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腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰骨髓间充质干细胞降低大鼠移植物抗宿主病的研究

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中华血液学杂志 2004年第8期25卷 506-508页

作者：郭小荑邓宇斌原清涛梁海翔中山大学病理生理学教研室广州510080 广州市第二人民医院矫形外科

移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植后最主要的并发症,解决GVHD的关键在于干预T细胞活化的起始阶段,诱导T细胞对受体的特异性无反应.CTLA4Ig作为阻断T细胞B7/CD28共刺激通路的最有效制剂,其诱导特异性免疫耐受的作用受到广泛关... 详细信息

移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植后最主要的并发症,解决GVHD的关键在于干预T细胞活化的起始阶段,诱导T细胞对受体的特异性无反应.CTLA4Ig作为阻断T细胞B7/CD28共刺激通路的最有效制剂,其诱导特异性免疫耐受的作用受到广泛关注.我们拟用前期构建的重组腺病毒表达载体Ad-CTLA4Ig体外修饰大鼠骨髓间充质干细胞(MSC),通过MSC介导的基因治疗研究目的基因CTIA4Ig在大鼠异基因骨髓移植模型中对GVHD的抑制作用,同时探讨转基因MSC在体内的定向迁移特性,为骨髓MSC在基因治疗中的应用提供新的实验依据。

关键词：腺病毒 CTLA4Ig基因骨髓间充质干细胞大鼠移植物抗宿主病 GVHD 免疫组化

CTLA4Ig重组腺病毒载体的构建与体外表达

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中国病理生理杂志 2003年第5期19卷 585-589,T002页

作者：郭小荑邓宇斌陆才生李树浓中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080 中山大学附属第三医院风湿科广东广州510630

目的 :构建含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒载体 ,为下一步在动物模型体内表达和基因治疗提供基础。方法 :自行设计一对分别含有BglⅡ及HindⅢ酶切位点的CTLA4Ig基因上下游引物 ,以质粒PCDNA3 0 /CTLA4Ig为模板 ,通过PCR扩增获得CTLA4Ig基... 详细信息

目的 :构建含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒载体 ,为下一步在动物模型体内表达和基因治疗提供基础。方法 :自行设计一对分别含有BglⅡ及HindⅢ酶切位点的CTLA4Ig基因上下游引物 ,以质粒PCDNA3 0 /CTLA4Ig为模板 ,通过PCR扩增获得CTLA4Ig基因全部序列。片段回收以后经BglⅡ及HindⅢ双酶切 ,定向插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack -CMV的启动子下游BglⅡ及HindⅢ位点之间 ,获得重组质粒pAdTrack -CTLA4Ig。通过BglⅡ /HindⅢ双酶切、PCR及插入片段测序鉴定后 ,将正确重组体pAdTrack -CTLA4Ig与腺病毒骨架质粒pAdEasy - 1共转化BJ5 183细菌。同源重组后用选择性培养基筛选阳性克隆 ,提取质粒用脂质体介导转染 2 93细胞 ,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增目的基因等方法鉴定重组的腺病毒。结果 :成功构建了含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒 ,病毒滴度为 1 6 5× 10 12 PFU/L。结论 :该重组腺病毒的构建为下一步研究其在哺乳动物细胞内表达、研究CTLA4Ig的生物学活性及移植排斥、自身免疫病的基因治疗提供了一定的基础。

关键词： CTLA4Ig重组腺病毒载体构建体外表达 T淋巴细胞细胞塞件免疫球蛋白基因治疗移植排斥

2000～2003年山东省交通医院住院糖尿病患者尿路感染情况分析

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预防医学论坛 2005年第4期11卷 457-458页

作者：汪红郭荑司艳山东省交通医院山东济南250031

[目的]探讨住院糖尿病患者尿路感染的危险因素及防治。[方法]对在山东省交通医院2000～2003年住院的糖尿病患者432例发生医院内尿路感染的29例病例进行回顾性分析。[结果]糖尿病患者发生医院内尿路感染与住院天数、年龄、血糖、性别、... 详细信息

[目的]探讨住院糖尿病患者尿路感染的危险因素及防治。[方法]对在山东省交通医院2000～2003年住院的糖尿病患者432例发生医院内尿路感染的29例病例进行回顾性分析。[结果]糖尿病患者发生医院内尿路感染与住院天数、年龄、血糖、性别、病原菌有关。[结论]糖尿病患者是医院感染的易发人群,应加强预防与护理措施。

关键词：糖尿病尿路感染分析

Efficiency of adenoviral vector mediated CTLA4Ig gene delivery into mesenchymal stem cells

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Chinese Medical Journal 2003年第11期116卷 1649-1654页

作者：邓宇斌郭小荑原清涛李树浓 Department of Pathopbysiology Zhongshan Medical College Sun Yat-sen University Guangzhou 510080 China Department of Pathophysiology Zhongshan Medical College Sun Yat-sen University Guangzhou 510080 China

Objective To prevent Graft-versus-host disease (GVHD) in rat model, we evaluated the feasibility of mesenchymal stem cells (MSCs) as a gene transfer target and studied the efficiency of recombinant adenovirus mediated gene therapy.Methods We constructed the recombinant adenovirus containing CTLA4lg gene. Rat MSCs of passages 3-5 were infected by the adenovirus, and the transfection efficiency was monitored by GFP markers. We performed flow cytometric analysis, immunohistochemical and Western blotting analysis to identify the CTLA4lg expression. The gene transferred MSCs were tested for their ability to inhibit the allogeneic lymphocyte response in vitro and to prevent GVHD in a rat model.Results Recombinant adenovirus pAd-CTLA4lg was correctly constructed and confirmed. After MSCs were infected by the adenovirus, the CTLA4lg protein was detected not only in transgenic MSCs, but also in the culture medium. In a mixed lymphocytes response (MLR) test, the transgenic MSCs could significantly inhibit the allogeneic lymphocyte response compared with the control groups (P < 0. 05) . A model of GVHD was developed by transplanting bone marrow cells and spleen lymphocytes of F344 rats to lethally irradiated SD rats. The onset of GVHD could be ameliorated or prevented by co-administration of transgenic MSCs. All the rats in the control groups suffered severe acute GVHD. CTLA4lg expression was observed in the liver, intestine, kidney and spleen 30 days post- transplantation.Conclusions Our results indicate that adenoviral vectors could efficiently transfer CTLA4lg gene into MSCs and sustain long-term stable expression in vitro and in vivo.

关键词： CTLA4Ig · adenoviral vector · mesenchymal stem cells · mixed lymphocytes response

老年人使用BiPAP呼吸机治疗不依从性原因分析

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齐鲁护理杂志 2004年第7期10卷 541-542页

作者：汪红郭荑周春梅山东省交通医院山东济南250031

机械通气是抢救呼吸衰竭的最有效手段.经面罩机械通气,是近10年来治疗呼吸衰竭主要进展之一,双相气道正压通气(BiPAP)是一种常用的方法[1].它无需切开气管或插管,无创伤,使用方便,疗效好,通气和住院时间短,节约了住院经费.

关键词：老年人 BiPAP 呼吸机治疗不依从性原因机械通气双相气道正压通气

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睡眠呼吸暂停综合征监测的护理

中国交通医学杂志 2004年第5期18卷 613-614页

作者：汪红郭荑周春梅山东省交通医院济南250031

睡眠呼吸暂停综合征(Sleep Apnea Syndrome,SAS)是一种以睡眠过程中频繁发生呼吸暂停和血氧饱和度下降为特征的临床综合征.其中以阻塞睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSHAS)最为常见.主要的症状有:打鼾、憋醒、白天困倦、嗜睡、注意力不集中... 详细信息

睡眠呼吸暂停综合征(Sleep Apnea Syndrome,SAS)是一种以睡眠过程中频繁发生呼吸暂停和血氧饱和度下降为特征的临床综合征.其中以阻塞睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSHAS)最为常见.主要的症状有:打鼾、憋醒、白天困倦、嗜睡、注意力不集中和记忆力减退等,如不及时治疗,可导致高血压、脑血栓、脑出血、冠心病、心律失常、肺动脉高压、肺心病、智力下降、脑卒中、血液粘稠度增高,甚至导致夜间睡眠中猝死.

关键词：睡眠呼吸暂停综合征护理监测 SAS 常见记忆力减退夜间睡眠重要环节过程准确性

下肢静脉曲张诱发小腿顽固性溃疡63例治疗体会

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中国麻风皮肤病杂志 2003年第4期19卷 411-411页

作者：郭荑山东省交通医院 250031

我们于1995年以来共收治63例下肢静脉曲张诱发小腿顽固性溃疡的病人,均经门诊换药治疗后治愈及好转.我们认为早期明确诊断,根据溃疡的不同情况采取相应的治疗方法,综合治疗才是治愈康复的重要因素.现将临床资料介绍如下.

关键词：下肢静脉曲张诱发小腿顽固性溃疡治疗

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糖尿病足合并感染93例细菌培养分析

交通医学 2003年第4期17卷 444-445页

作者：郭荑汪红宋绍慧山东省交通医院济南市250031

目的 :探讨糖尿病足感染发生的高危因素及治疗措施。方法 :调查分析细菌培养及药敏后的情况。结论 :控制血糖、合理营养、保护足部 ,根据培养及药敏情况合理并针对性应用抗生素。

关键词：糖尿病足合并症感染细菌培养抗生素

CTLA4Ig诱导免疫耐受的机制及应用研究

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国外医学（内科学分册） 2002年第3期29卷 111-114,139页

作者：郭小荑邓宇斌李树浓中山医科大学病理生理学教研室

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 4免疫球蛋白 (CTLA4Ig)作为阻断B7 CD2 8/CTLA4共刺激通路、诱导T细胞特异性免疫耐受的最有效制剂 ,其作用机制主要有 :抑制T细胞的活化和效应过程 ;调节Th1 /Th2型细胞分化 ;阻断树突状细胞的分化成熟。对于... 详细信息

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 4免疫球蛋白 (CTLA4Ig)作为阻断B7 CD2 8/CTLA4共刺激通路、诱导T细胞特异性免疫耐受的最有效制剂 ,其作用机制主要有 :抑制T细胞的活化和效应过程 ;调节Th1 /Th2型细胞分化 ;阻断树突状细胞的分化成熟。对于CTLA4Ig的应用研究主要利用导入可溶性分子或基因转染 ,发挥其免疫抑制和诱导免疫耐受作用 ,取得一定效果的同时也存在局限性。本文综述CTLA4Ig诱导免疫耐受的作用机制及应用研究。

关键词： CTLA4Ig 免疫耐受共刺激通路