检索结果-南通市图书馆

水稻条斑病菌异柠檬酸脱氢酶在致病性中的功能分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物病理学报 2016年第5期46卷 624-633页

作者：郭威邹丽芳陈功友浙江师范大学化学与生命科学学院金华321004 上海交通大学农业与生物学院上海200240

异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IcdH)催化异柠檬酸转化成α-酮戊二酸,参与碳代谢途径末端的三羧酸(tricarboxylic acid,TCA)循环。然而,编码异柠檬酸脱氢酶基因是否参与水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoc)的致病性,... 详细信息

异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IcdH)催化异柠檬酸转化成α-酮戊二酸,参与碳代谢途径末端的三羧酸(tricarboxylic acid,TCA)循环。然而,编码异柠檬酸脱氢酶基因是否参与水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoc)的致病性,我们并不清楚。为了阐明IcdH的作用,通过同源重组技术获得了Xoc的icdH基因缺失突变体(RΔicdH),并对该突变体进行了相关功能研究。研究表明:该突变体不能利用苹果酸、丙酮酸和柠檬酸,在寄主水稻上的生长能力和致病力相对于野生型均显著降低,其游动性也显著减弱;功能互补子恢复RΔicdH的上述表型至野生型水平;Real-time PCR结果显示,六碳单糖、蔗糖、苹果酸、丙酮酸与柠檬酸能显著诱导icdH基因的转录表达;与水稻细胞互作时icdH基因受诱导表达,并受HrpX和HrpG负调控。这些结果说明:icdH基因是Xoc获取碳源和在寄主水稻上具有致病性所需的。

关键词：水稻条斑病菌异柠檬酸脱氢酶致病性碳水化合物转录水平

水稻条斑病细菌hrp调节基因hrpG_(Xooc)和hrpXooc的克隆和序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物病理学报 2003年第3期33卷 213-219页

作者：陈功友王金生南京农业大学植物保护学院

***基因文库的hrp基因克隆pUHRS138携 39.3 kb大小的hrp基因片段。经系列亚克隆和对hrp 突变体的功能互补验证 ,4 .5 kbBamHI KpnI为最小功能片段 ,该片段可使X .o .pv .oryzicola的hrp 突变体恢复在烟草上激发产生HR和在水稻上具致病... 详细信息

***基因文库的hrp基因克隆pUHRS138携 39.3 kb大小的hrp基因片段。经系列亚克隆和对hrp 突变体的功能互补验证 ,4 .5 kbBamHI KpnI为最小功能片段 ,该片段可使X .o .pv .oryzicola的hrp 突变体恢复在烟草上激发产生HR和在水稻上具致病性。序列测定和分析显示 ,4 .5 kbhrp片段中含hrpXooc和hrpGXooc基因。单独的hrpGXooc和hrpXooc不能功能互补hrp 突变体。hrpXooc与其它黄单胞菌中已克隆的hrpX的同一性达 83%以上 ,推测的蛋白质水平上的差别主要在32、14 1、16 4、175、2 13、2 4 7和 35 7位点上。HrpX序列中α 螺旋转 α 螺旋结构在黄单胞菌中高度保守。hrpGXooc与水稻白叶枯病菌的hrpGXoo同一性达 96 % ,与X .***的hrpGXcv同一性达 87% ,与Ralstoniasolanacearum的hrpGRs同源性较低 ,4种HrpG蛋白质水平上的差别主要集中在 2 2、2 9、115和 2 5 2位点上。HrpGXooc和HrpGXcv同列比较显示 ,3～ 9和 2 16～ 2 2 0区域的氨基酸序列有所不同 ,可能反映了HrpG蛋白在感知环境信号和调节hrp基因表达方面的差别。

关键词：水稻条斑病细菌 hrp调节基因 hrpGxooc hrpXooc 克隆序列分析

水稻白叶枯病菌hrp调节基因hrpXoo的克隆与序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科学 2003年第5期36卷 528-535页

作者：陈功友余晓江王金生南京农业大学植物保护学院/农业部植物病虫监测与治理重点开放实验室南京农业大学植物保护学院/农业部植物病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

用化学方法诱变水稻白叶枯病菌PXO99A 菌株 ,获得 6株hrp-突变体 ,此突变体除丧失在非寄主烟草上激发过敏反应和在感病寄主水稻上的致病能力外 ,有些缺乏激发烟草产生HR的信号物质 ,有些在胞内存在此信号物质 ,而不能泌至胞外。来自Xant... 详细信息

用化学方法诱变水稻白叶枯病菌PXO99A 菌株 ,获得 6株hrp-突变体 ,此突变体除丧失在非寄主烟草上激发过敏反应和在感病寄主水稻上的致病能力外 ,有些缺乏激发烟草产生HR的信号物质 ,有些在胞内存在此信号物质 ,而不能泌至胞外。来自Xanthomonasoryzaepv .oryzaeJXOIII粘粒基因文库的hrp基因克隆pUHRX2 4 5 ,所携hrp基因片段大小为 36 .8kb。系列亚克隆 36 .8kbhrp基因片段及各亚克隆对hrp-突变体功能互补作用的结果显示 ,3.3kbSacI片段为最小酶切功能片段。序列测定和分析结果表明 ,3.3kbhrp片段含hrpX oo基因和含与热激蛋白 90家族有关的 2个开放阅读框hspORF1和hspORF2。HspORF1在蛋白质数据库中未发现序列蛋白。HspORF2与Hsp90 Xo的同源性达 99%。hrpXoo与黄单胞菌中已报道的hrpX基因有很高的同源性(90 %以上 )。在黄单胞菌中高度保守的编码α 螺旋转 α 螺旋结构的 6 0 bp核苷酸序列 ,在交叉功能互补时是必需的。不含此结构的hrpXoo (1.1kb)片段 ,可使JXOIII的hrp-突变体在水稻上具致病性和在非寄主烟草上激发产生HR ,但不能使来自PXO99A 和RS10 5的hrp-突变体恢复在烟草上激发产生HR的功能。黄单胞菌中已知HrpX的同列比较显示 ,X .oryzae和X .campestris种间在 88、196和 2 4 7位点的氨基酸上有

关键词：水稻白叶枯病菌水稻条斑病细菌 hrpXoo 过敏反应致病性

hrpE基因在水稻条斑病菌Hrp pilus形成和致病性中起重要作用

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

植物病理学报 2009年第4期39卷 392-398页

作者：王寅鹏邹丽芳周丹陈功友南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095 上海交通大学农业与生物学院上海200240

水稻条斑病菌(Xanthomonas ***,Xooc)的hrp(hypersensitive response and pathogenicity)基因簇编码形成Ⅲ型分泌系统(T3SS),将致病性的效应分子通过HrpF转位装置注入水稻细胞中,从而导致水稻产生抗(感)病性,但Xooc的HrpE是否形成Hrp pilus还不清楚。本研究对Xooc的hrpE基因进行突变,发现hrpE突变体在水稻上丧失致病性和在烟草上丧失激发HR的能力。与水稻互作结果显示,hrpE突变体不能够与水稻细胞互作,其在水稻组织中的生长能力显著下降。电镜结果显示,hrpE突变体不能够形成Hrp pilus,从而导致水稻条斑病菌丧失在水稻上的致病性。功能互补结果显示,完整的hrpE基因可以恢复hrpE突变体在烟草上激发HR反应的能力、在水稻上的致病性以及在水稻薄壁细胞间形成Hrp pilus的能力,表明hrpE基因形成Hrp pilus是水稻条斑病菌分泌致病性效应分子的重要条件。

关键词：水稻条斑病菌 hrpE Hrp pilus 致病性过敏反应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

我国植物病原细菌学的研究现状和发展策略

植物保护 2010年第3期36卷 6-8页

作者：何晨阳陈功友中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 上海交通大学农业与生物学院农业部都市农业(南方)重点实验室上海200240

作为植物保护学科的重要分支学科之一,植物病原细菌学主要研究植物细菌病害的发生机理、灾变规律及其防控技术。近年来,我国在病原菌分子生物学、基因组学、病原菌-寄主互作机理等方面取得了重要进展。本文分析了本领域的发展规律和研... 详细信息

作为植物保护学科的重要分支学科之一,植物病原细菌学主要研究植物细菌病害的发生机理、灾变规律及其防控技术。近年来,我国在病原菌分子生物学、基因组学、病原菌-寄主互作机理等方面取得了重要进展。本文分析了本领域的发展规律和研究现状,探讨了今后的发展布局和重点方向,提出了相应的发展策略和保障措施。

关键词：植物病原细菌学研究现状发展策略

水稻条斑病菌hrcC、hpa3和hrpE基因表达不依赖hrpG和hrpX基因调控

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2009年第8期49卷 1018-1025页

作者：姜佳邹华松李玉蓉陈功友南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095 上海交通大学农业与生物学院上海200240

【目的】决定水稻条斑病菌(Xanthomonas ***)在非寄主植物上激发过敏反应(hypersensitive response,HR)和在寄主水稻上致病性(pathogenicity)的hrp基因簇是受hrpG和hrpX基因调控的,但还不清楚hrpG和hrpX基因是否共同决定着所有hrp基因... 详细信息

【目的】决定水稻条斑病菌(Xanthomonas ***)在非寄主植物上激发过敏反应(hypersensitive response,HR)和在寄主水稻上致病性(pathogenicity)的hrp基因簇是受hrpG和hrpX基因调控的,但还不清楚hrpG和hrpX基因是否共同决定着所有hrp基因的表达。【方法】本文通过基因敲除方式获得了水稻条斑病菌的hrpG和hrpX基因的双突变体。【结果】烟草和水稻上测定结果显示,双突变体与单突变体一样,均在烟草上失去HR激发能力和丧失在水稻上的致病性;相应地,功能互补后双突变体恢复至野生表型。细菌在水稻悬浮细胞、hrp诱导培养基XOM3和营养丰富的培养基NB中生长后的RT-PCR结果显示,NB中hrp基因低水平表达,XOM3和水稻细胞能够高水平诱导hrp基因表达。无论何种生长条件,hrpG单突变体中hrcC、hrcT、hpa3和hrpE基因表达,而hpa1、hpa2、hpaB、hrcJ和hrpG基因不表达;hrpX单突变体中hpa2、hrcC、hpa3、hrpE和hrpG基因表达,而hpa1、hrcT、hpaB和hrcJ基因不表达;hrpG和hrpX双突变体中hrcC、hpa3和hrpE基因表达,而hpa1、hpa2、hpaB、hrcT、hrcJ和hrpG基因不表达。【结论】这提示,水稻条斑病菌的hrcC、hrpE和hpa3基因不受hrpG和hrpX基因单独或同时调控,而hrcT基因受HrpG调控。由此推测,水稻条斑病菌Ⅲ型分泌系统关键组份的表达有可能通过另外的信号途径进行调控,这为进一步分析Ⅲ型分泌途经的形成提供了线索。

关键词：水稻条斑病菌 hrp调节基因 Ⅲ型分泌系统 RT-PCR

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

粉锈宁加Y-Z增效剂防治苹果白粉病试验

河南农业科学 1990年第1期19卷 23-24页

作者：陈功友姚喜民徐梅河南农业大学植保系郑州市黄河游览区

粉锈宁是防治苹果白粉病理想的药剂。但由于这种内吸杀菌剂易使病菌产生抗性,成本较高,果农在生产上很少应用。近年来郑州市区苹果白粉病严重,幼树新梢被害率达50%以上;挂果树冬芽被害率平均为5.6%,重者达26.4%;春季新梢被害率高达85%,... 详细信息

粉锈宁是防治苹果白粉病理想的药剂。但由于这种内吸杀菌剂易使病菌产生抗性,成本较高,果农在生产上很少应用。近年来郑州市区苹果白粉病严重,幼树新梢被害率达50%以上;挂果树冬芽被害率平均为5.6%,重者达26.4%;春季新梢被害率高达85%,严重影响苹果的座果率和产量。为此,笔者于1988年进行了应用Y-Z增效剂减少粉锈宁用量防治此病研究,取得了防病增产、减少用药量的效果。

关键词：苹果白粉病粉铲宁增效剂

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻条斑病细菌dsp基因的克隆

南京农业大学学报 2004年第1期27卷 41-45页

作者：赖志兵邵敏宋从凤陈功友王金生南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室江苏南京210095

用硫酸二乙酯 (DES)化学诱变水稻条斑病细菌RS1 0 5菌株 ,获得一株dsp基因突变体AM1 1。该突变体的菌落形态、颜色、胞外多糖产生能力以及胞外酶 (淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和纤维素酶 )的活性与野生型菌株RS1 0 5无明显差异。将水稻条斑... 详细信息

用硫酸二乙酯 (DES)化学诱变水稻条斑病细菌RS1 0 5菌株 ,获得一株dsp基因突变体AM1 1。该突变体的菌落形态、颜色、胞外多糖产生能力以及胞外酶 (淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和纤维素酶 )的活性与野生型菌株RS1 0 5无明显差异。将水稻条斑病细菌RS1 0 5基因文库 1 2 0 0个克隆逐个导入dsp基因突变体AM1 1中 ,致病性测定结果表明 ,dsp基因阳性克隆pC1 0 1可以恢复AM1 1在水稻上的致病性。酶切分析显示 ,克隆pC1 0 1携 4 4 92kb的dsp基因片段。亚克隆和功能互补结果显示 ,克隆pE4 6和pE4 7均具有恢复dsp突变体AM1 1致病性的能力 ,这表明决定水稻条斑病细菌dsp表型的基因位点至少有 2个。

关键词：水稻条斑病条斑病菌 dsp基因基因克隆致病机理化学诱变

大豆斑疹病菌harpin编码基因的克隆与特性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2005年第4期45卷 496-499,i001页

作者：陈功友张兵武晓敏赵梅琴南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

根据黄单胞菌harpin编码基因的同源性,设计简并引物,采用PCR方法从大豆斑疹病菌(***,Xag)中克隆了402bp的hpa1同源基因,构建于表达载体pET30(a)上经转化大肠杆菌BL21菌株,获得基因工程菌BHR-3。基因工程菌诱导表达后经收集菌体和破碎细... 详细信息

根据黄单胞菌harpin编码基因的同源性,设计简并引物,采用PCR方法从大豆斑疹病菌(***,Xag)中克隆了402bp的hpa1同源基因,构建于表达载体pET30(a)上经转化大肠杆菌BL21菌株,获得基因工程菌BHR-3。基因工程菌诱导表达后经收集菌体和破碎细胞,得到表达产物为15.1kD的蛋白质。该蛋白质富含甘氨酸,不含半胱氨酸,对热稳定,对蛋白酶K敏感,可在非寄主烟草上激发过敏反应。激发的过敏反应需要植物体内水杨酸的积累,还可被真核生物代谢抑制剂抑制。序列比较显示,该基因与Xag中hpaG基因相同,与其它黄单胞菌中的hpa1基因有51.4%～93.8%的同源性,与其它革兰氏阴性植物病原细菌的harpin编码基因无同源性。据此把该基因产物鉴定为harpinXag。黄单胞菌harpin蛋白质序列比较发现,GG-GGG基序的多少并不是harpin蛋白的唯一特性。这为利用harpin蛋白开展植物病害控制的基因药物学设计提供了科学线索。

关键词：大豆斑疹病菌,烟草,过敏反应,harpin编码基因