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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 562-573页

作者：胡颖怡倪其承钟瑞华杨文捷李国停周洁芸郭湘洁谢淑武周佳铃朱焰复旦大学药学院上海200032 上海市生物医药技术研究院国家卫生健康委生育调节药械重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海200032 上海市实验动物研究中心上海201203 上海健康医学院药学院上海201318

目的探讨连续重复给予含左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)紧急避孕药(emergency contraception pills,ECPs)对雌性大鼠生育力及其F1代仔鼠健康的影响。方法成年SPF级雌性大鼠于每个动情周期连续给予3次LNG-ECPs,分别给予3个(P-3)、6个(P... 详细信息

目的探讨连续重复给予含左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)紧急避孕药(emergency contraception pills,ECPs)对雌性大鼠生育力及其F1代仔鼠健康的影响。方法成年SPF级雌性大鼠于每个动情周期连续给予3次LNG-ECPs,分别给予3个(P-3)、6个(P-6)和12个(P-12)动情周期。雌性大鼠每个给药时程下,采用Excel产生随机数按体质量分层随机分为2组,分别为LNG-ECPs组和溶媒对照组,分别灌胃给予0.12 mg/kg LNG-ECPs和等体积溶媒。各组于末次给药后4 h分别取1/2动物(12~18只)进行解剖(6~9只)和交配(6~9只);剩余1/2动物(12~18只)于停药恢复3个动情周期后再分别进行解剖(6~9只)和交配(6~9只),计算脏器系数。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测雌性大鼠血清中卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(lutenizing hormone,LH)、雌激素、孕激素、睾酮、抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)以及游离甲状腺激素3(free thyroid hormone,fT3)的水平。雌性大鼠卵巢组织切片苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后进行卵泡计数。记录LNG-ECPs给药结束和停药恢复期雌性大鼠妊娠率及窝仔数,测定F1代仔鼠生长指数以及主动和被动运动能力等指标。取P-12大鼠卵巢组织进行转录组学测序,建立LNG-ECPs致卵巢差异表达基因谱,分析LNG-ECPs致卵巢损伤的差异基因,并进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。结果①连续给予3个和6个动情周期后,LNG-ECPs组雌鼠的血清激素水平和生育力与溶媒对照组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05);F1代仔鼠生长指数和行为学结果与溶媒对照组仔鼠相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。②连续给予12个动情周期后,与溶媒对照组相比,LNG-ECPs组大鼠血清中FSH[(0.21±0.17)U/L]、LH[(0.27±0.08)U/L]和孕激素[(0.68±0.23)μg/L]水平显著低于溶媒对照组[(1.00±0.82)U/L,P=0.043;(1.00±0.50)U/L,P=0.006;(1.00±0.20)μg/L,P=0.027],雌二醇[(2.24±1.03)μg/L]和睾酮[(1.25±0.25)μg/L]水平明显高于溶媒对照组[(1.00±0.35)μg/L,P=0.019;(1.00±0.07)μg/L,P=0.044];卵巢中原始卵泡数量(4.88±2.36)显著少于溶媒对照组(16.13±9.36,P=0.005),闭锁卵泡数量(24.38±5.01)显著高于溶媒对照组(19.13±2.30,P=0.018);LNG-ECPs组中F1代仔鼠负重游泳时间[(157.13±32.29)s]明显低于溶媒对照组[(198.06±40.01)s,P=0.003]。停药恢复3个动情周期后,LNG-ECPs可造成大鼠血清中FSH[(2.48±1.18)U/L]、LH[(1.60±0.41)U/L]、睾酮[(1.37±0.23)μg/L]及FSH/LH值(1.61±0.41)显著高于溶媒对照组[(1.00±0.67)U/L,P=0.024;(1.00±0.27)U/L,P=0.014;(1.00±0.18)μg/L,P=0.011;1.00±0.49,P=0.042],且雌激素水平[(0.49±0.15)μg/L]和AMH水平[(0.79±0.15)μg/L]显著低于溶媒对照组[(1.00±0.37)μg/L,P=0.011;(1.00±0.10)μg/L,P=0.016],同时,大鼠卵巢中原始卵泡数量(6.25±5.06)仍显著少于溶媒对照组(12.00±5.56,P=0.048);F1代仔鼠在旷场中的运动总距离[(89.85±36.98)m]以及负重游泳时长[(112.00±29.52)s]均显著低于溶媒对照组[(147.55±23.13)m,P<0.001;(137.69±25.85)s,P=0.014]。③转录组测序结果表明,与溶媒对照组相比,LNG-ECPs组雌性大鼠卵巢组织中存在Cd5、Cxcr1、Lexm、Fga、Mybphl和Gstm5等显著差异表达的基因,参与萜类骨架生物合成、卵巢类固醇生成和皮质醇的合成与分泌等类固醇激素合成相关过程

关键词：左炔诺孕酮生育力行为学卵巢损伤转录组学

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同种异体子宫内膜异位症大鼠模型用于GnRH激动剂类药物的药效评价研究

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实验动物与比较医学 2024年第2期44卷 127-138页

作者：钟瑞华李国停杨文捷郭湘洁周洁芸胡颖怡倪其承杨野张敏朱焰国家卫生健康委员会生育调节药械重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组上海200237 复旦大学药学院上海200032 长春金赛药业有限公司长春130012

目的用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型,并评价促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响。方法取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠... 详细信息

目的用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型,并评价促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响。方法取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠的腹腔壁上,构建同种异体的子宫内膜异位症模型。3周后,测量异位内膜的长、宽、高,计算给药前异位内膜的体积V1。将进行假手术操作的大鼠设为假手术组,将造模大鼠随机分为模型组、曲普瑞林组(0.25mg/kg)、GenSci006-1组(0.125mg/kg)和GenSci006-2组(0.25mg/kg)共4组,每组大鼠16只。各组大鼠单次给予相应的药物,假手术组和模型组给予同等体积的溶剂。3周后,再次测量异位内膜,计算给药后异位内膜的体积V2和抑制率;通过比较脏器系数及病理切片的变化,判断GenSci006对大鼠子宫和卵巢组织的影响;ELISA法测定血清中雌二醇(estradiol,E_(2))、孕酮(progesterone,P_(4))、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizinghormone,LH)水平的变化;实时荧光定量PCR法测定下丘脑和垂体中GnRH受体(GnRHreceptor,GnRHR)mRNA的表达水平。蛋白质印迹法检测异位内膜组织中雌激素受体(estrogen receptor,ER)α、ERβ和孕激素受体(progesterone receptor,PR)蛋白的表达。结果给药3周后发现,与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠的体重显著增加(P0.05);与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组子宫脏器系数及子宫内膜厚度显著降低(P0.05);与模型组相比,曲普瑞林组、GenSci006-1组和GenSci006-2组大鼠的卵巢脏器系数和血清P4水平均显著降低(P0.05)。与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠垂体GnRHRmRNA表达水平显著下调(P0.05)。结论大鼠同种异体子宫内膜异位症模型适宜作为筛选和评价子宫内膜异位症治疗药物的动物模型,而且异位内膜体积、抑制率、子宫及卵巢脏器系数、血清E_(2)水平均可作为检测药物疗效的指标。

关键词：子宫内膜异位症 GenSci006 曲普瑞林异位内膜大鼠

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恶病质模型的构建及诺美孕酮对恶病质模型大鼠的影响研究

恶病质模型的构建及诺美孕酮对恶病质模型大鼠的影响研究

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：钟瑞华李国停杨文捷郭湘洁朱焰国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组

目的:建立顺铂诱导的恶病质模型,探索诺美孕酮对大鼠体重及脂肪的影响。方法:将大鼠随机分成三组,每组9只,分别腹腔注射1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg的化疗药物顺铂,每天对大鼠进行称重,大鼠体重下降5%停止给予顺铂,给药时间最长为5天。确定... 详细信息

目的:建立顺铂诱导的恶病质模型,探索诺美孕酮对大鼠体重及脂肪的影响。方法:将大鼠随机分成三组,每组9只,分别腹腔注射1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg的化疗药物顺铂,每天对大鼠进行称重,大鼠体重下降5%停止给予顺铂,给药时间最长为5天。确定构建恶病质大鼠的剂量及给药时间。通过预先给予顺铂,筛选出对顺铂有反应的大鼠,随机分为空白组、模型对照组,甲地孕酮组(5、10mg/kg),诺美孕酮(2.5、5、10mg/kg),每组10只,给药方式为灌胃。大鼠给予甲地孕酮和诺美孕酮1周后,除空白组外,其他组腹腔注射顺铂,给药持续3天。给予顺铂期间,每天对大鼠进行称重,给予诺美孕酮11天后,大鼠进行麻醉取血处死。通过Image Pro Plus 6.0软件计算病理切片中大鼠腹股沟脂肪和附睾周围脂肪的横截面积及周长的变化。Western blot测定腹股沟脂肪细胞脂肪降解相关基因激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase, HSL)、脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase, ATGL),脂肪生成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase FASN)、甾醇调节元件结合蛋白-1 (sterol regulatory element binding protein-1, SREBP-1)表达的变化。结果:给予2mg/kg的顺铂连续给药3天,能够构建大鼠恶病质模型。与模型组相比,2.5、5mg/kg诺美孕酮和10mg/kg的甲地孕酮能减轻顺铂诱导的恶病质大鼠的体重降低(p0.05)。诺美孕酮能够降低脂质降解基因HSL和ATGL在腹股沟脂肪的表达(p<0.05),增加脂质生成基因FASN、SREBP-1和PPARγ的表达(p<0.05)。结论:2mg/kg的顺铂连续腹腔给药3天能够构建大鼠恶病质的模型及诺美孕酮能够通过降低脂肪的萎缩改善顺铂诱导的恶病质大鼠的体重降低。

关键词：诺美孕酮恶病质顺铂脂肪

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基于P450酶的诺美孕酮与紫杉醇/顺铂相互作用的研究

基于P450酶的诺美孕酮与紫杉醇/顺铂相互作用的研究

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：郭湘洁李钊李国停钟瑞华杨文捷谢淑武朱焰国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组

目的基于不同药物对细胞色素P450酶（CYP450）的代谢亚型酶活性的影响,考察醋酸诺美孕酮（NOMAc）体外与紫杉醇（PTX）、顺铂（CDDP）的相互作用,初步探讨NOMAc、PTX、CDDP的相互作用,为NOMAc用于多药联合化疗辅助治疗子宫内膜腺癌提供... 详细信息

目的基于不同药物对细胞色素P450酶（CYP450）的代谢亚型酶活性的影响,考察醋酸诺美孕酮（NOMAc）体外与紫杉醇（PTX）、顺铂（CDDP）的相互作用,初步探讨NOMAc、PTX、CDDP的相互作用,为NOMAc用于多药联合化疗辅助治疗子宫内膜腺癌提供数据支持。方法建立适合的肝微粒体酶体外孵育体系:包含肝微粒体、MgCl2、探针底物混合样品、不同浓度的药物及抑制剂,37℃水浴预孵育5min后,加入NADPH再生系统启动反应,继续孵育60min;加入含内标氘代来曲唑的冰甲醇终止反应,涡旋震荡30 S后,4℃下13000×g离心10 min,取上清液进液质联用仪（HPLC-MS/MS）测定。确定探针药物的米氏常数、半数抑制浓度及CYP酶对应探针药物底物产物的浓度。结果 1、探针药物米氏常数（Km）分别为氯唑沙宗（CYP2E1）:0.4949;咪达唑仑（CYP3A4）:5.852;紫杉醇（CYP2C8）:3.041。2、药物半数抑制浓度（IC50）分别为双硫仑（CYP2E1）:5.533;酮康唑（CYP3A4）:3.145;槲皮素（CYP2C8）:0.07728。3、NOMAc与PTX/CDDP对3种CYPs酶活性的影响结果分别为:（1）CYP3A4酶:空白组浓度为22.975±1.168μmol·L,NOMAc组23.445±0.382μmol·L,NOMAc+PTX组21.593±0.985μmol·L,NOMAc+CDDP组24.329±0.727μmol·L,NOMAc+PTX+CDDP组21.224±1.462μmol·L;（2）CYP2E1酶:空白组浓度为0.892±0.069μmol·L,NOMAc组0.780±0.138μmol·L,NOMAc+PTX组0.447±0.026μmol·L,NOMAc+CDDP组0.799±0.080μmol·L,NOMAc+PTX+CDDP组0.499±0.107μmol·L;（3）CYP2C8酶:空白组浓度为16.472±1.332μmol·L,NOMAc组15.782±1.287μmol·L,NOMAc+PTX组15.926±0.973μmol·L,NOMAc+CDDP组16.631±0.419μmol·L, NOMAc+PTX+CDDP组15.973±1.331μmol·L。讨论1、NOMAc及NOMAc和CDDP联合用药组对三种酶均无显著影响;2、、NOMAc联合PTX、NOMAc联合PTX/CDDP用药时,与空白组相比对CYP3A4、CYP2C8无显著影响,但对CYP2E1有显著的抑制作用。临床上NOMAc与PTX联合用药时,在同时使用通过CYP2E1代谢的药物（如苯妥英钠、双香豆素、甲苯磺丁脲、优降糖、格列齐特、普萘洛尔、维拉帕米、利福平等）时应特别注意药物不良反应。联合用药时体内相互作用的实际情况需进行更深入研究。

关键词：诺美孕酮、紫杉醇、顺铂 P450酶药物相互作用肝微粒体

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应用液质联用法同时测定新西兰家兔血浆中左炔诺孕酮和炔雌醇浓度及其药动学

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中国药理学与毒理学杂志 2017年第8期31卷 823-831页

作者：李钊郭湘洁谢淑武周洁芸朱焰上海市计划生育科学研究所国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院上海200032

目的建立液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定新西兰家兔血浆中左炔诺孕酮(LNG)和炔雌醇(EE)浓度的方法,并探讨LNG/EE复方避孕贴多次给药后药动学特征。方法 6只雌性新西兰家兔连续10次给予LNG/EE复方避孕贴(5 cm×4 cm,每贴含LNG 5.35... 详细信息

目的建立液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定新西兰家兔血浆中左炔诺孕酮(LNG)和炔雌醇(EE)浓度的方法,并探讨LNG/EE复方避孕贴多次给药后药动学特征。方法 6只雌性新西兰家兔连续10次给予LNG/EE复方避孕贴(5 cm×4 cm,每贴含LNG 5.35 mg,EE 0.11 mg),每3 d1贴,连续给药30 d,分别于给药后不同时间耳缘静脉采血,血浆样品经丹酰氯衍生化后,采用HPLC-MS/MS测定血浆中LNG和EE浓度,并采用DAS3.0软件计算首末次给药的主要药动学参数。结果 LNG的线性范围为0.10~20.00μg·L^(-1),最低定量限为0.10μg·L^(-1),提取回收率均>78.30%,日内精密度79.99%,日内精密度<3.28%、日间精密度<12.76%。首次给药后EE的药动学参数:C_(max)为(0.18±0.04)μg·L^(-1),T_(max)为(2.50±1.30)h,AUC(0-768)为(2.65±0.56)h·μg·L^(-1);末次给药后EE的药动学参数:C_(max)为(0.17±0.07)μg·L^(-1),T_(max)为(2.17±0.26)h,AUC(0-768)为(2.02±0.82)h·μg·L^(-1)。结论建立的HPLC-MS/MS法准确灵敏,可用于同时测定血浆中LNG和EE的浓度。新西兰家兔给予LNG/EE复方避孕贴后首末次主要药动学参数无显著性差异,且多次给予此避孕贴后体内血药浓度无蓄积。

关键词：左炔诺孕酮炔雌醇避孕贴衍生化药动学

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附睾精子成熟和低双氢睾酮不育发病机制研究

附睾精子成熟和低双氢睾酮不育发病机制研究

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：谢淑武李国停郭湘洁钟瑞华杨文捷周洁芸朱焰沈如凌范春上海实验动物研究中心国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理研究组

睾丸产生的精子还不具备精卵识别和精卵结合能力,在附睾运行和贮存过程中,精子发生一系列形态结构、生化代谢和生理功能的改变,最终成熟并获得受精能力。附睾管腔微环境与精子相互作用,使精子表面蛋白质的成分得以部分改变,或已有的蛋...

睾丸产生的精子还不具备精卵识别和精卵结合能力,在附睾运行和贮存过程中,精子发生一系列形态结构、生化代谢和生理功能的改变,最终成熟并获得受精能力。附睾管腔微环境与精子相互作用,使精子表面蛋白质的成分得以部分改变,或已有的蛋白质得以部分修饰(如磷酸化或去磷酸化,酯化或脱酯化,酰化或脱酰化,羧基化或脱羧基化,醣基化或去醣基化等)而被激活或抑制,从而逐步获得成熟时所具备的功能,保护其自身能在附睾中储存及与卵子结合。

关键词：

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金凤丸对环磷酰胺诱导的大鼠早发性卵巢功能不全的改善作用及其机制初探

金凤丸对环磷酰胺诱导的大鼠早发性卵巢功能不全的改善作用及其机...

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：胡颖怡钟瑞华郭湘洁李国停周洁芸杨文捷任冰涛朱焰复旦大学药学院国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理研究组

研究目的:金凤丸(Jinfeng Pill,JFP)由淫羊藿、鹿茸、人参、阿胶、女贞子、何首乌、仙茅、肉桂和益母草共9种中药组成,是一剂源自清朝的传统中药复方,在我国南部及东南亚地区被誉为妇科"圣药"。临床上,金凤丸主要用于调节月经,改善痛经... 详细信息

研究目的:金凤丸(Jinfeng Pill,JFP)由淫羊藿、鹿茸、人参、阿胶、女贞子、何首乌、仙茅、肉桂和益母草共9种中药组成,是一剂源自清朝的传统中药复方,在我国南部及东南亚地区被誉为妇科"圣药"。临床上,金凤丸主要用于调节月经,改善痛经;目前,也被广泛应用于低子宫内膜容受性、反复种植失败、多囊卵巢综合征等多种妇科疾病。我们推测金凤丸可能对早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)也具有良好的治疗效果,因此,本研究主要评价金凤丸对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的大鼠早发性卵巢功能不全的疗效,并初步探讨其可能的作用机制。方法:首先,采用环磷酰胺诱导建立大鼠POI模型,通过大鼠体重、卵巢系数、血清激素水平和卵泡计数等指标评价金凤丸的药效;而后,采用网络药理学分析结合转录组测序技术,初步确定金凤丸改善POI的潜在作用靶点;最后,通过RT-qPCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平上验证关键通路中重要靶点的表达情况。结果:金凤丸通过显著降低血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和FSH/LH值,提高血清中雌激素(E2)和抗缪勒管激素(AMH)水平,并促进卵巢中卵泡的发生与成熟,逆转原始卵泡池的耗竭,来发挥改善CTX诱导的大鼠卵巢功能损伤的作用。通过网络药理学分析,发现金凤丸可影响癌症相关通路(pathways in cancer)、癌症中蛋白聚糖通路(proteoglycans in cancer)、PI3K-AKT信号通路(PI3K-AKTsignaling pathway)、TNF信号通路(TNF signaling pathway)和FoxO信号通路(FoxO signaling pathway)等与增殖和免疫过程相关的通路。转录组学测序结果进一步揭示,环磷酰胺和金凤丸共同调控的最重要的信号通路是IL-17信号通路(IL-17 signaling pathway),其次是癌症中转录失调通路(transcriptional misregulation in cancer)和癌症中蛋白聚糖通路(proteoglycans in cancer)。结合网络药理学和转录组学分析发现,金凤丸可能调节COX-2、HSP9OAA1、FOS、MMP3和MAPK11等免疫相关基因,和IL-17信号通路、Th17细胞分化(Th17 cell differentiation)和TNF信号等与免疫调节相关的通路。而后,通过RT-qPCR检测发现金凤丸可调节FOS、FOSB、FOSL1、MMP3、MMP13和COX-2等IL-17通路相关基因的表达。最后,在蛋白水平上,确定了金凤丸可通过降低血清中IL-17A水平,抑制卵巢组织中MEK1/2和ERK1/2磷酸化及其下游IL-6等促炎因子的表达,来发挥改善环磷酰胺诱导大鼠POI的作用。结论:金凤丸能有效改善环磷酰胺诱导的大鼠早发性卵巢功能不全的症状,其作用机制可能与抑制IL-17A/IL-6轴及MEK1/2-ERK1/2信号活性有关。

关键词：金凤丸早发性卵巢功能不全转录组学 IL-17/IL-6轴 MEK/ERK

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度他雄胺对大鼠附睾Claudin1和β-catenin表达的影响

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中华男科学杂志 2015年第1期21卷 17-22页

作者：谢淑武曲立娟周娴颖周洁芸李国停毕继宏郭湘洁李钊曹霖朱焰上海市计划生育科学研究所生殖药理研究组国家卫生与计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海200032 上海市第八人民医院检验科上海200235 广东医学院药学院广东湛江524000

目的：通过度他雄胺对大鼠附睾上皮连接关键蛋白Claudin1和β-catenin表达影响的研究,探讨度他雄胺抑制生育的可能分子机制,为男性不育治疗和男性避孕提供附睾靶点。方法：16只SD雄性大鼠（3月龄,250~300 g）,设度他雄胺40 mg/kg实验组... 详细信息

目的：通过度他雄胺对大鼠附睾上皮连接关键蛋白Claudin1和β-catenin表达影响的研究,探讨度他雄胺抑制生育的可能分子机制,为男性不育治疗和男性避孕提供附睾靶点。方法：16只SD雄性大鼠（3月龄,250~300 g）,设度他雄胺40 mg/kg实验组和阴性对照组,每组8只,灌胃给药,1次/d,连续2周。给药结束后计算机辅助精子分析雄鼠精子活力及形态,计算交配雌鼠受孕率,ELISA法测定大鼠血清睾酮（T）和双氢睾酮（DHT）浓度,透射电镜分析附睾细胞紧密连接变化,RT-PCR分析实验组和对照组附睾上皮连接蛋白Claudin1和β-catenin基因表达变化;免疫组化和免疫印迹分析其蛋白表达变化。结果：度他雄胺可以显著抑制大鼠血清DHT浓度、精子活力和生育力,超微结构显示实验组附睾上皮细胞紧密连接出现空隙,附睾腔液体积增多。RT-PCR、免疫组化和免疫印迹显示度他雄胺可以显著下调Claudin1和β-catenin的表达。结论：度他雄胺可以显著抑制雄性大鼠生育,这可能与其降低大鼠血清DHT水平,进而抑制附睾上皮连接关键基因Claudin1和β-catenin表达和破坏附睾上皮紧密连接有关。

关键词：度他雄胺双氢睾酮附睾上皮连接 Claudin1 β-catenin

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LC-MS/MS法测定大鼠血浆中SM1044的浓度及其药代动力学

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中SM1044的浓度及其药代动力学

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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：李钊郭湘洁朱焰复旦大学生殖与发育研究院上海市计划生育科学研究所生殖药理研究组国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室

目的:测定单次灌胃给予SM1044后,其在SD大鼠体内不同时间点血药浓度的变化,初步探讨SM1044在SD大鼠体内的药代动力学特征。方法:雌性SD大鼠,5只,灌胃给予0.7mg/kg的SM1044。分别于给药的0h、0.25h、0.5h、0.75h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h...

目的:测定单次灌胃给予SM1044后,其在SD大鼠体内不同时间点血药浓度的变化,初步探讨SM1044在SD大鼠体内的药代动力学特征。方法:雌性SD大鼠,5只,灌胃给予0.7mg/kg的SM1044。分别于给药的0h、0.25h、0.5h、0.75h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、4h、6h、8h、24h、48h、72h、96h眼底静脉丛采集血样;采用液质联用方法(HPLC-MS/MS)对血浆样品进行测定,观察给予SM1044后不同时间点的血药浓度的变化,采用DAS3.0软件计算主要药代动力学参数,并应用SPSS20.0对结果进行统计分析。结果:SM1044的血药浓度在0.1～20μg/L范围内线性良好。大鼠灌胃给予SM1044后,血浆中SM1044药动学参数分别为:C为0.93±0.77μg/L、T为0.58±0.38h、AUC为0.85±0.37μg/L*h、T为0.48±0.15 h、MRT为0.92±0.45 h、CL为827.09±271.92 L/h、V为606.96±318.89 L/kg。结论:大鼠灌胃给予SM1044后,达峰时间较快,原型药在体内代谢消除较快;Cmax、V及AUC、T、CL和MRT无剂量相关性。

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怀牛膝HPLC指纹图谱研究

引用

中成药 2010年第6期32卷 897-900页

作者：郭湘洁杨中林周培培李萍中国药科大学现代中药重点实验室江苏南京210009

目的:建立怀牛膝药材的HPLC指纹图谱。方法:采用HPLC法测定10个不同产地的怀牛膝药材,制定指纹图谱。色谱柱为C18,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为250nm,进样量为20μL,柱温为30℃。结果:得到分离度、重现性均较好... 详细信息

目的:建立怀牛膝药材的HPLC指纹图谱。方法:采用HPLC法测定10个不同产地的怀牛膝药材,制定指纹图谱。色谱柱为C18,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为250nm,进样量为20μL,柱温为30℃。结果:得到分离度、重现性均较好的怀牛膝药材HPLC/UV指纹图谱,得到15个共有峰。结论:该方法简便、可靠、重现性好,可用于怀牛膝的质量控制。

关键词：怀牛膝指纹图谱高效液相色谱法

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