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CIK细胞联合化疗对胃癌疗效的Meta分析

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第3期22卷 363-368页

作者：郑晨宏谢晓华解放军总医院南楼综合外科北京100853

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞联合化疗对胃癌患者的疗效。方法:计算机检索Pub Med、EMBase、Web of Science、Cochrane数据库、中国期刊全文数据库和维普数据库,收集1990年1月到2014年3月发表的符合... 详细信息

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞联合化疗对胃癌患者的疗效。方法:计算机检索Pub Med、EMBase、Web of Science、Cochrane数据库、中国期刊全文数据库和维普数据库,收集1990年1月到2014年3月发表的符合要求的随机对照试验或非随机同期对照试验,应用Revman 5.2软件进行Meta分析。结果:共纳入5项研究、306名胃癌患者。Meta分析结果提示,与单纯化疗相比,CIK细胞联合化疗能够提高患者近、远期疗效。肿瘤近期缓解率:RR=2.14,95%CI:1.20~3.79,P=0.01,I2=0%。远期效应:1年存活率,RR=1.13,95%CI:1.03~1.24,P=0.09,I2=50%;2年存活率,RR=1.22,95%CI:1.11~1.44,P=0.46,I2=0%;3年存活率,RR=1.34,95%CI:1.10~1.63,P=0.5,I2=0%。无进展生存期:RR=2.65,95%CI:2.29~3.01,P<0.001,I2=98%。结论:CIK细胞联合化疗相对于单纯化疗能提高胃癌患者近、远期疗效,延长患者无进展生存期。

关键词：细胞因子诱导的杀伤细胞免疫治疗胃癌化疗 Meta分析

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黏附分子在肿瘤多细胞耐药中的研究进展

肿瘤 2008年第7期28卷 626-629页

作者：郑晨宏梁后杰周琪第三军医大学附属西南医院肿瘤科重庆400038

肿瘤细胞耐药是影响化疗敏感的主要原因之一。细胞黏附分子(cell adhesion molecules,CAMs)是细胞黏附功能的执行者,与"细胞-细胞"或"细胞-基质"相互作用所致整个细胞群体的耐药表型改变有关。此现象被称之为"多细胞耐药(multicellular ... 详细信息

肿瘤细胞耐药是影响化疗敏感的主要原因之一。细胞黏附分子(cell adhesion molecules,CAMs)是细胞黏附功能的执行者,与"细胞-细胞"或"细胞-基质"相互作用所致整个细胞群体的耐药表型改变有关。此现象被称之为"多细胞耐药(multicellular resistance,MR)"或"群集耐药"。细胞黏附分子介导的多细胞耐药(或群集耐药)是目前细胞耐药领域研究的热点。大量实验研究表明,多种细胞黏附分子参与肿瘤多细胞耐药,为逆转肿瘤细胞耐药开辟了新的药物靶点。本文就细胞黏附分子在实体肿瘤中多细胞耐药的研究进展做一综述。

关键词：肿瘤抗药性肿瘤细胞黏附分子

Semaphorin3F下调整合素αvβ3表达逆转结肠癌细胞多细胞耐药的实验研究

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Semaphorin3F下调整合素αvβ3表达逆转结肠癌细胞多细胞耐药的实...

作者：郑晨宏第三军医大学

学位级别：硕士

背景与目的当肿瘤细胞作为一个细胞群集体(多细胞球球体)存在时,其产生的耐药现象称之为“多细胞耐药或群集耐药(MCR)”。多细胞耐药或群集耐药的产生有赖于体内实体瘤三维立体的空间结构,可以通过建立体外三维培养模型被很好的模拟出... 详细信息

背景与目的当肿瘤细胞作为一个细胞群集体(多细胞球球体)存在时,其产生的耐药现象称之为“多细胞耐药或群集耐药(MCR)”。多细胞耐药或群集耐药的产生有赖于体内实体瘤三维立体的空间结构,可以通过建立体外三维培养模型被很好的模拟出来。这种培养方式更接近体内实体瘤情况,与普通单层培养方式相比,其化疗敏感性低。通过Kerbel实验小组对三维立体细胞培养模型的革新发现:当肿瘤细胞以三维培养方式存在时,多细胞球球体可产生内源性抵抗化疗药物及放射治疗的作用。我们也同样的证实了许多肿瘤细胞系(如肺癌、结肠癌、胃癌等),在体外三维培养方式下形成的多细胞球球体细胞后,其化疗药物作用后肿瘤细胞半数死亡药物浓度(IC50)要比普通平面培养方式高很多。多细胞耐药或群集耐药主要关注的是以细胞信号转导网络为基础的“细胞—细胞”或“细胞—基质”相互作用以及他们特殊的微环境。其中比较重要的是,当多细胞球球体形成后,细胞分泌多种细胞—细胞和细胞—基质粘附分子,如E-钙粘附素和整合素家族分子。这些存在着大量的细胞与细胞、细胞与基质粘附分子,可以介导肿瘤细胞生存以及对化疗药物的抵抗。当细胞粘附分子被阻断后,其粘附分子介导的耐药性可以逆转或消失。在粘附分子抑制剂当中,抗整合素抗体包括抗αv亚单位抗体和抗β1亚单位抗体可以抑制细胞—基质相互作用、介导细胞凋亡以及逆转多细胞耐药性。 Semaphorin3F是一种跨膜蛋白分子,介导神经轴突锚定、细胞生长、迁移和血管形成的信号转导。最近的研究发现,在内皮细胞中,Sema3F可以下调整合素αvβ3的活性。因此,我们设想,Sema3F是否可以通过下调肿瘤细胞整合素αvβ3从而逆转多细胞耐药性,进一步找到一种逆转肿瘤多细胞耐药性可行的策略。方法 1.建立结肠癌多细胞耐药体外三维培养模型,并观察其与普通平面培养模型在生物学特性上的改变,检测结肠癌细胞系中Sema3F表达差异,选择合适细胞系。 2.应用RT-PCR、免疫组化、激光共聚焦方法,观察细胞粘附分子整合素αvβ3在结肠癌细胞多细胞耐药体外模型的表达,并比较其与普通平面培养表达的差异。通过整合素αvβ3抗体阻断粘附分子整合素αvβ3表达,观察结肠癌细胞群集耐药性的情况。 3.应用MTT和Radial outgrowth方法,检测和比较三维球型培养条件下稳定转染Sema3F基因前后,结肠癌HT29细胞化疗敏感性的情况,以及Sema3F对整合素αvβ3的作用。结果 1.成功建立结肠癌细胞多细胞三维培养模型(图1),扫描电镜和透射电镜显示,多细胞球球体直径在1.0-2.0mm不等;可见桥粒和粘着小带等细胞紧密连接(图2,图3)。结肠癌HT-29、LoVo细胞中Sema3F mRNA(图17)和蛋白(图18)表达较低。 2.整合素αvβ3 mRNA(图8)及蛋白(图9,图10),在三维球型较普通平面培养相比表达明显增高;球型细胞与普通平面细胞相比,对化疗药物更加耐药;整合素αvβ3抗体阻断整合素αvβ3后,可提高多细胞球球体对化疗药物的敏感性(图7)。 3.建立稳定转染Sema3F的结肠癌HT29细胞三维培养模型。不同浓度5-FU(0,125,250,500,1000,2000μg/ml)作用HT29细胞48h后,MTT法(图24)及Radialoutgrowth assay(图25),流式细胞检测(图4,5,13)以及克隆形成试验(图26)检测稳定转染Sema3F多细胞球球体与对照组相比较,转染后的细胞三维球型化疗敏感性明显增加。检测转染Sema3F后细胞以及空转对照以及HT29细胞整合素αvβ3蛋白表达水平发现,转染Sema3F的结肠癌HT29细胞可以下调整合素αvβ3蛋白表达。结论 1.结肠癌细胞多细胞耐药体外模型与普通平面培养细胞相比结构更加紧密;多细胞球球体对化疗药物的敏感性与普通平面培养细胞相比,其药物敏感性显著降低。 2.结肠癌HT29细胞多细胞球球体与普通平面培养细胞相比,粘附分子整合素αvβ3 mRNA及蛋白表达显著增高;整合素αvβ3抗体阻断结肠癌HT29细胞多细胞球球体整合素αvβ3表达可以提高对化疗药物的化疗敏感性。 ***3F可下调结肠癌HT29细胞整合素αvβ3表达,可以提高结肠癌HT29细胞的化疗敏感性。

关键词：结直肠肿瘤多细胞耐药 Semaphorin3F 整合素αvβ3 化学治疗

体外三维培养的结肠癌细胞整合素αⅤ β3表达变化及其与化疗敏感性的关系

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肿瘤 2008年第10期28卷 829-832页

作者：郑晨宏梁后杰周琪杨凤武彭秋平边志衡第三军医大学西南医院肿瘤科重庆400038 重庆市涪陵中心医院肿瘤科重庆408000

目的:用三维培养方法在体外模拟体内实体瘤生长情况,探讨结肠癌细胞群集耐药与细胞黏附分子整合素αⅤ(integrin αⅤ)和整合素β3(integrin β3)过度表达的关系。方法:运用三维培养法获得人结肠癌细胞HT29多细胞球体(multicellular sph... 详细信息

目的:用三维培养方法在体外模拟体内实体瘤生长情况,探讨结肠癌细胞群集耐药与细胞黏附分子整合素αⅤ(integrin αⅤ)和整合素β3(integrin β3)过度表达的关系。方法:运用三维培养法获得人结肠癌细胞HT29多细胞球体(multicellular spheroids,MCS)模型,采用RT-PCR法及免疫荧光法比较单层细胞(monolayer cells,MC)及MCS细胞中基质间黏附分子integrin αⅤ和integrin β3 mRNA及蛋白表达水平变化,用FCM法检测5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)作用48h后细胞的生存率和凋亡率。结果:HT29 MCS与HT29 MC经比较,integrin αⅤ和integrin β3 mRNA及蛋白表达水平均明显增高(P<0.01),对5-FU的药物敏感性显著下降(P<0.05),5-FU诱导的细胞凋亡率显著下降(0.346±0.035vs0.235±0.024),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:细胞黏附分子integrin αⅤ和integrin β3表达水平增高可能增加结肠癌细胞群集的耐药性。

关键词：结肠肿瘤细胞培养技术整合素αV 整合素β3 抗药性肿瘤

靶向CD_(47)及其配体TSP-1/SIRPα在免疫及损伤应答中的研究进展

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医学综述 2015年第22期21卷 4042-4044页

作者：郑晨宏谢晓华解放军总医院南楼临床部综合外科北京100853

整合素相关蛋白CD_(47)是一个广泛表达于细胞表面的分子标志物,作为信号调节蛋白α的配体在免疫应答过程中发挥重要调控作用,同时也是机体应对刺激信号调节细胞反应时凝血酶敏感蛋白1的信号受体,控制机体对损伤应答的反应程度。CD_(47)... 详细信息

整合素相关蛋白CD_(47)是一个广泛表达于细胞表面的分子标志物,作为信号调节蛋白α的配体在免疫应答过程中发挥重要调控作用,同时也是机体应对刺激信号调节细胞反应时凝血酶敏感蛋白1的信号受体,控制机体对损伤应答的反应程度。CD_(47)及其配体凝血酶敏感蛋白1、信号调节蛋白的表达调控在感染及肿瘤免疫、缺血/再灌注损伤、脑出血损伤及电离辐射损伤中起到非常重要的作用,具有较强的临床应用价值。

关键词：整合素相关蛋白信号调节蛋白α 凝血酶敏感蛋白1 免疫损伤

刀豆蛋白A诱导肝损伤模型中免疫细胞及因子研究进展

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解放军医学院学报 2016年第2期37卷 191-194页

作者：郑晨宏谢晓华解放军总医院南楼临床部综合外科北京100853

根据自身免疫性肝炎(autoimmune hepatis,AIH)和病毒性肝炎(viral hepatitis,VH)的临床病理特点,刀豆蛋白A(Concanavalin A)诱导的肝损伤模型相对于其他肝损伤模型具有操作简单和方便等特点,优于四氯化碳(CCl4)和D-氨基半乳糖苷模型。过... 详细信息

根据自身免疫性肝炎(autoimmune hepatis,AIH)和病毒性肝炎(viral hepatitis,VH)的临床病理特点,刀豆蛋白A(Concanavalin A)诱导的肝损伤模型相对于其他肝损伤模型具有操作简单和方便等特点,优于四氯化碳(CCl4)和D-氨基半乳糖苷模型。过去20年,虽然对刀豆蛋白A诱导的肝损伤免疫学机制进行了大量研究,但是仍然存在许多问题,需进一步阐述和深入研究。本文对刀豆蛋白A导致免疫性肝损伤的相关研究做一综述。

关键词：刀豆蛋白免疫机制动物模型肝损伤

人HCT116结肠癌细胞系中CD133^+结肠癌干细胞分离及鉴定

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第三军医大学学报 2009年第4期31卷 330-333页

作者：陈克力梁后杰江恒陈建芳裴莉郑晨宏第三军医大学西南医院肿瘤科重庆400038

目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+... 详细信息

目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+细胞鉴定其体外增殖特性;采用含血清培养基诱导干细胞克隆球分化并采用免疫组化检测CK20表达情况鉴定其分化特性。结果HCT116细胞系中存在CD133+细胞,免疫磁珠能有效的分选CD133+细胞,分选后的阳性含量为91.92%,分选后的阳性细胞具有典型干细胞的体外增殖、分化特性。结论CD133+结肠癌干细胞在体外具有和普通干细胞类似的无限增殖、自我更新和分化能力,同时它们也表达ABCG2等耐药相关蛋白。

关键词： HCT116 结肠癌干细胞 CD133 分离及鉴定

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一起军校学员水痘暴发流行的调查

解放军预防医学杂志 2000年第3期18卷 222-222页

作者：郑晨宏徐荷第二军医大学流行病学教研室上海200433

1999年12月22日～2000年1月6日,某军校连续出现了一批以发热、腹泻、浑身痒痛并伴有丘疹为主要症状和体征的病人,经调查证实为一起水痘一带状疱疹病毒感染.由于本次暴发是以首发病例为中心,呈现出人群分布的聚集性,为此,我们对首发病例... 详细信息

1999年12月22日～2000年1月6日,某军校连续出现了一批以发热、腹泻、浑身痒痛并伴有丘疹为主要症状和体征的病人,经调查证实为一起水痘一带状疱疹病毒感染.由于本次暴发是以首发病例为中心,呈现出人群分布的聚集性,为此,我们对首发病例及所在的单位进行了流行病学调查.

关键词：水痘暴发流行流行病学调查军校学员

咳嗽合剂治疗风邪犯肺型感染后咳嗽老年患者临床疗效观察及对SP、CGRP的影响

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咳嗽合剂治疗风邪犯肺型感染后咳嗽老年患者临床疗效观察及对SP、...

作者：郑晨南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过对比常规西医疗法与联合运用咳嗽合剂,在治疗风邪犯肺型感染后咳嗽老年患者治疗前后临床症状评分及痰上清液中P物质(Substance P)与降钙素基因相关肽(Calc-itonin-Gene-Related Peptide)浓度的变化,评价联合咳嗽合剂是否能够... 详细信息

目的:通过对比常规西医疗法与联合运用咳嗽合剂,在治疗风邪犯肺型感染后咳嗽老年患者治疗前后临床症状评分及痰上清液中P物质(Substance P)与降钙素基因相关肽(Calc-itonin-Gene-Related Peptide)浓度的变化,评价联合咳嗽合剂是否能够提高疗效,以辅助临床治疗。同时,从气道神经源性炎症角度探讨咳嗽合剂治疗感染后咳嗽的可能作用机制,以期为中医药治疗感染后咳嗽带来新的启迪和思考。方法:收集2022年10月至2023年12月期间,就诊于南京市中医院住院部或门诊,辨证属风邪犯肺型感染后咳嗽老年患者80例。随机分成对照组与治疗组,各40例。对照组给予西医常规治疗,治疗组在对照组基础上加用咳嗽合剂,两组疗程均为7天。对受试者在接受治疗前1天和接受治疗后第7天进行症状评价及记录积分,分别为咳嗽(日间咳嗽与夜间咳嗽之和)、咯痰、咽痒以及遇外界刺激加重情况;此外,对受试者在接受治疗前1天与接受治疗后第7天进行痰诱导,检测治疗前后痰上清液中SP和CGRP的含量变化。最后利用SPSS26.0软件整理分析相关数据,得出结果。结果:1.基本资料分析经秩和检验,两组受试者年龄分布情况无显著差异;经卡方检验,两组受试者在性别比例分布上无显著差异,男性多于女性,男性47例(58.8%),女性33例(41.2%)。2.临床疗效评价(1)治疗前,两组患者各症状积分差异无统计学意义,具有可比性(P>0.05)。(2)中医各症状积分:组内比较:经治疗后,两组咳嗽、咯痰、咽痒及遇刺激加重症状积分较治疗前均降低,但治疗组下降程度更为显著,差异具有统计学意义(P0.05)。(3)总体疗效比较:采用尼莫地平法进行总体疗效的计算。治疗组患者40例,总有效率90%,治愈率7.5%,显效率27.5%;对照组患者40例,总有效率75%,显效率7.5%。治疗后组间差异具有统计学意义(P0.05);(2)痰上清液中SP、CGRP含量:组内比较:经治疗周期后,两组痰上清液中SP、CGRP浓度较治疗前均减少,但治疗组减少幅度优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);组间比较:经治疗周期后,治疗组痰上清液中SP、CGRP水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。提示两组治疗均可有效降低患者痰上清液中SP、CGRP水平,但联合咳嗽合剂治疗效果更佳,明显优于单纯西医治疗。结论:1.咳嗽合剂联合西医常规治疗可改善风邪犯肺型感染后咳嗽患者咳嗽、咳痰、咽痒及遇刺激加重等症状,提高总体疗效。2.咳嗽合剂可能通过减少患者体内SP、CGRP含量,缓解气道神经源性炎症,发挥治疗作用。

关键词：咳嗽合剂感染后咳嗽风邪犯肺型气道神经源性炎症临床研究