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大肠癌干细胞相关分子Nrip2功能及其关键靶蛋白研究

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大肠癌干细胞相关分子Nrip2功能及其关键靶蛋白研究

作者：陶海英浙江大学

学位级别：硕士

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在西方国家占肿瘤相关死因的第三位。近年来大肠癌发病率和死亡率在我国均呈上升趋势,但大肠癌的发病机制有待阐明。已有研究表明大肠癌中存在大肠肿瘤干细胞,它可能是大肠癌发生发展的根源。我们先前... 详细信息

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在西方国家占肿瘤相关死因的第三位。近年来大肠癌发病率和死亡率在我国均呈上升趋势,但大肠癌的发病机制有待阐明。已有研究表明大肠癌中存在大肠肿瘤干细胞,它可能是大肠癌发生发展的根源。我们先前的研究中发现了一个新的分子—Nrip2,它在CD133+大肠癌细胞中出现了显著“沉默”,重新表达Nrip2显著抑制CD133+大肠癌细胞在NOD/SCID鼠的成瘤性,提示沉默Nrip2是促进大肠癌干细胞致瘤性新的分子机制。Nrip2可能是靶向抑制大肠癌干细胞治疗的一个新的潜在靶点。然而目前对Nrip2作用分子机制尚不明了。实验目的：本研究拟在先前研究基础上,研究Nrip2分子功能及参与调控Nrip2的细胞信息通路,鉴定Nrip2相互作用蛋白,为今后研制新的针对肿瘤干细胞低毒性分子靶向药物打下基础。实验方法：1.细胞定位：构建Brip2-pEGFP-C1重组质粒,转染到细胞后在共聚焦显微镜下观察Nrip2在细胞中的定位。2.磷酸化位点与定点突变：利用生物信息学预测Nrip2磷酸化位点,建立高表达Nrip2的稳定细胞系,用Western blot验证磷酸化位点,并进行定点突变改变磷酸化位点的氨基酸,观察突变体Nrip2在细胞中的定位有无改变。3.检测Wnt通路：为了研究Nrip2及其突变体与Wnt信号的关系,用双荧光报告基因方法检测野生型和突变体Nrip2对β-Catenin活性的影响。4.成瘤实验：通过高表达Nrip2后观察Nrip2对动物成瘤实验的影响。5.免疫共沉淀：将Nrip2-pEGFP-C1重组质粒瞬时转染293T细胞,通过免疫共沉淀的方法将与Nrip2相互作用的蛋白沉淀下来,再通过SDS-PAGE染色后串联质谱预测蛋白及随机抗体筛选法鉴定出与Nrip2相互作用蛋白。实验结果：***2主要分布于细胞质、细胞核,部分分布于溶酶体。***2的S34和T152分别能被Akt和PKA激酶磷酸化,提示Nrip2功能可能受Akt和PKA激酶调节,改变磷酸化位点的氨基酸S34A及T152A对细胞定位无明显影响。3.野生型Nrip2和S34A突变体可不同程度的抑制β-Catenin活性,而T152A突变体对β-Catenin活性无明显影响。4.高表达Nrip2能抑制SW620细胞的致瘤性。5.筛选出HSP73,PKM2,FZD1为Nrip2相互作用蛋白。结论：1.野生型Nrip2和S34A及T152A突变体均主要分布于细胞质、细胞核,部分分布于溶酶体。***2的S34和T152分别能被Akt和PKA激酶磷酸化。***2具有肿瘤抑制基因的功能。***73、PKM2、FZD1为Nrip2的靶蛋白。***2可能通过Wnt通路对大肠癌的发生发展进行调控。

关键词：大肠癌干细胞 Nrip2 分子机制

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论劳资关系中商业秘密的法律保护

论劳资关系中商业秘密的法律保护

作者：陶海英华东政法学院

学位级别：硕士

商业秘密是经营者的财富,更是可以使其在市场竞争中取得优势的一项重要的无形资产。在智力成果日益商品化、产业化及网络传输高速发展的今天,商业秘密已成为整个国际社会日益关注和重视的问题。在我国商业秘密侵权纠纷大幅增长及商业秘... 详细信息

商业秘密是经营者的财富,更是可以使其在市场竞争中取得优势的一项重要的无形资产。在智力成果日益商品化、产业化及网络传输高速发展的今天,商业秘密已成为整个国际社会日益关注和重视的问题。在我国商业秘密侵权纠纷大幅增长及商业秘密法律保护相对薄弱的背景下,本文旨在通过分析劳资关系中商业秘密保护的特殊性,平衡协调不同利益,从而提出适当的、行之有效的保护方法。本论文主要包括四部分内容: 第一部分从商业秘密和劳资关系的概念和特征入手,分析了商业秘密保护和劳资关系法律调整的理念冲突(即保护雇主利益与职工利益的冲突)。该部分是劳资关系中商业秘密的法律保护的理论基础,是全文的基石。对劳资关系中的商业秘密进行保护法律保护,就要讨论劳资关系中所产生的商业秘密归谁所有,讨论商业秘密归谁所有之前,必须讨论谁可以成为商业秘密的主体。第二部分即从讨论商业秘密的主体入手,分析了劳资关系中商业秘密的权利归属的复杂问题。这是对商业秘密进行保护前提。第三部分主要阐述劳资关系中商业秘密的二种法律保护形式,即合同法保护和侵权法保护。共分四小节,第一小节提出了在适用合同保护时应注意的两个问题;第二小节介绍了商业秘密的保密合同保护:第三小节介绍了商业秘密的竞业禁止合同保护;第四小节简要分析了劳资关系中侵权法保护的运用。第四部分对侵权法保护与合同保护竞合的情形进行简要分析说明。

关键词：劳资关系商业秘密保护竞业禁止

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从国际法角度看国家流失档案的收回问题

浙江档案 2009年第5期 44-45页

作者：白龙陶海英浙江工业大学法学院浙江金道律师事务所

档案是一个国家和民族珍贵的历史文化遗产,承载着文化完整的使命,对国家的发展起着重要的作用。但是,由于战争的原因,我国档案流失情况比较严重。一、我国国家档案的流失现状

关键词：档案联合国教科文组织二战联合国教育、科学及文化组织联合国专门机构文化财产国际法

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我国在建建筑物抵押制度研究

我国在建建筑物抵押制度研究

作者：陶海英河南大学

学位级别：硕士

随着我国社会主义现代化建设的不断深入，市场经济高速发展，整个市场对资金的需求日益增强，在市场经济中起着重要作用的担保物权也随着不断发展和完善。其中，抵押权制度作为“担保王国”中一项举足轻重的制度，既能保障市场交易的安... 详细信息

随着我国社会主义现代化建设的不断深入，市场经济高速发展，整个市场对资金的需求日益增强，在市场经济中起着重要作用的担保物权也随着不断发展和完善。其中，抵押权制度作为“担保王国”中一项举足轻重的制度，既能保障市场交易的安全，又能充分发挥物的使用价值和交换价值。不动产抵押在担保中扮演着越来越重要的角色。房地产作为不动产的主要方式，更是最为常见的担保物。在此背景下，在建建筑物抵押则是对民法传统抵押制度的突破和创新，是对民法传统抵押制度的又一大发展，因其自身所具备的独特优势，能够较好实现物尽其用，满足房地产开发商投资建设所需资金的实际需求，因此在建建筑物抵押在社会实践中的应用也呈现出广泛化的趋势。然而由于我国房地产抵押发展还不完善，以及在建建筑物抵押本身所具有的特殊性及理论研究上存在不足等问题，在建建筑物抵押还存在着理论和实践中的一些不科学、不完善之处。如何较好的解决我国在建建筑物抵押中所存在的法律问题,完善我国在建建筑物抵押制度，仍是一个值得研究的命题。研究我国在建建筑物抵押制度，首先要对在建建筑物及其法律性质进行界定，这也是解决在建建筑物抵押法律问题的基础和前提;其次，对在建建筑物抵押进行界定，并分析在建建筑物抵押与一般抵押的区别;最后，阐述在建建筑物抵押的必要性及可行性。《物权法》第180条明确规定在建建筑物可以抵押，但在建建筑物抵押如何设立，在设立中如何认定抵押标的物的价值，各地做法不一。实践中，存在有少数房地产开发商利用在建建筑物抵押价值构成上的模糊不清，投入少，向债权人提供了在建建筑物抵押后，形成烂尾楼，从而影响了相关权利人的合法权益。从我国现有立法对在建建筑物抵押标的物价值认定的规定出发，找出其可能存在的问题，笔者也提出了自己的拙见：（1）加快完善我国在建建筑物抵押登记制度：明确在建建筑物抵押登记的性质，建立房地产统一登记制度，建立健全安全便捷的登记信息公开查询制度;（2）不断完善评估立法，加强评估监管：在《资产评估法》的立法过程中，应明确房地产价值评估的监管权，将权力集中，统一行使，以期更好实现对在建建筑物抵押标的物的价值认定。关于在建建筑物抵押登记，尽管我国《物权法》第87条明确规定在建建筑物抵押权自登记时设立，国内很多学者仍主张在建建筑物抵押登记仅是预告登记，登记时并不当然产生在建建筑物抵押权，只有在建筑物完工以后抵押权才能成立。从《物权法》的角度而言，我国在立法上采取的是登记生效主义，即在建建筑物抵押权以登记为其生效要件，在建建筑物抵押权自登记时设立。我国现行法律尚没有对在建建筑物抵押登记作出统一的规定，只是分散地规定在抵押相关法规中，但在建建筑物抵押登记中仍存在有登记性质尚未定论、现行不动产抵押登记制度不能完全适用于在建建筑物抵押登记、缺乏统一的抵押登记部门、“抵押合同中记载”的抵押登记模式无法起到公示作用等问题，针对上述问题，笔者主要从三个方面对其提出了完善建议：（1）明确在建建筑物抵押登记性质：在建建筑物抵押登记的性质是本登记，而非预告登记;（2）建立房地产统一登记制度：从登记的效率出发，可以考虑将现行立法对在建建筑物抵押登记办法取消，收回房屋管理部门对其登记的职权，只在“土地使用权抵押登记”的基础上稍作调整，就成为一种新的在建建筑物抵押登记办法;（3）建立健全安全便捷的登记信息公开查询制度：包括全社会范围内的自然人和法人都可以申请查询登记资料，且申请人可查询的信息内容也不应再受限制，其可申请查询不动产登记的全部资料。抵押权制度属于物权的范畴，物权制度本身的价值在于最大限度地发挥物的效用，在使其利用，而非使其所有。因此，为彰显物尽其用的效用，从理论和立法上均不排斥重复抵押和再抵押。由于房屋抵押登记机关和土地使用权抵押登记机关的不统一，实务中在建建筑物抵押权与预售商品房抵押权、建设用地使用权抵押权、建设工程价款优先受偿权、商品房预购人期待权的冲突时有发生。《物权法》关于不动产抵押权的设立采用登记生效主义，因此实务中不存在未经登记的不动产抵押权。在解决在建建筑物抵押权与相关权利发生冲突时，主要采用在同一建筑物上“设立数个抵押权之间的优先受偿顺序，其规则是按照登记的先后顺序确立抵押权的优先受偿顺序——登记在先者优先于登记在后者”。要切实领会《物权法》的精神，来解决在建建筑物抵押中存在的问题。

关键词：在建建筑物在建建筑物抵押登记权利冲突及解决

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刺参内脏蛋白酶解液抗氧化活性研究

食品研究与开发 2015年第11期36卷 58-61页

作者：陶海英闫鸣艳尹利端山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100 中国科学院烟台海岸带研究所山东烟台264003 烟台新时代健康产业有限公司山东烟台264006

采用小鼠D-半乳糖致衰老模型,通过测定小鼠肝脏和心脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,进一步研究了刺参内脏蛋白酶解物酶解物的抗氧化活性。表明灌胃200 mg/kg·d酶解物可明显提高小鼠肝脏... 详细信息

采用小鼠D-半乳糖致衰老模型,通过测定小鼠肝脏和心脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,进一步研究了刺参内脏蛋白酶解物酶解物的抗氧化活性。表明灌胃200 mg/kg·d酶解物可明显提高小鼠肝脏和心脏中SOD和GSH-Px活力,并显著降低MDA含量。说明刺参内脏蛋白酶解物在一定程度上能够提高D-半乳糖模型衰老小鼠的抗氧化能力。

关键词：刺参内脏酶解液抗氧化活性

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高中数学高效课堂构建策略探析

中国科技经济新闻数据库教育 2022年第2期 61-63页

作者：陶海英重庆市奉节永安中学校重庆404600

如今,在提倡学生全面发展教育的同时,课堂效率的提升也尤为重要。对于高中生来说,高效课堂的高级不仅对他们学习成绩的提高非常有帮助,更能促进他们的学习积极性。而众所周知,高中生要学的科目很多,学习压力很大,而每门课一节课仅需40分... 详细信息

如今,在提倡学生全面发展教育的同时,课堂效率的提升也尤为重要。对于高中生来说,高效课堂的高级不仅对他们学习成绩的提高非常有帮助,更能促进他们的学习积极性。而众所周知,高中生要学的科目很多,学习压力很大,而每门课一节课仅需40分钟,学习时间不长。因此,学生如何才能有效地吸收老师在课堂上教的东西,才不会让学生在课堂上感到迷茫,这就需要老师改变以往的教学方式,才能最大限度地提高课堂教学的效率。

关键词：高中数学课堂教学效率对策探讨

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对我国药品管理目标的思考

中国药房 2007年第28期18卷 2165-2167页

作者：孙利华陶海英刘琰沈阳药科大学工商管理学院沈阳市110016 新疆西域药业有限公司乌鲁木齐市830011 东北制药总厂沈阳市110026

目的:为明确我国药品管理目标提供参考,促进我国药品管理效益和水平的提高。方法:运用系统观点和方法,对我国药品管理的应然目标进行逻辑推理与分析,并对我国现实的药品管理目标及其存在的问题进行分析。结果与结论:我国药品管理应然目... 详细信息

目的:为明确我国药品管理目标提供参考,促进我国药品管理效益和水平的提高。方法:运用系统观点和方法,对我国药品管理的应然目标进行逻辑推理与分析,并对我国现实的药品管理目标及其存在的问题进行分析。结果与结论:我国药品管理应然目标应是"保证和促进国民用药安全、有效、经济、适当",现实的药品管理目标不够科学、合理。

关键词：药品管理目标系统分析

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复方一枝蒿颗粒的抗炎、抗菌作用和对免疫功能的影响

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中药药理与临床 2007年第2期23卷 64-66页

作者：陶海英孙玉华胡正梅刘发新疆西域药业有限公司乌鲁木齐830011 新疆药物研究所乌鲁木齐830001

目的：研究复方一枝蒿颗粒的抗炎、抗菌和对免疫功能的影响，为其临床治疗风热感冒提供药理学参考。方法：抗炎作用采用毛细血管通透性和角叉菜胶足肿胀试验，对免疫功能的影响采用血清溶血素生成和淋巴细胞培养试验；抗感染作用采用体... 详细信息

目的：研究复方一枝蒿颗粒的抗炎、抗菌和对免疫功能的影响，为其临床治疗风热感冒提供药理学参考。方法：抗炎作用采用毛细血管通透性和角叉菜胶足肿胀试验，对免疫功能的影响采用血清溶血素生成和淋巴细胞培养试验；抗感染作用采用体内外抗菌试验方法。结果：（1）2．0，4．0，8．0g／kg·d连用3天对小鼠腹腔毛细血管通透性的抑制率分别为31．6％，35．4％和54．4％；（2）1．5，3．0，6．0g/kg·d连用7天，对大鼠角叉菜胶足肿胀的抑制率为23．3％-64．9％；（3）小鼠体内抗菌以对肺炎球菌、乙型溶血链球菌作用最强，ED50分别为1259．5mg／kg和1587．4mg／kg，对金黄色葡萄球菌ED50为2103．0mg／kg；（4）在62．5—500p．g／ml浓度范围内促进B淋巴细胞增殖；2．0，4．0，8．0g／kg·d连续ig8天，3个剂量均可促进小鼠血清溶血素的生成；（5）0．8g，1．6g和3．2异／k·d连续ig3天均可使三联疫苗致家兔发热体温降低。结论：复方一枝蒿颗粒有抗炎、抗菌、解热和体液免疫促进作用。

关键词：复方一枝蒿颗粒抗炎抑菌解热体液免疫

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关于农家书屋发展的几点思考

安徽农学通报 2012年第10期18卷 22-22,74页

作者：陶海英长丰县义井乡综合文化站安徽长丰231100

建设好农家书屋对提高农民大众的科学文化素养、丰富农民文化生活,创建和谐社会主义新农村有着深刻的现实意义。但是农家书屋的建设还在起步和探索中,存在许许多多的问题,亟待完善和解决。分析了农家书屋的现状及存在的问题,提出了对农... 详细信息

建设好农家书屋对提高农民大众的科学文化素养、丰富农民文化生活,创建和谐社会主义新农村有着深刻的现实意义。但是农家书屋的建设还在起步和探索中,存在许许多多的问题,亟待完善和解决。分析了农家书屋的现状及存在的问题,提出了对农家书屋发展的几点思考,主要包括:提高认识,党政重视,建立长效管理机制;解决报酬问题,加强管理,建立长效管理机制开展多种形式读书、用书活动等。

关键词：农家书屋现状问题思考

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