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慢病毒介导siRNA干扰MSK1的表达对大鼠脊髓损伤的作用及机制研究

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慢病毒介导siRNA干扰MSK1的表达对大鼠脊髓损伤的作用及机制研究

作者：钟泽祥福建医科大学

学位级别：硕士

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术抑制MSK1的表达,初步探究下调MSK1对大鼠脊髓损伤后炎症反应、细胞凋亡、星形胶质细胞增殖和运动功能恢复的影响。旨在探讨MSK1在脊髓损伤修复中的作用及机制。从而为脊髓损伤的基础研究及临床治疗提供... 详细信息

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术抑制MSK1的表达,初步探究下调MSK1对大鼠脊髓损伤后炎症反应、细胞凋亡、星形胶质细胞增殖和运动功能恢复的影响。旨在探讨MSK1在脊髓损伤修复中的作用及机制。从而为脊髓损伤的基础研究及临床治疗提供新的思路和靶点。方法1.将慢病毒感染高分化PC12细胞,并分为空白对照组（NC）、慢病毒阴性对照组（LV-GFP）、干扰组1（MSK1siRNA1）、干扰组2（MSK1siRNA2）和干扰组3（MSK1siRNA3）,通过荧光显微镜观察转染效率;利用Western blot检测MSK1的表达,验证其体外干扰效率。2.把大鼠随机分为手术组和假手术组,手术组为脊髓损伤模型组,假手术组只进行椎板切除处理,不损伤脊髓组织。采用椎管内局部注射法将慢病毒载体转染入脊髓组织,在荧光显微镜下观察慢病毒注射后不同时间点脊髓组织绿色荧光的表达情况,确定病毒最佳转染时间点。3.把大鼠随机分为SCI组（单纯脊髓损伤）、LV-GFP组（脊髓损伤后注射阴性对照慢病毒）和LV-MSK1组（脊髓损伤后注射MSK1siRNA慢病毒）。Western blot检测慢病毒转染后7、14d MSK1蛋白的表达水平,验证体内干扰效率。4.下调MSK1的表达后,Western blot检测脊髓损伤后相关的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和增殖细胞核抗原PCNA的表达变化;采用免疫荧光染色法检测PCNA、胶质纤维酸性蛋白GFAP和凋亡相关蛋白Caspase3的表达变化;通过TUNEL染色检测细胞凋亡;通过透射电子显微镜镜观察脊髓神经元的超微结构变化;根据BBB评分,评估大鼠脊髓损伤后后肢运动功能的恢复情况。从而探讨MSK1下调对脊髓损伤后炎症反应、细胞凋亡、星形胶质细胞增殖和运动功能恢复的影响。结果1.慢病毒转染72h后,各组中PC12细胞均在荧光显微镜下观察到大量的绿色荧光,大约80%的细胞被慢病毒感染。转染96h后,MSK1siRNA1、MSK1siRNA2和MSK1siRNA3组中MSK1蛋白的表达量显著低于NC和LV-GFP组。与LV-GFP组相比,MSK1-siRNA2慢病毒载体具有最高的干扰效率。2.慢病毒转染大鼠脊髓后第1天观察到绿色荧光表达。荧光在第3天和第5天逐渐增强。在第7天,达到峰值。在第14天,荧光表达逐渐减弱。3.慢病毒注射后7d和14d,LV-MSK1组中的MSK1蛋白表达均显著低于SCI和LV-GFP组。*** blot结果显示:与SCI和LV-GFP组相比,LV-MSK1组中TNF-α,IL-6和IL-1β、PCNA蛋白表达量明显升高;而IL-10蛋白表达量显著降低。5.免疫荧光染色表明:LV-MSK1组中PCNA和GFAP阳性细胞的平均免疫荧光强度和NeuN+Caspase3阳性细胞数显著高于LV-GFP组;TUNEL染色显示LV-MSK1组中TUNEL阳性细胞的数量明显高于LV-GFP组。6.透射电镜下观察到:SCI和LV-GFP组的神经元出现细胞凋亡的典型特征,如神经元细胞核固缩,染色质浓缩,核膜皱折,髓鞘形态不规则、变薄。而LV-MSK1组,神经细胞发生细胞膜严重受损,线粒体肿胀,并且伴有脱髓鞘变现象的超微结构变化。7.大鼠后肢运动功能BBB评分显示LV-MSK1组在损伤后第5,7和14天均低于SCI和LV-GFP组。结论***1siRNA慢病毒载体能有效地转染高分化PC12细胞和大鼠脊髓组织,并在体外和体内均有效地抑制MSK1的表达。2.下调MSK1的表达可促进SCI后的炎症反应、星形胶质细胞增殖和细胞凋亡,并抑制SCI后大鼠运动功能的恢复。***1可能通过调控炎症反应、星形胶质细胞增殖和细胞凋亡在大鼠脊髓损伤修复中发挥一定的作用。

关键词：促分裂原和应激激活的蛋白激酶1 脊髓损伤炎症反应星形胶质细胞增殖细胞凋亡

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普通高校篮球技术教学中归因训练的实验研究

普通高校篮球技术教学中归因训练的实验研究

作者：钟泽东北师范大学

学位级别：硕士

因果关系是自然界和人类社会中普遍存在的一种规律性关系。个体对某一事件的归因影响其后行为的动机水平和积极性。韦纳的研究表明,学生在教育教学情景中总会对自己的成就任务做出归因,且对学生的心理和随后的学习行为来讲,一些归因总... 详细信息

因果关系是自然界和人类社会中普遍存在的一种规律性关系。个体对某一事件的归因影响其后行为的动机水平和积极性。韦纳的研究表明,学生在教育教学情景中总会对自己的成就任务做出归因,且对学生的心理和随后的学习行为来讲,一些归因总要比另一些归因要好[1]。在篮球教学中,教师作为影响学生归因的主要因素,其言行和教学策略会促进学生的成败归因向积极的方面转化。本文以归因理论为依据,结合篮球动作技术教学实践,试图通过研究寻求行之有效的归因训练模式及方法,指导高校篮球教学实践,为提高教学质量提供新的方法和手段。实验选取吉林师范大学 2004 级的两个篮球选项班。一组为实验组,一组为对照组。实验组接受归因训练,对照组不接受任何归因训练。实验分为情景体验、实验前测量、教育干预和实验后测量四个阶段。结果发现:(1)在普通高校篮球技术教学中实施归因训练可以使大学生的成败归因向积极的方向转化。(2)归因训练可以使大学生的追求成功动机显著增强,避免失败动机下降不十分显著,大学生的成就动机水平显著提高。(3)在篮球技术教学中开展归因训练有利于促进大学生的学业成绩的提高。

关键词：篮球技术教学归因归因训练成就动机

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关于载流导线所受磁场力的计算

大学物理 1995年第5期14卷 25-27页

作者：李钟泽洛阳大学物理教研室

指出了在求解载流导线所受磁场力时，单纯应用矢量积分在理论上是不完备的。为此，需根据由安培定律ｄＦ＝Ｉｄｌ×Ｂ所提供的力系特点，补充求解合力作用点的有关方程。

关键词：磁场力合力作用点导线

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凹印制版技术

丛书名：印前制版技术丛书

2006年

作者：钟泽辉杨辉

本书从凹印制版的两条工艺线路出发，一是对复合凹印图文信息处理的基本方法与工艺作了详尽的说明，二是对凹版版滚筒金加工的方法与处理工艺的几个难点进行细致的讲解，并且适当编入了必要的基础知识，讲求知识的结构性与完整性。本书... 详细信息

ISBN: (纸本)7800005534

本书从凹印制版的两条工艺线路出发，一是对复合凹印图文信息处理的基本方法与工艺作了详尽的说明，二是对凹版版滚筒金加工的方法与处理工艺的几个难点进行细致的讲解，并且适当编入了必要的基础知识，讲求知识的结构性与完整性。本书第一章分别对凹版印刷及其发展概况进……

关键词：凹版制版

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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饮食叙事与互渗思维

江西社会科学 2023年第1期43卷 134-144,207页

作者：傅修延钟泽芳江西省哲学社会科学重点基地江西师范大学叙事学研究院江西南昌330046 江西师范大学江西南昌330046 江西师范大学文学院江西南昌330046

饮食男女为人之大欲,传世文献对饮食行为的记述,反映了人类为维系生存和改善状态所作的种种努力。互渗指先民心目中万物因“交感”和“触染”而发生的相互浸透,受这种思维的影响,一些现代人仍相信食物的某些属性会随摄入过程进入人体。... 详细信息

饮食男女为人之大欲,传世文献对饮食行为的记述,反映了人类为维系生存和改善状态所作的种种努力。互渗指先民心目中万物因“交感”和“触染”而发生的相互浸透,受这种思维的影响,一些现代人仍相信食物的某些属性会随摄入过程进入人体。在充饥解渴的生理冲动之外,一些层级更高的愿望也在左右着人类的饮食行为:一为祛病强身,许多民族都有按“相似性理论”从食物中寻求救赎的叙事,这种理论发展到极端便是视同类血肉为最佳滋补之物,“人吃人”的丑陋历史便是在这样的思想背景下发生;二为延年益寿,期盼青春永驻与肉体不朽属于世界文学的永恒主题,但其中也包括了许多盲目和不择手段的追求,对长生故事的记述大多带有揶揄意味,这表明人们骨子里明白任何努力都不能阻挡死神的到来;三为享受美食人生,人类之为万物之灵,在于能把源于动物阶段的进食行动升华为审美事件,进食目的在这一过程中被遮蔽,进食过程则作为一种感官享受被刻意彰显。在人类口腹之欲的深层,隐藏着生存者对生存本身的珍爱以及生命对生命母体即大自然的感激。

关键词：饮食叙事互渗思维愿望

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翘嘴鳊及其亲本肌间骨的比较分析

翘嘴鳊及其亲本肌间骨的比较分析

作者：钟泽洲湖南师范大学

学位级别：硕士

在我国鱼类产量排名中,前五位的养殖对象都属于鲤科鱼类,可是由于鲤科鱼类的肌间骨数目较多,这使得鲤科鱼类较难进入国际市场,这对我国养殖业的进一步发展产生了直接的影响。目前我国在饮食、深加工等方面都正在对肌间骨数目多的品种进... 详细信息

在我国鱼类产量排名中,前五位的养殖对象都属于鲤科鱼类,可是由于鲤科鱼类的肌间骨数目较多,这使得鲤科鱼类较难进入国际市场,这对我国养殖业的进一步发展产生了直接的影响。目前我国在饮食、深加工等方面都正在对肌间骨数目多的品种进行遗传改良,通过杂交、转基因等技术手段,期望能培育肌间骨较少的鲤科鱼类新品种,从而能促进水产养殖业的长期发展。肌间骨(intermuscular bone又称肌间刺或肌间小骨),是指位于椎骨两侧肌间隔中的硬骨小刺,由肌隔结缔组织骨化而成,仅存在于真骨鱼类中,且低等真骨鱼类(非棘鳍鱼类)中也普遍存在肌间骨。这种小骨随着鱼类的演化而逐渐减少。在形态学上,最开始出现比较简单的肌间骨是在真骨鱼类,而随着鱼类由简单向复杂的演化,肌间骨的形态也随着发生变化,特别是演化到鲤科鱼类,其肌间骨的形态已变得非常复杂。近年来国内外虽然已有不少对鱼类肌间刺形态学的研究,但是对远缘杂交鱼类例如鲂鲌品系的肌间刺形态学的观察研究报道却很少。远缘杂交(distant hybridization)是指种间、属间乃至亲缘关系更远的生物类型之间的杂交。远缘杂交可以使基因组从一个物种转移到另一个物种中,从而使杂交后代的表现型和基因型都发生改变。湖南师范大学发育生物学实验室采用远缘杂交育种技术,以团头鲂(Blunt snout bream)(♀)和翘嘴红鲌(Topmouth culter)(♂)杂交,获得的杂种F1有可育的二倍体个体,称之为二倍体鲂鲌F1(hybrid of Blunt snout bream(♀)×Topmouth culter(♂))。然后用其F1后代中二倍体鲂鲌F1(♀)与团头鲂(♂)回交获得翘嘴鳊(hybrid of (Blunt snout bream×Topmouth culter)(♀)×Blunt snout bream(♂))。目前,团头鲂和翘嘴红鲌间两代异源可育杂交鱼的形成为后续鲂鲌品系的遗传育种奠定了基础,翘嘴鳊的形成为利用鲂鲌品系制备新型杂交鱼提供了前景。该鲂鲌杂交鱼品系的形成为开展不同杂交鱼后代及其亲本肌间骨的形态学观察研究提供了重要的生物学平台。本文采用常规测量法和解剖法对团头鲂(Blunt snout bream)、翘嘴红鲌(Topmouth culter)、鲂鲌F1(hybrid of Blunt snout bream(♀)xTopmouth culter(♂))及其杂交后代翘嘴鳊(hybrid of (Blunt snout bream×Topmouth culter)(♀)xBlunt snout bream(♂))四种不同杂交鱼的肌间骨的数目,形态和分布进行了研究。本论文的研究结果如下：1.翘嘴红鲌肌间骨数目在126～136之间,平均值约为130根,翘嘴鳊肌间骨数目在116-125之间,平均值约为120根,二倍体鲂鲌F1肌间骨数目在121～139之间,平均值约为129根,团头鲂肌间骨数目在112～119之间,平均值约为116根。在本研究中翘嘴鳊的脊椎骨数目多于团头鲂,可能是翘嘴鳊比团头鲂肌间刺多的直接原因。2.考虑到不同杂交鱼的鱼体大小和肌节数目的不同,进一步统计了每一肌节的平均肌间骨数目,鲂鲌F1最多(0.8100),翘嘴红鲌次之(0.7570),团头鲂第三(0.7256),翘嘴鳊最少(0.6971)。通过SPSS软件统计分析显示：这四种鱼翘嘴红鲌、鲂鲌F1、团头鲂、翘嘴鳊的平均肌间骨数目分别与其他三种差异显著(P<0.05)。故在维持营养、形态、活动等基本生理功能均衡的前提下,翘嘴鳊的每肌节平均肌间骨比团头鲂和翘嘴红鲌都少,体现了一种有利于鱼的食用和深加工处理的趋势。3.不同杂交鱼后代及其亲本的肌间骨形态有7种类型,分别为“Ⅰ”形、“卜”形、“Y”形、一端多叉形、两端两分叉形、两端多叉形和树枝形。不同杂交鱼之间都存在肌间小骨越靠前端,形态越复杂的现象。4.不同杂交鱼后代及其亲本身体左右两侧肌间骨的数目,基本上不完全相等,但总体上两侧肌间骨的数目比较接近。同种鱼不同部位肌间骨数目也存在差异。本研究结果说明翘嘴鳊等人工培育的杂交鱼比原始亲本翘嘴红鲌、团头鲂的肌间刺少。这在鱼类骨骼发育生物学方面和鱼类遗传育种方面具有一定的意义。同时本研究中获得的与杂交效应相关的肌间骨减少的现象和观点可以积极引导和推动远缘杂交选育少刺经济鱼类的遗传改良方法,为我国鱼类遗传育种技术的纵深发展及服务我国的水产养殖事业提供必要的经验指导和数据支持。

关键词：肌间骨髓弓小骨脉弓小骨形态遗传育种

160km/h市域快线铁路钢弹簧浮置板轨道振动特性分析

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160km/h市域快线铁路钢弹簧浮置板轨道振动特性分析

作者：钟泽方西南交通大学

学位级别：硕士

市域铁路能有效串联起主城区与边远城区,加快都市圈内部资源、人员流通。市域快线铁路相比城市轨道交通,列车运行速度更高、轴重更大,伴随而来的是更加严重的振动与噪声问题,选择合适的减振轨道变得更加重要。钢弹簧浮置板轨道主要应用... 详细信息

市域铁路能有效串联起主城区与边远城区,加快都市圈内部资源、人员流通。市域快线铁路相比城市轨道交通,列车运行速度更高、轴重更大,伴随而来的是更加严重的振动与噪声问题,选择合适的减振轨道变得更加重要。钢弹簧浮置板轨道主要应用于时速100公里及以下的城市轨道交通中,用于市域快线铁路的实例较少,且对于市域快线铁路工况下钢弹簧浮置板的适应性研究不足。因此,开展市域快线铁路钢弹簧浮置板轨道结构研究具有一定的意义。本文以钢弹簧浮置板轨道在市域快线铁路上的适应性问题为研究背景,围绕装配式钢弹簧浮置板的振动特性,主要开展了以下研究:(1)建立装配式钢弹簧浮置板有限元模型,分析结构参数对系统固有频率的影响规律。装配式钢弹簧浮置板的固有频率较低,前3阶固有频率分别为:9.80Hz、10.98Hz、14.60Hz;钢弹簧浮置板轨道低阶固有频率与浮置板板长、板宽、厚度、隔振器间距负相关,与隔振器刚度正相关,隔振器刚度与间距的变化对浮置板低阶频率影响更明显。(2)建立列车—浮置板—隧道耦合动力学模型,研究了列车时速、隔振器刚度对系统动力响应的影响规律,对比了不同工况的减振性能,提出了限位装置的布置方案。装配式钢弹簧浮置板轨道满足市域列车快速运行时的安全平稳性要求;列车横垂向振动加速度、结构垂向位移与隔振器刚度负相关,当隔振器刚度从7.5k N/mm增加至15.0k N/mm时,钢轨和浮置板的垂向位移分别降低30.2%和41.6%,隔振器刚度继续增加后,对位移的影响减小;浮置板轨道的减振性能与隔振器刚度负相关,装配式钢弹簧浮置板减振性能超过15d B,对于高频振动的减振性能更加明显。(3)通过静、动力学计算,分析了板缝处剪力铰与共享隔振器对板端位移的约束作用。增设共享隔振器有利于减小长板以及钢轨板端的垂向位移,同时增设剪力铰与共享隔振器对于板端约束效果更好。

关键词：市域快线铁路钢弹簧浮置板振动特性数值模拟

电力企业发行蓝色债券的效益与风险研究 ——以“21国电GN004A”为例

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电力企业发行蓝色债券的效益与风险研究 ——以“21国电GN004A”...

作者：钟泽芳广东外语外贸大学

学位级别：硕士

广东省珠三角地区流动人口妇女HPV感染的流行病学研究

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广东省珠三角地区流动人口妇女HPV感染的流行病学研究

作者：钟泽艳南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景与目的意义人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一种嗜上皮性病毒,在人和动物中分布广泛,具有高度的特异性,人体皮肤及粘膜的复层鳞状上皮是唯一宿主。HPV感染能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖性病变,包括乳头状瘤和瘤... 详细信息

研究背景与目的意义人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一种嗜上皮性病毒,在人和动物中分布广泛,具有高度的特异性,人体皮肤及粘膜的复层鳞状上皮是唯一宿主。HPV感染能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖性病变,包括乳头状瘤和瘤样病变等,主要分为三大类:第一类,包括宫颈癌、外阴癌、阴茎癌、肛门癌、前列腺癌、膀胱癌以及某些类型的直肠癌、口腔癌、扁桃体癌等恶性病变。第二类,主要是良性病变,如寻常疣、扁平疣、尖锐湿疣等。第三类,主要为复发性呼吸道乳头状瘤,多发生于免疫力低下的儿童。生殖道HPV感染主要是通过性途径传播,其它可见接触传播、垂直传播、医院感染等。HPV的潜伏期短至数周,长则数年,许多病人在感染初期并没有临床症状,因此无症状携带者是主要的传染源。不同的HPV亚型(也称基因型)可引起不同类型的疾病,目前已经发现了约200种HPV的亚型,其中至少有40多种亚型会感染生殖道,即与宫颈病变相关。目前,已经明确HPV感染特别是高危型HPV的持续性感染是宫颈癌的重要致病因素。宫颈癌是严重危害妇女健康的恶性肿瘤之一,居世界女性癌症死亡率第二位。研究数据显示,全世界每年约有50万宫颈癌新发病例,其中亚洲约占38万。在我国每年约有15万宫颈癌新发病例,每年约有8万人死于宫颈癌。近年来,宫颈癌发病率每年以3%-5%的速度处于增长趋势发展,并且患者呈现年轻化趋势,成为严重威胁女性健康的公共卫生问题之一。宫颈癌的发生经过HPV持续感染、低度癌前病变、高度癌前病变和宫颈癌四个阶段,在病变过程中存在较长的可逆转的癌前病变期。随着宫颈癌病因的研究更加深入和治疗宫颈癌前病变临床技术的不断完善,使宫颈癌成为目前唯一可以早发现、早诊断、早治疗的妇科疾病。因此,通过HPV感染筛查,阻断HPV的持续感染能够有效地从根本上降低宫颈癌的发病率与死亡率。近年来,全国进行了多项HPV感染与宫颈癌的流行病学调查,如在山西、广西、上海、北京、台湾等地区对妇女进行了宫颈癌和HPV基因型别的检测研究。但到目前为止,广东省珠三角地区还没有全面的流动人口妇女的流行病学调查研究,所以本研究的主要目的是通过大规模的人群筛查,了解广东省珠三角地区各城市的妇女生殖道HPV感染状况,以及不同型别的HPV感染在不同人群、不同地区的分布特征,并从不同年龄段、不同职业、不同教育程度和不同性生活年限等方面探讨HPV感染与人口学分布特征的关联性。客观地分析广东省珠三角地区各城市流动人口中HPV感染高危人群的规模和特征,分析和预测HPV感染流行形势,建立流动人口 HPV感染分型特点、宫颈癌筛查数据库等,最终达到预防宫颈癌发生的目的。研究内容与方法1、检测方法的选择本研究采用的方法是深圳华大临床检验中心提供的高通量基因测序检测技术,首先将宫颈脱落细胞中的HPV-DNA通过multiplex-index-PCR技术扩增富集,采用新一代高通量测序技术对样品中的HPV-DNA进行序列信息读取,再将测序结果与标准数据库中的HPV型别序列信息进行比对分析,从而精确判断受检者是否感染HPV及其感染的HPV型别。2、研究对象的选择广东是流动人口聚集大省,占据全国流动人口的1/3。流动人口由于平均文化素质较低,生活条件和卫生习惯较差,对各类疾病的认知水平有限等原因使他们成为引起各类传染病爆发和流行的高危人群。因此,本研究的对象是广东省珠三角地区流动人口妇女人群,年龄分布由18岁到72岁,有性生活史,且无子宫切除手术史或宫颈手术史,目前无妊娠、白带异常、接触性出血史的慢性宫颈炎或疑有宫颈病变的患者。采用随机多阶段整群抽样的方法,抽取广东省珠三角地区的五大城市(东莞市、深圳市、肇庆市、中山市和惠州市),根据各城市行政地区划分情况随机抽查,以其所在乡镇的医疗机构或计划生育服务站为基点,共计筛查45634例。3、样本的采集由妇科医师或者已经接受过专门训练的医务人员对调查对象进行常规检查,并详细记录宫颈等情况。按照《HPV样本采集手册》,采用妇科检查常用体位,使用一次性子宫颈取样拭子取样,收集宫颈脱落细胞样本于细胞保存管中,确认采样成功,然后运输待检。4、结果数据的统计学分析汇总五大城市的筛查情况,使用统计软件SPSS13.0,统计分析HPV感染率以及主要感染型别,并分别通过以下方面分析HPV感染与人口学分布特征的关联性:(1)不同年龄段分布与HPV感染的关联性;(2)HPV各型别在各年龄组中的分布情况;(3)不同职业分组与HPV感染的关联性;(4)不同教育程度分组与HPV感染的关联性;(5)不同性生活年限分组与HPV感染的关联性。研究结果1、五大城市总体HPV感染情况共成功收集检测45634例样本,整体感染率为6.95%。其中东莞市的受检人数最多,为10734人,占总受检人数的23.52%。结果显示,东莞市、

关键词： HPV 感染率型别宫颈癌流行病学特征