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DATS对人胃癌SGC-7901细胞中CSCs样细胞的作用及机制初步研究

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DATS对人胃癌SGC-7901细胞中CSCs样细胞的作用及机制初步研究

作者：陈真伟南华大学

学位级别：硕士

目的:现有的理论认为,肿瘤与干细胞密切相关,研究显示肿瘤干细胞(cancer stem cells ,CSCs)在恶性疾病发生发展中起重要作用,且是肿瘤治疗失败的根源。胃癌细胞系中同样也存在着肿瘤干细胞。二烯丙基三硫(diallyl trisulfide, DATS)可... 详细信息

目的:现有的理论认为,肿瘤与干细胞密切相关,研究显示肿瘤干细胞(cancer stem cells ,CSCs)在恶性疾病发生发展中起重要作用,且是肿瘤治疗失败的根源。胃癌细胞系中同样也存在着肿瘤干细胞。二烯丙基三硫(diallyl trisulfide, DATS)可抑制人胃癌细胞生长,但其抗胃癌作用与CSCs的关系不明确。本研究目的是通过筛选人胃癌细胞系SGC-7901细胞中的CD44(+)肿瘤干细胞(CSCs)样细胞,然后分析DATS对胃癌CSCs样细胞的抑制作用及机制,从而为DATS用于临床防治癌症提供理论基础和实验依据。方法: MTT比色法检测DATS对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用;细胞免疫组化和western blot检测DATS处理胃癌SGC-7901细胞后c-FLIP蛋白的表达情况。磁珠分选术(MACS)从胃癌SGC-7901细胞中筛选出人胃癌CD44(+)CSCs样细胞,采用免疫荧光流式细胞术、球状体形成、软琼脂集落形成等实验鉴定胃癌CSCs样细胞,并在倒置显微镜下观察肿瘤干细胞形态。软琼脂集落形成实验观察DATS对胃癌CSCs样细胞增殖能力的抑制作用;流式细胞术检测DATS对人胃癌CSCs样细胞增殖及周期分布的影响。细胞免疫组织化学技术分析DATS诱导人胃癌CSCs样细胞中c-FLIP蛋白表达的改变。结果: 1. MTT结果显示:DATS浓度从6、8、10、12、14、16 mg·L处理人胃癌SGC-7901细胞24h,其吸光值比对照组低,而且随浓度增加逐渐降低(P<0.05);相反,随着浓度增加,DATS处理24h后对癌细胞增殖的抑制率从20.4%、29.4%、32.2%、49.1%、71.3%到79.2%逐渐增强(P<0.05),处理48h后的变化趋势也一样。表明DATS对人胃癌细胞具有明显的生长抑制作用,且呈显著的剂量-效应依赖关系。 2.细胞免疫组化结果显示:c-FLIP蛋白在SGC-7901细胞浆中表达呈强阳性,DATS处理24、48h后,SGC-7901细胞c-FLIP蛋白表达逐渐减弱(P< 0.05);Western blot结果同样显示,与未处理组相比,DATS处理胃癌SGC7901细胞24、48h,使SGC-7901细胞c-FLIP蛋白表达逐渐下调(P< 0.05)。 3.免疫荧光流式细胞术分析结果显示,人胃癌SGC-7901细胞系中只有约2.4%的CD44(+)阳性细胞,经过MACS磁珠分选后,CD44(+)亚群的细胞阳性率可以提高到97.4%。将分选后CD44(+)和CD44(-)细胞接种到无血清培养基中观察球状体的形成,结果发现,CD44(+)细胞形成明显的球状体, CD44(-)细胞不形成球状体(P<0.05)。将分选后CD44(+)和CD44(-)细胞接种到软琼脂中观察集落形成,发现CD44(+)细胞群有强大的增殖能力,形成集落大且数量多,而CD44(-)细胞群集落少且小(P<0.05)。流式细胞分析显示:CD44(+)细胞S期百分率明显高于CD44(-)细胞(P<0.05)。倒置显微镜观察细胞形态发现,CD44(+)组与未分选细胞组、CD44(-)组在形态上并无差异。 4. DATS处理CD44(+)细胞后观察软琼脂集落形成,结果表明,与未处理组CD44(+)细胞相比,处理组CD44(+)细胞所形成的集落要小且数量少(P<0.05)。 5.流式细胞分析显示,10mg·L、20mg·L DATS处理分选后的CD44(+)细胞48h,其S期百分率明显下降,而G2/M期百分率明显高于未处理的CD44(+)细胞(P<0.05)。 6.细胞免疫组化发现, CD44(+)细胞中c-FLIP蛋白表达呈阳性,而DATS处理后c-FLIP蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论: 1.人胃癌细胞SGC-7901中存在CD44阳性CSCs样细胞;2. DATS可抑制CD44阳性人胃癌SGC-7901肿瘤CSCs样细胞的增殖并阻滞细胞于G2/M期;3. c-FLIP蛋白的表达下调可能是DATS抑制人胃癌细胞及其CSCs样细胞增殖作用的分子机制之一。

关键词：胃肿瘤二烯丙基三硫肿瘤干细胞 CD44 c-FLIP

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电子烟相关性肺损伤病理研究现状

临床与实验病理学杂志 2020年第12期36卷 1440-1442页

作者：方三高陈真伟魏建国重庆医科大学附属第三医院(捷尔医院)病理科重庆401120 浙江省金华市中心院病理科金华321000 浙江省绍兴市人民医院病理科绍兴312000

电子烟在一些年轻人中越来越流行,导致电子烟相关性肺损伤(Vaping-associated lung injury/Vaping-associated pulmonary injury,VALI/VAPI)病例激增,已有患者死亡的报道,引起公共卫生机构和大众媒体的关注,但VALI的病理改变国内尚缺乏... 详细信息

电子烟在一些年轻人中越来越流行,导致电子烟相关性肺损伤(Vaping-associated lung injury/Vaping-associated pulmonary injury,VALI/VAPI)病例激增,已有患者死亡的报道,引起公共卫生机构和大众媒体的关注,但VALI的病理改变国内尚缺乏相关资料,该文结合文献就VALI的临床病理研究现状进行综述。

关键词：肺损伤电子烟类脂质肺炎临床病理鉴别诊断文献综述

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WHO(2020)软组织肿瘤分类

临床与实验病理学杂志 2020年第9期36卷 1132-1134页

作者：方三高魏建国陈真伟重庆医科大学附属第三医院(捷尔医院)病理科浙江省绍兴市人民医院病理科浙江省金华市中心院病理科

形态学代码来自肿瘤学国际疾病分类(ICD-O)编码第三版第2次修订。生物学行为编码:0代表良性,1代表不确定、交界性或生物学行为未定,2代表原位癌/上皮内瘤变Ⅲ级,3代表原发恶性,6代表转移(癌症登记者一般不用)。鉴于对一些疾病认识的变化...

形态学代码来自肿瘤学国际疾病分类(ICD-O)编码第三版第2次修订。生物学行为编码:0代表良性,1代表不确定、交界性或生物学行为未定,2代表原位癌/上皮内瘤变Ⅲ级,3代表原发恶性,6代表转移(癌症登记者一般不用)。鉴于对一些疾病认识的变化,对先前的WHO肿瘤组织学分类进行了一些修订;标有星号的ICD-O编码由IARC/WHO编委会于2020年01月批准; NOS.非特殊类型

关键词：

P504s在胰腺实性假乳头瘤和胰腺神经内分泌肿瘤鉴别诊断中的价值

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中华病理学杂志 2015年第5期44卷 320-322页

作者：陈真伟浙江大学附属第一医院病理科

目的探讨P504s在胰腺实性假乳头瘤(sere)和胰腺神经内分泌肿瘤(PanNET)鉴别诊断中的作用。方法收集2007年至2014年确诊的43例sPTP、41例PanNET病例，采用免疫组织化学EnVision方法观察波形蛋白、CD10、嗜铬粒素A、突触素、β-catenin、C... 详细信息

目的探讨P504s在胰腺实性假乳头瘤(sere)和胰腺神经内分泌肿瘤(PanNET)鉴别诊断中的作用。方法收集2007年至2014年确诊的43例sPTP、41例PanNET病例，采用免疫组织化学EnVision方法观察波形蛋白、CD10、嗜铬粒素A、突触素、β-catenin、CD99、P504s等多项免疫组织化学抗体在两组肿瘤中的表达情况，重点阐述P504s的鉴别诊断中的作用。结果波形蛋白、CDl0、嗜铬粒素A、突触素、CD09等免疫标志物在这两组织肿瘤中都有不同程度的表达，P504s在所有SPTP中呈胞质颗粒状阳性表达，所有PanNET肿瘤均不表达P504s。结论P504s对SPTP的诊断具有敏感性，是鉴别SPTP和PanNET一个有价值的免疫标记指标。

关键词：胰腺肿瘤神经内分泌瘤免疫组织化学

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疫情下体育网络课的实践与思考

文体用品与科技 2020年第17期4卷 166-167页

作者：陈真伟王红云四川美术学院重庆401331

2020年初,新型冠状病毒爆发,全国各大、中、小学体育人遵照教育部"停课不停学"的政策,积极应对提出了"停课不停练,停课不停训",开展了各式各样体育课网络授课模式,各地各校均精心开发制作体育线上课程,虽然存在诸多问题,但却是确保停课... 详细信息

2020年初,新型冠状病毒爆发,全国各大、中、小学体育人遵照教育部"停课不停学"的政策,积极应对提出了"停课不停练,停课不停训",开展了各式各样体育课网络授课模式,各地各校均精心开发制作体育线上课程,虽然存在诸多问题,但却是确保停课不停学的最佳方案,也充分地发挥了体育在防控新冠疫情中的作用,取得了非常好的效果。在线实施教学给体育课带来了新的挑战,体育网络课教学怎么上?体育网络课目的和目标是什么?特殊时期使我们不得不对体育教学进行重新思考,重新探索体育网课的教学模式。体育网络课对于老师和学生都是一次崭新教学形式的尝试,转变了学习方式,改变了传统课堂形态,让体育教师拓展了思路。这也为体育课的互联网化提供了一个新的思路。

关键词：疫情停课不停学体育网络课实践思考

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优秀教练员执教高校运动队研究

体育文化导刊 2009年第1期 90-92页

作者：王红云陈真伟四川美术学院重庆400053

运用文献资料法等，对优秀教练员运动员执教高校体育进行研究。研究认为，5～10年的时间内将有更多的优秀教练员运动员到高校执教；对扩大学校的知名度，争创世界和国内一流大学有积极宣传作用；高校正式编制和非正式编制引进的优秀教... 详细信息

运用文献资料法等，对优秀教练员运动员执教高校体育进行研究。研究认为，5～10年的时间内将有更多的优秀教练员运动员到高校执教；对扩大学校的知名度，争创世界和国内一流大学有积极宣传作用；高校正式编制和非正式编制引进的优秀教练员运动员，他们应享受引进特殊人才的相关政策；我国高校体育教师岗位将受优秀教练员运动员的冲击，应有一定的压力。这是积极的、有益的竞争和合作。

关键词：体育教育优秀教练员高校体育

2021年第五版WHO中枢神经系统肿瘤分类

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诊断病理学杂志 2022年第10期29卷 991-992,F0003页

作者：方三高陈真伟魏建国上海金域医学检验所有限公司病理科上海200120 浙江大学医学院附属第四医院病理科浙江义乌322000 绍兴市人民医院病理科浙江绍兴312000

2021年WHO中枢神经系统肿瘤分类,胶质瘤、胶质神经元肿瘤和神经元肿瘤。

关键词： WHO 中枢神经系统肿瘤分类

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2015版WHO肺肿瘤组织学分类解读

中华肿瘤防治杂志 2016年第1期23卷 60-64页

作者：陈真伟滕晓东金华市中心医院病理科浙江金华321000 浙江大学医学院附属第一医院病理科浙江杭州310003

对第4版(2015年)WHO肺肿瘤分类与第3版(2004年)肿瘤分类进行比较,并复习相关文献。2015版肿瘤分类作了大量的改动,对肺肿瘤的分类做了一些修改,新增了6个病种,即NUT中线癌、肌上皮肿瘤、伴有EWSR1-CREB1基因易位的肺黏液样肉瘤、血管内... 详细信息

对第4版(2015年)WHO肺肿瘤分类与第3版(2004年)肿瘤分类进行比较,并复习相关文献。2015版肿瘤分类作了大量的改动,对肺肿瘤的分类做了一些修改,新增了6个病种,即NUT中线癌、肌上皮肿瘤、伴有EWSR1-CREB1基因易位的肺黏液样肉瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、Erdheim-Chester病和脑膜瘤非特异型;更新了肺癌的分子病理和免疫组织化学等内容,强调了肺癌相关基因的检测与靶向治疗。对一些肿瘤作了重新命名,如硬化性血管瘤命名为硬化性肺泡细胞瘤,使用贴壁型腺癌代替原先的细支气管肺泡癌。

关键词：肺肿瘤 WHO 分类综述文献

高校体育课开设心肺复苏和急救教学的意义和实践研究——以四川美术学院为例

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文体用品与科技 2021年第15期5卷 93-94页

作者：王红云陈真伟四川美术学院体育教研室重庆401331

通过对大学体育课中开展心肺复苏与急救教学的目的意义及优势的分析,以及对大学生心肺复苏与急救现状和在我校体育课开设急救课程的教学实践研究,认为在高校开设心肺复苏与急救课程,让大学生先学会急救知识和技能,然后带动其他群体,提... 详细信息

通过对大学体育课中开展心肺复苏与急救教学的目的意义及优势的分析,以及对大学生心肺复苏与急救现状和在我校体育课开设急救课程的教学实践研究,认为在高校开设心肺复苏与急救课程,让大学生先学会急救知识和技能,然后带动其他群体,提高公众在突发状况下的应急能力,逐步普及和推广,所以,提高在校大学生的整体综合素质具有积极的、深远的现实意义。高校体育课是目前大学教育的主要公共课程之一,也是提高大学生身体素质、培养良好体育锻炼意识的有效课程,在高校体育课程中开展心肺复苏与急救知识和技能是普及心肺复苏最高效、便捷的途径,将急救培训纳入体育课教学中,加强实用技能培养,提高急救技能,增强自救救他意识,丰富体育课程资源、实现课程改革目标,让体育课真正做到以人为本、健康第一。

关键词：大学生体育课心肺复苏与急救目的意义实践研究