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细胞表面展示技术在环境修复方面的研究进展

中国生物工程杂志 2022年第9期42卷 105-115页

作者：黄明珠姚坤宋卓琳张豪刘斌陈雪岚国家淡水鱼加工技术研发专业中心南昌330022 江西师范大学生命科学学院南昌330022

人类社会工业化导致各种有毒物质被排放到环境中造成严重的污染。除了自然降解外,传统的处理方法包括化学转化、物理吸附、离子交换和电化学方法等,但存在二次污染、能源需求高、投资成本高、再生效率低、低浓度废水处理效率低等缺点。... 详细信息

人类社会工业化导致各种有毒物质被排放到环境中造成严重的污染。除了自然降解外,传统的处理方法包括化学转化、物理吸附、离子交换和电化学方法等,但存在二次污染、能源需求高、投资成本高、再生效率低、低浓度废水处理效率低等缺点。细胞表面展示技术是一种通过表面锚定蛋白在细胞表面连接功能肽的新型、高效的生物技术。与细胞内和分泌物表达系统相比,微生物表面展示的蛋白质对有机溶剂、蛋白酶、温度和pH的变化表现出更强的稳定性。通过细胞培养就可以获得固定在细胞表面的蛋白酶,避免了蛋白质纯化、浓缩等繁琐的程序。此外,细胞表面展示技术是良好的单细胞水平突变体文库高通量筛选平台。综述细胞表面展示技术在环境生物修复方面的研究进展,重点介绍该技术的应用和未来发展前景。

关键词：生物修复生物吸附细胞表面展示全细胞催化微生物

赭曲霉毒素A模拟抗原表位及噬菌体展示酶联免疫吸附分析法的建立

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分析化学 2015年第6期43卷 856-861页

作者：王吕熊斯诚邹旭强陈超超邵辉锋陈雪岚江西师范大学功能有机小分子教育部重点实验室生命科学学院南昌大学食品学院

以驴抗鼠二抗包被微孔板,以捕获方式包被抗赭曲霉毒素A（OTA）单克隆抗体,利用噬菌体随机七肽库筛选OTA模拟抗原表位,并以其替代检测抗原,建立了基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析（Phage ELISA）检测OTA的方法。结果表明,筛选获得... 详细信息

以驴抗鼠二抗包被微孔板,以捕获方式包被抗赭曲霉毒素A（OTA）单克隆抗体,利用噬菌体随机七肽库筛选OTA模拟抗原表位,并以其替代检测抗原,建立了基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析（Phage ELISA）检测OTA的方法。结果表明,筛选获得的模拟OTA抗原表位七肽氨基酸序列为GMSWMMA。基于模拟表位噬菌体建立的Phage ELISA方法半数抑制浓度（IC50值）为（0.15±0.02）ng/m L,检测OTA的线性范围为0.03;.50 ng/m L,OTA的检出限为0.03 ng/m L,且Phage ELISA与其它4种常见真菌毒素（黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮）无交叉反应。大米样品OTA加标实验表明,批內加标回收率为97.0%;15.2%,批间加标回收率为107.2%;23.1%,与ELISA试剂盒检测结果比较,无显著性差异。

关键词：赭曲霉毒素A 噬菌体展示肽库模拟表位酶联免疫吸附法

量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测恶性疟原虫

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分析化学 2015年第3期43卷 338-343页

作者：段宏陈雪岚江湖沈骏董胜明熊勇华 Andrew Wang 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室江西师范大学生命科学学院北京金源佳和生物科技有限公司 4. Ocean NanoTech LLC.San Diego CA92126 USA

以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白(Pf)单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,形成试... 详细信息

以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白(Pf)单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,形成试纸条检测线和质控线,建立了免疫层析试纸条定量检测血清中恶性疟原虫的方法。所使用的羧基化量子点荧光微球的荧光强度为单个量子点的2800倍。实验结果表明,该荧光试纸条定量检测血清中恶性疟原虫线性范围为5.8~8010 Parasite/μL,最低灵敏度达到5.8 Parasite/μL,单个样品检测时间只需15 min。加标回收实验显示,试纸条批内回收率为93.0%~111.8%,批间回收率为98.3%~115.1%,且批内、批间的相对标准偏差均小于5%。

关键词：量子点荧光微球免疫层析试纸条恶性疟原虫定量检测

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核心链霉亲和素的原核表达

食品科学 2009年第23期30卷 286-289页

作者：彭福中陈雪岚徐锋熊勇华江西师范大学生命科学学院江西南昌330022 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室江西南昌330047

以链霉菌(Streptomyces avidinii)的基因组为模板通过PCR扩增得到354bp的核心链霉亲和素基因Stv13,并将其与pET22b+、pGEX-4T-1连接构建大肠杆菌表达载体,与P43连接构建枯草芽孢杆菌分泌型表达载体。大肠杆菌表达的核心链霉亲和素Stv13... 详细信息

以链霉菌(Streptomyces avidinii)的基因组为模板通过PCR扩增得到354bp的核心链霉亲和素基因Stv13,并将其与pET22b+、pGEX-4T-1连接构建大肠杆菌表达载体,与P43连接构建枯草芽孢杆菌分泌型表达载体。大肠杆菌表达的核心链霉亲和素Stv13大部分以包涵体的形式存在,而枯草芽孢杆菌则无核心链霉亲和素Stv13分泌表达。

关键词：链霉亲和素核心链霉亲和素大肠杆菌枯草芽孢杆菌

NADPH代谢对氨基酸生物合成影响的研究进展

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食品科学 2014年第19期35卷 280-284页

作者：陈进聪陈雪岚张斌熊勇华南昌大学中德联合研究院江西南昌330047 江西师范大学生命科学学院江西南昌330022

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)是微生物代谢重要的辅助因子,其在微生物体内的含量是限制氨基酸合成代谢的一个重要因素。本文从NADPH的生物代谢,NADPH与微生物发酵产氨基酸的关系,以及N... 详细信息

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)是微生物代谢重要的辅助因子,其在微生物体内的含量是限制氨基酸合成代谢的一个重要因素。本文从NADPH的生物代谢,NADPH与微生物发酵产氨基酸的关系,以及NADPH的代谢调控策略促进氨基酸的生物合成等,进行简要概述,为进一步提高氨基酸产量提供参考。

关键词： NADPH 生物代谢氨基酸发酵策略

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高特异性长双歧杆菌多克隆抗体的制备

中国生物制品学杂志 2010年第2期23卷 182-184,195页

作者：徐锋彭珍万翠香熊勇华赖卫华魏华曾明陈雪岚南昌大学食品科学与技术国家重点实验室南昌330047 中国药品生物制品检定所细菌一室北京100050 江西师范大学生命科学学院南昌330044

目的制备高特异性长双歧杆菌多克隆抗体,为长双歧杆菌的免疫学检测提供参考。方法以破碎的长双歧杆菌细胞碎片为抗原免疫小鼠,制备抗血清;利用偶联相同抗原的磁珠,分离纯化长双歧杆菌多抗,分别采用间接ELISA、SDS-PAGE和点杂交法检测纯... 详细信息

目的制备高特异性长双歧杆菌多克隆抗体,为长双歧杆菌的免疫学检测提供参考。方法以破碎的长双歧杆菌细胞碎片为抗原免疫小鼠,制备抗血清;利用偶联相同抗原的磁珠,分离纯化长双歧杆菌多抗,分别采用间接ELISA、SDS-PAGE和点杂交法检测纯化多抗的效价、纯度和交叉反应性。结果所制备的纯化多抗效价约为1∶1500,回收率约为80%,纯度可达83%。纯化的多抗有效消除了与金黄葡萄球菌的非特异性交叉反应。结论已制备出高特异性的长双歧杆菌多克隆抗体,可用于长双歧杆菌制剂的菌体检测。

关键词：长双歧杆菌多克隆抗体磁珠交叉反应

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以核心价值体系引领大学生 007

云南日报

作者：陈雪岚

为扎实推进高校社会主义核心价值体系建设，引导广大青年学生认真学习和践行社会主义核心价值体系，按照省委的要求，4月中旬至5月底，省委宣传部会同省委高校工委，在全省高校集中开展了社会主义核心价值体系宣讲活动，受到高校师生的...

为扎实推进高校社会主义核心价值体系建设，引导广大青年学生认真学习和践行社会主义核心价值体系，按照省委的要求，4月中旬至5月底，省委宣传部会同省委高校工委，在全省高校集中开展了社会主义核心价值体系宣讲活动，受到高校师生的热烈欢迎，有力地推动了社会主义核心价值?

关键词：

来源： cnki报纸评论

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链霉亲和素在大肠杆菌中的表达

链霉亲和素在大肠杆菌中的表达

proC及putP基因的敲除对钝齿棒杆菌产L-精氨酸生理代谢的影响

华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会

作者：彭福中陈雪岚江西师范大学生命科学学院

以Streptomyces avidinii基因组DNA为模板用PCR扩增获得编码不同长度链霉亲和素的基因stv-13、csa、cnsa,分别连接到pET22b和pET11a中并转化至多种***表达宿主,经筛选获得高效表达菌株BL21(DE3)pLysS(pET11a-cnsa),同时对其诱导表达温...

以Streptomyces avidinii基因组DNA为模板用PCR扩增获得编码不同长度链霉亲和素的基因stv-13、csa、cnsa,分别连接到pET22b和pET11a中并转化至多种***表达宿主,经筛选获得高效表达菌株BL21(DE3)pLysS(pET11a-cnsa),同时对其诱导表达温度、时间、IPTG

关键词：

来源： cnki会议评论

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中国生物工程杂志 2015年第8期35卷 51-58页

作者：万方张斌陈民良陈进聪陈雪岚江西师范大学生命科学学院南昌330022 南昌大学生命科学学院南昌330047

为了选育精氨酸高产菌株,基于谷氨酸棒杆菌的基因组尺度代谢网络模型的指导,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过基因敲除技术构建了pro C和put P敲除菌株。摇瓶发酵结果表明,pro C敲除菌株精氨酸产量达到9.94g... 详细信息

为了选育精氨酸高产菌株,基于谷氨酸棒杆菌的基因组尺度代谢网络模型的指导,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过基因敲除技术构建了pro C和put P敲除菌株。摇瓶发酵结果表明,pro C敲除菌株精氨酸产量达到9.94g/L,较出发菌株提高了15.90%,葡萄糖转化率提高了26.02%。由于其生长受到明显抑制,因此在发酵液中外源添加24mmol/L的脯氨酸,结果发现其精氨酸产量达到12.22g/L,且菌株恢复生长。put P敲除菌株精氨酸产量达到12.23g/L,较出发菌株提高了42.70%,葡萄糖转化率提高了49.31%。以上结果显示,put P的敲除比pro C的敲除更有利于精氨酸的合成,put P的敲除对菌株的生理代谢基本无影响且无需外添加脯氨酸。

关键词：钝齿棒杆菌精氨酸基因组尺度代谢网络模型基因敲除生理代谢