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利巴韦林对猫细小病毒体外抑制作用的研究

黑龙江畜牧兽医 2015年第2期 165-167页

作者：郑良焰刘碧涛任常宝唐兆新华南农业大学兽医学院广州510642 肇庆大华农生物药品有限公司广东肇庆526238

猫细小病毒（Feline parvovirus，FPV）又称猫泛白细胞减少症病毒、猫瘟热病毒或猫传染性肠炎病毒。动物感染FPV后主要的临床表现为高热、呕吐、肠炎、腹泻和白细胞数目严重减少，是一种急性病毒性传染病[1]。FPV是目前细小病毒属中感... 详细信息

猫细小病毒（Feline parvovirus，FPV）又称猫泛白细胞减少症病毒、猫瘟热病毒或猫传染性肠炎病毒。动物感染FPV后主要的临床表现为高热、呕吐、肠炎、腹泻和白细胞数目严重减少，是一种急性病毒性传染病[1]。FPV是目前细小病毒属中感染范围最广、致病性最强的一种病毒，广泛存在于世界各地，主要感染猫科与鼬科等多种动物，其中以幼猫和水貂最为易感旧[2-3]。该病多发于冬末至春秋，是危害猫科和犬科等家养、经济动物和野生动物的主要疫病之一[4]。

关键词：猫泛白细胞减少症病毒细小病毒体外抑制作用利巴韦林传染性肠炎动物感染病毒性传染病猫瘟热病毒

H9亚型禽流感病毒感染引起MDCK细胞内抗氧化功能的变化

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中国畜牧兽医 2013年第11期40卷 175-179页

作者：郑良焰陈龙徐家华唐兆新华南农业大学兽医学院广东广州510642 肇庆大华农生物药品有限公司广东广州526238

将传代MDCK细胞以8×104/cm2的密度接种于6孔细胞培养板,H9亚型禽流感病毒以不同剂量0(对照组)、10-3(高剂量组)、10-4(中剂量组)、10-5×EID50(低剂量组)分别接种,检测H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞内抗氧化功能的影响。结果表明,与对照... 详细信息

将传代MDCK细胞以8×104/cm2的密度接种于6孔细胞培养板,H9亚型禽流感病毒以不同剂量0(对照组)、10-3(高剂量组)、10-4(中剂量组)、10-5×EID50(低剂量组)分别接种,检测H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞内抗氧化功能的影响。结果表明,与对照组相比,高剂量H9亚型禽流感病毒接种MDCK细胞使细胞内过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(·OH)含量均显著增加(P>0.05),细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力均显著下降(P>0.05),细胞内的丙二醛(MDA)含量显著增加(P>0.05)。说明H9亚型禽流感病毒可显著提高MDCK细胞内活性氧自由基(ROS)含量,并降低抗氧化酶活力,阻碍ROS在细胞内的清除机制,引起细胞脂质过氧化作用,从而损伤细胞。

关键词： H9亚型禽流感病毒 MDCK细胞抗氧化功能

禽类弱毒疫苗外源因子污染检测方法的研究进展

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中国家禽 2021年第8期43卷 88-95页

作者：陈秀琴郑敏黄梅清林甦郑良焰林锋强福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 成都农业科技职业学院四川成都611130

近年来,我国已经发生数起禽类弱毒疫苗污染事件,给养禽业造成巨大的经济损失。应用合适的检测方法准确快速检测外源因子对确保疫苗产品安全至关重要。传统的检测法是公认的检测外源因子的标准方法,但存在一定的局限性,基于核酸的分子生... 详细信息

近年来,我国已经发生数起禽类弱毒疫苗污染事件,给养禽业造成巨大的经济损失。应用合适的检测方法准确快速检测外源因子对确保疫苗产品安全至关重要。传统的检测法是公认的检测外源因子的标准方法,但存在一定的局限性,基于核酸的分子生物学方法逐渐成为更有优势的方法。文章就禽类弱毒疫苗污染外源因子的原因,外源因子传统检测技术、免疫学技术及分子生物学技术,检测外源因子不同方法的比较进行了综述,以期为预防和检测疫苗污染外源因子提供参考。

关键词：禽类弱毒疫苗污染外源因子检测方法

利巴韦林对感染猫细小病毒细胞的治疗作用研究

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黑龙江畜牧兽医 2015年第4期 43-46,51页

作者：胡莲美郑良焰余文兰唐兆新华南农业大学兽医学院广州510642

为了研究利巴韦林对感染猫细小病毒(FPV)细胞的作用,试验采用F81猫肾细胞,在猫细小病毒感染后不同时间点收集细胞,应用MTT法检测细胞的增殖活性;利用利巴韦林毒性试验,摸索出药物对细胞的安全浓度;利用不同浓度利巴韦林处理已攻毒细胞,... 详细信息

为了研究利巴韦林对感染猫细小病毒(FPV)细胞的作用,试验采用F81猫肾细胞,在猫细小病毒感染后不同时间点收集细胞,应用MTT法检测细胞的增殖活性;利用利巴韦林毒性试验,摸索出药物对细胞的安全浓度;利用不同浓度利巴韦林处理已攻毒细胞,MTT法检测细胞的增殖活性,酶标法检测细胞氧化损伤情况。结果表明:利巴韦林能明显抑制FPV引起的细胞死亡率,病毒组过氧化氢(H2O2)含量和细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性在各个采样时间点均显著高于对照组,显示细胞氧化损伤严重,致使LDH从细胞内渗出。病毒组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量均明显低于对照组,揭示病毒所引起的细胞氧化损伤进一步激发了细胞自体保护性ROS清除机制,最终导致了细胞内SOD活性和GSH含量的下降。利巴韦林药物组LDH活性和H2O2含量都呈现升高趋势,但其增长幅度明显低于病毒组;在各采样时间点,药物组细胞内SOD活性和GSH含量均明显(P<0.05)高于病毒组,低于对照组。说明利巴韦林对感染猫细小病毒细胞具有一定的修复治疗效果。

关键词：利巴韦林猫细小病毒(FPV) 抗氧化 F81细胞治疗

利巴韦林对猫细小病毒感染诱导F81猫肾细胞中凋亡相关基因表达的影响

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中国畜牧兽医 2015年第2期42卷 309-316页

作者：胡莲美郑良焰余文兰李亚枫唐兆新华南农业大学兽医学院广州510642

试验将F81猫肾细胞随机分为对照组、药物组(猫细小病毒(FPV)+利巴韦林)、病毒组(FPV感染),采用实时荧光定量PCR的方法,检测Bcl-2、Bcl-xl、Bax和Caspase 3等凋亡相关基因的相对表达量。结果显示,与对照组相比,病毒组细胞凋亡增加,抗凋... 详细信息

试验将F81猫肾细胞随机分为对照组、药物组(猫细小病毒(FPV)+利巴韦林)、病毒组(FPV感染),采用实时荧光定量PCR的方法,检测Bcl-2、Bcl-xl、Bax和Caspase 3等凋亡相关基因的相对表达量。结果显示,与对照组相比,病毒组细胞凋亡增加,抗凋亡基因Bcl-2mRNA表达受到抑制,Bax mRNA和Caspase 3mRNA的相对表达量均有不同程度的上调。药物组细胞的抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl的表达水平显著高于病毒组(P<0.05),且总体呈上调状态,但72h时Bcl-xl表达量减少;而药物组的促凋亡基因Bax和Caspase 3的表达量显著低于病毒组(P<0.05),48h前,Bax的表达量呈递减状态,72h时检测结果显示药物组Bax表达量相比对照组显著上调(P<0.05),但仍显著低于病毒组(P<0.05);与对照组相比,病毒组和药物组Caspase 3的表达量在72h时显著上调(P<0.05)。综上所述,利巴韦林可在基因水平通过上调抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl和下调促凋亡基因Bax和Caspase 3的表达来抑制FPV感染诱导的F81猫肾细胞凋亡发生。

关键词：利巴韦林 F81猫肾细胞基因表达细胞凋亡

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不同硒浓度日粮对小鼠肝脏和睾丸组织中部分硒蛋白mRNA水平的影响

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中国畜牧兽医 2013年第3期40卷 38-42页

作者：郑良焰张琴刘碧涛郭凯余文兰刘正伟陈叶郭翠丽唐兆新华南农业大学兽医学院广东广州510642

选取80只7周龄雄性BALB/c小鼠,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组20只,使Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组基础日粮中硒含量达到0.045、0.1、0.4和0.8mg/kg。结果表明:①Ⅰ组能显著降低小鼠肝脏中硒的沉积量(P0.05);③Ⅰ、Ⅲ组肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶4(g... 详细信息

选取80只7周龄雄性BALB/c小鼠,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组20只,使Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组基础日粮中硒含量达到0.045、0.1、0.4和0.8mg/kg。结果表明:①Ⅰ组能显著降低小鼠肝脏中硒的沉积量(P0.05);③Ⅰ、Ⅲ组肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPx4)的mRNA相对表达量差异不显著(P>0.05),但均显著低于Ⅱ组(P0.05);④随着日粮中硒添加量的增加,肝脏和睾丸中硫氧还蛋白还原酶2(thioredoxin reductase 2,TrxR2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。因此,在肝脏和睾丸组织中,饲喂低硒饲料能显著降低硒的沉积量和GPx1、GPx4、TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05);而饲喂高硒饲料能显著降低GPx1的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著增加TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05)。提示,硒对GPx1、GPx4和TrxR2mRNA相对表达量的调节存在组织差异性。

关键词：硒谷胱甘肽过氧化物酶1 谷胱甘肽过氧化物酶4 硫氧还蛋白还原酶2 mRNA 肝脏睾丸

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日粮硒对小鼠肾脏硒沉积及抗氧化酶基因表达的影响

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中国畜牧兽医 2014年第2期41卷 87-91页

作者：刘碧涛张琴郑良焰郭凯余文兰刘正伟郭翠丽陈叶唐兆新华南农业大学兽医学院广东广州510642

本试验旨在研究日粮硒对小鼠肾脏硒沉积及抗氧化酶基因表达的影响。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别以0.045、0.1、0.4和0.8mg/kg含硒量的试验日粮连续饲喂小鼠8周。结果显示,肾脏硒沉积水平随日粮中硒含量增加而升高,Ⅰ组显著低于其他组(P0.0... 详细信息

本试验旨在研究日粮硒对小鼠肾脏硒沉积及抗氧化酶基因表达的影响。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别以0.045、0.1、0.4和0.8mg/kg含硒量的试验日粮连续饲喂小鼠8周。结果显示,肾脏硒沉积水平随日粮中硒含量增加而升高,Ⅰ组显著低于其他组(P0.05);Ⅰ组的硫氧还蛋白还原酶2(TrxR2)mRNA表达量显著低于Ⅱ、Ⅲ组(P0.05),SOD2表达量差异显著(P0.05)。结果表明,补硒可提高肾脏组织硒沉积水平,且随着饲喂时间增加,肾脏硒沉积会在高硒添加组中趋于饱和;缺硒和补硒过量都会降低肾脏TrxR2、SOD1、SOD2和CAT mRNA的表达水平。

关键词：硒肾脏硒沉积抗氧化酶基因表达

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高职畜牧兽医类专业《家畜环境卫生学》教学改革探索与实践

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当代畜牧 2020年第4期49卷 49-51页

作者：鲁志平李建臻杨敏李娟郑良焰杨定勇王振华成都农业科技职业学院四川成都611130

《家畜环境卫生学》是动物医学、动物科学等本科专业及畜牧兽医高职类相关专业的一门专业基础课。近年来,随着集约化养殖业的不断发展壮大,环境卫生学越来越受到重视。为适应课程学科领域的发展变化,建立更适合高职畜牧兽医类专业学生... 详细信息

《家畜环境卫生学》是动物医学、动物科学等本科专业及畜牧兽医高职类相关专业的一门专业基础课。近年来,随着集约化养殖业的不断发展壮大,环境卫生学越来越受到重视。为适应课程学科领域的发展变化,建立更适合高职畜牧兽医类专业学生的课程要求,笔者在家畜环境卫生学教学过程中,结合课程特点及学生对课堂内容、教学手段、教学方法等方面进行课程教学改革的尝试,为新形势下人才培养探索出一条新路子。

关键词：高职畜牧兽医家畜环境卫生学教学改革

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猫细小病毒的分离与鉴定

动物医学进展 2013年第9期34卷 124-127页

作者：刘碧涛任常宝张晓战许冬蕾郑良焰唐兆新华南农业大学兽医学院广东广州510642 肇庆大华农生物药品有限公司广东肇庆526238

为丰富猫细小病毒(FPV)流行病学资料和制备灭活疫苗,通过猫肾传代细胞(F81)培养方法从疑似感染FPV病猫粪便中分离病毒。对分离到的病毒进行理化性质分析和FPV特异性检测引物PCR鉴定,然后对FPV的VP2基因进行扩增测序。理化性质分析结果与... 详细信息

为丰富猫细小病毒(FPV)流行病学资料和制备灭活疫苗,通过猫肾传代细胞(F81)培养方法从疑似感染FPV病猫粪便中分离病毒。对分离到的病毒进行理化性质分析和FPV特异性检测引物PCR鉴定,然后对FPV的VP2基因进行扩增测序。理化性质分析结果与FPV特性均相符,VP2基因测序结果与GenBank已发表的FPV标准株VP2基因序列对比分析,核苷酸序列同源性达到99.0%,证明该分离毒株为猫细小病毒。该毒株的成功分离进一步充实了我国FPV病毒库,也为灭活疫苗的制备奠定了基础。

关键词：猫细小病毒分离鉴定聚合酶链反应