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黄芪经益生菌发酵后异黄酮转化研究

中药材 2020年第11期43卷 2675-2678页

作者：郭瑞郭舒臣王怀友董婷霞詹华强深圳市可食用及药用资源研究重点实验室香港科技大学深圳研究院广东深圳518057 山西中医药大学基于炎性反应的重大疾病创新药物山西省重点实验室山西晋中030619 香港科技大学生命科学部暨中药研发中心中国香港

目的:通过益生菌发酵中药黄芪提取液筛选出最佳菌株,探讨发酵时间对异黄酮类成分含量的影响。方法:以黄芪提取液为底物,分别接种10种益生菌,发酵32 h,发酵液前处理后,经HPLC法检测发酵前后异黄酮类成分含量,计算转化效率,筛选最佳菌株;... 详细信息

目的:通过益生菌发酵中药黄芪提取液筛选出最佳菌株,探讨发酵时间对异黄酮类成分含量的影响。方法:以黄芪提取液为底物,分别接种10种益生菌,发酵32 h,发酵液前处理后,经HPLC法检测发酵前后异黄酮类成分含量,计算转化效率,筛选最佳菌株;用最佳菌株发酵黄芪提取液,考察不同时间下异黄酮类成分含量的变化情况。结果:有8种益生菌可使2种主要异黄酮苷类成分转化为各自苷元;根据转化效率筛选出最佳菌种为植物乳杆菌;植物乳杆菌发酵黄芪后2种异黄酮苷的转化率随着发酵时间的延长而增加,最终可达80%以上。结论:植物乳杆菌发酵黄芪效果最佳,该研究建立的检测方法专属性强,操作简单,重现性好,可用于黄芪发酵过程中异黄酮类成分的检测。

关键词：黄芪益生菌 HPLC⁃UV 异黄酮生物转化

新世纪20年:中药炮制机制研究热点与前沿分析

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中国中药杂志 2022年第5期47卷 1161-1169页

作者：杨冰杨陆周滨滨杨菊郭舒臣封亮贾晓斌中国药科大学中药学院江苏南京211198

中药炮制机制研究是完善中药炮制工艺、制定饮片质量标准、提升中药临床疗效、丰富中药炮制理论、推动中药炮制学科发展的关键与核心基础。新世纪20年,众多科研工作者对中药炮制机制进行了深入研究,并在炮制过程中的化学成分转化、活性... 详细信息

中药炮制机制研究是完善中药炮制工艺、制定饮片质量标准、提升中药临床疗效、丰富中药炮制理论、推动中药炮制学科发展的关键与核心基础。新世纪20年,众多科研工作者对中药炮制机制进行了深入研究,并在炮制过程中的化学成分转化、活性成分的体内过程变化、有毒中药炮制减毒规律、加辅料炮制增效减毒机制及生物医学新技术应用等方面取得了显著进展,初步阐明了多味中药炮制机制,极大地促进了中药炮制学科发展。纵观中药炮制机制发展,发现中药炮制机制研究逐渐将化学成分的体外转化与体内吸收、转运与代谢结合,将宏观机体生物效应与微观细胞、分子、靶点、通路结合,且更加注重从整体层面探究炮制机制,并初步形成了中药炮制机制现代系统研究体系。为进一步统筹推进中药炮制科学发展,笔者提出中药炮制机制研究需密切结合中药药性、重视疾病状态对药物作用方式及效应强度的影响、顺应中医药临床复方配伍用药的特点及充分利用系统生物学整体观的思路与建议,并进一步强调从传统中医药理论及中医药临床用药特点深入剖析中药炮制机制。

关键词：炮制机制研究热点前沿减毒增效

新世纪20年:现代生物体系下的中药炮制机制的研究技术与方法

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中国中药杂志 2022年第5期47卷 1170-1176页

作者：郭舒臣李得天梁士魁吴葳杨冰封亮贾晓斌中国药科大学中药学院江苏南京211198

解读中药炮制的机制是中药炮制引领中药实现现代化的关键。中药炮制研究的核心是探讨中药炮制增效、减毒、改变用药目的的机制。过去20年来,研究者们在现代系统生物学体系下对中药炮制的机制进行了深入的探讨,主要集中在炮制引起的药性... 详细信息

解读中药炮制的机制是中药炮制引领中药实现现代化的关键。中药炮制研究的核心是探讨中药炮制增效、减毒、改变用药目的的机制。过去20年来,研究者们在现代系统生物学体系下对中药炮制的机制进行了深入的探讨,主要集中在炮制引起的药性、药效的变化,常常使用到现代药理学与分子生物学技术、谱效相关技术、生物光子辐射技术。但是,这些技术未能真正符合中医药“整体观”内涵。随着系统生物学平台的引进,多组学技术(基因组学、转录组学、蛋白组学、代谢组学)像雨后春笋般冒出,已经开始逐步应用于中药炮制机制研究,在整体性上凸显优势。该文聚焦20年来现代系统生物体系下中药炮制机制的研究技术和方法,分析其中的局限性以及优势,指出整合系统生物学中多组学技术可重构中药炮制机制研究,为其进一步发展提供新的方向。

关键词：中药炮制机制增效减毒多组学系统生物学

结合逐步敲入策略与制剂工艺过程的肾宝片复杂成分辨识

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中草药 2021年第14期52卷 4162-4175页

作者：陆萌贾晓斌郭舒臣易欢段龙强耿炤封亮中国药科大学中药学院江苏南京211198 江西汇仁药业股份有限公司技术中心江西南昌330052

目的结合肾宝片处方22味药材组成及其制剂工艺过程,阐明肾宝片提取物(浸膏)的化学成分,为肾宝片质量控制提供依据。方法采用UPLC分别建立浸膏1与浸膏2的指纹图谱,将浸膏1、2成分与全浸膏对应,按照浸膏1、2逐步敲入的方式,验证全浸膏中... 详细信息

目的结合肾宝片处方22味药材组成及其制剂工艺过程,阐明肾宝片提取物(浸膏)的化学成分,为肾宝片质量控制提供依据。方法采用UPLC分别建立浸膏1与浸膏2的指纹图谱,将浸膏1、2成分与全浸膏对应,按照浸膏1、2逐步敲入的方式,验证全浸膏中的成分,并利用UPLC-Q-TOF-MS快速鉴定各浸膏中的成分。结果基于UPLC重点分析表征了全浸膏中朝藿定A、B、C及淫羊藿苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷、补骨脂素、异补骨脂素等21个成分;利用UPLC-QTOF-MS从浸膏1中共鉴定了朝藿定A、人参皂苷Rg1、人参皂苷Ro等17个化合物,浸膏2中鉴定了松果菊苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、大黄素等58个化合物,从全浸膏中共鉴定了宝藿苷I、人参皂苷Rb1、甘草酸、毛蕊花糖苷等82个化合物,涵盖了处方中22味药材,主要组分包括淫羊藿黄酮组分、人参皂苷组分、制何首乌蒽醌组分、黄芪皂苷组分、肉苁蓉苯乙醇苷组分与补骨脂香豆素组分。结论基于UPLC-Q-TOF-MS对肾宝片的化学成分进行了较为全面的分析,为其物质基础及制剂工艺过程的质量控制提供了实验依据。

关键词：逐步敲入策略制剂工艺过程肾宝片 UPLC UPLC-Q-TOF-MS 物质基础质量控制朝藿定淫羊藿苷松果菊苷毛蕊花糖苷补骨脂素人参皂苷甘草苷大黄素宝藿苷甘草酸

基于UPLC-Q-TOF-MS代谢组学研究炙淫羊藿温肾助阳的炮制机制

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药学学报 2021年第10期56卷 2849-2857页

作者：王玲孙娥侯健徐金娣郭舒臣韦英杰贾晓斌南京中医药大学第三临床医学院江苏南京210028 江苏省中医药研究院江苏南京210028 中国药科大学中药学院江苏南京211198

采用代谢组学方法探究炙淫羊藿温肾助阳和炮制增效机制。建立氢化可的松诱导的大鼠肾阳虚证模型,基于UPLC-Q-TOF-MS(ultra-performance liquid chromatography with quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry)代谢组学方法,联合多元统计分析和单变量统计分析,筛选并鉴定血浆、尿液样品中与肾阳虚相关的潜在生物标志物,分析羊脂油组、淫羊藿生品组、淫羊藿加热品组、淫羊藿炙品组改善肾阳虚证的代谢调控机制。结果显示,氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠血浆、尿液代谢呈现明显的轨迹变化,在血浆和尿液中鉴定出15种与肾阳虚相关的生物标志物,涉及5条代谢通路,分别为甘油磷脂代谢、鞘脂代谢、硫代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢。炙淫羊藿温肾助阳的代谢通路涉及甘油磷脂代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢,而炙淫羊藿两个炮制因素“加热”“羊脂油”分别通过调节甘油磷脂代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢来增强其温肾助阳的作用,进而阐明了炙淫羊藿的炮制增效机制。本文涉及的动物实验符合伦理学标准,并且已获得江苏省中医药研究院动物伦理委员会批准(批准号:AEWC-20200702-119)。

关键词：炙淫羊藿炮制机制代谢组学肾阳虚证 UPLC-Q-TOF-MS 代谢通路

发酵柴胡地上部分定量分析及其抗菌活性成分预测

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中国中药杂志 2020年第17期45卷 4238-4245页

作者：郭舒臣郭瑞夏翊腾董婷霞王怀友詹华强香港科技大学深圳研究院深圳市可食用及药用资源研究重点实验室广东深圳518057 香港科技大学生命科学部暨中药研发中心香港

通过关联分析植物乳杆菌发酵的柴胡地上部分中活性成分的含量和抗菌活性结果,预测其抗菌活性成分。建立8种黄酮成分(山柰酚-3-O-芸香糖苷,异槲皮苷,槲皮素,异鼠李素,芦丁,野鹫尾苷,槲皮素-3-O-β-L-阿拉伯糖苷,山柰酚)和DL-3-苯基-2-羟... 详细信息

通过关联分析植物乳杆菌发酵的柴胡地上部分中活性成分的含量和抗菌活性结果,预测其抗菌活性成分。建立8种黄酮成分(山柰酚-3-O-芸香糖苷,异槲皮苷,槲皮素,异鼠李素,芦丁,野鹫尾苷,槲皮素-3-O-β-L-阿拉伯糖苷,山柰酚)和DL-3-苯基-2-羟丙酸的UPLC-MS-MS检测条件,并且对其发酵过程中含量变化进行动态监测。同时选用5种常见非水生病原菌(金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,铜绿假单胞菌,肺炎克雷伯菌,枯草芽孢杆菌)和4种常见水生病原菌(嗜水气单胞菌,迟缓爱德华菌,解藻弧菌,哈维弧菌),考察柴胡地上部分不同发酵时间的体外抗菌活性,最终通过皮尔逊相关性分析预测柴胡地上部分发酵产物的抗菌活性成分。该研究所建立的UPLC-MS-MS分析方法线性良好,最宽的线性范围在0.19~50μg·mL-1,定量限在0.19~1.56μg·mL-1,检测限在0.10~0.78μg·mL-1。在发酵柴胡地上48 h内,3种黄酮(芦丁,槲皮素-3-O-β-L-阿拉伯糖苷,异槲皮苷)和DL-3-苯基-2-羟丙酸的含量明显增加。发酵柴胡地上部分对水生病原菌的抑菌效果明显强于非水生病原菌;进一步通过皮尔逊相关性分析对发酵物活性成分的预测得出,对于这4种水生病原菌,异槲皮苷,芦丁,槲皮素-3-O-β-L-阿拉伯糖苷,DL-3-苯基-2-羟丙酸与抗菌活性呈现显著相关性。该研究表明发酵柴胡地上部分对水生病原菌有较高的敏感度,并且通过相关性分析得出,可能是由于异槲皮苷,芦丁,槲皮素-3-O-β-L-阿拉伯糖苷,DL-3-苯基-2-羟丙酸含量的增加所导致。该研究为进一步开发大量浪费的柴胡地上部分提供理论依据和新思路。

关键词：柴胡地上部分植物乳杆菌发酵 UPLC-MS-MS分析抗菌活性皮尔逊相关性分析

基于ICP-MS法的不同产地天麻中20种元素分析

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中草药 2017年第17期48卷 3619-3623页

作者：于生郭舒臣姚卫峰单鸣秋池玉梅张丽丁安伟南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定天麻中As、Ba、Be、Cd、Co、Cr、Cu、Ga、Hg、Mg、Mn、Mo、Ni、Pb、Se、Sn、Sr、Ti、Tl、V 20种元素的量。方法采用浓硝酸与双氧水作为混合溶剂,结合微波消解处理天麻样品。经过仪器工作条... 详细信息

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定天麻中As、Ba、Be、Cd、Co、Cr、Cu、Ga、Hg、Mg、Mn、Mo、Ni、Pb、Se、Sn、Sr、Ti、Tl、V 20种元素的量。方法采用浓硝酸与双氧水作为混合溶剂,结合微波消解处理天麻样品。经过仪器工作条件的优化,进行了方法学考察,并测定了30批不同产地天麻样品中20种元素的量。结果 20种待测元素的线性关系良好(r≥0.998 2),重复性试验RSD均≤6.34%,稳定性试验RSD均≤6.00%,精密度试验RSD均≤5.78%,加样回收率在91.62%~108.10%,RSD均≤5.21%。结论该方法具有前处理简便、多种元素同时测定、分析速度快、灵敏度高、准确度高、精密度好等优点,可为天麻中元素的快速分析以及药材质量评价提供技术支持和科学依据。

关键词：电感耦合等离子体质谱天麻 As Ba Be Cd Co Cr Cu Ga Hg Mg Mn Mo Ni Pb Se Sn Sr Ti Tl V 定量分析聚类分析

基于UPLC-Q/TOF-MS研究掌叶大黄酒蒸前后的化学成分变化

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中草药 2024年第15期55卷 5033-5049页

作者：康朝霞孙娥郭舒臣王龙黄然汪晶黄一平窦志华封亮贾晓斌南京中医药大学附属中西医结合医院江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药口服释药系统重点研究室江苏南京210028 中国药科大学江苏南京211198 南通市第三人民医院江苏南通226006

目的基于UPLC-Q/TOF-MS技术,分析掌叶大黄Rheum palmatum酒蒸前后的化学成分,运用植物代谢组学方法对掌叶大黄酒蒸前后化学成分进行对比,研究掌叶大黄酒蒸前后的化学成分变化。方法采用ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μ... 详细信息

目的基于UPLC-Q/TOF-MS技术,分析掌叶大黄Rheum palmatum酒蒸前后的化学成分,运用植物代谢组学方法对掌叶大黄酒蒸前后化学成分进行对比,研究掌叶大黄酒蒸前后的化学成分变化。方法采用ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,体积流量0.3 mL/min,在负离子模式下采集掌叶大黄生品及酒蒸品样品数据,并在此基础上使用正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)研究8个不同产地、批次掌叶大黄炮制前后化学成分的差异。结果全面分析了8批掌叶大黄生熟品的化学成分,共指认出115个成分(鉴定106个),包含糖类3个、鞣质类40个、酚酸类2个、黄酮类20个、二苯乙烯类6个、苯丁酮类6个、蒽醌类22个、色原酮类1个、蒽酮类6个,以及9个未知成分。基于植物代谢组学分析,发现酒蒸前后掌叶大黄化学成分明显不同,与掌叶大黄生品比较酒蒸后鞣质类、黄酮类、蒽醌类等6类共30个化学成分呈现差异,其中有6个成分酒蒸后显著上调,即没食子酸、儿茶素-7-O-葡萄糖苷、儿茶素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷和山柰酚;香叶木素-7-O-新橙皮苷、没食子酸-3-O-葡萄糖苷、1,6-二-O-没食子酰葡萄糖苷等22个成分酒蒸后显著下调。结论掌叶大黄炮制前后化学成分结构发生改变,鞣质聚合体向鞣质单体转化,多级糖苷向次级糖苷和苷元转化,进一步阐释了掌叶大黄酒蒸加热过程成分变化的规律。

关键词：掌叶大黄炮制变化规律 UPLC-Q/TOF-MS 植物代谢组学没食子酸儿茶素-7-O-葡萄糖苷儿茶素-3-O-葡萄糖苷槲皮素-3-O-葡萄糖苷大黄素-8-O-葡萄糖苷和山柰酚

UPLC-MS/MS法与HPLC-FLD法分析检测中药中的黄曲霉毒素

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药物分析杂志 2019年第7期39卷 1272-1278页

作者：郭舒臣汪成彭治添王怀友董婷霞詹华强深圳市可食用及药用资源研究重点实验室/香港科技大学深圳研究院深圳518057 香港科技大学生命科学部暨中药研发中心香港

目的:建立黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS法),同时采用高效液相色谱荧光法(HPLC-FLD法)进行测定。方法:采用UPLC-MS/MS测定,待测黄曲霉毒素的中药经过免疫亲和柱净化,采用C18(2.1 mm×50 mm,... 详细信息

目的:建立黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS法),同时采用高效液相色谱荧光法(HPLC-FLD法)进行测定。方法:采用UPLC-MS/MS测定,待测黄曲霉毒素的中药经过免疫亲和柱净化,采用C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)进行色谱分离,柱温30℃,以含0.1%甲酸的2.0 mmol·L^-1乙酸铵溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,用电喷雾正离子多反应监测模式(MRM)扫描;采用HPLC联用柱后衍生荧光检测方法测定同样的样品;并验证检测结果。结果:UPLC-MS/MS黄曲霉毒素质谱检测的线性关系良好,定量下限范围在0.177 8~0.633 3μg·kg^-1,检测下限范围在0.055 1~0.190 0μg·kg^-1,样品测定结果在1.423~1.975μg·kg^-1之间;同时采用HPLC-FLD荧光检测法进行测定(定量下限范围为0.660~0.204μg·kg^-1,检测下限范围为0.059~0.206μg·kg^-1)。同一样品测定结果误差在1.501%~9.377%之间。结论:与柱后衍生化HPLC-FLD法相比,液质联用测定中药材中黄曲霉毒素的方法,专属性强,操作简单,简便快速,灵敏度高,减少实验成本。

关键词：超高效液相色谱串联质谱联用法高效液相色谱荧光法中药材黄曲霉毒素霉菌毒素