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传染性法氏囊病的流行特点与防控措施

畜牧业环境 2024年第6期 65-66页

作者：陈绍品张雷文世兴贵州省毕节市七星关区动物疫病预防控制中心贵州毕节551700

传染性法氏囊病是由传染性法氏囊炎病毒(IBDV)引起的一种高度传染性疾病,主要影响鸡的免疫系统,导致严重的经济损失。本文综述了传染性法氏囊炎的病原学特征、临床症状、病理变化、诊断方法及防控技术。通过对该病的深入研究,旨在为养... 详细信息

传染性法氏囊病是由传染性法氏囊炎病毒(IBDV)引起的一种高度传染性疾病,主要影响鸡的免疫系统,导致严重的经济损失。本文综述了传染性法氏囊炎的病原学特征、临床症状、病理变化、诊断方法及防控技术。通过对该病的深入研究,旨在为养殖业提供科学的防控策略,以减少传染性法氏囊炎带来的负面影响。

关键词：传染性法氏囊病 IBDV 病原学临床症状防控措施

P-Body组件蛋白DCP2、LSm1与PRRSV作用机理初探

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P-Body组件蛋白DCP2、LSm1与PRRSV作用机理初探

作者：陈绍品贵州大学

学位级别：硕士

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是一种高度变异及传染的单股正链RNA病毒,目前还没有得到有效的控制,给世界养猪业带来极大的损失。m RNA处理小体(processing bodies,P-Body)是细... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是一种高度变异及传染的单股正链RNA病毒,目前还没有得到有效的控制,给世界养猪业带来极大的损失。m RNA处理小体(processing bodies,P-Body)是细胞质内参与基因转录后调控的m RNA-蛋白质复合体,是不具有包膜的亚细胞结构。主要参与细胞的翻译抑制、RNA介导的基因沉默、m RNA降解等重要生命活动。P-body的装配能够影响病毒在细胞内的复制,同时病毒的复制又反过来影响P-body的装配。LSm1及DCP2定位于P-body中,是P-body的标志性蛋白,能够影响许多病毒的复制。为了探索PRRSV复制过程中与宿主P-body的相互作用关系,本研究运用分子生物学、基因工程、细胞生物学等实验技术,获取PRRSV核衣壳蛋白N、P-Body标志蛋白DCP2、LSm1基因序列,对其核苷酸序列与编码的氨基酸序列进行分析,构建携带N、DCP2、LSm1基因的原核表达质粒,诱导表达后纯化,免疫兔子制备高免血清。并从基因转录水平初步探索PRRSV复制过程中对宿主DCP2、LSm1的影响。*** N基因的扩增及其编码蛋白高免血清的制备。PCR扩增出N基因编码区全长后,将其连接到p Cold I原核表达质粒上,得到重组质粒p Cold I-N。序列测定显示N基因核苷酸序列长度为372 bp。序列分析结果显示,PRRSV分离株E11105与北美洲型代表株VR-2332、欧洲型代表株Lelystad virus(LV)、中国2006年暴发的高致病性PRRSV代表株JXA1、中国代表株CH-1a核苷酸序列同源性分别为93.3%、34.7%、99.2%、95.4%,氨基酸序列同源性分别为94.4%、15.3%、94.4%、99.2%,表明E11105毒株属于美洲型PRRSV,与中国高致病性PRRSV亲缘关系较近;预测N蛋白不具有信号肽,为非分泌蛋白,存在5个B细胞优势抗原表位。诱导表达重组N蛋白分子量约为16.7 k D,主要以不可溶性蛋白形式存在,但也存在可溶性蛋白。重组N蛋白纯化后免疫兔子,成功获得了针对N蛋白的高免血清。且针对可溶性N蛋白的兔源高免血清效价较高,为1:12800,而针不可溶性重组N蛋白的兔源高免血清效价仅为1:3200。试验结果为研究PRRSV N蛋白的功能特性及PRRSV致病机理奠定了基础。2.P-Body组件蛋白DCP2基因的扩增及高免血清的制备。利用PCR技术扩增出DCP2之后,将其连接到克隆质粒上进行测序,结果显示获得了DCP2基因两种转录变异体编码区全长,分别为转录变异体X1、X2,长度为1263 bp和1158 bp,DCP2转录变异体X1编码的氨基酸序列比X2编码的氨基酸序列在从第314个氨基酸至第349个氨基酸的位置多出36个氨基酸,其他地方完全一致。选取较长的转录变异体X1进行生物信息学分析,结果表明,DCP2转录变异体X1基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列在不同哺乳动物中的相似性较高,在94%以上,具有较高的保守性。预测Marc145细胞源DCP2转录变异体X1蛋白不具有跨膜结构和信号肽,是非分泌蛋白,具有良好的优势抗原表位。将DCP2转录变异体X1基因连接到p Cold I原核表达载体上,诱导表达的原核重组蛋白为不可溶性蛋白,纯化后免疫兔子,成功获得了针对DCP2转录变异体X1蛋白的兔源高免血清,效价为1:6400,试验结果为进一步研究DCP2的功能及其在病毒复制中作用的机制奠定了坚实基础。3.P-Body组件蛋白LSm1基因的扩增及原核表达质粒的构建。经过巢式PCR两轮的扩增后,成功得到了Marc145细胞源LSm1基因编码区全长,将其连接到p Cold I原核表达载体上,测序结果显示其长度为402 bp,编码133个氨基酸。其核苷酸序列与人类、灵长类相似性较高,其次是海洋哺乳动物类,最后是陆地野生动物及家畜,相似性为92.8%-99.8%,而其编码的氨基酸虽没有此规律,但氨基酸序列相似性都较高,相似性为97.8%-99.3%。预测此LSm1蛋白无跨膜区域,无信号肽区域,为非分泌蛋白,存在4个B细胞优势抗原表位。携带LSm1基因的重组原核表达质粒诱导结果显示,没有表达重组LSm1蛋白。研究结果表明LSm1蛋白在细胞内转录及表达水平可能较低,细胞c DNA须通过巢式PCR扩增两轮才能出现目的条带,LSm1重组表达蛋白不在本研究的表达系统中表达,需考虑通过更换表达系统、截短表达、融合表达等方法获得高浓度的LSm1重组原核表达蛋白。本试验为LSm1基因的扩增提供了参考,为获得LSm1人工表达蛋白与针对LSm1蛋白的特异性抗体,以及在细胞水平研究LS

关键词： LSM1 DCP2 P-Body PRRSV 原核表达巢式PCR

浅谈川续断的药理作用及其在养猪生产中的应用前景

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养猪 2023年第3期 29-32页

作者：张雷文世兴陈绍品贵州省毕节市七星关区农业农村局贵州毕节551700

川续断是我国传统中药材之一,其性微温,味苦辛,归肝、肾经,有补肝肾、强筋骨、调血脉、生肌止痛和安胎等功效。本文对川续断的作用进行了综述,发现随着人们对该中药的化学成分和药理作用研究不断深入,在养猪生产开发利用方面具有重大意... 详细信息

川续断是我国传统中药材之一,其性微温,味苦辛,归肝、肾经,有补肝肾、强筋骨、调血脉、生肌止痛和安胎等功效。本文对川续断的作用进行了综述,发现随着人们对该中药的化学成分和药理作用研究不断深入,在养猪生产开发利用方面具有重大意义,前景广阔。

关键词：川续断药理作用养猪生产应用

基于倒毛鸡LSm14A分子序列分析的原核表达与免疫原性分析

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畜牧兽医学报 2016年第7期47卷 1511-1516页

作者：伍昌华陈绍品温贵兰李晨李天珍林汉卿管国丹王开功文明龚新勇贵州大学动物科学学院预防兽医学实验室贵阳550025

旨在探明倒毛鸡LSm14A分子序列特征与免疫原性。通过提取倒毛鸡肝总RNA,经RT-PCR分别扩增倒毛鸡LSm14A全长CDS区与原核表达片段;采用分子生物学技术构建携带倒毛鸡LSm14分子的原核表达质粒;经IPTG诱导表达、His-tag镍柱纯化表达的重组... 详细信息

旨在探明倒毛鸡LSm14A分子序列特征与免疫原性。通过提取倒毛鸡肝总RNA,经RT-PCR分别扩增倒毛鸡LSm14A全长CDS区与原核表达片段;采用分子生物学技术构建携带倒毛鸡LSm14分子的原核表达质粒;经IPTG诱导表达、His-tag镍柱纯化表达的重组蛋白质;纯化重组蛋白质rHis-cLSm14A分别免疫小鼠与兔制备相应的多克隆抗体;采用间接ELISA与Western blotting方法分析表达蛋白质的免疫原性。结果显示:倒毛鸡LSm14A全长CDS为1 386bp,与原鸡源LSm14A相似性达100%,与鸭源的LSm14A相似性为95.1%;与鼠、爪蟾、猴、人、猪、鹅源的LSm14A相似性相对较低;鼠源、兔源抗cLSm14A多克隆抗体ELISA效价均高于1∶3 200;Western blotting结果显示,重组表达蛋白质分别被His抗体、鼠源与兔源抗cLSm14A多克隆抗体所识别,蛋白质条带大小约为19.6ku。以上结果说明倒毛鸡源LSm14A分子具有较高的保守性与良好的免疫原性,研究结果为研究倒毛鸡的生物学特性与宿主的抗病毒天然免疫机制奠定了基础。

关键词：倒毛鸡 cLSm14A 免疫原性

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从江香猪源干扰素α2基因的克隆与序列分析

动物医学进展 2018年第12期39卷 54-60页

作者：温贵兰陈绍品张升波林汉卿赵德刚贵州大学农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州大学动物科学学院预防兽医实验室贵州贵阳550025 贵州省农业科学院贵州贵阳550006

选取我国珍稀物种贵州从江香猪作为研究对象,提取贵州从江香猪肝脏组织总RNA,反转录生成cDNA,采用特异性引物扩增从江香猪的IFN-α2(CJ-poIFN-α2)基因编码区,克隆至pUCm-T载体后送上海英骏公司测序,并用生物学软件对CJ-poIFN-α2基因... 详细信息

选取我国珍稀物种贵州从江香猪作为研究对象,提取贵州从江香猪肝脏组织总RNA,反转录生成cDNA,采用特异性引物扩增从江香猪的IFN-α2(CJ-poIFN-α2)基因编码区,克隆至pUCm-T载体后送上海英骏公司测序,并用生物学软件对CJ-poIFN-α2基因进行序列分析。测序结果显示,从江香猪IFN-α2编码区长为546bp;序列比对结果表明CJ-poIFN-α2与猪源IFN-α2核苷酸序列同源性最高,为98.7%,遗传进化树结果也显示两者在同一分支上,说明两者遗传关系较近;在线服务器软件分析结果显示,CJ-poIFN-α2二级结构主要以α-螺旋、无规则卷曲为主,23-24aa位点预测为信号肽酶切位点;CJ-poIFN-α2基因编码蛋白B细胞表位主要位于46-48aa、56-58aa、70-73aa、155-159aa、175-178aa。试验结果为进一步研究干扰素的生物学活性、加快从江香猪的资源开发与利用奠定基础。

关键词：从江香猪 IFN-α2 基因克隆序列分析

贵州某鸡场一株鸡源金黄色葡萄球菌的分离鉴定

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贵州某鸡场一株鸡源金黄色葡萄球菌的分离鉴定

一株副鸡嗜血杆菌的分离鉴定和16S rRNA序列分析

中国畜牧兽医学会2016年学术年会、中国畜牧兽医学会禽病学分会第十八次学术研讨会

作者：管国丹温贵兰李晨陈绍品林汉卿贵州大学动物科学学院

引言葡萄球菌病主要是由金黄色葡萄球菌引起的鸡和其他鸟类的各种疾病总称,是侵害家禽、哺乳动物和人的一种急性或慢性细菌性疾病。鸡葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌引起的雏鸡传染病。在临床上主要引起禽类腱鞘、关节和滑液囊局部化脓... 详细信息

引言葡萄球菌病主要是由金黄色葡萄球菌引起的鸡和其他鸟类的各种疾病总称,是侵害家禽、哺乳动物和人的一种急性或慢性细菌性疾病。鸡葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌引起的雏鸡传染病。在临床上主要引起禽类腱鞘、关节和滑液囊局部化脓、创伤感染、败血症、脐炎和细菌性心内膜炎。表现化为脓性关节炎,皮炎,常呈急性败血症,治宜抗菌消炎。本试验通过对病鸡进行剖检,分离培养得到一株细菌,对细菌进行生理生化特性鉴定、药敏试验,并利用PCR技术对分离菌株进行扩增,经序列测定获得该分离菌序列并对获得的序列进行比对分析。最后进行动物感染试验。试验将对金黄色葡萄球菌的研究奠定一定的科学理论基础。

关键词：鸡源金黄色葡萄球菌动物感染试验科赫法则分离鉴定

来源： cnki会议评论

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一株副鸡嗜血杆菌的分离鉴定和16S rRNA序列分析

贵州某鸡场一株卡氏杆菌的分离与16S rDNA基因的分析鉴定

中国畜牧兽医学会2017年学术年会

作者：林汉卿汪德生陈绍品管国丹张升波徐丽贵州大学动物科学学院

引言副鸡嗜血杆菌是鸡传染性鼻炎的病原,该菌常引起鸡发生颜面肿胀、流鼻涕、呼吸困难和结膜炎等症状,还可使蛋鸡产蛋量下降,肉鸡生长受阻、肉质下降,死亡率及淘汰率增高。De Blieck于1931年首次分离到了该菌,冯文达于1987年首先在我国...

引言副鸡嗜血杆菌是鸡传染性鼻炎的病原,该菌常引起鸡发生颜面肿胀、流鼻涕、呼吸困难和结膜炎等症状,还可使蛋鸡产蛋量下降,肉鸡生长受阻、肉质下降,死亡率及淘汰率增高。De Blieck于1931年首次分离到了该菌,冯文达于1987年首先在我国分离到一株细菌。副鸡嗜血杆菌是革兰氏阴性球杆菌,无芽抱,无鞭毛,新分离的致病菌部分有荚膜。按照新Kume分类原则,副鸡嗜血杆菌包括A、B、C三个血清群9个血清型,其中A群和C群各有4个血清型,B群有1个血清型,目前我国主要流行的血清型为A型。贵州一规模化土鸡养殖场发生了一种以面部肿胀、流鼻涕为主要症状的传染性疾病,通过细菌分离、形态学观察、生化鉴定和16S RNA基因序列分析,鉴定该鸡场的鸡感染了C型副鸡嗜血杆菌。实验结果可为副鸡嗜血杆菌的防治提供参考。

关键词：

来源： cnki会议评论

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贵州某鸡场一株卡氏杆菌的分离与16S rDNA基因的分析鉴定

中国畜牧兽医学会2017年学术年会

作者：张升波温贵兰陈绍品管国丹林汉卿李昌红徐丽贵州大学动物科学学院

引言禽卡氏杆菌病是由卡氏杆菌引起的危害蛋鸡鸡群重要的传染病之一,临床上常以输卵管囊肿和卵巢炎等为主要特征。1950年,Hansen首次发现卡氏杆菌,1960年被定为溶血性巴氏杆菌,Christensen等2003年以该细菌的微生物学和分子生物学特征...

引言禽卡氏杆菌病是由卡氏杆菌引起的危害蛋鸡鸡群重要的传染病之一,临床上常以输卵管囊肿和卵巢炎等为主要特征。1950年,Hansen首次发现卡氏杆菌,1960年被定为溶血性巴氏杆菌,Christensen等2003年以该细菌的微生物学和分子生物学特征将鸭巴氏杆菌、输卵管炎放线杆菌和溶血性巴氏杆菌合并,组成巴氏杆菌科的一个新属——卡氏杆菌属,并且将禽卡氏杆菌定为该属的代表种。为探明贵州某白羽蛋鸡养殖场患病鸡的细菌感染情况,本试验对送检发病鸡进行细菌分离培养与16S rDNA基因分析鉴定,最终确定病鸡为卡氏杆菌感染。实验结果为该鸡场禽卡氏杆菌病的防控提供了理论依据。材料与方法

关键词：

来源： cnki会议评论

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甘蔗蓟马防治技术研究及推广应用

中国糖料 2010年第2期32卷 49-54页

作者：杨世常陈寿宏夏银果范新亮张云生陈绍品李翱云南省德宏州甘蔗科学研究所陇川678707 德宏英茂糖业有限公司景罕糖厂陇川678707 陇川县植保植检站陇川678700

针对当地甘蔗蓟马严重发生危害的现状,科研部门与企业合作,采用"公司+科研+农户"的模式,通过调查研究,田间试验,预测预报,技术培训,办中心样板,田间指导,采用农业和化学相结合的方法进行示范推广,总结出了一套行之有效的综合防治技术,... 详细信息

针对当地甘蔗蓟马严重发生危害的现状,科研部门与企业合作,采用"公司+科研+农户"的模式,通过调查研究,田间试验,预测预报,技术培训,办中心样板,田间指导,采用农业和化学相结合的方法进行示范推广,总结出了一套行之有效的综合防治技术,并取得了较好的防治效果。

关键词：甘蔗蓟马防治技术