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光唇鱼和宽鳍鱲线粒体全序列测定及分析

光唇鱼和宽鳍鱲线粒体全序列测定及分析

作者：闫锦锦安徽师范大学

学位级别：硕士

通过测定光唇鱼和宽鳍鱲的线粒体全序列，我们发现它们都是由单个共价闭合的环状染色体组成，序列长度分别为16589bp和16611bp。其基因排列顺序与已发表的鲤科鱼类线粒体全序列类似。都包含13个蛋白质编码基因，22个tRNA基因，2个rRNA... 详细信息

通过测定光唇鱼和宽鳍鱲的线粒体全序列，我们发现它们都是由单个共价闭合的环状染色体组成，序列长度分别为16589bp和16611bp。其基因排列顺序与已发表的鲤科鱼类线粒体全序列类似。都包含13个蛋白质编码基因，22个tRNA基因，2个rRNA基因，和1个D-loop区。两种鱼的蛋白质编码基因除COX1是以GTG作为起始密码子外，其它均是以ATG起始密码子，但它们终止密码子的使用却有所不同，包括了TAA，TAG，TA和T。光唇鱼和宽鳍鱲线粒体全序列中A+T含量分别为55.7%和56.2%，表现出A+T的偏好性，这与脊椎动物偏好A+T是一致的。通过与其他鲤科鱼类的控制区比较，我们识别了这两种鱼的控制区的3个保守序列区域。

关键词：光唇鱼宽鳍鱲线粒体基因组

重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的中试发酵及纯化工艺

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中国生物工程杂志 2015年第2期35卷 78-83页

作者：刘亚龙闫东明翁樑邹雪刘丹彭超苏亚南闫锦锦张静郭志燕芜湖康卫生物科技有限公司芜湖241000

重组基因工程菌经中试发酵后,诱导表达出以包涵体形式存在的重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)蛋白。采用Q Sepharose High Perfomance阴离子交换层析,将洗涤、裂解后得到的可溶性蛋白进行纯化,得到纯度高达98%的重组LTB蛋白。利用S... 详细信息

重组基因工程菌经中试发酵后,诱导表达出以包涵体形式存在的重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)蛋白。采用Q Sepharose High Perfomance阴离子交换层析,将洗涤、裂解后得到的可溶性蛋白进行纯化,得到纯度高达98%的重组LTB蛋白。利用Sephadex G-25分子筛层析法将重组LTB蛋白中的盐和尿素脱去,使蛋白复性,最终获得目的蛋白纯度为95%。将得到的重组LTB蛋白进行免疫双扩散实验,结果表明此蛋白具有良好的生物学活性。通过高效表达重组LTB蛋白的大肠杆菌发酵,确定了其中试发酵工艺,并建立了Q柱一步纯化即可获得目的蛋白的方法,该工艺简捷、高效、易于工业化生产,为重组LTB蛋白的生产和应用奠定了基础。

关键词： LTB 包涵体纯化

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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的克隆表达及纯化

生物技术通报 2015年第7期31卷 220-225页

作者：闫锦锦闫东明邹雪刘丹彭超苏亚南芜湖康卫生物科技有限公司芜湖241000

为获得高纯度具有生物活性的尿素酶B亚单位(Ure B)蛋白,利用PCR方法扩增出ure B目的基因,将其插入到p ET28a载体中,构建表达质粒p ET28a-ure B。将鉴定正确的质粒转入大肠杆菌中培养,通过IPTG诱导表达获得Ure B蛋白。采用Q Sepharose Hi... 详细信息

为获得高纯度具有生物活性的尿素酶B亚单位(Ure B)蛋白,利用PCR方法扩增出ure B目的基因,将其插入到p ET28a载体中,构建表达质粒p ET28a-ure B。将鉴定正确的质粒转入大肠杆菌中培养,通过IPTG诱导表达获得Ure B蛋白。采用Q Sepharose High Per formance阴离子交换层析纯化,G-25凝胶过滤层析脱盐,并通过SDS-PAGE和免疫双扩散法对Ure B蛋白进行鉴定。结果表明,该蛋白相对分子质量约为64 k D,与预期结果相符,脱盐后获得的Ure B蛋白纯度为98.5%;免疫双扩散法证明该蛋白具有良好的生物活性和反应特异性。最终确定的纯化工艺,达到了一步纯化即得到高纯度、具有生物活性蛋白的目的,该纯化工艺简单、有效。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶B亚单位 UreB蛋白蛋白纯化

对接受手术治疗的瘢痕子宫切口妊娠孕妇进行综合护理的效果探析

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当代医药论丛 2020年第1期18卷 247-248页

作者：闫锦锦李萍萍乔黎中国人民解放军陆军第七十一集团军医院妇产科

目的:探讨对接受手术治疗的瘢痕子宫切口妊娠孕妇进行综合护理的临床效果。方法:选取2017年1月至2018年12月期间在中国人民解放军陆军第七十一集团军医院接受手术治疗的50例瘢痕子宫切口妊娠孕妇为研究对象。将其随机分为对照组(n=25)... 详细信息

目的:探讨对接受手术治疗的瘢痕子宫切口妊娠孕妇进行综合护理的临床效果。方法:选取2017年1月至2018年12月期间在中国人民解放军陆军第七十一集团军医院接受手术治疗的50例瘢痕子宫切口妊娠孕妇为研究对象。将其随机分为对照组(n=25)和试验组(n=25)。对对照组孕妇进行常规护理。在此基础上,对试验组孕妇进行综合护理。治护结束后,对比两组孕妇焦虑、抑郁心理的改善情况和对护理服务的满意度。结果:治护后,与对照组孕妇相比,试验组孕妇对护理服务的总满意率较高,其SDS及SAS的评分均较低,P<0.05。结论:对接受手术治疗的瘢痕子宫切口妊娠孕妇进行综合护理可显著减轻其焦虑、抑郁的心理,提高其对护理服务的满意度。

关键词：瘢痕子宫切口妊娠综合护理焦虑抑郁护理满意度

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重组LTB-UreB融合蛋白的结构研究

药物生物技术 2015年第5期22卷 400-402页

作者：彭超刘丹邹雪翁樑闫锦锦刘亚龙郭志燕苏亚南潘安龙芜湖康卫生物科技有限公司安徽芜湖241000

重组LTB-Ure B融合蛋白可有效的预防幽门螺杆菌的感染,但对其蛋白结构研究至今并无相关报道。由于蛋白质的一级结构对其空间结构、性质及功能都是十分重要的,因此对重组LTB-Ure B融合蛋白的一级结构进行了研究,为进一步研究其功能及作... 详细信息

重组LTB-Ure B融合蛋白可有效的预防幽门螺杆菌的感染,但对其蛋白结构研究至今并无相关报道。由于蛋白质的一级结构对其空间结构、性质及功能都是十分重要的,因此对重组LTB-Ure B融合蛋白的一级结构进行了研究,为进一步研究其功能及作用机制奠定基础。文章利用不同方法对重组LTB-Ure B融合蛋白的纯度、分子质量、N-端、C-端及肽段覆盖率进行了分析,结果显示,重组LTB-Ure B融合蛋白一级结构的各项分析数据与理论结果均相符。该研究建立了重组LTB-Ure B融合蛋白一级结构研究方法,获得了蛋白结构相关信息,可为重组LTB-Ure B融合蛋白的功能研究奠定基础。

关键词：重组LTB—UreB融合蛋白一级结构

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口服重组幽门螺杆菌疫苗冻干工艺的优化

中国生物制品学杂志 2015年第2期28卷 167-169,176页

作者：张静翁樑邹雪李建旭刘丹彭超葛自强夏名鹏刘亚龙闫锦锦郭志燕芜湖康卫生物科技有限公司安徽芜湖241000

目的优化口服重组幽门螺杆菌疫苗的冻干工艺,以降低冻干过程中制剂瓶的破瓶率。方法通过改变冻干工艺中预冻、升华干燥、解析干燥阶段的工艺参数,对12批口服重组幽门螺杆菌疫苗进行冻干试验,在保证样品外观、水分、p H值及无菌检查合格... 详细信息

目的优化口服重组幽门螺杆菌疫苗的冻干工艺,以降低冻干过程中制剂瓶的破瓶率。方法通过改变冻干工艺中预冻、升华干燥、解析干燥阶段的工艺参数,对12批口服重组幽门螺杆菌疫苗进行冻干试验,在保证样品外观、水分、p H值及无菌检查合格的前提下,以制剂瓶的破瓶率为指标筛选最优冻干工艺。结果口服重组幽门螺杆菌疫苗的最优冻干工艺条件为:预冻期2 h内冷冻至-45℃并维持4.5 h;升华干燥时阶段性升温,总历时34 h;解析干燥时28℃维持12 h。按此工艺冻干后的口服重组幽门螺杆菌疫苗样品的外观、水分、p H值及无菌检查均在合格范围内,且制剂瓶的破瓶率为0。结论优化后的口服重组幽门螺杆菌疫苗冻干工艺稳定可靠,为今后的大规模生产奠定了基础。

关键词：口服重组幽门螺杆菌疫苗冷冻干燥优化破瓶率

母婴床旁护理模式关键流程在产后护理中的应用效果

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人人健康 2017年第8期 173-173页

作者：闫锦锦张朵朵中国人民解放军第97医院

目的:分析研究将母婴床旁护理应用于产后护理的效果,探讨其关键流程对于产后的护理效果影响。方法:采取本院在近一年收治的200例产妇与新生儿为观察对象,将其随机划分成研究组以及参照组。为参照组提供传统产科护理,研究组则需要根据传... 详细信息

目的:分析研究将母婴床旁护理应用于产后护理的效果,探讨其关键流程对于产后的护理效果影响。方法:采取本院在近一年收治的200例产妇与新生儿为观察对象,将其随机划分成研究组以及参照组。为参照组提供传统产科护理,研究组则需要根据传统护理进行一定的优化再造实施母婴床旁护理模式关键流程,观察对比两组的产后护理效果。结果:在实施护理后,对比两组产后护理效果发现,研究组护理有效率显著优于参照组,对比差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:采用新型的母婴床旁护理模式关键流程对于产后护理具有较好的护理效果,其将关键流程进行优化能够有效的提高对于产妇以及新生儿的护理质量,为母婴提供高质量的护理服务,值得在产科护理中推广应用。

关键词：母婴床旁护理模式关键流程产后护理应用效果