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小鼠孤雌胚胎干细胞向成骨细胞定向诱导分化的研究

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小鼠孤雌胚胎干细胞向成骨细胞定向诱导分化的研究

作者：都慧聪西北大学

学位级别：硕士

在骨组织工程研究领域中,骨原细胞来源是制约骨组织工程研究与应用的关键问题,以往研究多采用骨髓基质干细胞、脂肪干细胞等作为种子细胞向成骨细胞诱导分化,但结果并不理想。因此需要为骨组织工程研究寻找一种理想的种子细胞。目的：1... 详细信息

在骨组织工程研究领域中,骨原细胞来源是制约骨组织工程研究与应用的关键问题,以往研究多采用骨髓基质干细胞、脂肪干细胞等作为种子细胞向成骨细胞诱导分化,但结果并不理想。因此需要为骨组织工程研究寻找一种理想的种子细胞。目的：1.验证KM×129／SV小鼠孤雌胚胎干细胞的全能性,证实其具有向成骨细胞定向分化的潜能;2.探索孤雌胚胎干细胞向成骨细胞定向诱导分化的条件,鉴定诱导的成骨细胞;3.观察诱导的孤雌胚胎干细胞种植于三维支架珊瑚上的贴附和生长情况。方法：将孤雌胚胎干细胞在体外稳定培养,通过碱性磷酸酶染色,全能性表面抗原SSEA-1、端粒酶和细胞因子的免疫组化染色,RT-PCR检测全能性转录因子,孤雌胚胎干细胞体内分化检测验证KM×129/SV孤雌胚胎干细胞的全能性。通过向培养液中添加地塞米松、p-磷酸甘油、维生素C等成骨细胞诱导因子,直接诱导孤雌胚胎干细胞向成骨细胞定向分化,通过RT-PCR检测成骨细胞相关基因、透射电镜、茜素红、von Kossa染色等方法检测孤雌胚胎干细胞向成骨细胞定向分化的情况。并将诱导7天后的孤雌胚胎干细胞接种于三维支架材料珊瑚上,通过激光共聚焦显微镜和扫描电镜观察细胞在材料上的生长情况。结果：实验结果显示：***×129/SV小鼠孤雌胚胎干细胞在体外培养条件下能够稳定增殖,碱性磷酸酶染色呈阳性,表达全能性表面抗原SSAE-1和全能性转录因子Nanog、Oct4和Sox2,具有高水平的端粒酶活性,处于未分化状态;在体内可以分化为三个胚层的细胞类型,具有全能性。2.用所建立的成骨细胞诱导条件诱导孤雌胚胎干细胞定向分化,诱导过程中细胞形态发生显著变化;诱导28天时表达成骨细胞相关基因Ⅰ型胶原和骨钙素,茜素红、von Kossa染色均呈阳性,诱导的细胞发生矿化,形成钙结节;线粒体、高尔基体增多,形成电子密度较高的矿化物。3.诱导7天的孤雌胚胎干细胞种植于珊瑚材料上,激光共聚焦显微镜和扫描电镜观察显示细胞在珊瑚表面贴附良好,并能稳定增殖。传代,具有与胚胎干细胞相似的全能性,通过直接诱导的方法可以将孤雌胚胎干细胞定向诱导为成骨细胞,接种于三维支架材料珊瑚上生长良好。表明孤雌胚胎干细胞适宜作为骨组织工程的种子细胞,通过进一步研究能够找到更为优化的诱导条件,提高孤雌胚胎干细胞体外诱导成骨细胞的效率,使该方法最终应用于临床治疗中。

关键词：孤雌胚胎干细胞全能性成骨细胞诱导分化珊瑚

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东方蝾螈肢体异位再生的研究

中国组织工程研究与临床康复 2009年第37期13卷 7301-7304页

作者：耿文鑫严兴荣陈煜娴都慧聪魏菁赵洁都慧聪魏菁赵洁李立文陈富林西北大学教育部西部资源与现代生物技术重点实验室陕西省西安市 710069

背景:蝾螈具有很强的肢体再生能力,研究蝾螈肢体再生对于实现患者肢体再生有着重要的指导作用。目的:验证东方蝾螈的肢体再生能力,并通过诱导东方蝾螈异位肢体生成,建立东方蝾螈为模式动物的再生医学研究技术平台。设计、时间及地点:观... 详细信息

背景:蝾螈具有很强的肢体再生能力,研究蝾螈肢体再生对于实现患者肢体再生有着重要的指导作用。目的:验证东方蝾螈的肢体再生能力,并通过诱导东方蝾螈异位肢体生成,建立东方蝾螈为模式动物的再生医学研究技术平台。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-07/2009-01在西北大学教育部西部资源与现代生物技术重点实验室完成。材料:东方蝾螈,购买于西安宠物市场。方法:①将成体东方蝾螈右前肢上臂处切断,连续10周观察记录其断肢再生情况,并分别取材进行组织学观察。②通过东方蝾螈前肢运动神经异位转移和对侧皮肤移植,观察肢体异位再生情况。主要观察指标:①观察东方蝾螈肢体再生能力和组织学过程。②观察东方蝾螈的异位肢体诱导情况,并进行组织学观察。结果:①东方蝾螈断肢后10周左右肢体成功再生。肢体再生过程中,肢芽中出现大量皮肤成纤维细胞。②通过神经异位转移和对侧皮肤移植,可以诱导出肢芽。约13周可以成功在异位诱导出新的肢体。结论:①东方蝾螈具有完全肢体再生能力,皮肤成纤维细胞是参与肢体再生的重要细胞来源。②神经异位转移和对侧皮肤移植可以在异位诱导出新的肢体。

关键词：肢体再生东方蝾螈神经

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两种激活处理促进小鼠孤雌胚胎原核形成

基因组学与应用生物学 2010年第6期29卷 1102-1107页

作者：严兴荣陈冬梅华进联雷安民杨艳红都慧聪窦忠英西北大学生命科学学院西安710069 西北农林科技大学动物医学学院杨凌712100 第四军医大学唐都医院妇产科西安710038

不同人工处理方法激活哺乳动物卵母细胞的机理相似,但其激活效率存在差异。本研究以昆明(KM)、129/Sv×KM F1和C3H×KM F1雌鼠来源的卵母细胞为对象,利用氯化锶(SrCl2,Sr2+)联合细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)(Sr2++CB)和离子霉素(iono... 详细信息

不同人工处理方法激活哺乳动物卵母细胞的机理相似,但其激活效率存在差异。本研究以昆明(KM)、129/Sv×KM F1和C3H×KM F1雌鼠来源的卵母细胞为对象,利用氯化锶(SrCl2,Sr2+)联合细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)(Sr2++CB)和离子霉素(ionomycin,Ion)联合6-二甲胺基嘌呤(6-dimethylaminopurine,6-DMAP)(Ion+6-DMAP)两种激活方法处理下对比分析不同品系小鼠卵母细胞的激活效率,并以卵母细胞原核形成率、原核数量和孤雌胚胎体外发育来评价两种激活剂的激活效率。研究结果表明,Ion+6-DMAP激活卵的1原核比率显著高于2原核(p0.05),但129/Sv×KM F1和C3H×KM F1囊胚发育率显著高于KM组(p<0.05)。3种小鼠品系的卵母细胞用Sr2++CB处理的孤雌胚胎发育率显著高于Ion+6-DMAP。结果证明,Sr2++CB处理小鼠卵母细胞的激活效率明显优于Ion+6-DMAP;129/Sv×KM F1和C3H×KM F1的孤雌胚胎体外发育率显著高于KM小鼠,为研究小鼠遗传背景影响孤雌胚胎发育的机理提供参考。

关键词：小鼠卵母细胞孤雌激活原核胚胎发育

基于太赫兹光谱数据融合实现多组分橡胶添加剂的定量检测

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中国激光 2024年第5期51卷 260-268页

作者：殷贤华陈慧聪张活桂林电子科技大学电子工程与自动化学院广西桂林541004 广西自动检测技术与仪器重点实验室广西桂林541004

橡胶添加剂含量是判断橡胶质量好坏的一个重要标志。现有的检测方法不能满足橡胶中添加剂快速、准确、无损的检测需求,而且当检测对象为多组分混合物时,混合物的吸收光谱会出现重叠和失真现象,从而导致预测结果不准确。针对此问题,本文... 详细信息

橡胶添加剂含量是判断橡胶质量好坏的一个重要标志。现有的检测方法不能满足橡胶中添加剂快速、准确、无损的检测需求,而且当检测对象为多组分混合物时,混合物的吸收光谱会出现重叠和失真现象,从而导致预测结果不准确。针对此问题,本文提出了一种基于太赫兹时域光谱结合化学计量学方法、数据融合的定量分析方法。以丁腈橡胶、白炭黑、氧化锌、防老剂H和防老剂MB制成五组分混合物并将其作为实验样品,利用太赫兹时域光谱系统获取并计算了五组分混合物在0.3~1.6 THz范围内的吸收光谱,然后通过求一阶导数的方式获得样品的导数光谱数据。低层数据融合直接将吸收光谱数据与导数光谱融合;中层数据融合将蒙特卡罗无信息变量消除法和连续投影算法进行特征提取后的变量进行融合;高层数据融合使用多元线性回归法进行融合。基于蒙特卡罗无信息变量消除法的中层数据融合的预测精度高于单一光谱的预测精度,而且预测性能最好。研究结果表明,太赫兹光谱结合支持向量回归、数据融合的方法可以实现多组分混合物中防老剂MB的快速、准确、无损检测,对于促进橡胶工业的快速发展具有十分重要的意义。

关键词：光谱学橡胶及添加剂多组分混合物太赫兹光谱定量检测数据融合

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大鼠皮肤的冷冻干燥保存

中国组织工程研究与临床康复 2009年第41期13卷 8080-8084页

作者：杨维姜曼耿文鑫严兴荣都慧聪魏菁刘亮岐赵洁李立文陈富林西北大学生命科学学院组织工程实验室陕西省西安市710069

背景:细胞干燥保存的研究报道较多,组织器官是否适用于干燥保存,尚缺乏证据。目的:用海藻糖作为干燥保护剂,优化海藻糖载入大鼠皮肤的条件,探索皮肤干燥保存的可行性。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-11/2008-11在西北大学生命科... 详细信息

背景:细胞干燥保存的研究报道较多,组织器官是否适用于干燥保存,尚缺乏证据。目的:用海藻糖作为干燥保护剂,优化海藻糖载入大鼠皮肤的条件,探索皮肤干燥保存的可行性。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-11/2008-11在西北大学生命科学学院组织工程实验室完成。材料:体质量150g左右成年SD大鼠。海藻糖由Sigma公司提供。方法:通过控制海藻糖浓度(50,300,500,800,1000mmol/L)、负载时间(0.5,4,7,9h)和温度[4℃、4～37℃(相转变)和37℃],优化海藻糖导入大鼠皮肤的条件。将负载海藻糖的皮肤置于含100g/L二甲基亚砜的DMEM冷冻液中孵育,程序冷冻仪以1℃/min的速率降温至-80℃后移入冷冻干燥机中进行冻干。将冻干皮肤水化复苏后分别用双醋酸羧基荧光素(CFDA)、四甲基偶氮唑盐(MTT)检测皮肤活性,并以新鲜和甲醛固定皮肤的吸光度值作为阳性和阴性对照。以苏木精-伊红染色和观察皮肤组织结构,并进行自体移植。主要观察指标:海藻糖在不同加载浓度、孵育温度和时间载入大鼠皮肤的情况。冻干皮肤水化后的形态学、组织学变化及其自体移植后存活情况。结果:海藻糖浓度小于800mmol/L,皮肤的海藻糖载入量随海藻糖浓度的升高而明显增(P<0.05),浓度大于800mmol/L,海藻糖载入量差异不显著。孵育温度为37℃组和相转变组皮肤海藻糖载入量明显高于4℃组(P<0.05),相转变组与37℃组差异无统计学意义。皮肤孵育4,7,9h的海藻糖载入量明显高于孵育0.5h的载入量(P<0.05),孵育时间为4,7,9h之间的海藻糖载入量差异不显著,但孵育7h后皮肤的海藻糖载入量不再增加。实验以海藻糖浓度为800mmol/L,孵育温度为37℃,孵育时间为7h为优化的负载条件处理大鼠皮肤。冻干皮肤玻璃化状态良好,呈半透明状。水化后能够恢复到新鲜皮肤的大小和色泽,组织结构和细胞形态与新鲜皮肤组织无差别。冷冻干燥皮肤的活性明显高于甲醛固定的大鼠皮肤(P<0.05)。冻干保存的皮肤水化后移植回自体大鼠,可存活长达13d。结论:海藻糖可作为干燥保护剂进行大鼠皮肤冷冻干燥保存,海藻糖浓度为800mmol/L,孵育温度为37℃,孵育时间为7h是海藻糖载入大鼠皮肤的最佳条件。

关键词：皮肤海藻糖冷冻干燥保存自体移植

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自体颗粒脂肪移植治疗增生性瘢痕的临床研究

中国美容医学 2022年第4期31卷 39-42页

作者：何林都慧聪周林张卓余学元舒茂国西安交通大学第一附属医院整形美容颌面外科陕西西安710061

目的:探讨自体颗粒脂肪移植治疗增生性瘢痕的临床效果。方法:选取15例1年以上增生性瘢痕患者,给予瘢痕内注射自体颗粒脂肪治疗(0.5 ml/cm^(2)),于治疗前及治疗6个月后,采用患者观察者瘢痕评估量表对瘢痕进行评估,其中4例患者自愿取材进... 详细信息

目的:探讨自体颗粒脂肪移植治疗增生性瘢痕的临床效果。方法:选取15例1年以上增生性瘢痕患者,给予瘢痕内注射自体颗粒脂肪治疗(0.5 ml/cm^(2)),于治疗前及治疗6个月后,采用患者观察者瘢痕评估量表对瘢痕进行评估,其中4例患者自愿取材进行病理检测。结果:15例患者均获得了随访,无感染、血肿、脂肪栓塞等并发症发生。治疗6个月后,患者瘢痕疼痛、瘙痒症状无明显改善,瘢痕厚度、粗糙程度、规则程度等改善不明显,差异无统计学意义(P>0.05);瘢痕颜色、硬度、血管分布等得到了显著改善,差异有统计学意义(P<0.05)。患者及观察者评估总分均较治疗前得到改善,差异有统计学意义(P<0.05)。Masson染色结果显示瘢痕胶原纤维蓝染变浅,变得稀疏,排列较治疗前有序。结论:自体颗粒脂肪移植可改善增生性瘢痕的颜色、质地和柔软度,但对患者的疼痛、瘙痒症状及瘢痕厚度、规则程度等改善不明显,总体治疗效果有限,有待进一步研究。

关键词：自体颗粒脂肪移植增生性瘢痕病理检测胶原纤维

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基于深度强化学习的游戏阵容角色推荐方法研究

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基于深度强化学习的游戏阵容角色推荐方法研究

作者：边慧聪齐鲁工业大学

学位级别：硕士

随着互联网技术的不断进步与大数据时代的来临,人们在生活中遇到的选择日益增多,同时也面临信息过载的挑战。在这样的背景下,推荐系统在现代信息社会中扮演了至关重要的角色,其应用范围横跨电子商务、音乐、电影、新闻和社交媒体等多个... 详细信息

随着互联网技术的不断进步与大数据时代的来临,人们在生活中遇到的选择日益增多,同时也面临信息过载的挑战。在这样的背景下,推荐系统在现代信息社会中扮演了至关重要的角色,其应用范围横跨电子商务、音乐、电影、新闻和社交媒体等多个领域。这些传统推荐系统通过分析用户的历史行为和偏好,向用户提供定制化的推荐服务。而在电子游戏这一特殊领域,推荐系统的潜力尚未被完全挖掘。以当前风靡一时的多人在线战术竞技(MOBA)游戏为例,玩家在每局游戏开始前都需要在众多角色中进行角色选择,以参与即将到来的对战。鉴于游戏角色众多、技能各异且相互之间关系错综复杂,玩家在有限的时间内挑选出最适合自己的角色无疑是一项极具挑战性的任务。角色推荐系统的出现,为这一难题提供了解决方案。通过对玩家的游戏历史数据、角色特性以及比赛结果等信息进行深入分析,推荐系统能够学习并理解角色的能力强弱、角色间的复杂互动以及玩家的个人喜好,进而为玩家提供精准的角色推荐。这不仅可以提升玩家的游戏体验,而且在为游戏厂商创造商业价值和推动智能推荐算法的发展等方面都有极其重要的作用。本文对角色推荐任务进行了具体的分析,并结合强化学习与深度学习的相关知识,构建了完整的角色推荐框架,主要贡献如下:(1)在传统的角色推荐方法中,胜率往往被作为评估的核心标准,这种做法在模型构建过程中忽略了角色之间的复杂互动性,同时也未能充分考虑到用户的个人喜好。为了解决这些问题,本文结合了深度学习和强化学习的最新进展,提出了一套全新的角色推荐模型。该模型通过优化蒙特卡洛树搜索算法,并采用双神经网络作为角色阵容评估的反馈机制,有效地克服了以往单纯依赖胜率作为评价标准所带来的推荐效果不理想的问题。本文还引入了知识图谱技术来构建角色间的关联矩阵,有效揭示了角色之间的深层次联系。最后,通过整合玩家的游戏历史记录,构建玩家的兴趣角色向量,从而实现了对不同用户进行精准个性化推荐。(2)在以往的推荐系统中,搜索树算法被广泛应用于角色推荐任务。但是多轮复杂的搜索不仅对系统的性能提出了挑战,同时也大量消耗了时间资源。为了解决这一问题,本文提出了一种创新的自对抗数据生成方法,该方法利用本研究早先提出的模型来模拟真实玩家的博弈过程,从而产生数据。通过这些自生成的对抗数据,本文进一步结合了长短期记忆网络(LSTM)和注意力机制,构建了一个高效的角色推荐预测网络。该网络能够基于当前已选择的角色表示,准确地预测出待推荐角色的概率分布。其在保证推荐效果的同时,大幅节约了计算和时间资源。(3)本文结合软件开发技术,成功搭建了两个推荐系统界面,分别服务于PC端和移动端用户。为了验证系统的实际效用,本课题开展了一系列全面的对比实验和用户体验调查。实验结果和用户反馈一致表明,无论在推荐的精确度还是用户的互动体验方面,本系统都表现出了明显的优势,彰显了其卓越的推荐效率和用户满意度。

关键词：推荐系统 MOBA 角色选择深度学习强化学习

欢歌声中的红色浪漫看吉安采茶戏《有盐同咸》有感

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中国戏剧 2024年第9期 36-37页

作者：张慧聪河南财政金融学院音乐学院

许多年前看过的一部电影让我记忆深刻,那就是法国出品的《虎口脱险》。这是一部反映二战时期盟军及法国老百姓与德国法西斯的军队殊死搏斗的电影作品,然而,这样一部电影竟然没有一处血腥的镜头,完全是用喜剧的手法来表现的,滑稽的动作... 详细信息

许多年前看过的一部电影让我记忆深刻,那就是法国出品的《虎口脱险》。这是一部反映二战时期盟军及法国老百姓与德国法西斯的军队殊死搏斗的电影作品,然而,这样一部电影竟然没有一处血腥的镜头,完全是用喜剧的手法来表现的,滑稽的动作、幽默的语言,让人忍俊不禁。然而,这不仅没有降低这部作品的力量,反而让我们在喜剧中看到了抵抗战士们的顽强的斗志和必胜的乐观主义精神,最后,他们取得了胜利。真所谓“谈笑间,樯橹灰飞烟灭”。

关键词：电影作品二战时期德国法西斯采茶戏

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网约配送员职业伤害保障制度研究

网约配送员职业伤害保障制度研究

作者：孙慧聪吉林大学

学位级别：硕士