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嗜水气单胞菌毒素的提纯及其特性分析

微生物学报 1992年第6期32卷 432-438页

作者：涂小林陆承平南京农业大学兽医系

从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌,其培养物经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素层析及 Sephsdex G100凝胶过滤纯化,获得一种单一多肽的外毒素,分子量为52.5kd。该毒素对热敏感,对胰酶有抗性,最适 pH5—8,具有溶血性、肠毒性和细胞毒... 详细信息

从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌,其培养物经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素层析及 Sephsdex G100凝胶过滤纯化,获得一种单一多肽的外毒素,分子量为52.5kd。该毒素对热敏感,对胰酶有抗性,最适 pH5—8,具有溶血性、肠毒性和细胞毒性,腹腔注射致死小白鼠和鲫鱼,其生物学活性可被同源抗毒素中和。鉴于该毒素的独特性质,建议命名为hec 毒素。

关键词：嗜水气单胞菌溶血性毒素

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致病性迟缓爱德华菌的检测

微生物学报 2001年第6期41卷 736-740页

作者：熊清明陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095

系统检测了 2 5株迟缓爱德华菌 (Edwardasiellatarda ,Et)的胞外产物 (ECP) ,包括溶血素、胞外蛋白酶 (ECPase) ,并用Et强致病株JEL4的ECP抗血清作Dot ELISA检测各株Et的ECP ,同时对小鼠和剑尾鱼作致病性试验。试验表明 ,具动物致病性... 详细信息

系统检测了 2 5株迟缓爱德华菌 (Edwardasiellatarda ,Et)的胞外产物 (ECP) ,包括溶血素、胞外蛋白酶 (ECPase) ,并用Et强致病株JEL4的ECP抗血清作Dot ELISA检测各株Et的ECP ,同时对小鼠和剑尾鱼作致病性试验。试验表明 ,具动物致病性的菌株溶血素检测均为阳性 ,ECPase与致病性无关。JEL4ECP的Dot ELISA结果与动物致病性的符合率达 1 0 0 %。在此基础上 ,建立了致病性Et的检测方法 ,该方法只需作简便的平板溶血试验和Dot ELISA ,即可检测Et的ECP ,无须作动物试验 ,从而简化了致病性Et的检测程序 ,为研制检测试剂盒奠定了基础。

关键词：迟缓爱德华菌溶血素胞外蛋白酶 Dot-ELISA 检测水产动物

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猪流感病毒进化方式及其流行特点

微生物学报 2009年第9期49卷 1138-1145页

作者：祁贤陆承平南京农业大学动物医学院南京210093

猪在甲型流感病毒生态分布和遗传进化中占有重要地位。猪的呼吸道上皮同时具有禽和人流感病毒2种类型的受体,因此人和禽流感病毒都可以感染猪,猪被认为是禽、人流感病毒的中间宿主和不同来源流感病毒的基因"混合器"。猪流感病毒(Swine i... 详细信息

猪在甲型流感病毒生态分布和遗传进化中占有重要地位。猪的呼吸道上皮同时具有禽和人流感病毒2种类型的受体,因此人和禽流感病毒都可以感染猪,猪被认为是禽、人流感病毒的中间宿主和不同来源流感病毒的基因"混合器"。猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)的进化方式包括基因重配、抗原漂移和宿主适应性进化,其中基因重配是主要进化方式。与人类季节性流感病毒相比,SIV在全球的流行情况各不相同,呈地方流行性,并具有明显的地区差异。全球范围内流行的SIV亚型主要有3种:H1N1、H3N2和H1N2亚型,其中各亚型内病毒基因来源又不尽相同。欧洲、北美及我国猪群中流行的流感病毒在遗传进化和基因来源方面各具特色。目前欧洲猪群中流行的主要是类禽H1N1、H1N2和H3N2病毒,其中后两者是基因重配病毒。从1998年开始,古典猪H1N1、"人-猪-禽"三源基因重配H3N2、H1N1和H1N2病毒共存于北美的猪群中,其遗传变异日趋复杂。在基因进化上,欧洲和北美基因重配的SIV是目前新的人类流感大流行病原-"甲型H1N1病毒"-的母源病毒。我国猪群中流感病毒主要是古典猪H1N1和类人H3N2病毒,但近年来也分离到遗传上与欧洲和北美SIV高度相关的病毒,提示我国SIV的流行和进化趋势值得关注。1970年代以来,全球已陆续报道了50多起人感染SIV事件,表明SIV也是一种值得重视的人兽共患病,预示了SIV可能会成为人类流感流行毒株或为流行毒株提供基因。鉴于SIV在甲型流感病毒生态学上的重要意义,以及对人类公共卫生的潜在威胁,建议应尽早启动我国SIV的常规监测工作,密切关注SIV的流行动态,掌握其分子遗传进化规律。同时,将SIV的监测工作纳入整个流感病毒(人和动物流感病毒)的监测网络,在信息上实现共享,从生态学的高度把握我国流感病毒的流行和进化趋势,这对保护动物健康和预防人类流感大流行都有重要意义。

关键词：猪甲型流感病毒基因重配跨物种传播

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猪链球菌的烈性噬菌体和前噬菌体

微生物学报 2015年第4期55卷 389-394页

作者：汤芳陆承平南京农业大学世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室农业部动物细菌学重点实验室江苏南京210095

猪链球菌(Streptococcus suis,***)是一种重要的人畜共患病病原,携带有前噬菌体。本文对猪链球菌的烈性噬菌体和前噬菌体的研究现状做了综述,主要包括猪链球菌烈性噬菌体的形态及功能;烈性噬菌体裂解酶的结构及功能;烈性噬菌体末端酶大... 详细信息

猪链球菌(Streptococcus suis,***)是一种重要的人畜共患病病原,携带有前噬菌体。本文对猪链球菌的烈性噬菌体和前噬菌体的研究现状做了综述,主要包括猪链球菌烈性噬菌体的形态及功能;烈性噬菌体裂解酶的结构及功能;烈性噬菌体末端酶大亚基的活性;前噬菌体的比较基因组学、前噬菌体的裂解酶以及烈性噬菌体和溶原性噬菌体之间的相互转化,并对猪链球菌噬菌体与宿主的相互关系作了展望。

关键词：猪链球菌噬菌体裂解酶基因组

猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白诱导上皮细胞融合和凋亡

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微生物学报 2003年第3期43卷 407-412页

作者：曾巧英陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

猪链球菌 2型 (SS2 )溶菌酶释放蛋白 (MRP)的致病作用迄今不明 ,为此 ,以HEp 2细胞为上皮细胞体外模型 ,将纯化的MRP溶液和细胞共孵育 ,光镜观察 ,发现MRP可诱导细胞发生两种典型形态学变化 :一是诱导细胞融合形成多核巨细胞 ,随后巨细... 详细信息

猪链球菌 2型 (SS2 )溶菌酶释放蛋白 (MRP)的致病作用迄今不明 ,为此 ,以HEp 2细胞为上皮细胞体外模型 ,将纯化的MRP溶液和细胞共孵育 ,光镜观察 ,发现MRP可诱导细胞发生两种典型形态学变化 :一是诱导细胞融合形成多核巨细胞 ,随后巨细胞发生凋亡 ;二是诱导单个细胞凋亡。透射电镜观察和流式细胞分析确证MRP具有诱导上皮细胞凋亡的功能 ,凋亡率达 1 8%。证明MRP可单独作为SS2的毒力因子。

关键词：猪链球菌溶菌酶释放蛋白诱导上皮细胞融合细胞凋亡

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安徽地区克氏原螯虾白斑综合征的诊断及朔源

微生物学报 2013年第5期53卷 492-497页

作者：潘子豪杨政霖陆承平南京农业大学动物医学院南京210095

【目的】诊断安徽地区养殖的克氏原螯虾发生疫情的病原,追踪感染源,为疫病的防控提供依据。【方法】采集病料,参照OIE推荐的套式PCR法检测白斑综合征病毒(WSSV)。将病螯虾鳃丝组织研磨后离心,取上清液接种健康克氏原螯虾。透射电镜观察... 详细信息

【目的】诊断安徽地区养殖的克氏原螯虾发生疫情的病原,追踪感染源,为疫病的防控提供依据。【方法】采集病料,参照OIE推荐的套式PCR法检测白斑综合征病毒(WSSV)。将病螯虾鳃丝组织研磨后离心,取上清液接种健康克氏原螯虾。透射电镜观察病原特征。综合流行病源学及病原检测,分析养殖地区的可能感染源。【结果】发病螯虾感染了WSSV,动物实验可见和发病螯虾相同的临床症状,证实该病原引起养殖螯虾发病。电镜观察可见典型的白斑综合症病毒颗粒。流行病学调查显示,水产颗粒膨化饲料和冷冻饲料甲壳类检测阳性。【结论】该地区养殖的克氏原螯虾近年爆发的疫病病原为WSSV,推断地区性克氏原螯虾WSSV的感染并流行与污染的饲料有关。

关键词：克氏原螯虾白斑综合征套式PCR 感染源

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中国兽医专业学位教育

学位与研究生教育 2002年第1期 26-29页

作者：陆承平全国兽医专业学位教育指导委员会

一、中国兽医专业学位的形成与现状

关键词：中国兽医专业学位教育研究生教育学位设置培养目标职业资格证书

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迟缓爱德华菌的外膜蛋白图谱及耐药性分析

微生物学报 2001年第5期41卷 630-631页

作者：黄新新陆承平南京农业大学动物医学院

分析 2 7株不同来源的迟缓爱德华菌 (Et)的外膜蛋白 (OMP) ,可分为A～H 8个型。 2 1株致病株与 6株非致病株有明显不同的图谱。致病株OMP条带多而深浓 ,并且相同来源的菌株有几乎一致的图谱。其中国内致病株以E型为主 ,与ATCC参考株相... 详细信息

分析 2 7株不同来源的迟缓爱德华菌 (Et)的外膜蛋白 (OMP) ,可分为A～H 8个型。 2 1株致病株与 6株非致病株有明显不同的图谱。致病株OMP条带多而深浓 ,并且相同来源的菌株有几乎一致的图谱。其中国内致病株以E型为主 ,与ATCC参考株相似。非致病株OMP条带则浅而稀疏 ,来源虽不同 ,但图谱极类似。另外 ,6株非致病株对磺胺、庆大、四环素等抗生素普遍耐药 ,而致病株除少数几株外。

关键词：迟缓爱德华菌外膜蛋白图谱耐药性水产动物致病菌

猪链球菌2型胞外蛋白因子基因片段的克隆与表达

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中国兽医学报 2003年第2期23卷 163-165页

作者：欧瑜陆承平南京农业大学动物医学院江苏南京210095

根据猪链球菌 2型 (Streptococcus suis type 2 )胞外蛋白因子 (extracellular factor protein,EF)基因序列 ,设计和合成 1对引物 ,以猪链球菌 2型江苏 98分离株 HA980 1的基因组 DNA为模板 ,通过 PCR技术 ,扩增 epf基因 12 0 7～16 75... 详细信息

根据猪链球菌 2型 (Streptococcus suis type 2 )胞外蛋白因子 (extracellular factor protein,EF)基因序列 ,设计和合成 1对引物 ,以猪链球菌 2型江苏 98分离株 HA980 1的基因组 DNA为模板 ,通过 PCR技术 ,扩增 epf基因 12 0 7～16 75 bp序列 ,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体 p GEX- 6 p- 1中谷胱甘肽转移酶 (GST)基因的下游 ;将重组质粒转化入大肠杆菌 BL2 1 株 ,经 IPTG诱导可表达相对分子质量约为 4 10 0 0的融合蛋白。用 EF抗血清进行的免疫印迹分析表明 ,含有 epf基因 12 0 7～ 16 75 bp序列编码的肽段的融合蛋白不能被 EF抗血清识别。

关键词：猪链球菌2型胞外蛋白因子融合蛋白基因克隆基因表达