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Effects of Inotodiol Extracts from Inonotus Obliquus on Proliferation Cycle and Apoptotic Gene of Human Lung Adenocarcinoma Cell Line A549

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Chinese Journal of Integrative Medicine 2011年第2期17卷 218-223页

作者：钟秀宏王立波孙东植 Department of Pathology Jilin Medical College Department of Pathology Jilin City People's Hospital Department of Pathology and Forensic Medicine Basic Medical CollegeYanbian University Health Science Center

Objective： To observe the proliferation inhibition, apoptosis, and cell proliferation cycle of human lung carcinoma cell line A549 treated with Inotodiol extracts from Inonotus obliquus and explore the possibility of Inotodiol extracts from Inonotus obliquus as a new tumor chemopreventive drug. Methods： Human lung cancer cell line A549 was treated with different concentrations of Inotodiol, the effects of Inotodiol on cell apoptosis, the expression of Ki-67, Bcl-2, Bax, and p53 and cell cycle were detected by TUNEL assay, immunohistochemistry, and flow cytometry assay respectively. Results： Inotodiol extracts had antiproliferation effect on human lung carcinoma cell line A549. The expression of Ki-67 decreased with the increase of Inotodiol concentration and exposure time （P〈0.05）, in a close-dependent and time-dependent manner. The typical characteristics of the apoptosis of A549 cells treated with Inotodiol were observed, and the apoptotic rate of A549 cell at 48 h was the highest by TUNEL assay. Inotodiol arrested A549 cells in the S phase, and apoptotic peak was observed by flow cytometry. Immunocytochemistry indicated that the expression of Bcl-2 protein decreased, while the expression of p53 and Bax proteins increased in A549 cells treated with Inotodiol, compared with the control cells （P〈0.05）. Conclusion： Inotodiol can inhibit proliferation and induce the apoptosis of A549 cells, and its molecular mechanism may be associated with the up-regulating expression of p53 and bax proteins and down- regulating expression of Bcl-2 protein, which arrested A549 cells in S phase.

关键词： Inonotus obliquus A549 apoptotic gene cell cycle cell proliferation Ki-67

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桦褐孔菌提取物抑制人胃癌BGC-823细胞株增殖及诱导凋亡的实验研究

桦褐孔菌提取物抑制人胃癌BGC-823细胞株增殖及诱导凋亡的实验研究

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作者：钟秀宏延边大学

学位级别：硕士

目的：在体外实验中，观察桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用及凋亡相关基因表达的影响，为其成为防治肿瘤的菌类药物提供实验依据。方法：选用人胃癌BGC-823细胞株进行体外培养，用MTT比色法测定不同方法提... 详细信息

目的：在体外实验中，观察桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用及凋亡相关基因表达的影响，为其成为防治肿瘤的菌类药物提供实验依据。方法：选用人胃癌BGC-823细胞株进行体外培养，用MTT比色法测定不同方法提取的桦褐孔菌提取物对胃癌BGC-823细胞株的抗增殖作用。应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜、吖啶橙-溴化乙锭(AO／EB)双染色荧光显微镜及透射电镜技术观察细胞凋亡形态学变化。通过脱氧核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)和AO／EB双染色法检测细胞凋亡率。应用流式细胞术进行定量并作细胞周期分析。采用免疫细胞化学染色法检测药物处理前后Ki-67抗原及凋亡相关基因产物bax，bcl-2，caspase-3，caspase-9蛋白的表达。结果：1)MTT实验结果表明：桦褐孔菌的水提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物在10μg／ml～80μg／ml范围内，于12h、24h、48h、72h对胃癌BGC-823细胞株均有抑制生长作用，并表现出浓度、时间依赖性关系，上述提取物在终浓度80μg／ml、于48h时，体外最大抑制率分别达到51％、62％、60％，桦褐孔菌的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物对人胃癌BGC-823细胞株生长抑制作用高于水提取物。2)HE染色光镜下，实验组BGC-823肿瘤细胞体积变小、变圆，核染色质浓缩或染色质块形成，有的细胞膜起泡形成凋亡小体;倒置显微镜下，实验组BGC-823肿瘤细胞体积变小、变圆，核染色质凝集，细胞间连接疏松，贴壁能力减弱;AO／EB双染色荧光显微镜下，实验组BGC-823肿瘤细胞胞核染色质呈橘红色，胞质内的橘红色或橘黄色荧光消失，细胞周围可见亮绿色荧光的凋亡小体;透射电镜观察，80μg／ml桦褐孔菌水提取物处理后的凋亡肿瘤细胞核染色质固缩、边集，胞质内有空泡出现，还可见凋亡小体凸出细胞表面。3)AO／EB双染色细胞凋亡半定量方法结果，80μg／ml桦褐孔菌水提取物作用BGC-823胃癌细胞12h、24h、48h、72h，凋亡率分别为3.5％、10％、25％、15％，不同时间段相比有统计学差异(p＜0.01或

关键词：桦褐孔菌提取物人胃癌BGC-823细胞株细胞凋亡细胞增殖 bcl-2 bax ki-67 caspase-3 caspase-9

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桦褐孔菌多糖对微波辐射致大鼠免疫损伤的防护作用

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中国老年学杂志 2014年第23期34卷 6685-6686页

作者：孙艳美钟秀宏吕士杰吉林医药学院检验学院吉林吉林132013 吉林医药学院病理学教研室吉林医药学院生物化学教研室

目的探讨桦褐孔菌多糖对高功率微波辐射致大鼠免疫损伤的影响。方法 18只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组、微波辐射模型组和药物预防组,每组6只。正常对照组不予任何处理,微波辐射模型组采用微波辐射装置辐射6 min,照射平均功率密度... 详细信息

目的探讨桦褐孔菌多糖对高功率微波辐射致大鼠免疫损伤的影响。方法 18只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组、微波辐射模型组和药物预防组,每组6只。正常对照组不予任何处理,微波辐射模型组采用微波辐射装置辐射6 min,照射平均功率密度为200 m W/cm2;药物预防组先用桦褐孔菌多糖溶液灌胃,每次2 ml(按400 mg/kg),1次/d,连续10 d,然后当天进行微波辐射,照射条件同微波辐射模型组。第11天全部动物乙醚麻醉,股动脉取血,检测大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及大鼠血清Ig G含量,冰浴下立即取大鼠脾脏,观察各组脾脏形态学的变化。结果与正常对照组比较,微波辐射模型组大鼠脾脏白髓和红髓结构紊乱,淋巴细胞坏死和凋亡;药物预防组与微波辐射模型组比较,大鼠脾脏形态结构上的损害较轻,大鼠红髓与白髓分界清晰,脾脏生发中心均可见。与正常对照组比较,微波辐射模型组大鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数都明显降低,血清中Ig G含量也减少(P<0.05);与微波辐射模型组比较,药物预防组大鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数都明显升高,血清中Ig G含量也增加(P<0.05)。结论桦褐孔菌多糖能提高机体的体液免疫水平和非特异性免疫能力,对微波辐射致机体的免疫功能损伤有一定的防护作用。

关键词：桦褐孔菌多糖微波辐射免疫损伤

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灯盏花素对抗结核药致小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

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中国药学杂志 2011年第16期46卷 1242-1244页

作者：杨淑艳钟秀宏张以忠赵丽微吉林医药学院吉林吉林132013

目的探讨灯盏花素对抗结核药致小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法 40只小鼠随机分为对照组、模型组、护肝片组、灯盏花素高和低剂量共5组。除对照组外,其余各组每天采用异烟肼和利福平灌胃造成肝损伤模型,2 h后,对照组和模型组分别予... 详细信息

目的探讨灯盏花素对抗结核药致小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法 40只小鼠随机分为对照组、模型组、护肝片组、灯盏花素高和低剂量共5组。除对照组外,其余各组每天采用异烟肼和利福平灌胃造成肝损伤模型,2 h后,对照组和模型组分别予以等体积生理盐水灌胃,其余各组分别予以护肝片、灯盏花素灌胃,连续2周。分别检测各组小鼠肝指数和血清谷丙转氨酶(ALT)的活性;肝组织匀浆丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及肝组织病理学变化。结果灯盏花素和护肝片组均可明显降低肝损伤小鼠肝指数、血清ALT活性、肝匀浆MDA的含量,并能显著提高肝匀浆SOD的活性。肝组织病理学检查,灯盏花素组明显减轻肝细胞变性和坏死。结论灯盏花素对抗结核药致小鼠肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。

关键词：灯盏花素抗结核药肝损伤肝保护

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尾加压素Ⅱ对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响

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中国老年学杂志 2015年第19期35卷 5425-5427页

作者：高宇钟秀宏黄丽红吉林大学中日联谊医院神经内二科吉林长春130033 吉林医药学院病理教研室吉林大学中日联谊医院老年病科

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV304,将不同浓度UⅡ及ox-LDL与内皮细胞共同孵育24 h后,应用倒置显微镜观察细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测... 详细信息

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV304,将不同浓度UⅡ及ox-LDL与内皮细胞共同孵育24 h后,应用倒置显微镜观察细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测内皮细胞活性,TUNEL、流式细胞仪检测内皮细胞凋亡,免疫组化法检测内皮细胞凋亡基因bcl-2,bax,caspase-3蛋白表达水平。结果 ox-LDL(20μg/ml)处理24 h后,可诱导内皮细胞凋亡;同时给予不同浓度的UⅡ(20μg/ml ox-LDL+10-10mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-9mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-8mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-7mol/L UⅡ)处理24 h后,可显著增强ox-LDL诱导内皮细胞凋亡作用,并呈浓度依赖性。ox-LDL处理内皮细胞24 h后,bcl-2蛋白阳性表达率降低,而bax、caspase-3阳性表达率升高。同时给予UⅡ可增强促凋亡作用,与ox-LDL组比较,ox-LDL+UⅡ组的bcl-2蛋白阳性表达率显著降低(P<0.05),而bax、caspase-3阳性表达率显著升高(P<0.05)。结论 UⅡ可增强ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡,并呈浓度依赖性,其作用可能与bcl-2、bax、caspase-3调节有关。

关键词：尾加压素 ox-LDL 内皮细胞凋亡

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桦褐孔菌多糖对微波辐射致大鼠免疫损伤的影响

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中国老年学杂志 2015年第3期35卷 758-759页

作者：孙艳美钟秀宏吕士杰吉林医药学院检验学院吉林吉林132013 吉林医药学院病理学教研室吉林医药学院生物化学教研室

目的探讨桦褐孔菌多糖对微波辐射致大鼠免疫损伤的影响。方法 18只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组、微波辐射模型组和微波辐射加药物治疗组。正常对照组不予任何处理;微波辐射模型组采用微波辐射装置辐射6 min,照射平均功率密度为200... 详细信息

目的探讨桦褐孔菌多糖对微波辐射致大鼠免疫损伤的影响。方法 18只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组、微波辐射模型组和微波辐射加药物治疗组。正常对照组不予任何处理;微波辐射模型组采用微波辐射装置辐射6 min,照射平均功率密度为200 m W/cm2;微波辐射加药物治疗组照射条件同微波辐射模型组,微波辐射后开始用桦褐孔菌多糖溶液灌胃,连续10 d。测定各组大鼠血清白细胞介素(IL)-2、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的活性,观察各组胸腺形态学的变化。结果微波辐射模型组的胸腺皮质和髓质中的淋巴细胞有不同程度的损伤,生发中心减少;药物治疗组大鼠胸腺组织的损伤有所减轻。与正常对照组比较,微波辐射模型组大鼠血清中IL-2、IL-6的活性显著降低,而TNF-α的活性有所升高(P<0.05);与微波辐射模型组比较药物治疗组IL-2、IL-6的活性升高,TNF-α的活性降低(P<0.05)。结论高功率微波辐射对免疫器官具有损伤效应,桦褐孔菌多糖可能通过调节细胞因子而发挥防辐射作用。

关键词：桦褐孔菌多糖微波辐射细胞因子免疫损伤

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结肠癌早期诊断及预防措施

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中国慢性病预防与控制 2019年第5期27卷 387-390页

作者：钟秀宏王月华蒋林哲崔涛吉林医药学院基础医学院吉林省吉林132013 吉林医药学院检验学院吉林市人民医院普外科北华大学附属医院消化内科

结肠癌(colon cancer)是消化道最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年有110万新发病例,约50万人因此死亡[1],从全球范围看,欧洲和北美发病率较高[2]。但是随着我国人口老龄化、饮食结构脂肪成分增多以及结肠癌普查工作的开展,结肠癌在我国的... 详细信息

结肠癌(colon cancer)是消化道最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年有110万新发病例,约50万人因此死亡[1],从全球范围看,欧洲和北美发病率较高[2]。但是随着我国人口老龄化、饮食结构脂肪成分增多以及结肠癌普查工作的开展,结肠癌在我国的发病率呈逐年上升的趋势,发病年龄也有年轻化趋势[3]。因此,降低我国结肠癌的发病率和死亡率是亟待解决的公共卫生问题。研究发现,结肠癌的预后与诊治时机密切相关,早期5年生存率可达90%以上,进展期5年生存率不到5%[4]。因此,生存率的提高有赖于早期诊断,早期诊断包含两方面含义,一是早期发现,二是早期确诊。

关键词：结肠癌早期诊断预防措施

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药理性预适应对心肌缺血保护机制研究进展

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中国医院药学杂志 2009年第6期29卷 495-497页

作者：张雷杨淑艳钟秀宏张以忠郑中华吉林医药学院附属医院药剂科吉林吉林132013 吉林医药学院病理教研室吉林吉林132013

目的:综述药理性预适应对心肌缺血保护机制研究进展。方法:查阅国内外相关文献,并将其分析、归纳。结果:许多中西药物对心肌缺血具有预适应样保护作用。结论:药理性预适应对心肌缺血性疾病的治疗具有广泛的临床应用前景。

关键词：药物预适应心肌保护

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桃仁乙醇提取物对亚急性衰老大鼠的抗衰老作用

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中国老年学杂志 2013年第11期33卷 2607-2608页

作者：于兆霞陈正爱钟秀宏朴花子长白山职业技术学院康复保健系吉林白山134300 延边大学医学部药理教研室吉林医药学院病理学教研室

目的观察桃仁乙醇提取物(EETR)对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力、相关酶及免疫器官的影响。方法 Wistar大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖150 ***-1.d-1制备亚急性衰老大鼠模型,随机分正常组、模型组、EETR小、中、大(2.5、5.0、10.0 ***-1.... 详细信息

目的观察桃仁乙醇提取物(EETR)对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力、相关酶及免疫器官的影响。方法 Wistar大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖150 ***-1.d-1制备亚急性衰老大鼠模型,随机分正常组、模型组、EETR小、中、大(2.5、5.0、10.0 ***-1.d-1)剂量组及人参皂苷组(人参皂苷混悬液400 ***-1.d-1)连续灌胃给药60 d,末次给药后Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,之后取胸腺、脾脏称重,测定胸腺、脾脏指数,同时取脑检测乙酰胆碱酯酶(AchE)活性。结果与模型组比较EETR各剂量组学习记忆能力均有所提高(P<0.05);脑组织AchE活性降低(P<0.05,P<0.01);同时增加胸腺、脾脏重量(P<0.05)。结论 EETR对D-半乳糖所致衰老大鼠具有延缓衰老的作用。

关键词：桃仁 D-半乳糖抗衰老学习记忆

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桦褐孔菌的药理作用研究进展

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中国药房 2007年第25期18卷 1983-1984页

作者：钟秀宏杨淑艳孙东植吉林医药学院病理学教研室吉林市132013 延边大学基础医学院病理学与法医学教研部延吉市133000

桦褐孔菌属于真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌科、褐卧孔菌属,学名:Fuscoporia obliqua(***.)Aoshi或Inonotus obliquus(Fr.)Pilat,俄语名:Chaga。[第一段]

关键词：药理作用桦褐孔菌褐孔菌属担子菌亚门多孔菌科真菌门

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