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蛋白质棕榈酰化修饰在病毒感染过程中的作用

中国科学：生命科学 2020年第8期50卷 836-848页

作者：易李郑春福福建医科大学基础医学院免疫学系福州350122

蛋白质棕榈酰化修饰是脂质修饰的一种,赋予了底物蛋白更加多样化的生物学功能.在哺乳动物细胞中,棕榈酰化修饰主要是由ZDHHC家族介导的.病毒入侵细胞后,可利用宿主的棕榈酰化修饰促进自身的复制和感染.宿主通过模式识别受体识别病原体... 详细信息

蛋白质棕榈酰化修饰是脂质修饰的一种,赋予了底物蛋白更加多样化的生物学功能.在哺乳动物细胞中,棕榈酰化修饰主要是由ZDHHC家族介导的.病毒入侵细胞后,可利用宿主的棕榈酰化修饰促进自身的复制和感染.宿主通过模式识别受体识别病原体相关分子模式诱发天然免疫应答以保护自身免受病毒的伤害并达到清除病原体的目的.天然免疫是宿主抵抗病毒感染的第一道防线,越来越多的研究表明,抗病毒蛋白的棕榈酰化修饰对其发挥功能非常重要.然而截至目前, ZDHHC家族蛋白参与病毒感染过程中的作用机制尚不完全清楚.本文综述了ZDHHC家族蛋白棕榈酰化修饰在病毒感染过程中的最新研究进展.

关键词：蛋白质翻译后修饰棕榈酰化病毒感染

弓形虫P22编码基因真核表达质粒接种小鼠后的细胞免疫效果

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中国人兽共患病杂志 2000年第6期16卷 31-32,27页

作者：高世同吴少庭林敏占国清郑春福深圳市卫生防疫站深圳518020 同济医科大学重庆医科大学

目的　观察分析弓形虫表面抗原 P2 2编码基因真核表达质粒 (p BK/P2 2 )接种小鼠诱导的细胞免疫效果。方法　采用肌肉注射免疫接种 BAL B/c小鼠 ,5周后 ,取鼠脾细胞作 Con A刺激淋转试验 (MTT法 )及 T细胞亚群的测定。结果　MTT试验中 ,... 详细信息

目的　观察分析弓形虫表面抗原 P2 2编码基因真核表达质粒 (p BK/P2 2 )接种小鼠诱导的细胞免疫效果。方法　采用肌肉注射免疫接种 BAL B/c小鼠 ,5周后 ,取鼠脾细胞作 Con A刺激淋转试验 (MTT法 )及 T细胞亚群的测定。结果　MTT试验中 ,p BK/P2 2免疫组、空质粒 p BK- CMV对照组与 NS对照组的 Con A孔的光密度值与不加 Con A孔的光密度值的差值疫苗免疫组略高于二对照组 ,统计学分析无明显差异 (P>0 .0 5 ) ;CD+4 细胞数量变化无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,而 CD+8细胞数量则明显增多 ,p BK/P2 2免疫组、空质粒 p BK- CMV均高于 NS对照组 ,其差异有显著性 (P0 .0 5 )。结论　 p BK/P2 2对 Con A刺激的淋巴细胞增殖功能作用不明显 ;T淋巴细胞亚群测定结果表明 ,p BK/P2 2免疫后小鼠 CD+4 淋巴细胞增殖不明显 ,而

关键词：弓形虫 P22编码基因 DNA接种细胞免疫

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恒河猴结核病的捡疫和防治

中国人兽共患病杂志 1994年第6期10卷 49-50页

作者：郑春福魏振年谢佩梅福建省计划生育科学技术研究所福建省妇幼保健院福建医学院

恒河猴结核病的捡疫和防治福建省计划生育科学技术研究所郑春福，魏振年福建省妇幼保健院谢佩梅结核病对灵长类动物危害极大，引起恒河猴结核病的病原可以是人型和牛型，但人型较多。结核病是仅次于细菌性痢疾的主要危害恒河猴的疾病之... 详细信息

恒河猴结核病的捡疫和防治福建省计划生育科学技术研究所郑春福，魏振年福建省妇幼保健院谢佩梅结核病对灵长类动物危害极大，引起恒河猴结核病的病原可以是人型和牛型，但人型较多。结核病是仅次于细菌性痢疾的主要危害恒河猴的疾病之一。目前，国内外普遍采用ＯＴ法进行...

关键词：恒河猴结核病检疫预防治疗猴

恶性疟原虫FCC-1/HN株裂殖子表面抗原2基因在*** mc^2155中的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第5期21卷 531-534页

作者：郑春福吴少庭陈雅棠高世同林敏梁驹卿重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所深圳市卫生防疫站广东省妇幼保健院

目的　研究裂殖子表面抗原 2 (merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )基因重组BCG疫苗的保护作用。方法　采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG/MSA2导入耻垢分枝杆菌 (M .smegmatis)mc2 1 55中 ,通过卡那霉素抗性筛选并经PCR鉴定的重组M .smegm... 详细信息

目的　研究裂殖子表面抗原 2 (merozoitesurfaceantigen 2 ,MSA2 )基因重组BCG疫苗的保护作用。方法　采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG/MSA2导入耻垢分枝杆菌 (M .smegmatis)mc2 1 55中 ,通过卡那霉素抗性筛选并经PCR鉴定的重组M .smegmatismc2 1 55培养于middlebrook 7H9broth (M7H9)培养基 ,并添加 1 0 %M7H9enrichmentADC和 0 .0 5%Tween80 ,4 8～ 72h后于 4 5℃进行 3 0min的诱导表达 ,表达产物进行十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)及Westernblot分析。结果　SDS PAGE及Westernblot分析结果均显示在相对分子质量 (Mr)约 3 1× 1 0 3的位置上可见明显的蛋白条带 ,并与MSA2基因编码序列推断的Mr 相符。结论　恶性疟原虫裂殖子表面抗原 2可在M .smegmatis中表达。

关键词：恶性疟原虫耻垢分枝杆菌基因表达裂殖子表面抗原2 穿梭质粒

恶性疟原虫FCC-1/HN株环子孢子蛋白基因片段的亚克隆及表达

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中华传染病杂志 2001年第2期19卷 81-83页

作者：郑春福吴少庭陈雅棠高世同林敏占国清广东省深圳市卫生防疫站分子生物学实验室 518020 重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所同济医科大学

目的　构建恶性疟原虫FCC 1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒 pBK CSP ,在大肠杆菌中进行表达 ,并进行鉴定。方法　采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 .6 /CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段 ,将其亚克隆于... 详细信息

目的　构建恶性疟原虫FCC 1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒 pBK CSP ,在大肠杆菌中进行表达 ,并进行鉴定。方法　采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 .6 /CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段 ,将其亚克隆于 pBK CMV真核表达载体 ,构建重组真核表达质粒 pBK CSP。经IPTG诱导 ,重组质粒在大肠杆菌DH5α中进行表达 ,并进行SDS PAGE及免疫印迹分析。结果　从 pBCG5 .6 /CSP中分离出CSP基因片段 ,成功构建 pBK CSP重组质粒 ;SDS PAGE及免疫印迹分析结果显示特异性蛋白条带的相对分子质量约为 42 0 0 0。结论　从pBCG5 .6 /CSP中成功分离出CSP基因片段 ,并成功构建 pBK CSP重组质粒 ,诱导表达CSP非融合蛋白。

关键词：恶生疟原虫环子孢子蛋白严克隆基因表达 FCC-1/HN株

恶性疟原虫DNA疫苗在小鼠体内组织分布和安全性的初步研究

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中国人兽共患病杂志 2002年第6期18卷 29-31页

作者：郑春福吴少庭陈雅棠高世同林敏重庆医科大学第一附属医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 深圳市卫生防疫站分子生物学实验室深圳518020

目的　探讨疟疾DNA疫苗在小鼠体内的组织分布 ,并对其安全性进行观察。方法　将重组质粒pBK -CSP经肌肉途径免疫BALB/c小鼠 ,分别在 4周和 8周后剖杀动物并摘取各种组织 ,抽提全组织DNA进行PCR扩增后经琼脂糖凝胶电泳分析 ,并对DNA疫苗... 详细信息

目的　探讨疟疾DNA疫苗在小鼠体内的组织分布 ,并对其安全性进行观察。方法　将重组质粒pBK -CSP经肌肉途径免疫BALB/c小鼠 ,分别在 4周和 8周后剖杀动物并摘取各种组织 ,抽提全组织DNA进行PCR扩增后经琼脂糖凝胶电泳分析 ,并对DNA疫苗的安全性进行观察。结果　免疫 4周和 8周后 ,仅有DNA疫苗接种位点的肌肉组织检测到CSP基因 ,而 10 0 μg的质粒DNA并未产生明显的毒副作用。结论　疟疾DNA疫苗接种 4周后 ,质粒DNA仅分布于接种部位 ,并可持续至 8周以上 ,而未发现毒副作用。

关键词：恶性疟原虫 DNA疫苗组织分布安全性疟疾

编码弓形虫表面抗原P30基因的克隆及在***中的表达

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中国人兽共患病杂志 2003年第3期19卷 31-33页

作者：占国清吴少庭李国光高世同林敏郑春福十堰市人民医院肝病研究室深圳市疾病预防控制中心深圳518020 同济医科大学流行病学教研室重庆医科大学寄生虫学教研室

目的　构建编码弓形虫RH株表面抗原P30基因重组表达质粒 ,初步观察P30基因在E coli表达。方法　将P30基因定向克隆到分支杆菌 -大肠杆菌穿梭表达质粒热休克蛋白 70 (hsp70 )起动基因的下游的多克隆位点 ,构建重组表达质粒pBCG -P30 ;采... 详细信息

目的　构建编码弓形虫RH株表面抗原P30基因重组表达质粒 ,初步观察P30基因在E coli表达。方法　将P30基因定向克隆到分支杆菌 -大肠杆菌穿梭表达质粒热休克蛋白 70 (hsp70 )起动基因的下游的多克隆位点 ,构建重组表达质粒pBCG -P30 ;采用亚克隆技术 ,将含P30和hsp70起动基因的复合片段 ,插入表达载体 pBK -CMV质粒 ,转化大肠杆菌DH5α ,在卡那霉素阳性LB培养基平板筛选阳性重组子 ,并经双酶切及PCR扩增鉴定。重组质粒 pBK -P30转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达后进行SDS -PAGE和Westernboltting分析。结果　 1)阳性重组质粒 pBCG -P30、pBK -P30经酶切和PCR鉴定 ,与预期的结果相符合。 2 )序列测定证实克隆的基因为编码P30抗原的基因。 3)P30基因在大肠杆菌诱导表达后获得4 5kDa融合蛋白 ,此抗原未被弓形虫高免兔血清识别。结论　成功构建编码弓形虫表面抗原P30重组表达质粒 ,并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：编码弓形虫表面抗原 P30基因克隆 E.coli 表达基因重组弓形虫

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一氧化氮与寄生虫感染

国外医学（临床生物化学与检验学分册） 2000年第2期21卷 81-86页

作者：郑春福重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400046

本文就一氧化氮（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅ，ＮＯ）与寄生虫感染的相互关系进行综述，主要阐述ＮＯ的合成和调节，ＮＯ在寄生虫感染中的作用以及ＮＯ抗寄生虫感染的作用机制。

关键词：一氧化氮寄生虫感染相互关系合成调节

弓形虫DNA疫苗免疫鼠体内重组质粒分布的探讨

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中国人兽共患病杂志 2000年第6期16卷 42-44页

作者：占国清吴少庭李国光高世同林敏郑春福同济医科大学流行病学教研室深圳市卫生防疫站深圳518020 重庆医科大学寄生虫学教研室

目的　通过肌注弓形虫 DNA疫苗质粒 p BK- P30、p BK- P2 2直接免疫小鼠 ,观察重组质粒在鼠体内不同器官组织的分布。方法　疫苗 p BK- P30、p BK- P2 2经肌注免疫 BAL B/ c鼠 ,5周和 10周后 ,分别取免疫鼠的肺、心脏、肝脏、脾、肌肉... 详细信息

目的　通过肌注弓形虫 DNA疫苗质粒 p BK- P30、p BK- P2 2直接免疫小鼠 ,观察重组质粒在鼠体内不同器官组织的分布。方法　疫苗 p BK- P30、p BK- P2 2经肌注免疫 BAL B/ c鼠 ,5周和 10周后 ,分别取免疫鼠的肺、心脏、肝脏、脾、肌肉、肾脏及血液 ,抽提组织 DNA,并以此为模板进行 PCR扩增 ,扩增的产物经琼脂糖凝胶电泳分析。结果　免疫后 5周 ,p BK- P30免疫组的上述各器官组织 DNA中均扩增出 P30基因片段 ,其大小 10 2 7bp,p BK- p30 & p BK- P2 2免疫组分别扩增出 P30和 P2 2基因片段 ,P2 2基因片段为 5 93bp,均与预期结果相符合。NS对照组和 p BK- CMV空质粒对照组未扩增出片段。免疫后 10周 ,仅免疫鼠血液扩增出上述特异性基因片段。结论　弓形虫 DNA疫苗免疫 BAL B/ c鼠 5周后 ,多个不同器官组织均可检测出重组质粒 ,免疫后 10周血液检测出重组质粒。

关键词：弓形虫 DNA疫苗分布重组质粒小鼠