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鸡胚原始生殖细胞的分离与培养

鸡胚原始生殖细胞的分离与培养

作者：郝小静山东农业大学

学位级别：硕士

近年来，作为精子和卵子的祖细胞的原始生殖细胞(PGCs)已成为另一种可选择的多能性干细胞。来源于PGCs的干细胞称胚胎生殖细胞。迄今为止仅在小鼠上获得PGCs来源的真正意义上的胚胎干细胞(ES cells)，即具有参与生殖系传递能力的ES细胞... 详细信息

近年来，作为精子和卵子的祖细胞的原始生殖细胞(PGCs)已成为另一种可选择的多能性干细胞。来源于PGCs的干细胞称胚胎生殖细胞。迄今为止仅在小鼠上获得PGCs来源的真正意义上的胚胎干细胞(ES cells)，即具有参与生殖系传递能力的ES细胞。取孵化5.5～6.5天含PGCs的鸡胚生殖腺及其周围组织，经0.25％胰酶+0.02％EDTA消化后，接种于24孔培养板内。加入新鲜的EG细胞培养液(含DMEM、胎牛血清、鸡血清、β-巯基乙醇、L-谷氨酰胺、HEPES、鸡胚浸出液以及细胞因子等成分)培养24小时以后，PGCs开始部分贴附于共培养的生殖原基细胞上。培养3～4天的PGCs大多已转变为由2～20细胞构成的集落，其中包括从PGCs群集或细胞本身增殖所形成的两种集落类型。培养至5～7天，类EG克隆数目明显增加。类EG细胞克隆呈规则的集落状生长，多层分布，且有明显的花纹。克隆内的细胞间并不紧密排列，因此不难看出克隆内的单个细胞。这与经典的小鼠胚胎生殖细胞的形态有所不同。原代培养时，我们采用PGCs与相同来源的生殖原基细胞共培养的方式，效果良好。继代培养时，经过反复实验比较鸡胚原代成纤维细胞饲养层(PCEF)、小鼠原代成纤维细胞饲养层(PMEF)、SNL细胞饲养层等三种不同饲养层的作用效果，最终发现以鸡胚原代成纤维细胞制作饲养层同时添加各种生长因子最适合鸡类EG细胞的生长，但PCEF与PMEF之间的差异不显著。本研究中，通过分组添加不同生长因子，结果发现，培养初期不同的分组在培养过程中出现的类EG集落数相差不明显。而随着培养时间的延长，添加LIF、bFGF、SCF、及IGF-1组表现的优势越来越明显，对促进类EG集落的持续增多效果最佳。四种生长因子的添加量分别为：100IU／ml，10ng／m1，10ng／ml，10ng／ml。在鸡类EG细胞的传代过程中，采用0.25％胰酶与0.02％EDTA的联合作用将集落离散收到了很好的效果。胰酶和EDTA的协同作用，缩短了消化时间，同时降低了消化液对细胞的损伤作用。除酶的作用以外，外源性物质的添加、血清的更换、温度和PH值的改变等因素对鸡类EG细胞的分离培养均有重要的影响。研究中分离得到的鸡类EG细胞经PAS染色后呈深紫红色，而鸡胚成纤维细胞并不着色。将消化分散的类EG细胞在无分化抑制因子的类EG培养基中重悬培养，3～4天后，可见部分细胞团形成简单的胚体。在饲养层上生长的类EG细胞集落，在去除抑制分化因子的条件下培养，长时间不传代，可见细胞生长缓慢，自发分山东农业大学硕士研究生论文（2003）化，首先表现为失去原有的形态，进而与周围细胞界限不清，集落外围的细胞与饲养层连成一片。最后将传至3代、4代的类EG细胞集落离散后制作嵌合体，得到了一只毛色嵌合体鸡。本研究分离得到的类EG细胞经形态学鉴定、PAS染色、体外分化实验和嵌合体鸡的制作等实验证明其具有胚胎干细胞的诸多类似特性。类EG细胞所具有的多能性、定向整合及较高的嵌合能力，对高效培育鸡的新品种有重大的意义。

关键词：鸡原始生殖细胞类胚胎生殖细胞饲养层细胞培养

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瘤胃调控剂对瘤胃发酵的影响

中国饲料 2022年第5期1卷 19-22页

作者：郝小静青岛市畜牧工作站/青岛市畜牧兽医研究所山东青岛266100

本文综述了酵母培养物、半胱胺、稀土、小肽和肉桂醛5种常用瘤胃调控剂对瘤胃发酵的调控作用,探讨了常用瘤胃调控剂对反刍动物瘤胃氨氮浓度、瘤胃微生物蛋白产量、瘤胃挥发性脂肪酸浓度及瘤胃内pH等指标的影响,以期为这5种常用瘤胃调控... 详细信息

本文综述了酵母培养物、半胱胺、稀土、小肽和肉桂醛5种常用瘤胃调控剂对瘤胃发酵的调控作用,探讨了常用瘤胃调控剂对反刍动物瘤胃氨氮浓度、瘤胃微生物蛋白产量、瘤胃挥发性脂肪酸浓度及瘤胃内pH等指标的影响,以期为这5种常用瘤胃调控剂应用于反刍动物生产提供理论依据和技术参考。

关键词：瘤胃调控剂瘤胃发酵酵母培养物半胱胺稀土小肽肉桂醛

舌鳞癌组织中Cyclin D1的表达与临床病理相关性

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第四军医大学学报 2004年第2期25卷 179-181页

作者：安虹王亚利郝小静任辉西安交通大学口腔医院修复科陕西西安710004 西安交通大学第二医院放疗中心陕西西安710004

目的 :探讨细胞周期素D1 (CyclinD1 )在舌癌中的表达及临床病理相关性 .方法 :采用免疫组化ABC法检测 4 2例舌鳞状细胞癌、1 9例良性肿瘤石蜡包埋标本的CyclinD1表达 .结果 :CyclinD1在舌癌细胞核中呈阳性表达 ,阳性表达率5 5 % ,与组... 详细信息

目的 :探讨细胞周期素D1 (CyclinD1 )在舌癌中的表达及临床病理相关性 .方法 :采用免疫组化ABC法检测 4 2例舌鳞状细胞癌、1 9例良性肿瘤石蜡包埋标本的CyclinD1表达 .结果 :CyclinD1在舌癌细胞核中呈阳性表达 ,阳性表达率5 5 % ,与组织学分级及淋巴结转移呈明显正相关 (r=0 .388,P 0 .0 5 ) ,Kaplan Meier生存曲线示两组 5a累积无复发生存期 (RFS)无显著差异 (P >0 .0 5 ) .结论 :CyclinD1在舌癌中异常表达 ,其表达可能与肿瘤分化及发展相关。

关键词：舌癌 Cyclin D1 临床病理特征

基于数据挖掘技术的大学英语过程性评价体系研究

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信息记录材料 2018年第1期19卷 101-104页

作者：郝小静内蒙古科技大学外国语学院内蒙古包头014010

现代教育再也不止步于应试教育,而是提倡素质教育。传统保守的终结性评价显然已经不能适应社会的发展步伐,因而一种全新的评价方式随之应运而生,这就是过程性评价。过程性评价不仅可以让学生的学习能力有质的飞跃。还可以让教师的教学... 详细信息

现代教育再也不止步于应试教育,而是提倡素质教育。传统保守的终结性评价显然已经不能适应社会的发展步伐,因而一种全新的评价方式随之应运而生,这就是过程性评价。过程性评价不仅可以让学生的学习能力有质的飞跃。还可以让教师的教学有突破性的优化。但是在过程性评价的使用过程中,仍旧存在着这样那样的缺陷,比如因为教师对学生相关的信息资料收集不足,导致了逻辑错误,从而产生了个人偏见。这就极容易造成过程性评价的真实性与有效性降低。本文就目前大学英语的过程性评价的形势提出一种新的设想,把过程性评价使用过程中产生的数据通过数据挖掘进行缜密的分析。如通过教师在英语四六级中教学中的过程性评价得到的信息利用数据挖掘来进行比较与分析,再和教师在学生的英语四六级成绩中得出的总结性的评价实行全面比较,推断出教师在英语教学中过程性评价能否客观合理,进而解决过程性评价使用过程中产生的问题,促使大学英语教育能更科学的实行过程性评价。

关键词：数据挖掘技术大学英语过程性评价研究

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我国食品安全监管的不足与完善

经营管理者 2014年第2期 259-260页

作者：郝小静北京师范大学

随着社会经济的快速发展,相伴而来的却是食品安全事故频发。这不得不使我们发出疑问,是行政监管出了问题还是我们应该建立更完备的食品安全监管机制?合理利用行政强制措施,大力开展食品原产地可追溯制度,学习美国黑名单制度,充分发挥'... 详细信息

随着社会经济的快速发展,相伴而来的却是食品安全事故频发。这不得不使我们发出疑问,是行政监管出了问题还是我们应该建立更完备的食品安全监管机制?合理利用行政强制措施,大力开展食品原产地可追溯制度,学习美国黑名单制度,充分发挥'第三部门',NGO等的社会监督作用,还食品以安全,还公民以吃的放心,吃的健康。

关键词：食品安全行政强制措施食品原产地可追溯制度黑名单第三部门

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浅谈异步电动机的几种调速控制

科技信息 2012年第17期 92-92,91页

作者：郝小静山东理工大学山东淄博255000 滨州技师学院山东博兴256500

通过改变定子电压频率f1、极对数p以及转差率s都可以实现交流异步电动机的速度调节,具体可以归纳为变极调速、变转差率调速和变频调速三大类,而变转差率调速又包括调压调速、转子串电阻调速、串级调速等,它们都属于转差功率消耗型的调... 详细信息

通过改变定子电压频率f1、极对数p以及转差率s都可以实现交流异步电动机的速度调节,具体可以归纳为变极调速、变转差率调速和变频调速三大类,而变转差率调速又包括调压调速、转子串电阻调速、串级调速等,它们都属于转差功率消耗型的调速方法。

关键词：变转差率调速变频调速调压调速

DICOM增强型信息对象信息提取技术的研究

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中国组织工程研究 2012年第30期16卷 5620-5624页

作者：吕晓琪郝小静谷宇内蒙古科技大学信息工程学院内蒙古自治区包头市014010

背景:随着医学影像技术的发展,医学数字图像和通信标准早期的信息对象定义不能突显出新图像的序列特点。目的:分析增强型信息对象的新技术,新结构和新机制,寻找一种方法,能正常浏览增强型信息对象,获取相关信息。方法:依照医学数字图像... 详细信息

背景:随着医学影像技术的发展,医学数字图像和通信标准早期的信息对象定义不能突显出新图像的序列特点。目的:分析增强型信息对象的新技术,新结构和新机制,寻找一种方法,能正常浏览增强型信息对象,获取相关信息。方法:依照医学数字图像和通信标准分析增强型信息对象的结构,基于面向对象编程,实现图像浏览,获取图像对象的详细信息。结果与结论:该程序能够便捷流畅地浏览增强型信息对象并获取到它们的标签信息。利用本程序,可以改进优化现有的医学图像处理软件,所获取信息为三维重建和挂片协议等提供有力技术支撑。

关键词：增强型信息对象 DICOM DICOM多帧图像 DCMTK 数字化医学

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以飞散性视角分析木心小说《空房》的译介

教育现代化 2016年第36期 260-261页

作者：吕娜郝小静内蒙古科技大学外国语学院

虽然我国政府大力倡导"中国文化走出去"的战略思想,但在英语世界中中国文学作品的译介和传播仍不容乐观,任重道远。因此,无论从译介模式还是翻译思想理论方面,中国文学对外传播都需要新的突破。本文将结合童明教授成功译介木心小说的案... 详细信息

虽然我国政府大力倡导"中国文化走出去"的战略思想,但在英语世界中中国文学作品的译介和传播仍不容乐观,任重道远。因此,无论从译介模式还是翻译思想理论方面,中国文学对外传播都需要新的突破。本文将结合童明教授成功译介木心小说的案例,通过解读《空房》英译文本,探讨译者以飞散性视角和"异、易、移、艺"翻译观指导下的翻译策略和方法的取舍。

关键词：飞散木心小说异易移艺飞散译者