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乙酰化修饰在植物病原物致病过程中的作用

生物技术通报 2024年第5期40卷 1-12页

作者：王立超李欢盛若成李敏陈凤毛南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心南京210037

赖氨酸乙酰化修饰作为生物体内一种保守的蛋白翻译后修饰,参与多种生物学过程。大量的医学和植物病理学研究指出,乙酰化修饰在动物疾病和植物病害发生过程中发挥重要的调控作用。本文根据前人的研究进展,就乙酰化修饰参与植物病原物的... 详细信息

赖氨酸乙酰化修饰作为生物体内一种保守的蛋白翻译后修饰,参与多种生物学过程。大量的医学和植物病理学研究指出,乙酰化修饰在动物疾病和植物病害发生过程中发挥重要的调控作用。本文根据前人的研究进展,就乙酰化修饰参与植物病原物的致病过程,主要包括乙酰化修饰在调控病原物的生长发育和致病力,寄主植物的抗性以及病原物与寄主植物之间的互作等三方面内容阐述乙酰化修饰在植物病原物中的作用,旨在了解乙酰化修饰在病原物致病过程中发挥的作用,以期为病原物的防控提供新思路和新理论。

关键词：植物病原物乙酰化修饰致病过程防御反应

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推-拉技术对松材线虫病防控效果研究

生物灾害科学 2024年第2期47卷 243-248页

作者：江雪峰陈凤毛柴演初徐明许嘉麟柴忠心休宁县林业有害生物防治检疫站安徽黄山245499 南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 江苏省林业科学研究院江苏南京210053 南京生兴有害生物防治技术股份有限公司江苏南京211112

【目的】在林间连年设置6种引诱剂和5种驱避剂,使用推-拉技术,比较和实现其对松褐天牛成虫和松材线虫病的防控效果。【方法】拟利用课题组开发的驱避剂和引诱剂,把松褐天牛成虫驱赶(推)到适当位置,再用引诱剂(拉)集中消灭,大量诱杀松褐... 详细信息

【目的】在林间连年设置6种引诱剂和5种驱避剂,使用推-拉技术,比较和实现其对松褐天牛成虫和松材线虫病的防控效果。【方法】拟利用课题组开发的驱避剂和引诱剂,把松褐天牛成虫驱赶(推)到适当位置,再用引诱剂(拉)集中消灭,大量诱杀松褐天牛及其携带的病原松材线虫,实现对松材线虫病的精准防控,保护松树免受其危害。【结果】复配引诱剂SY1和SY4对林间松褐天牛成虫的引诱效果最好,且无显著差异,引诱率分别达64.41%和66.29%。2019—2021年使用的复配驱避剂对天牛成虫的林间驱避率分别为81.82%、73.74%和74.30%,显著高于单剂的驱避效果(53.85%、60.75%和61.70%,F0.01=11.3),说明复配驱避剂对松褐天牛成虫有显著的林间驱避效果。随着林间连年使用复配驱避剂把松褐天牛驱赶(推)到一定区域,驱避剂挂设点20 m外东南西北四向的引诱剂诱捕器诱捕(拉)大量天牛成虫,同时结合连年彻底清理病死树,使3年的驱避剂点外平均每诱捕器诱捕松褐天牛成虫数分别为(149.33±19.43)、(23.88±5.52)和(7.17±2.00)头,林间天牛成虫的虫口密度大幅降低。林间松树平均病死率逐年降低,分别为(12.70±3.20)%、(7.30±2.40)%和(5.30±2.20)%。【结论】通过林间推-拉技术的成功实施,大量诱杀了林间松褐天牛成虫,减少了病害的传播原,大幅降低林间的病死树率,实现了对松材线虫病的有效防控。

关键词：松褐天牛松材线虫病推-拉技术引诱剂驱避剂

喜旱莲子草与乌蔹莓等植物提取物对松材线虫的毒杀活性研究

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南京林业大学学报（自然科学版） 2022年第4期46卷 45-52页

作者：江奕陈凤毛南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】松材线虫病是当前我国林业生产上危害最严重的森林病害。尽管投入了大量的人力、物力和财力,但松材线虫病防控形势依然严峻。化学杀线剂具有环境局限性,研发高效植物源杀灭松材线虫的药剂对控制松材线虫病疫情,同时降低环境化... 详细信息

【目的】松材线虫病是当前我国林业生产上危害最严重的森林病害。尽管投入了大量的人力、物力和财力,但松材线虫病防控形势依然严峻。化学杀线剂具有环境局限性,研发高效植物源杀灭松材线虫的药剂对控制松材线虫病疫情,同时降低环境化学污染具有重要意义。【方法】采用乙醇浸渍提取法制备喜旱莲子草(Alternanthera philoxeroides)、乌蔹莓(Cayratia japonica)、迷迭香(Rosmarinus officinalis)等30种植物的提取物,测定其对松材线虫的毒杀活性。利用液液萃取法,用乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水等有机溶剂对两种植物中的活性成分进行分步提取,得到药液的质量浓度梯度为10.000、5.000、2.500、1.250和0.625 g/L,并分别测定其对松材线虫的毒杀活性。虫卵悬浮液在25℃恒温保湿培养箱内培养,24 h后开始观察,32 h后结束观察。通过镜检统计线虫卵数,并计算相应的线虫卵累计孵化率和孵化抑制率。【结果】采用质量浓度为10 g/L的喜旱莲子草、乌蔹莓乙醇提取物分别处理松材线虫,72 h后线虫校正死亡率均为100%。喜旱莲子草的乙酸乙酯萃取物和乌蔹莓的水层萃取物中存在主要的杀线活性物质,两种植物萃取物处理松材线虫72 h后的半致死剂量(LC_(50))分别为0.5888和0.9693 g/L。在离体虫卵孵化试验中,喜旱莲子草的乙酸乙酯萃取物对线虫的卵孵化抑制率最大,为79.77%,其次为乌蔹莓的水层萃取物,为46.51%。【结论】可见,喜旱莲子草和乌蔹莓对松材线虫成虫和虫卵均具有较强的生物毒杀活性,可作为新型植物杀线虫剂加以开发利用。

关键词：喜旱莲子草乌蔹莓提取物松材线虫毒杀活性

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松材线虫两种实用分子检测技术

北京林业大学学报 2011年第4期33卷 149-152页

作者：陈凤毛叶建仁吴小芹谈家金黄麟南京林业大学森林资源与环境学院江苏省有害生物预防与控制重点实验室

为检验已开发的SCAR标记与实时PCR两种分子检测方法鉴定松材线虫的可靠性,本文选用线虫未知种样品7个以及已知种样品3个为实验材料,采用上述两种分子检测方法进行检测,并且对7个线虫未知种样品进行形态鉴定。结果表明:1)运用SCAR标记检... 详细信息

为检验已开发的SCAR标记与实时PCR两种分子检测方法鉴定松材线虫的可靠性,本文选用线虫未知种样品7个以及已知种样品3个为实验材料,采用上述两种分子检测方法进行检测,并且对7个线虫未知种样品进行形态鉴定。结果表明:1)运用SCAR标记检测,第2、3、4、7号4个未知种样品与8号松材线虫样品出现了一条清晰、明亮的860bp特异条带,第1、5、6号样品与9号拟松材线虫、10号大核滑刃线虫均未出现扩增谱带,表明第2、3、4、7号4个待测样品中含有松材线虫,而第1、5、6号3个待测样品中不含有松材线虫;2)运用实时PCR检测,第2、3、4、7号4个样品与8号松材线虫样品表现有明显的阳性扩增信号,其余样品均未出现扩增信号,也无循环阈值(Ct值);3)对7个未知种样品的形态鉴定结果为:第2、4、7号样品为松材线虫样品,3号样品中除松材线虫外还含有其他线虫,第1、5、6号3个样品不含松材线虫。对于松材线虫的检测,两种分子检测结果与形态鉴定结果完全一致,且两种分子检测方法对松材线虫都具有很强的特异性,都可以在较短时间内对松材线虫进行鉴定。其中SCAR标记检测方法约需2h,实时PCR检测方法约需1h。实现了对松材线虫幼虫快速检测目标,检测结果便于判读。

关键词：松材线虫实用分子技术 SCAR标记实时PCR 检测

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枫香种子生物学特性的研究进展

种子 2001年第1期20卷 33-34页

作者：陈凤毛高捍东施季森南京林业大学森林资源与环境学院南京210037

枫香材用、观赏价值较高 ,是很有潜力的造林绿化树种。本文论述了枫香种子的结实、果实和种子成熟、采集、加工、贮藏萌发特性 ,对枫香种子生产。

关键词：枫香树种子结实形态特征采集加工贮藏萌发特性

GFP标记短小芽孢杆菌LYMC-3在马尾松体内的定殖

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华中农业大学学报 2016年第6期35卷 68-73页

作者：李亮亮谈家金陈凤毛南京林业大学林学院/南方现代林业协同创新中心南京210037

为研究松材线虫拮抗细菌短小芽孢杆菌LYMC-3的内生性及其在马尾松体内的定殖规律,采用扫描电子显微镜(SEM)观察菌株在马尾松组培苗体内的定殖,并采用高渗透法将质粒pGFP78转入菌株LYMC-3,对其进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,同时测定标记菌... 详细信息

为研究松材线虫拮抗细菌短小芽孢杆菌LYMC-3的内生性及其在马尾松体内的定殖规律,采用扫描电子显微镜(SEM)观察菌株在马尾松组培苗体内的定殖,并采用高渗透法将质粒pGFP78转入菌株LYMC-3,对其进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,同时测定标记菌株的遗传稳定性。在此基础上,以GFP标记和抗性标记作为示踪手段,将标记菌株接种到2年生马尾松盆栽实生苗的根部,借助激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和稀释涂板的方法,对马尾松根部、茎部的标记菌株进行定期回收检测。结果显示,通过SEM成功观察到菌株LYMC-3在马尾松体内的定殖,并成功获得LYMC-3菌株荧光表达强烈且遗传稳定的转化子,经过连续8次的稀释培养,其遗传稳定性为96.8%。GFP标记菌株在接种马尾松根部后的第4天,根部、茎部都能回收到大量标记菌株的存在,随后呈持续下降的趋势,且根部的下降速度快于茎部。接种40d后,根部回收标记菌株数量为0.3×102cfu/g,茎部回收标记菌株数量为0.8×102cfu/g。以上结果表明短小芽孢杆菌LYMC-3具有内生性,能在马尾松体内良好地定殖和传导。

关键词：短小芽孢杆菌马尾松绿色荧光蛋白遗传稳定性定殖

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松材线虫病鉴定方法与评价(综述)

安徽农业大学学报 2005年第1期32卷 22-25页

作者：陈凤毛汤坚叶建仁南京林业大学森林资源与环境学院南京210037 安徽省林业厅合肥230001

松材线虫病是一种毁灭性的松树病害,本文对松材线虫以及感染松材线虫病的松树、松木、制品的鉴定与诊断方法进行了综述。

关键词：松材线虫病松材线虫鉴定评价

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拟松材线虫及其致病性

安徽农业科学 2010年第36期38卷 20666-20667页

作者：魏素珍史延梅陈凤毛南京林业大学图书馆江苏南京210037 南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

对拟松材线虫的形态以及致病性方面的研究进行了综述。拟松材线虫在形态上与松材线虫十分相似。两者之间的主要区别在于拟松材线虫的尾部形态为圆锥形,而松材线虫的尾部为指形。形态鉴定上支持将尾尖突短于1μm的定性为松材线虫,长于3.5... 详细信息

对拟松材线虫的形态以及致病性方面的研究进行了综述。拟松材线虫在形态上与松材线虫十分相似。两者之间的主要区别在于拟松材线虫的尾部形态为圆锥形,而松材线虫的尾部为指形。形态鉴定上支持将尾尖突短于1μm的定性为松材线虫,长于3.5μm的定为拟松材线虫。拟松材线虫和松材线虫交合伞都有多种变化,不宜作为分类特征。关于拟松材线虫对松树的致病性,主要存在3种观点:①无致病性;②有微弱致病性或潜在致病性;③具有致病性分化,有的株系具有较强的致病性。

关键词：拟松材线虫尾尖突交合伞致病性

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滑刃属线虫1个中国新记录种

南京林业大学学报（自然科学版） 2020年第3期44卷 105-110页

作者：宋雅婷王立超孙守慧陈凤毛南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 沈阳农业大学林学院辽宁沈阳110866

【目的】2017年在安徽省黄山博村林场枯死的马尾松(Pinus massoniana)树体内分离得到一种不常见的线虫。经光学显微镜初步观察,该线虫在枯死松树内种群单一且数量较多。为研究其与松树枯萎的关系,从形态学和分子生物学特征对该线虫进行... 详细信息

【目的】2017年在安徽省黄山博村林场枯死的马尾松(Pinus massoniana)树体内分离得到一种不常见的线虫。经光学显微镜初步观察,该线虫在枯死松树内种群单一且数量较多。为研究其与松树枯萎的关系,从形态学和分子生物学特征对该线虫进行系统描述,确定该线虫的种属并对线虫数据库进行补充,以便于更好进行线虫的鉴定与分类,为松枯萎病的相关研究提供参考。【方法】将采集到的马尾松枯死木样品劈成长、宽均为1 cm的薄片,采用贝尔曼漏斗法在室温条件下分离8~12 h后收集线虫液,于光学显微镜下观察。将一定数量的线虫用无菌水漂洗后移入长满灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的马铃薯葡萄糖琼脂培养基中,置于培养箱25℃暗培养7 d后得到大量线虫。利用光学显微镜观察拍摄雌成虫和雄成虫的形态特征并进行形态测计。提取线虫DNA并分别对其ITS、18S和28S D2-D3区进行片段扩增、克隆和测序,构建进化树进行分子系统发育分析。综合系统形态学观察、测计及分子生物学系统发育分析对该线虫进行了种类鉴定。【结果】该线虫种群主要形态特征为:雌虫体长约642.0μm,角质层有微弱环纹;唇区圆形,缢缩明显,口针长约10.7μm,具有明显的小基部球;排泄孔通常位于中食道球前部,距体前端32.9μm;中食道球近卵圆形,瓣膜清晰,位于中心处;食道腺长叶状,从背面覆盖肠;侧线数量4条,生殖系统发达,卵巢前伸,卵母细胞呈单行排列,后阴子宫囊发育良好,一般长80.9μm,阴门横裂,无阴门盖;尾圆锥形,稍向腹面弯曲,末端钝圆,带有小的栓状突起。雄虫体长稍短,约为590.0μm,体前部与雌虫相似,单精巢前伸,通常延伸至食道腺末端附近;尾圆锥形,明显向腹面弯曲,尾长约为泄殖腔直径的3.0倍,带有1个小的栓状凸起;尾部具3对尾乳突,交合刺成对,呈玫瑰刺状,基顶和喙突明显;无交合伞和引带。基于ITS、18S和28S D2–D3区基因DNA序列分别构建的NJ系统进化树均表明该线虫与圆尾滑刃线虫(Aphelenchoides ro-tundicaudatus)以100%的置信度聚在同一进化分支。【结论】结合形态学与分子生物学特征,该线虫鉴定为圆尾滑刃线虫(***),是自原始文献之后在中国的实树寄生首次发现,为新记录种。原始文献中的韩国种群无法在灰葡萄孢上繁殖,且仅有46.0%的雄成虫和97.0%的雌成虫尾部具有短的栓状凸起;此次中国种群线虫在灰葡萄孢上发育完好,几乎所有成虫均具有栓状凸起的尾部特征。形态学测计中,中国种群的数值略大于原始文献中韩国种群的,但形态特征基本一致,这可能是不同地理种群间的差异或种内变异造成的。

关键词：滑刃属圆尾滑刃线虫分类鉴定新记录种