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烟草苯丙氨酸解氨酶基因NtPAL的克隆及功能分析

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中国烟草学报 2024年

作者：许力许永向海英黄海涛米其利陈钰栋蒋佳芮李雪梅高茜云南中烟工业有限责任公司技术中心

【背景和目的】烟草苯丙氨酸解氨酶参与苯丙氨酸代谢途径，不仅跟烟叶香气品质相关，而且对烟草抗病、抗逆等防御功能也有影响。为鉴定苯丙氨酸解氨酶参与烟草抗花叶病途径的基因功能。【方法】采用同源克隆的方法，在栽培烟草红花大金... 详细信息

【背景和目的】烟草苯丙氨酸解氨酶参与苯丙氨酸代谢途径，不仅跟烟叶香气品质相关，而且对烟草抗病、抗逆等防御功能也有影响。为鉴定苯丙氨酸解氨酶参与烟草抗花叶病途径的基因功能。【方法】采用同源克隆的方法，在栽培烟草红花大金元中克隆了苯丙氨酸解氨酶基因NtPAL，利用生物信息学方法分析NtPAL蛋白结构和进化关系。采用CRISPR/cas9基因编辑技术获得NtPAL基因编辑植株PAL-KO，在植株成熟期测定多酚含量和苯丙氨酸解氨酶活性。利用本氏烟草瞬时表达系统，进行NtPAL亚细胞定位分析。【结果】烟草NtPAL基因的全长CDS序列为2016bp，编码一个由671个氨基酸组成的PAL蛋白。NtPAL含有典型的苯丙氨酸解氨酶结构域PLN02457，是一个新的烟草NtPAL基因。亚细胞定位实验表明NtPAL定位在细胞核区域。与对照植株相比，编辑植株PAL-KO对烟草花叶病毒（TMV）的抗性降低，成熟期叶片中新绿原酸、莨菪亭、隐绿原酸、绿原酸及芸香苷等5种多酚含量均显著升高，苯丙氨酸解氨酶活性降低。【结论】烟草NtPAL通过调控多酚含量与苯丙氨酸解氨酶活性响应烟草花叶病抗性。该研究结果为深入阐明NtPAL在烟草抗病性增强和遗传改良方面的潜力奠定了理论基础。

关键词：烟草 NtPAL 亚细胞定位基因功能抗病性

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烟草NtHPL1基因克隆、表达及功能分析

烟草科技 2024年第2期57卷 27-36页

作者：和顺马兰馨陈钰栋武明珠徐馨李泽锋高茜杨军黄平俊王中中国烟草总公司郑州烟草研究院郑州450001 云南中烟工业有限责任公司技术中心昆明市650106 湖南中烟工业有限责任公司技术中心长沙市410007

为探究脂氢过氧化物裂解酶(hydroperoxide lyase,HPL)在烟草抗逆境胁迫中的生物学功能,从普通烟草K326中克隆1个脂氢过氧化物裂解酶基因并命名为NtHPL1,对NtHPL1蛋白进行生物信息学分析,并采用qPCR方法分析NtHPL1基因的相对表达量,通过... 详细信息

为探究脂氢过氧化物裂解酶(hydroperoxide lyase,HPL)在烟草抗逆境胁迫中的生物学功能,从普通烟草K326中克隆1个脂氢过氧化物裂解酶基因并命名为NtHPL1,对NtHPL1蛋白进行生物信息学分析,并采用qPCR方法分析NtHPL1基因的相对表达量,通过创制NtHPL1过表达转基因材料预测NtHPL1基因的抗逆境胁迫功能。结果表明:(1)NtHPL1基因编码区全长1365 bp,编码454个氨基酸;蛋白质结构和系统发育分析结果显示,NtHPL1蛋白属于13-HPL亚家族。(2)NtHPL1基因在烟草根、茎、叶、花和腋芽中均有表达,且花中相对表达量最高;NtHPL1基因在烟草各发育时期烟叶中的相对表达量不同,盛花期最低,成熟期最高;盐和干旱胁迫均能诱导NtHPL1基因表达。(3)盐和干旱胁迫处理后,野生型烟草叶片发黄,但NtHPL1过表达烟草正常生长,且NtHPL1过表达烟草叶片的叶绿素和脯氨酸含量(质量分数)高于野生型烟草,丙二醛含量比野生型烟草低,表明过表达NtHPL1基因可提高烟草对盐和干旱胁迫的抗性。

关键词：烟草 NtHPL1基因盐胁迫干旱胁迫功能分析

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烟草糖蛋白家族的全基因组鉴定与分析

分子植物育种 2024年

作者：陈兴云秦莉婷吴辉陈钰栋耿伟博王暖春李军民曹长代杨明峰张丽唐恒山东农业大学植物保护学院山东日照烟草有限公司山东中烟工业有限责任公司

SWEET (Sugars will eventually be exported transporter)家族是一种糖转运蛋白，SWEET家族基因在植物的生长发育、碳水化合物运输、环境适应性等方面具有重要意义。本研究为了更好的了解烟草发育的分子机理，利用生物信息学的方法，... 详细信息

SWEET (Sugars will eventually be exported transporter)家族是一种糖转运蛋白，SWEET家族基因在植物的生长发育、碳水化合物运输、环境适应性等方面具有重要意义。本研究为了更好的了解烟草发育的分子机理，利用生物信息学的方法，在烟草中共鉴定出35个SWEET基因家族成员，并对35个成员的系统发育、蛋白质理化性质、基因结构、保守基序、跨膜结构、启动子的顺式作用元件等进行全基因组的鉴定与系统的分析。通过对35个成员进行系统发育分析，将NtSWEET基因家族分为4个亚家族，预测所有NtSWEET基因编码的蛋白都具有7次跨膜结构域，且NtSWEET基因家族成员间具有高度保守的进化特征。在不同环境胁迫的诱导下，SWEET基因通过参与一系列的生理生化过程来调控植物对逆境的适应反应，推测这些基因在低温胁迫响应中也发挥着重要的作用。本研究结果为今后NtSWEET基因的功能分析提供了一个框架，为利用该基因培育优质、适产、抗逆的烟草品种奠定了基础。

关键词：烟草(Nicotiana tabacum L. 生物信息学 SWEET基因家族环境胁迫

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几种因素对烟草种子萌发的影响

植物学研究 2018年第2期7卷 169-176页

作者：陈钰栋刘文涛陈峰高强张丽侯欣山东农业大学植物保护学院山东泰安山东临沂烟草有限公司费县分公司山东临沂云南省公司烟叶管理处云南昆明山东临沂烟草有限公司沂水县分公司山东临沂

烟草种子萌发受到内因和外因的影响,为探究烟草种子萌发的最适条件,本研究设置了烟草类型、贮藏年限、温度、激素和酸碱对烟草种子发芽的影响试验。结果表明,同一年限不同类型的品种发芽率依次为:雪茄烟 >烤烟 >马里兰烟 >野生烟 >晒烟 ... 详细信息

烟草种子萌发受到内因和外因的影响,为探究烟草种子萌发的最适条件,本研究设置了烟草类型、贮藏年限、温度、激素和酸碱对烟草种子发芽的影响试验。结果表明,同一年限不同类型的品种发芽率依次为:雪茄烟 >烤烟 >马里兰烟 >野生烟 >晒烟 >白肋烟 >香料烟;烟草种子发芽率随贮藏年限的增加而降低;30℃条件下,烟草种子的萌发情况最好;对种子萌发促进作用最大的是质量浓度为20%的PEG浸种48小时,可促进发芽率大幅提高;质量分数为20%的NaOH和质量分数为10%的H2SO4对烟草种子的促进作用是最明显的,分别促进2.67%和3%。

关键词：烟草种子萌发影响因素最佳条件

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烟草卵形家族蛋白的全基因组鉴定与分析

分子植物育种 2022年

作者：秦莉婷陈兴云吴辉陈钰栋耿伟博王暖春李军民曹长代张丽唐恒山东日照烟草公司山东农业大学植物保护学院

卵形家族蛋白是一类具有OVATE结构域的蛋白质，是植物中特有的转录因子，可以编码转录抑制因子，提高植物抗性，调节生长发育等过程。本研究利用生物信息学等手段对烟草OFP (卵形家族蛋白)基因家族进行全基因组鉴定与分析，在烟草中鉴... 详细信息

卵形家族蛋白是一类具有OVATE结构域的蛋白质，是植物中特有的转录因子，可以编码转录抑制因子，提高植物抗性，调节生长发育等过程。本研究利用生物信息学等手段对烟草OFP (卵形家族蛋白)基因家族进行全基因组鉴定与分析，在烟草中鉴定出了43个OFP基因家族成员。系统发育分析表明，43个OFP具有较高的同源性；保守基序和基因结构分析表明，OFP大多含有两个以上的保守基序，基因结构具有相似性；理化性质及亚细胞定位结果表明，OFP家族成员编码的蛋白多为亲水性且多位于细胞核、线粒体、内质网、叶绿体等；顺式作用元件预测分析表明，烟草中OFP可能在烟草的生长发育、抵御逆境胁迫和激素调节等方面发挥着重要作用。基于此研究，我们可以进一步研究OFP具体功能，为烟草抗性提高提供新思路。

关键词： OFP基因家族全基因组烟草逆境胁迫

含隐式哈密顿函数随机振动系统概率密度的两步数据驱动辨识

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Acta Mechanica Sinica 2024年第5期40卷 150-160页

作者：陈钰瑛王神龙焦古月 School of Mechanical Engineering University of Shanghai for Science and Technology Shanghai China

更非线性随机振动是一种常见现象,预测其概率密度是振动工程的重要组成部分.本文提出了一种数据驱动的方法,用于识别具有隐式哈密顿函数的随机振动系统中响应概率密度的显式表达式.该过程包括两个步骤,一是识别哈密顿函数,二是计算稳态... 详细信息

更非线性随机振动是一种常见现象,预测其概率密度是振动工程的重要组成部分.本文提出了一种数据驱动的方法,用于识别具有隐式哈密顿函数的随机振动系统中响应概率密度的显式表达式.该过程包括两个步骤,一是识别哈密顿函数,二是计算稳态响应的概率密度,前者利用拟哈密顿系统的运动微分方程,从模拟数据中识别出哈密顿函数;后者则从识别出的哈密顿函数估计出概率密度的对数,并获取显式表达式.它们的未知系数可通过求解一组待定方程得到.该方法适用于不能简单导出哈密顿函数的系统,如具有复杂刚度的系统.本文给出了两个例子以证明我们提出方法的适用性和有效性,即非线性振动能量采集器和具有LuGre摩擦的杜芬振子。结果表明,我们所提出的方法在效率上优于蒙特卡罗模拟,对参数变化不敏感,可以用于瞬态概率密度分析,且其应用范围比随机平均法更广.

关键词：哈密顿函数概率密度显式表达式非线性随机振动随机平均法蒙特卡罗模拟拟哈密顿系统未知系数

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论钱锺书训“译”的“虚涵数意”

中国翻译 2024年第5期45卷 118-125页

作者：余承法陈钰曦湖南师范大学

钱锺书在《林的翻译》中对“译”训话,揭示“译”“诱”“媒”“讹”“化”之间“一脉通连、彼此呼应的意义”,提出影响深远的“化境论”,引发译学界竞相说“译”解“化”。有人指出钱氏训话依据不足、偷换概念、引发误解,这种追根溯源... 详细信息

钱锺书在《林的翻译》中对“译”训话,揭示“译”“诱”“媒”“讹”“化”之间“一脉通连、彼此呼应的意义”,提出影响深远的“化境论”,引发译学界竞相说“译”解“化”。有人指出钱氏训话依据不足、偷换概念、引发误解,这种追根溯源的解读值得称道,但存在诠释不当、概括不准、推衍不周之嫌。本文采取以钱解钱、一字数训、阐释循环,探查钱氏训“译”之源,分析其“虚涵数意”表现在“传”“驿”“择”“易”,分别对应“诱”“媒”“讹”“化”,论证各字之间以“译”贯穿“一脉通连”,以“化”实现“彼此呼应”。这种诠释表明,“化境论”等中国传统译论渊源有自、富有阐释能量,但需要深挖细究并进行创造性转化和创新性发展。

关键词：钱锺书训话译诱媒讹化

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推进乡村振兴的税收政策:现状、问题与对策

税务研究 2024年第6期 137-140页

作者：陈钰莹北京交通大学经济管理学院

现行税收政策从促进农业发展和农村一二三产业融合发展、促进农村人居环境改善和农村生态环境优化、减轻农民税负和促进农民就业创业等多个方面,积极推进乡村全面振兴,但仍存在税收激励不足、税收作用有待加强和相关优惠政策有待完善等... 详细信息

现行税收政策从促进农业发展和农村一二三产业融合发展、促进农村人居环境改善和农村生态环境优化、减轻农民税负和促进农民就业创业等多个方面,积极推进乡村全面振兴,但仍存在税收激励不足、税收作用有待加强和相关优惠政策有待完善等问题,未来需要从完善税收政策、实现农业高质高效,发挥税收调节作用、实现乡村宜居宜业,增强税收激励作用、实现农民富裕富足三方面加以改进,加力推进乡村振兴。

关键词：乡村振兴税收政策产业融合税收优惠

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PCR技术联合液体培养在结核分枝杆菌感染中的临床应用研究

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PCR技术联合液体培养在结核分枝杆菌感染中的临床应用研究

作者：陈钰大理大学

学位级别：硕士