清清蛋白在固/液界面吸附的影响。在生理条件下,疏水表面与亲水表面相比BSA吸附量较大。随着硅片表面电荷密度增加,BSA吸附量增加。BSA吸附量当体溶液pH值等于BSA等电点时达到最大。而随着体溶液离子强度增加,BSA吸附量亦上升。实验结果提示:除了熵驱动作用之外,硅片表面与BSA分子及BSA分子之间的静电作用在BSA吸附中起着十分重要的作用。

关键词：牛血清清蛋白椭圆偏振术吸附

毒素蛋白ColicinE1与磷脂膜的相互作用

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1996年第4期28卷 346-351页

作者：武轶隋森芳李庆喜王敬尊清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京微量化学研究所

多肽及蛋白质的插膜机制是目前分子生物学、细胞生物学研究中十分活跃的领域之一。本文通过荧光、圆二色等波谱学技术，深入地探讨了处于不同构象状态的毒素蛋白分子与磷脂膜作用后的构象变化。结果表明：带负电荷的磷脂膜对处于不同构... 详细信息

多肽及蛋白质的插膜机制是目前分子生物学、细胞生物学研究中十分活跃的领域之一。本文通过荧光、圆二色等波谱学技术，深入地探讨了处于不同构象状态的毒素蛋白分子与磷脂膜作用后的构象变化。结果表明：带负电荷的磷脂膜对处于不同构象状态的ＣｏｌｉｃｉｎＥ１分子的二级结构有较强的诱导作用；这种作用是电荷依赖性的。处于不同构象状态的毒素蛋白分子在磷脂膜的诱导下均可不同程度恢复其天然状态下插膜时的构象。不同磷脂对ＣｏｌｉｃｉｎＥ１分子诱导的强弱依次为ＤＭＰＧ＞ＤＭＰＥ＞ＤＭＰＣ。ＣｏｌｉｃｉｎＥ１分子与磷脂膜的结合是紧密的，结合后的蛋白质有较强的抗变性能力。

关键词： ColicinE_1 蛋白质插膜膜脂-蛋白质相互作用

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SPR生物传感器的谱之数字解析

生物物理学报 1998年第2期14卷 193-198页

作者：肖才德隋森芳清华大学生物科学与技术系郧阳医学院

为了实时地从ＳＰＲ谱的变化得到生物大分子相互作用的信息，作者采用等效递推法编程模拟计算，探讨了影响ＳＰＲ谱的各种因素。结果表明：在实际应用中组装在金膜表面的多层生物样品的厚度、面密度与ＳＰＲ谱峰位移ΔθＳＰＲ成正比，... 详细信息

为了实时地从ＳＰＲ谱的变化得到生物大分子相互作用的信息，作者采用等效递推法编程模拟计算，探讨了影响ＳＰＲ谱的各种因素。结果表明：在实际应用中组装在金膜表面的多层生物样品的厚度、面密度与ＳＰＲ谱峰位移ΔθＳＰＲ成正比，单个样品分子所占的面积与ΔθＳＰＲ成反比。光源波长和棱镜玻璃的色散关系对上述关系的比例常数有较大的影响；虽然作为金膜载体的盖玻片会导致ＳＰＲ谱上叠加一定频率的干涉噪音，但是可以不考虑盖玻片的厚度以及金膜厚度的影响。为了实时地从ＳＰＲ谱的变化得到生物大分子相互作用的信息，作者采用等效递推法编程模拟计算，探讨了影响ＳＰＲ谱的各种因素。结果表明：在实际应用中组装在金膜表面的多层生物样品的厚度、面密度与ＳＰＲ谱峰位移ΔθＳＰＲ成正比，单个样品分子所占的面积与ΔθＳＰＲ成反比。光源波长和棱镜玻璃的色散关系对上述关系的比例常数有较大的影响；虽然作为金膜载体的盖玻片会导致ＳＰＲ谱上叠加一定频率的干涉噪音，但是可以不考虑盖玻片的厚度以及金膜厚度的影响。

关键词：表面等离子激元共振生物传感器敏感膜