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天花粉蛋白基因转化番茄的研究

Acta Botanica Sinica 1999年第3期41卷 334-336页

作者：姜国勇金德敏翁曼丽郭宝太王斌莱阳农学院遗传研究室中国科学院遗传研究所

核糖体失活蛋白（ｒｉｂｏｓｏｍｅｉｎａｃｔｉｖａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＲＩＰ）是一类作用于核糖体，抑制蛋白质合成的蛋白毒素，它具有广谱抗植物病毒和动物病毒的活性，在异种植物中的抗性效应尤其明显。迄今为止，人们已... 详细信息

核糖体失活蛋白（ｒｉｂｏｓｏｍｅｉｎａｃｔｉｖａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＲＩＰ）是一类作用于核糖体，抑制蛋白质合成的蛋白毒素，它具有广谱抗植物病毒和动物病毒的活性，在异种植物中的抗性效应尤其明显。迄今为止，人们已经从５０多种植物中分离出６０多种不...

关键词：天花粉蛋白基因转化转基因番茄

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黑木耳电泳核型分析

菌物系统 2000年第1期19卷 78-80页

作者：边银丙罗信昌王斌金德敏周启华中农业大学应用真菌研究所武汉430070 中国科学院遗传研究所北京100101 华中农业大学生命科学院武汉430070

采用等高锁状均质电场（ＣＨＥＦ）凝胶电泳技术，对黑木耳（Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ　ａｕｒｉｃｕｌａ）电泳核型进行分析，以酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｉｖｉｓｉａｅ）菌株ＹＰＨ７５５和祭酒裂殖酵母（Ｓｃｈ... 详细信息

采用等高锁状均质电场（ＣＨＥＦ）凝胶电泳技术，对黑木耳（Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ　ａｕｒｉｃｕｌａ）电泳核型进行分析，以酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｉｖｉｓｉａｅ）菌株ＹＰＨ７５５和祭酒裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｐｏｍｂｅ）菌株ＡＳ２．２１４的染色体ＤＮＡ大小作为分子量标记，估计黑木耳基因组中至少包含９条ＤＮＡ分子量在８５０ｋｂ至５８００ｋｂ之间的染色体，多数染色体ＤＮＡ分子量在１０００ｋｂ至３４００ｋｂ之间，基因组大小在２２Ｍｂ以上。

关键词：黑木耳 CHEF电泳电泳核型染色体DNA 遗传学

玉米同核同质系在研究细胞质雄性不育中的应用

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Acta Genetica Sinica 2001年第7期28卷 663-667页

作者：杨典洱王岳光金德敏陈翠霞王斌中国科学院遗传研究所北京100101

以９４个Ｏｐｅｒｏｎ公司的１０碱基ＲＡＰＤ引物，对玉米同核同质系（Ⅰ）中的野生型正常可育株４７８（Ｆ）和其突变的不育株４７８－ｃｍｓ的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：仅ＯＰＺ－１９、ＯＰＡＡ... 详细信息

以９４个Ｏｐｅｒｏｎ公司的１０碱基ＲＡＰＤ引物，对玉米同核同质系（Ⅰ）中的野生型正常可育株４７８（Ｆ）和其突变的不育株４７８－ｃｍｓ的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：仅ＯＰＺ－１９、ＯＰＡＡ－１５与ＯＰＳ－０１３个引物在同核同质系（Ⅰ）的野生型正常可育株和其突变的不育株之间扩增出多态产物ＯＰＺ－１９４２０、ＯＰＡＡ－１５６００与ＯＰＳ－０１４００。提示在同核同质系的野生型正常可育株和其突变的不育株的ｍｔＤＮＡ之间同源性很高，多态性很低，同核同质系相当于在ｍｔＤＮＡ水平上的近等基因系，所找到的多态就在所研究的目标基因附近，因此它是研究ｍｔＤＮＡ基因的良好体系。上述３个多态扩增结果在同核同质系（Ⅰ）的姐妹同核同质系（Ⅱ）中进行了验证，结果表明仅２个引物ＯＰＺ－１９、ＯＰＡＡ－１５在姐妹同核同质系（Ⅱ）的野生型正常可育株苏４７８（Ｆ）和其突变的不育株苏４７８－ｃｍｓ之间获得了与同核同质系（ Ⅰ）相同的多态性扩增产物ＯＰＺ－１９４２０、ＯＰＡＡ－１５６００。即这两个多态性产物在两套同核同质系中同时存在，因而这两个多态性产物与育性直接相关的可能性很大。

关键词：玉米线粒体DNA 细胞质雄性不育 RAPD 同核同质系

AFLP和RFLP标记检测水稻亲本遗传多样性比较研究

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中国农业科学 2002年第6期35卷 589-592+594-595页

作者：陈亮梁春阳孙传清金德敏姜廷波王斌王象坤中国农业大学植物遗传育种系中国农业大学植物遗传育种系北京100094 中国科学院遗传研究所北京100101

利用AFLP和RFLP技术对 2 0个水稻品种 (系 )进行了遗传多样性分析。在AFLP分析中 ,用 6 4对引物组合进行了初筛 ,然后用其中适合水稻的 15对引物进行了详细研究 ,每对AFLP引物组合扩增出了 4 7～ 118条带 ,其中多态性带为 5～ 32条 ,15... 详细信息

利用AFLP和RFLP技术对 2 0个水稻品种 (系 )进行了遗传多样性分析。在AFLP分析中 ,用 6 4对引物组合进行了初筛 ,然后用其中适合水稻的 15对引物进行了详细研究 ,每对AFLP引物组合扩增出了 4 7～ 118条带 ,其中多态性带为 5～ 32条 ,15个引物组合共得到多态性条带 2 99条 ;在RFLP分析中 ,4 9个RFLP探针共检测出 10 7条多态性带。聚类分析表明 ,两种标记均能将 2 0个材料分成籼粳两大类群 ,但AFLP标记比RFLP标记更能反映品种间系谱亲缘和地理生态上的差异。两种标记检测出的遗传距离的趋势是一致的 ,但AFLP标记相对于RFLP而言提高了品种间的遗传距离的估计 ,降低了亚种间遗传距离的估计 ,因此 ,AFLP更适应于多样性的研究 ,RFLP更适应于籼粳分类及度量籼粳分化程度

关键词：水稻 AFLP RFLP 聚类分析遗传多样性

The Application of RAPD Markers in Diversity Detection and Variety Identification of Porphyra

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Acta Botanica Sinica 2000年第4期42卷 403-407页

作者：贾建航王萍金德敏曲雪萍王倩李传友翁曼丽王斌中国科学院遗传研究所北京100101

RAPD (random amplified polymorphic DNA) markers were generated from filaments of 15 Porphyra lines representing four important groups, P. yezoensis, P. haitanensis, P. katadai var. hemiphylla and P. oligospermatangia . Among the total 69 fragments generated by 6 selected primers (among 50 primers), 67 appeared to be polymorphic (97.1%). Cluster analysis based on the RAPD results was performed. The 15 Porphyra lines were divided into 3 groups. This result was consistent with that from taxonomy analysis. A DNA fingerprinting based on 8 bands amplified with OPN_02 and OPJ_18 was constructed and might be used in Porphyra variety identification. Five specific RAPD fragments of 5 Porphyra lines were isolated and cloned into pGEM_T easy vector. These five RAPD fragments may be useful in germplasm identification and property protection of Porphyra .

关键词： RAPD, genetic diversity cluster analysis Porphyra germplasm identification

酿酒酵母染色体DNA样品制备和CHEF分析

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菌物系统 1999年第3期18卷 284-287页

作者：边银丙翁曼丽罗信昌金德敏周启王斌华中农业大学应用真菌研究所武汉430070 华中农业大学生命科技学院武汉430070 中国科学院遗传研究所北京100101

等高锁状均匀电场（contolllsclampedhomogeneouselectncfield，CHED电泳技术与分子杂交、酵母人工染色体（yeastartificialchromosome，YAC）等分子生物学技术的有机结合，推动了真菌电泳核型、染色体作图和染色体DNA长度多型性（chrom... 详细信息

等高锁状均匀电场（contolllsclampedhomogeneouselectncfield，CHED电泳技术与分子杂交、酵母人工染色体（yeastartificialchromosome，YAC）等分子生物学技术的有机结合，推动了真菌电泳核型、染色体作图和染色体DNA长度多型性（chromosomalDNAlellgthpolymorphism，CLP...

关键词：酿酒酵母原生质体染色体 DNA样品 CHEF分析

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粟酒裂殖酵母染色体DNA的脉冲电泳分析

菌物系统 1997年第3期16卷 230-234页

作者：边银丙翁曼丽罗信昌金德敏周启王斌华中农业大学应用真菌研究所武汉430070 中国科学院遗传研究所北京100101

采用等高锁状均质电场（CHEF）凝胶电泳技术,对来自中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心的粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomycespombe）菌株AS2.214进行染色体DNA分析。CHEF电泳结果显示菌株AS2.214的4条染色体DNA的分子大小分别约为5... 详细信息

采用等高锁状均质电场（CHEF）凝胶电泳技术,对来自中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心的粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomycespombe）菌株AS2.214进行染色体DNA分析。CHEF电泳结果显示菌株AS2.214的4条染色体DNA的分子大小分别约为5900kb、3200kb、2500kb和550kb,基因组大小约为12000kb。供试菌株AS2.214第Ⅰ条染色体DNA为5900kb与已研究报道的菌株972h和HM248（5700kb）的基本一致,第Ⅱ条染色体DNA（3200kb）和第皿条染色体DNA（2500kb）,分别较上述2个菌株约小1400kb和1000kb,第Ⅳ条染色体DNA的分子大小与部分非整倍体菌株HM248的极微染色体Ch16DNA相近（500kb）。研究结果表明粟酒裂殖酵母菌株间染色体DNA长度存在显著差异,菌株AS2.214可能是三倍体减数分裂所产生的稳定的部分非整倍体。

关键词：酵母粟酒裂殖酵母染色体 DNA 脉冲电泳分析

AFLP分析中多态性扩增产物的回收、克隆及鉴定

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遗传 1998年第4期20卷 1-4页

作者：李传友伏健民金德敏翁曼丽王斌中国科学院遗传研究所

本研究在摸索和优化了水稻ＡＦＬＰ分析体系的基础上，发展了多态性ＡＦＬＰ产物的高效克隆方法。特异ＡＦＬＰ扩增产物直接从变性聚丙烯酰胺凝胶上分离纯化，再经过一至二轮ＰＣＲ扩增，即可高效地克隆于ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙｖｅｃｔ... 详细信息

本研究在摸索和优化了水稻ＡＦＬＰ分析体系的基础上，发展了多态性ＡＦＬＰ产物的高效克隆方法。特异ＡＦＬＰ扩增产物直接从变性聚丙烯酰胺凝胶上分离纯化，再经过一至二轮ＰＣＲ扩增，即可高效地克隆于ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙｖｅｃｔｏｒ系统中。本实验利用该方法成功地克隆了水稻温敏核不育等位突变系５４６０Ｓ和５４６０Ｆ间的４个多态性ＡＦＬＰ产物，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析证明其中３个产物在水稻基因组中为单拷贝序列，另一个为低拷贝序列。ＡＦＬＰ技术强有力的多态性检出能力再结合多态性扩增产物的高效克隆方法，为寻找与目标基因紧密连锁的分子标记提供了有力工具。

关键词：水稻 AFLP 分子标记

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高等植物线粒体基因组研究新进展

应用与环境生物学报 1998年第2期4卷 200-207页

作者：李传友伏健民金德敏王斌中国科学院遗传研究所北京100101

与其它真核生物相比，高等植物线粒体基因组不仅在大小，组织结构．基因组成和表达，RNA编辑等方面具有突出特点，而且线粒体基因组与核基因组之间存在着广泛的信息交流线粒体基因组作为一个半自主性的遗传系统，其组织结构的雏持和生... 详细信息

与其它真核生物相比，高等植物线粒体基因组不仅在大小，组织结构．基因组成和表达，RNA编辑等方面具有突出特点，而且线粒体基因组与核基因组之间存在着广泛的信息交流线粒体基因组作为一个半自主性的遗传系统，其组织结构的雏持和生理功能的发挥受到核基因组的调控作用，本文就这些方面的研究进展作了简要评述．

关键词：高等植物线粒体基因组重复顺序