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胶原模拟多肽及其对成纤维细胞粘附作用的研究

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胶原模拟多肽及其对成纤维细胞粘附作用的研究

作者：陈晖娟北京协和医学院

学位级别：硕士

胶原是胞外基质的主要成分,具有独特的三螺旋结构。它不仅对组织和器官起支持和保护作用,还参与介导许多生物学过程。这些生物学功能是通过细胞粘附分子与胶原特征结构域的特异性结合来实现的。深入研究胶原特征结构与细胞的相互作用,... 详细信息

胶原是胞外基质的主要成分,具有独特的三螺旋结构。它不仅对组织和器官起支持和保护作用,还参与介导许多生物学过程。这些生物学功能是通过细胞粘附分子与胶原特征结构域的特异性结合来实现的。深入研究胶原特征结构与细胞的相互作用,是胶原作为生物活性材料应用以及开发人工类胶原生物材料的重要基础。胶原模拟多肽(CMP)可以模拟胶原的特征结构,为研究胶原的结构和功能提供了一个新方法。本研究设计合成了包含类胶原重复序列(Pro-Hyp-Gly)n的CMP21、含整合素α2β1识别序列Gly-Phe-Hyp-Gly-Glu-Arg (GFOGER)的CMP9以及同时包含以上两种序列的CMP27。研究了Ⅰ型胶原和胶原模拟多肽的三螺旋结构及其热稳定性,观察了胶原模拟多肽对成纤维细胞的粘附作用,阐明了两种序列对细胞粘附的不同影响作用。主要研究工作如下： 1.胶原及胶原模拟多肽三螺旋结构及热稳定性研究通过圆二色谱(CD)表征了胶原及胶原模拟多肽的三螺旋结构及其热稳定性,CD谱结果显示,仅有整合素识别位点序列的CMP9不具有三螺旋结构,而CMP21和CMP27能自发形成类似胶原的三螺旋结构。热稳定性研究证实,胶原溶液经温度诱导后发生“螺旋—解旋”的热变性过程,该过程不可逆;CMP21和CMP27溶液温度升高后构象连续发生变化,在一定条件下其热变性过程实现可逆恢复,发生“螺旋—解旋—复旋”的变化过程。 2.胶原及胶原模拟多肽细胞毒性评价用CCK-8法考察CMP及胶原溶液对L929细胞的毒性作用。结果显示,CMP溶液对已贴壁成纤维细胞生长无抑制作用,未发生明显的细胞毒性反应,其中CMP27组对L929细胞生长有一定的促进作用。 3.物理吸附胶原模拟多肽对成纤维细胞粘附的影响通过物理吸附固定CMP,利用细胞粘附、竞争抑制、荧光染色等实验证实,三种包被CMP的基底均能在一定程度上促进细胞粘附、生长,具有良好的细胞粘附率和细胞附着形态,其中CMP27具有更好的促粘附效果,可观察到大量的应力纤维及伪足,粘附效果与Ⅰ型胶原相近。由此认为,胶原三螺旋结构对细胞粘附有促进作用,GFOGER序列对细胞伪足生成及应力纤维形成有支持作用。研究结果初步证实,胶原三螺旋结构与整合素识别位点序列共同作用促进成纤维细胞粘附。 4.壳聚糖膜共价偶联胶原模拟多肽对成纤维细胞粘附的影响以3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)为连接臂,将壳聚糖膜与CMP共价偶联。利用核磁共振(1H-NMR)与X-射线光电子能谱(XPS)对样品进行了表征,证实多肽与MB-壳聚糖膜共价偶联成功。细胞粘附等实验说明,MB-壳聚糖浓度对成纤维细胞粘附有一定影响,当MB-壳聚糖浓度为3ng/mm2和6ng/mm2时,粘附效果较好。MB-壳聚糖膜偶联CMP后对L929细胞粘附的促进作用明显增强,偶联CMP27的效果较好,可以观察到长势良好的应力纤维与微绒毛,其粘附效果与吸附胶原的基底近似。以上结果进一步证实,胶原三螺旋结构及整合素识别位点序列共同作用促进成纤维细胞粘附。综上所述,包含胶原三螺旋结构与整合素识别位点序列的CMP可以有效促进成纤维细胞粘附,可作为表面修饰基团促进α2β1,整合素介导的细胞粘附。本研究可为设计以多肽为基础的生物活性材料提供新的研究思路,也为开发以及应用人工类胶原生物材料提供研究基础。

关键词：胶原胶原模拟多肽成纤维细胞细胞粘附

圆二色谱研究胶原模拟多肽三螺旋结构及其热稳定性

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光谱学与光谱分析 2014年第4期34卷 1050-1055页

作者：张之宝王静洁陈晖娟熊青青刘玲蓉张其清中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所天津市生物医学材料重点实验室天津300192 福州大学生物和医药技术研究院福建福州350002

胶原是广泛研究和应用的生物材料,具有独特的三螺旋结构,此结构与其生物学性能密切相关。以胶原模拟多肽(collagen mimetic peptide,CMP)作为胶原的模型分子,通过圆二色谱研究了CMP的三螺旋结构、热稳定性等随序列或长度的改变所发生的... 详细信息

胶原是广泛研究和应用的生物材料,具有独特的三螺旋结构,此结构与其生物学性能密切相关。以胶原模拟多肽(collagen mimetic peptide,CMP)作为胶原的模型分子,通过圆二色谱研究了CMP的三螺旋结构、热稳定性等随序列或长度的改变所发生的规律性变化。根据形成胶原三螺旋结构的重复序列(POG)_n及胶原上α_2β_1整合素识别位点序列GFOGER设计五种不同序列或长度的CMP,采用圆二色谱表征了CMP的三螺旋结构,并通过检测CMP的程序升温变性和程序降温复性过程中圆二色谱的变化,研究了CMP三螺旋结构的热变性过程、解链温度以及复性过程。实验结果显示,五种CMP室温下均以三螺旋结构的形式存在,CMP三螺旋结构的热稳定性随POG的个数增加而增强;不同于胶原,CMP三螺旋结构的热变性是可逆的,升温过程中三螺旋解聚(变性),降温过程又可重新组装(复性),复性过程有明显的'磁滞'现象。研究结果可为进一步研究胶原与CMP分子特征性的三螺旋结构形成规律以及基于CMP的人工类胶原生物材料的研究提供依据。

关键词：胶原模拟多肽(CMP) 圆二色谱(CD) 三螺旋结构热稳定性 Collagen mimetic peptide(CMP) Circular dichroism(CD)

一步法合成1,2,4-三氮唑[3,4-i]嘌呤类化合物

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有机化学 2022年第5期42卷 1551-1556页

作者：楚治良陈晖娟单帅王晓娜高春芳渠桂荣刘忠于郭海明中国人民解放军联勤保障部队第989医院河南洛阳471031 河南师范大学化学化工学院河南新乡453007

1,2,4-三氮唑[3,4-i]嘌呤类化合物是潜在的黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂,有望用于痛风的治疗.报道了一种一步合成1,2,4-三氮唑[3,4-i]嘌呤类化合物的新方法.以6-肼基-N^(9)-取代嘌呤和脂肪族一元羧酸为原料,无水硫酸镁作除水剂,合成了17个新... 详细信息

1,2,4-三氮唑[3,4-i]嘌呤类化合物是潜在的黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂,有望用于痛风的治疗.报道了一种一步合成1,2,4-三氮唑[3,4-i]嘌呤类化合物的新方法.以6-肼基-N^(9)-取代嘌呤和脂肪族一元羧酸为原料,无水硫酸镁作除水剂,合成了17个新化合物.该方法操作简单,无需使用其他催化剂和氧化剂,且收率良好.同时,探讨了影响反应的因素,为1,2,4-三氮唑[3,4-i]嘌呤类化合物研究奠定了基础.

关键词： 6-肼基-N^(9)-取代嘌呤脂肪族一元羧酸 1,2,4-三氮唑[3,4-i]嘌呤类化合物

重要农业文化遗产保护与农业韧性的时空演变及影响效应

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经济地理 2024年

作者：卢勇陈晖伽红凯张凡南京农业大学人文与社会发展学院南京农业大学金融学院

增强农业韧性是推进农业高质量发展和实现农业强国的应有之义。重要农业文化遗产保护以其注重在地资源统筹，强调“外引内生”聚合转换的实践运行逻辑，可望成为提升农业韧性新的着力点。文章基于我国2009—2021年30个省份的面板数据，... 详细信息

增强农业韧性是推进农业高质量发展和实现农业强国的应有之义。重要农业文化遗产保护以其注重在地资源统筹，强调“外引内生”聚合转换的实践运行逻辑，可望成为提升农业韧性新的着力点。文章基于我国2009—2021年30个省份的面板数据，在考察重要农业文化遗产保护与农业韧性时空演变格局的基础上，运用双向固定效应模型实证分析了重要农业文化遗产保护对农业韧性的影响效应与作用路径。研究发现：①重要农业文化遗产保护与农业韧性在空间上均表现出“东西高—中部低”的分异特征，这种分异格局随着时间推移呈现优化趋势。②重要农业文化遗产保护显著提升了农业韧性。③农村金融支持与工商资本下乡是重要农业文化遗产保护提升农业韧性的主要渠道；而与传统认知不同的是，财政支农投入并没有在重要农业文化遗产保护影响农业韧性的过程中发挥应有作用，这可能与当前政府对于遗产保护的财政支农投入力度有限存在一定关联。

关键词：重要农业文化遗产农业韧性财政支农投入农村金融支持工商资本下乡

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肠道菌群与帕金森病相关性的研究进展

结直肠肛门外科 2020年第4期26卷 410-413页

作者：刘欣刘忠于陈晖娟马丽中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院科研部/全军肛肠外科研究所/全军重点实验室河南洛阳471000 中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院检验科河南洛阳471000

早在2000多年前被誉为现代医学之父的古希腊哲学家希波克拉底就曾提出"万病之源,始于肠道"。随着医学的发展,已有众多研究结果显示肠道菌群或许会通过一种特殊的"脑—肠轴"来影响机体的大脑结构以及大脑相关疾病的发生,如阿尔茨海默病... 详细信息

早在2000多年前被誉为现代医学之父的古希腊哲学家希波克拉底就曾提出"万病之源,始于肠道"。随着医学的发展,已有众多研究结果显示肠道菌群或许会通过一种特殊的"脑—肠轴"来影响机体的大脑结构以及大脑相关疾病的发生,如阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化、肌萎缩侧索硬化等神经系统疾病[1-3]。随着研究越来越深入,研究者进一步明确肠道菌群的紊乱与人们罹患神经系统疾病的风险、活跃程度和病情发展相关联。本文通过回顾近期的文献研究报道,将肠道微生态与帕金森病相关性的研究进展做一综述。

关键词：肌萎缩侧索硬化神经系统疾病大脑结构帕金森病阿尔茨海默病希波克拉底多发性硬化肠道菌群

肠道菌群与多囊卵巢综合征相互关系的研究进展

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结直肠肛门外科 2020年第4期26卷 418-422页

作者：龚慧陈晖娟郭宇冰韩静中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院科研部/全军肛肠外科研究所/全军重点实验室河南洛阳471000 中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院体检中心河南洛阳471000

近来有基于人类和啮齿类动物模型的研究表明,肠道菌群的变化与多囊卵巢综合征(polycysticovarian syndrome,PCOS)的代谢和临床参数之间存在关联,同时提出肠道菌群失调可能是PCOS发展的潜在致病因素[1]。因此,本文着重从PCOS患者以及动... 详细信息

近来有基于人类和啮齿类动物模型的研究表明,肠道菌群的变化与多囊卵巢综合征(polycysticovarian syndrome,PCOS)的代谢和临床参数之间存在关联,同时提出肠道菌群失调可能是PCOS发展的潜在致病因素[1]。因此,本文着重从PCOS患者以及动物模型上来对肠道菌群与PCOS的关系进行综述。

关键词：多囊卵巢综合征临床参数肠道菌群动物模型 PCOS 致病因素

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肠道菌群与常见慢性肝病关系的研究进展

结直肠肛门外科 2020年第4期26卷 414-417,422页

作者：陈晖娟龚慧高江苓刘忠于中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院科研部/全军肛肠外科研究所/全军重点实验室河南洛阳471000

1概述肠道菌群是维持人体生命健康所必需的重要环境因素。人体肠道内携带约1.5公斤的共生细菌,超过数千种不同的菌群,主要包括细菌、古细菌、病毒和真菌[1-2]。肠道菌群可为宿主健康提供多种益处,包括维持肠道黏膜屏障完整性、胆汁酸代... 详细信息

1概述肠道菌群是维持人体生命健康所必需的重要环境因素。人体肠道内携带约1.5公斤的共生细菌,超过数千种不同的菌群,主要包括细菌、古细菌、病毒和真菌[1-2]。肠道菌群可为宿主健康提供多种益处,包括维持肠道黏膜屏障完整性、胆汁酸代谢、营养获取和防止病原体入侵[3]。

关键词：肠道菌群共生细菌胆汁酸代谢重要环境因素人体肠道慢性肝病肠道黏膜屏障古细菌

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W波段一维相控阵前端集成与实验验证

W波段一维相控阵前端集成与实验验证

作者：陈晖电子科技大学

学位级别：硕士

基于生成对抗网络和迁移学习的电力碳流耦合特征数据生成与评估

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电力建设 2024年第3期45卷 126-136页

作者：杨至元陈晖李沛南方电网能源发展研究院有限责任公司广州市510663 南方电网产业投资集团有限责任公司广州市510663

目前电力碳流耦合特征数据的可信样本较为不足,不能满足高质量、高精度以及高时效的电碳耦合技术发展需求。将生成式对抗网络理论与电力碳流耦合模型相结合,提出一种全新的电力碳流耦合特征数据模拟生成方法:将电力系统时序状态参数和... 详细信息

目前电力碳流耦合特征数据的可信样本较为不足,不能满足高质量、高精度以及高时效的电碳耦合技术发展需求。将生成式对抗网络理论与电力碳流耦合模型相结合,提出一种全新的电力碳流耦合特征数据模拟生成方法:将电力系统时序状态参数和碳排放特征作为学习样本导入学习模块,实现时序电力碳流耦合关系的智能拟合;针对生成式网络训练困难等问题,通过迁移学习模块,在小样本中对电力碳流特征数据开展预训练,并将训练参数传递至目标域中,提高目标任务学习效率,结合对照选比结果,获得适用的生成式迁移模型;此外,针对生成数据的评价机制缺失问题,提出一种基于电力碳流计算结果的校验方法,量化了生成式迁移学习模型的有效性评估结果,并在IEEE 14节点和118节点系统上进行了验证。

关键词：电力碳排放流电碳耦合技术生成式网络迁移学习模型评价