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铜纳米簇的合成及其在5-羟甲基胞嘧啶和二硫苏糖醇检测中的应用

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铜纳米簇的合成及其在5-羟甲基胞嘧啶和二硫苏糖醇检测中的应用

作者：陈灿灿河北大学

学位级别：硕士

铜纳米簇(CuNCs)作为一种稳定的金属纳米团簇,它具有成本低、操作简便、合成高效等优点。目前CuNCs已被广泛应用于环境、医疗、生化分析等重要领域。以多肽、蛋白质、聚合物、小分子、核酸为模版均可形成稳定的CuNCs,这为CuNCs的应用开... 详细信息

铜纳米簇(CuNCs)作为一种稳定的金属纳米团簇,它具有成本低、操作简便、合成高效等优点。目前CuNCs已被广泛应用于环境、医疗、生化分析等重要领域。以多肽、蛋白质、聚合物、小分子、核酸为模版均可形成稳定的CuNCs,这为CuNCs的应用开辟了新的思路和途径。5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)是基因组DNA上一种重要的表观遗传修饰,参与调控生物体的基因表达,且与疾病发生有重要联系。当前存在的5hmC总含量的分析方法,有的不能准确定量基因组5hmC的总含量,有的需要昂贵的仪器,有的需要复杂的操作技术。因此,有必要开发一种可以准确定量,不需要昂贵仪器,简单的基因组5hmC总含量的检测方法。二硫苏糖醇(DTT)作为一种巯基的保护性试剂,被广泛应用于细胞生物学和蛋白质化学领域,帮助保护和还原蛋白质。在当前DTT的检测方法中,有的需要使用昂贵仪器,有的成本高,有的耗时长。因此,建立一种不需昂贵仪器、成本低、简单快速检测DTT的方法非常有必要。本论文的具体研究内容如下:第一,以DNA为模版,研究CuNCs的合成。在本章节中,我们优化CuNCs的合成条件,研究CuNCs的合成规律,结果发现当ss DNA上Poly T序列长度在11-60个碱基范围内时,模板序列越长其形成的CuNCs荧光强度越高,这为CuNCs在5hmC和DTT检测中的应用提供了思路和途径。第二,本章基于酶处理和CuNCs建立了一种可以准确定量,不需要昂贵仪器,简单的基因组5hmC总含量的检测方法。首先利用T4β-GT酶和Abas I酶特异性识别基因组DNA上的5hmC位点并对其进行切割形成粘性末端,然后通过TDT酶在产生的3′-OH末端延伸形成Poly T,再以Poly T为模版合成CuNCs,通过CuNCs荧光强度来定量5hmC的总含量。该5hmC分析方法的动态范围为0.1%-10%。当5hmC的含量在1%-8%浓度范围时,它与CuNCs荧光强度呈良好的线性关系。该方法不需要复杂的操作技术,检测范围较宽,且实用性强。第三,本章基于CuNCs建立了一种不需要昂贵仪器、成本低、简单快速检测DTT的方法。在CuNCs的合成过程中加入DTT会使生成的CuNCs荧光强度降低,加入的DTT会与Cu(Ⅱ)生成DTT-Cu复合物,从而阻止Cu(Ⅱ)与T碱基形成T-Cu复合物,进而抑制CuNCs的形成,导致荧光强度降低,通过检测CuNCs的荧光强度可以达到检测DTT的目的。该DTT的检测方法动态范围是20μM-200μM。当DTT浓度在25μM-150μM之间时,它与荧光强度有良好的线性关系。该方法可以在10 min内实现检测DTT的目的,不仅操作简便、耗时短,而且有较强的抗干扰能力。

关键词：铜纳米簇胸腺嘧啶 5-羟甲基胞嘧啶二硫苏糖醇

郄穴刺络拔罐联合针刺治疗带状疱疹急性期（肝经郁热型）的临床观察

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郄穴刺络拔罐联合针刺治疗带状疱疹急性期（肝经郁热型）的临床观...

作者：陈灿灿新疆医科大学

学位级别：硕士

S-100/CKpan免疫组化双染技术在结直肠癌周围神经侵犯诊断中的应用

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临床与实验病理学杂志 2024年第2期40卷 219-221页

作者：张玮琦陈灿灿中山大学附属第一医院病理科广州510080

近年我国结直肠癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势[1]。在结直肠癌的诊断中,周围神经侵犯与不良预后密切相关,是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素,也是相关病理结果中不可或缺的一环[2]。目前结直肠癌周围神经侵犯的诊断主要依赖病... 详细信息

近年我国结直肠癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势[1]。在结直肠癌的诊断中,周围神经侵犯与不良预后密切相关,是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素,也是相关病理结果中不可或缺的一环[2]。目前结直肠癌周围神经侵犯的诊断主要依赖病理医师对病理标本HE染色和相应免疫组化结果的判读。

关键词：结直肠肿瘤周围神经浸润 S-100/CKpan双染免疫组织化学

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森林土壤不同粒径颗粒的碳矿化研究

土壤学报 2024年第5期61卷 1247-1259页

作者：马红亮陈灿灿尹云锋高人福建师范大学湿润亚热带生态地理过程教育部重点实验室福州350007 福建师范大学地理科学学院福州350007 安阳职业技术学院河南安阳455099

土壤是由不同粒径颗粒组成的,各粒径颗粒的性质差异大、在土壤中的空间位置不同。为了研究它们各自碳的变化差异,评估这些颗粒在土壤有机碳稳定和周转中的作用。选择亚热带阔叶林土壤,采用物理分组的方法,获得不同粒径土壤颗粒(>2000、2... 详细信息

土壤是由不同粒径颗粒组成的,各粒径颗粒的性质差异大、在土壤中的空间位置不同。为了研究它们各自碳的变化差异,评估这些颗粒在土壤有机碳稳定和周转中的作用。选择亚热带阔叶林土壤,采用物理分组的方法,获得不同粒径土壤颗粒(>2000、2000~250、250~53、<53、53~20、20~2、<2μm),与全土等质量开展矿化试验,研究碳矿化量差异、主要碳形态变化及其相互关系,反向探究不同粒径颗粒在全土壤中的作用。结果表明,不同粒径颗粒按照质量比例作为权重计算的CO_(2)累积排放量、全碳、C/N、芳香性指数、游离氧化铁含量占全土的95.0%~101.8%。<2μm和20~2μm土壤颗粒CO_(2)累积排放量显著高于其他颗粒和全土。全土及各颗粒土壤CO_(2)累积排放量与比表面积、总孔隙体积、全碳、土壤可溶性有机碳(DOC,Dissolved organic carbon)、土壤微生物生物量碳(Soil microbial biomass carbon,MBC)、易氧化有机碳、游离氧化铁呈正相关性,而与C/N呈负相关性。通过对不同粒径颗粒16个指标降维分析,综合特征指数显示<2μm和20~2μm颗粒最高,即它们的综合作用最大。因此,全土壤的碳变化可追溯到土壤不同粒径颗粒碳的不同变化及关系,且土壤小粒径的团聚或被大粒径颗粒包闭可能是降低全土碳矿化的机理之一,有利于维持全土壤碳的稳定或增加保存。

关键词：亚热带森林土壤物理分组碳稳定碳矿化 CO_(2)排放

积极老龄化背景下社区养老服务困境及破解路径——基于“五社联动”视角

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老龄化研究 2024年第4期11卷 1266-1273页

作者：陈灿灿武汉科技大学法学与经济学院湖北武汉

目前,我国老龄化问题逐渐凸显,成为社会发展的重大挑战,为此我国做出积极应对人口老龄化的重要战略部署,致力于推动养老服务的高质量发展。社区养老由社区志愿者及社会支持网络共同支撑,为有需要的老人提供帮助,使他们能在熟悉的社区环... 详细信息

目前,我国老龄化问题逐渐凸显,成为社会发展的重大挑战,为此我国做出积极应对人口老龄化的重要战略部署,致力于推动养老服务的高质量发展。社区养老由社区志愿者及社会支持网络共同支撑,为有需要的老人提供帮助,使他们能在熟悉的社区环境中生活,而随着老龄化程度的加深,社区养老面临许多问题,成为制约积极老龄化进一步发展的瓶颈,因此必须对现有模式进行不断改革创新,通过整合社会资源、完善服务机制等,探索积极老龄化背景下社区养老服务新路径。文章结合我国积极老龄化对养老服务提出的新需求,指出传统社区居家养老存在的一系列问题,“五社联动”是基层治理的重要创新,其在社区养老服务实践中具有许多优势,从而成为积极老龄化背景下破解社区养老服务困境的可行路径。

关键词：积极老龄化社区养老五社联动破解路径

凉山林草扛起主防责任抢前抓早重落实严密部署备春防

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绿色天府 2024年第2期 22-23页

作者：陈灿灿凉山州林业和草原局

进入防火前置期以来,凉山林草系统坚定以习近平总书记关于防灾减灾救灾及森林草原防灭火有关工作的重要指示批示精神为指引,坚决贯彻党中央、国务院决策部署和省委省政府、州委州政府有关工作要求,将森林草原防火工作作为最大政治任务... 详细信息

进入防火前置期以来,凉山林草系统坚定以习近平总书记关于防灾减灾救灾及森林草原防灭火有关工作的重要指示批示精神为指引,坚决贯彻党中央、国务院决策部署和省委省政府、州委州政府有关工作要求,将森林草原防火工作作为最大政治任务和头等大事,以森林草原资源保护为主责主业,切实增强做好森林草原防灭火工作的责任感和紧迫感,对今冬明春森林草原防灭火工作进行早动员、早部署、早安排,稳扎稳打把“防”的工作赶在前,做足“提前量”、打好“主动仗”,全力以赴推动森林草原防灭火各项工作落地落实,坚定不移推进森林草原防火工作向纵深推进。

关键词：森林草原防灭火工作提前量春防主动仗

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普通化学实验过程性考核探讨

化纤与纺织技术 2024年第7期53卷 231-233页

作者：陈灿灿贾相岳晋中信息学院山西晋中030801

目前,实验考核存在诸多问题,文章以培养具有扎实基本功的创新人才为目标,通过线上线下相结合,优化实验项目、改革考核内容、增加预习与问题考核,构建了全过程评价、全过程育人的普通化学实验考核评价体系。该体系针对不同类别的实验进... 详细信息

目前,实验考核存在诸多问题,文章以培养具有扎实基本功的创新人才为目标,通过线上线下相结合,优化实验项目、改革考核内容、增加预习与问题考核,构建了全过程评价、全过程育人的普通化学实验考核评价体系。该体系针对不同类别的实验进行分类考核,规定考核细则,不仅能对学生起到督促监督作用,还能使学生养成良好的实验素养,旨在培养学生科学探索的精神。

关键词：普通化学实验教学考核评价

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衡阳师范学院：扎根基层沃土厚植教育情怀

衡阳师范学院：扎根基层沃土厚植教育情怀

山羊AGRP基因克隆及在黑色素细胞中的表达研究

光明日报

作者：禹爱华龙军陈灿灿

音乐声在群山环绕的妙溪小学响起——敲打着架子鼓，弹奏着吉他，手持麦克风沉浸地歌唱，这个由8个孩子组成的摇滚乐队自信大方地在舞台上表演。宁丹在台下微笑倾听。宁丹所在的妙溪小学是湖南省衡阳县岣嵝乡最偏远的一所山区小学，全校... 详细信息

音乐声在群山环绕的妙溪小学响起——敲打着架子鼓，弹奏着吉他，手持麦克风沉浸地歌唱，这个由8个孩子组成的摇滚乐队自信大方地在舞台上表演。宁丹在台下微笑倾听。宁丹所在的妙溪小学是湖南省衡阳县岣嵝乡最偏远的一所山区小学，全校共32名学生。宁丹和音乐教师一起在学校......

关键词：衡阳师范学院教育情怀师范毕业生

来源： cnki报纸评论

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黑龙江畜牧兽医 2024年第15期 49-54页

作者：李杰孙晓燕蒋婧任航行王高富陈灿灿重庆市畜牧科学院重庆402460 重庆市山羊工程技术研究中心重庆402460

为了研究刺鼠相关蛋白(agouti-related protein,AGRP)基因在动物皮肤黑色素沉积中的作用,试验以酉州乌羊为研究对象,利用TRIzol法提取皮肤组织RNA,通过RT-PCR扩增AGRP基因编码区(coding region,CDS)序列,采用生物信息学软件预测AGRP蛋... 详细信息

为了研究刺鼠相关蛋白(agouti-related protein,AGRP)基因在动物皮肤黑色素沉积中的作用,试验以酉州乌羊为研究对象,利用TRIzol法提取皮肤组织RNA,通过RT-PCR扩增AGRP基因编码区(coding region,CDS)序列,采用生物信息学软件预测AGRP蛋白质结构和功能,构建系统进化树分析山羊与其他哺乳动物AGRP基因的保守性;体外培养黑色素细胞,利用实时荧光定量PCR检测AGRP基因在细胞增殖和分化阶段不同时间点的相对表达量。结果表明:酉州乌羊AGRP基因CDS序列长度为405 bp,编码135个氨基酸,编码蛋白质分子量为14871.36 u,理论等电点为5.70;AGRP蛋白二级结构由3个α-螺旋和1个β-折叠以αααβ的顺序组成;AGRP蛋白的氨基酸序列在不同物种间高度相似;在构建的系统进化树中,酉州乌羊与绵羊和山羊的亲缘关系最近,与小鼠和人的亲缘关系最远。AGRP基因在黑色素细胞增殖和分化阶段的不同时间点均有表达,随着细胞培养时间的延长,AGRP基因的相对表达量在增殖阶段先逐渐降低再升高,在分化阶段逐渐升高,与0小时比较均差异极显著(P<0.01)。说明AGRP基因在黑色素细胞中具有时空特异性,在黑色素沉积过程中发挥重要作用。

关键词：酉州乌羊 AGRP 生物信息学黑色素细胞基因表达