检索结果-南通市图书馆

柔嫩艾美耳球虫杨凌株3-1E基因的克隆、表达与蛋白结构预测

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中国兽医学报 2007年第6期27卷 845-849页

作者：翟军军于三科才学鹏林青窦永喜景志忠闫鸿斌田广孚中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

应用PCR技术,从柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊子孢子cDNA表达文库中扩增得到鸡***杨凌株(YL)子孢子表面抗原3-1E基因。序列分析表明,*** YL 3-1E基因的开放阅读框(ORF)为513个碱基,编码170个氨基酸,与报道的***甘肃株(GS)3... 详细信息

应用PCR技术,从柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊子孢子cDNA表达文库中扩增得到鸡***杨凌株(YL)子孢子表面抗原3-1E基因。序列分析表明,*** YL 3-1E基因的开放阅读框(ORF)为513个碱基,编码170个氨基酸,与报道的***甘肃株(GS)3-1E基因相似性为99.8%,两者推导的氨基酸序列相似性为99.4%;而与文献报道的堆型艾美耳球虫(***)美国株(US)3-1E基因序列的相似性为98.8%,推导的氨基酸序列相似性为98.8%。利用生物信息学和分子生物学软件对3-1E基因编码的蛋白进行结构预测,结果表明,该蛋白为结构松散的球状蛋白。将3-1E基因亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,构建pGEX-3-1E重组质粒并在大肠杆菌BL21中进行表达,表达产物经SDS-PAGE分析,表明成功地表达出了分子量为44.7 ku的融合蛋白。该研究为球虫基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词： 3-1E基因柔嫩艾美耳球虫克隆表达蛋白结构预测

兔斯氏艾美耳球虫口服DNA疫苗的安全性、稳定性与免疫原性

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兔斯氏艾美耳球虫口服DNA疫苗的安全性、稳定性与免疫原性

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：孟庆玲才学鹏乔军骆学农闫鸿斌贾万忠景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室石河子大学动物科技学院

对携带兔斯氏艾美耳球虫MIC-5基因的真核表达质粒asd-pBMIC-5-IL-15的减毒鼠伤寒沙门菌X4550(X4550/asd-pBMIC-5-IL-15)进行了安全性、稳定性与免疫原性试验。结果表明,重组菌在109cfu剂量以下对家兔是安全的;连续培养30代重组菌,质粒... 详细信息

对携带兔斯氏艾美耳球虫MIC-5基因的真核表达质粒asd-pBMIC-5-IL-15的减毒鼠伤寒沙门菌X4550(X4550/asd-pBMIC-5-IL-15)进行了安全性、稳定性与免疫原性试验。结果表明,重组菌在109cfu剂量以下对家兔是安全的;连续培养30代重组菌,质粒可稳定存在于X4550内,具有良好的遗传稳定性;用重组菌2次免疫动物后,既能诱导机体产生抗兔斯氏艾美耳球虫抗体,也能显著增强淋巴细胞增殖水平,抗球虫指数为164.4。试验结果显示,减毒沙门氏菌介导的兔球虫调节型DNA疫苗具有良好的安全性、稳定性和兔疫原性。

关键词：斯氏艾美耳球虫微线蛋白-5基因减毒鼠伤寒沙门氏菌免疫原性

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多房棘球绦虫感染的检测方法研究进展

中国兽医科学 2024年第7期54卷 946-954页

作者：游杰李立孙继文詹舒懿逯文颖周蜓蜓殷宏贾万忠闫鸿斌中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家动物包虫病专业实验室甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730000 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫(中绦期)——棘球蚴引起的一类人兽共患寄生虫病。感染棘球绦虫的终末宿主(犬、狐狸等)是传染源,及时准确检测终末宿主感染状况是防控棘球蚴病的关键环节。本文综述了多房棘球绦虫感染的病原学、分子生物学... 详细信息

棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫(中绦期)——棘球蚴引起的一类人兽共患寄生虫病。感染棘球绦虫的终末宿主(犬、狐狸等)是传染源,及时准确检测终末宿主感染状况是防控棘球蚴病的关键环节。本文综述了多房棘球绦虫感染的病原学、分子生物学和免疫学检测方法的研究进展,以期为终末宿主多房棘球绦虫感染的检测方法研究和试剂盒研发提供指导。

关键词：多房棘球绦虫犬科动物粪DNA 粪抗原分子生物学检测免疫学诊断

多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基基因的克隆及原核表达

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中国畜牧兽医 2017年第10期44卷 2858-2864页

作者：杨洋李文卉张念章李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业部兽医公共卫生重点开放实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELIS... 详细信息

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,Tm PKA-C基因开放阅读框的长度为1 032 bp,可编码343个氨基酸。Tm PKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的分子质量大小约42 ku。Western blotting结果表明,该重组蛋白既能与自然感染脑多头蚴的绵羊血清发生特异性反应,又能与人工感染脑多头蚴不同时间段的绵羊血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。间接ELISA分析结果表明,脑多头蚴绵羊血清能与重组蛋白发生特异性反应,进一步证明该重组蛋白的反应原性良好。本研究为筛选脑多头蚴病诊断新抗原奠定了基础。

关键词：多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达反应原性

多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

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多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

第九届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：李文卉张念章杨洋刘垠鞠闫鸿斌李立贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

引言脑多头蚴病是由多头带绦虫的幼虫(脑多头蚴)寄生于绵羊等中间宿主的中枢神经系统引起的一种绦虫蚴病,该病引起感染宿主的最终死亡,对养羊业造成巨大的经济损失,而且人也能被感染,是一种被忽视的人兽共患寄生虫病。

关键词：多头带绦虫发育阶段原头节不同部位

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新疆部分地区兔球虫种类调查研究

动物医学进展 2007年第8期28卷 44-47页

作者：孟庆玲田广孚闫鸿斌张冬峰中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室

对新疆部分地区家兔球虫的种类进行调查,发现兔的艾美耳球虫检出率为100%,并检出10种兔艾美耳球虫,即斯氏艾美耳球虫(Eimera stiedai)、大型艾美耳球虫(***)、无残艾美耳球虫(***)、梨型艾美耳球虫(***)、小型艾美耳球虫(Eexigua)、肠... 详细信息

对新疆部分地区家兔球虫的种类进行调查,发现兔的艾美耳球虫检出率为100%,并检出10种兔艾美耳球虫,即斯氏艾美耳球虫(Eimera stiedai)、大型艾美耳球虫(***)、无残艾美耳球虫(***)、梨型艾美耳球虫(***)、小型艾美耳球虫(Eexigua)、肠艾美耳球虫(***)、盲肠艾美耳球虫(***)、穿孔艾美耳球虫((***)、野兔艾美耳球虫(***)、黄艾美耳球虫(***),其中穿孔艾美耳球虫、小型艾美耳球虫和斯氏艾美耳球虫为优势虫种。

关键词：球虫种类调查

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四价鸡球虫苗的免疫效果研究

中国预防兽医学报 2009年第3期31卷 236-240页

作者：闫鸿斌贾万忠田广孚李万坤孟庆玲郭爱疆才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

在实验条件下观察自主研制的四价鸡球虫苗(LCV)对平养鸡的安全性和免疫保护效果。试验设空白对照组(NC)、攻虫对照组(PC)和免疫组(VC)3个试验组,每组30只鸡。试验结果:空白对照组、攻虫对照组和免疫组的相对增重率依次为100%、84.77%和9... 详细信息

在实验条件下观察自主研制的四价鸡球虫苗(LCV)对平养鸡的安全性和免疫保护效果。试验设空白对照组(NC)、攻虫对照组(PC)和免疫组(VC)3个试验组,每组30只鸡。试验结果:空白对照组、攻虫对照组和免疫组的相对增重率依次为100%、84.77%和94.97%;免疫后(免疫后攻虫前)排卵囊高峰期间(免疫后5d～10d),免疫组平均OPG(即每克粪便中的卵囊数)为2.70×104,攻虫后排卵囊高峰期间(攻虫后6d～13d)攻虫对照组组平均OPG为2.32×106,高于免疫组(2.69×105)(p<0.01);攻虫后各组死亡率依次为0、10%和0;3个组的ACI(抗球虫指数)分别为200.0、154.77和184.97,免疫组试验效果最佳。结果表明,LCV安全性高、免疫保护效果理想,接种该疫苗后的鸡对较大剂量攻虫具有较强的抵抗力。

关键词：鸡球虫疫苗 LCV 免疫

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多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定

多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定

2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第16次学术研讨会

作者：李文卉岳龙张念章刘垠鞠闫鸿斌李立贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

目的:脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于羊等神经系统引起的一种人畜共患寄生虫病。该病可引起家畜死亡,不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且威胁着人体健康。方法:本研究以多头带绦虫基因组DNA为模板,PCR扩增TmAdh... 详细信息

目的:脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于羊等神经系统引起的一种人畜共患寄生虫病。该病可引起家畜死亡,不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且威胁着人体健康。方法:本研究以多头带绦虫基因组DNA为模板,PCR扩增TmAdh基因家族成员基因组序列,获得6个含有N端信号肽和1个FnⅢ结构域的基因序列。序列预测分析发现6个TmAdh基因都由3个外显子和2个内含子组成;其蛋白序列一致性在44.9-99.2%;进化分析发现该蛋白属于带科绦虫免疫保护性抗原家族的一个新的亚类。将TmAdh1-4基因进行在pGEX4T-1表达系统成功表达出产物大小约为39.0、38.1、38.9和37.8ku的重组蛋白,并进行反应原性及细胞黏着活性检测。结果:脑多头蚴自然感染绵羊血清与TmAdh3重组蛋白反应明显,而与TmAdh1、TmAdh2和TmAdh4重组蛋白反应不明显,而且该蛋白都具有细胞黏着活性。免疫组化表明TmAdh1-4重组蛋白主要分布在脑多头蚴原头节的上皮、顶突、小钩、组织内部有零星分布。重组蛋白的动物免疫保护实验结果显示TmAdh1、TmAdh3和TmAdh4重组蛋白免疫绵羊后抗体水平都显著上升,三免后达到峰值,攻虫后抗体水平开始逐渐下降。动物免疫保护实验表明TmAdh1、TmAdh3、TmAdh4重组蛋白的减虫率分别为61.71%、53.17%、50.76%。结论:本研究为进一步研制脑多头蚴病疫苗奠定基础。

关键词：多头带绦虫 TmAdh 纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域原核表达黏着活性功能性抗原

柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建及其基因的克隆与鉴定

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柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建及其基因的克隆与鉴定

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会

作者：林青才学鹏窦永喜翟军军闫鸿斌张彦明田广孚景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室西北农林科技大学动物科技学院

在无Rnase污染的环境下,提取柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子RNA,进而纯化mRNA, 采用oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和第二链,并在其两端加EcoRI／Hind III定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoR I／HindIII粘性... 详细信息

在无Rnase污染的环境下,提取柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子RNA,进而纯化mRNA, 采用oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和第二链,并在其两端加EcoRI／Hind III定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoR I／HindIII粘性末端的ZSCREEN载体的两臂之间。用PhageMaker extract对以上连接产物进行体外包装,形成完整的噬菌体,并用该噬菌体转染大肠杆菌ER1647,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆*** 3-1E基因,并进行测序。结果表明,成功构建了***孢子化卵囊子孢子的cDNA文库,文库原始库容量约为4×106pfu／mL,插入片段约100 bp～3 000 bp之间,扩增得到特定的*** 3-1E基因,说明文库质量高、代表性强,为进一步从文库中筛选相关基因提供了有效的工具。

关键词：柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊子孢子 cDNA表达文库构建