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水貂狐狸及貉源犬瘟热病毒H基因的克隆与序列分析

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中国兽医科学 2014年第2期44卷 134-139页

作者：朱春生赵建军白雪张海玲胡博张蕾邵西群许皓王振军孙彦刚闫喜军中国农业科学院特产研究所经济动物疫病研究室吉林长春130122 吉林特研生物技术有限责任公司吉林长春130122

应用RT-PCR方法从2011—2013年来自我国不同地区7份水貂、狐狸和貉源犬瘟热阳性病料中克隆得到犬瘟热病毒（CDV）H基因。序列分析结果表明，7株CDV的H基因的核苷酸序列与推导的氨基酸序列的同源性分别为98．7％～100％和98．4％～100％... 详细信息

应用RT-PCR方法从2011—2013年来自我国不同地区7份水貂、狐狸和貉源犬瘟热阳性病料中克隆得到犬瘟热病毒（CDV）H基因。序列分析结果表明，7株CDV的H基因的核苷酸序列与推导的氨基酸序列的同源性分别为98．7％～100％和98．4％～100％；相应地，与Onderstepoort、CDV3疫苗株的同源性分别为90．5％～91．2％、88．99／5～91．1％。基于H基因推导的氨基酸序列构建的系统进化发生树显示，7株CDV野毒均属于Asia-1基因型。来自山东省的3株水貂和狐狸源[SD（12）1、SD（12）3和sD（12）2]CDV的H蛋白的氨基酸在第549位点由Y突变成H，此突变位于SLAM受体结合区域。此外，与其他Asia-1基因型CDV的H蛋白N-糖基化位点不同，2株水貂源CDV[SD（12）1和SD（12）3]H蛋白的受体结合区因第542位氨基酸I→N突变而增加了1个潜在N-糖基化位点NRT。这2个重要的点突变可能预示着我国某些地区CDV在进化过程中对非犬源宿主（狐狸、水貂）的适应性增强。

关键词：犬瘟热病毒血凝素蛋白水貂狐狸貉

水貂、狐狸和貉源犬瘟热病毒F蛋白信号肽区基因克隆及遗传变异分析

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中国畜牧兽医 2015年第4期42卷 838-846页

作者：孙彦刚赵建军白雪牛登云邵西群胡博刘昊张海玲张蕾王洋马凡舒闫喜军中国农业科学院特产研究所经济动物疫病研究室长春130122 青岛农业大学动物科技学院青岛266109

为了解近年来犬瘟热病毒（canine distemper virus，CDV）在中国毛皮动物主要养殖区的流行情况及遗传变异情况，本试验于2012—2014年从山东、河北、辽宁收集疑似犬瘟热的水貂、狐狸和貉病料，经犬瘟热抗原检测试纸条检测和RT-PCR检测... 详细信息

为了解近年来犬瘟热病毒（canine distemper virus，CDV）在中国毛皮动物主要养殖区的流行情况及遗传变异情况，本试验于2012—2014年从山东、河北、辽宁收集疑似犬瘟热的水貂、狐狸和貉病料，经犬瘟热抗原检测试纸条检测和RT-PCR检测为阳性后，克隆测序了15株CDVF蛋白信号区（Fsp）基因序列。序列分析结果显示，15株CDV野毒株Fsp基因核苷酸序列和氨基酸序列的相似性均为93．6％～100．0％，与疫苗株相似性为80．7％～81.7％。基因系统进化分析结果显示，15株野毒株均属于中国当前流行的Asia-1基因型。氨基酸序列比对分析结果显示，Fsp蛋白在氨基酸3—14、16—37、47—67位等处存在高变异。通过对当前流行CDV野毒株Fsp基因序列分析，结果表明该Fsp基因区具有较高的变异率，可作为CDV基因分型的依据，同时本试验结果为毛皮动物犬瘟热的防控提供了参考依据。

关键词：水貂狐狸貉犬瘟热病毒 F蛋白信号肽(Fsp)

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水貂阿留申病的防制

经济动物学报 2001年第1期5卷 12-15页

作者：邵西群肖家美赵元楷籍玉林王克坚中国农业科学院特产研究所!吉林132109

简述了阿留申病对养貂业的严重危害及其症状和病原性。概述了当前此病的 3种防制措施 :应用对流免疫电泳 (CIEP)特异诊断阿留申病 (AD) ,淘汰阳性貂 ,净化种群 ;筛选抗阿留申病个体 ,进行抗病育种 ;研制疫苗 ,开展免疫预防综合性防制。

关键词：水貂阿留申病防制

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北极狐白介素-18基因的克隆与序列分析

中国兽医科学 2008年第1期38卷 59-62页

作者：张海玲闫喜军罗国良王凤雪柴秀丽易立邵西群中国农业科学院特产研究所人兽共患病研究室吉林吉林132109

根据GenBank中登录的犬白介素-18(IL-18)基因序列,设计了1对特异性引物。将北极狐外周血淋巴细胞经植物血凝素(PHA)诱导,用TRIzol裂解,提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增狐狸IL-18基因,连接pMD18-T载体,转化DH5α感受态细... 详细信息

根据GenBank中登录的犬白介素-18(IL-18)基因序列,设计了1对特异性引物。将北极狐外周血淋巴细胞经植物血凝素(PHA)诱导,用TRIzol裂解,提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增狐狸IL-18基因,连接pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞,获得阳性重组质粒。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长590 bp,含582 bp的开放阅读框,编码193个氨基酸,与已知犬IL-18序列的同源性高达98.7%,氨基酸同源性为96.4%。

关键词：北极狐白介素-18 克隆序列分析

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细小病毒反向遗传操作技术研究进展

动物医学进展 2021年第4期42卷 99-103页

作者：赵永强吴艳虹韦韬丛丽岳志刚肖家美邵西群中国农业科学院特产研究所吉林长春130112

细小病毒感染的动物宿主广泛,包括猫科、犬科、猪科、牛科、鸭科和鼬科等动物,是动物的一种重要病原。病毒反向遗传学技术是在获得病毒全基因组序列的基础上,构建感染性克隆,通过DNA重组、定点突变、插入、缺失等遗传修饰手段创造突变体... 详细信息

细小病毒感染的动物宿主广泛,包括猫科、犬科、猪科、牛科、鸭科和鼬科等动物,是动物的一种重要病原。病毒反向遗传学技术是在获得病毒全基因组序列的基础上,构建感染性克隆,通过DNA重组、定点突变、插入、缺失等遗传修饰手段创造突变体,并研究突变体所造成的表型效应,从而研究基因的生物学功能。论文对ssDNA细小病毒反向遗传学技术的研究进行综述,为细小病毒同科病毒反向遗传学操作平台的建立提供参考。

关键词：细小病毒反向遗传感染性克隆

犬瘟热病毒RT-nested PCR检测方法的建立与应用

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中国兽医科学 2007年第11期37卷 955-959页

作者：王凤雪闫喜军柴秀丽罗国良张海玲邵西群吴威程世鹏中国农业科学院特产研究所吉林吉林132109

根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计了套式引物,建立了RT-nested PCR检测方法。特异性试验表明,该法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV),... 详细信息

根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计了套式引物,建立了RT-nested PCR检测方法。特异性试验表明,该法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV),DNA病毒犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)及正常Vero细胞中均不能扩增出条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增到10-9稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。用RT-nested PCR法检测了2006年我国东北地区临床表现犬瘟热症状的病例19例,检出率达90%,明显高于RT-PCR的检出率(45%)。部分病例扩增片段的测序结果表明,CDV NP基因出现个别碱基变异。研究结果表明,建立的犬瘟热病毒RT-nested PCR方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热的快速诊断。

关键词：犬瘟热病毒反转录巢式PCR 反转录PCR NP基因

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水貂阿留申病诊断技术研究进展

动物医学进展 2019年第6期40卷 78-82页

作者：韦韬吴艳虹丛丽赵永强马瑞芳邵西群中国农业科学院特产研究所

水貂阿留申病是水貂养殖业的重要疫病,目前无疫苗预防,主要通过发展诊断技术,淘汰感染貂防控该病。论文总结了在貂场应用的基因与抗体检测技术,基因检测具有高灵敏度和特异性,能够检测到动物带毒感染,不同类型的基因检测技术对变异性强... 详细信息

水貂阿留申病是水貂养殖业的重要疫病,目前无疫苗预防,主要通过发展诊断技术,淘汰感染貂防控该病。论文总结了在貂场应用的基因与抗体检测技术,基因检测具有高灵敏度和特异性,能够检测到动物带毒感染,不同类型的基因检测技术对变异性强的阿留申病毒检测各有所长;抗体检测是水貂阿留申病的主要检测方式,研究者不断创新和改进原有技术,趋向对阿留申病的规模化精准检测,但单一的抗体检测方法淘汰感染貂具有局限性。论文通过对两类检测技术分析,建议采用基因与抗体的联合检测方法,从感染貂群中区分耐受貂或抗性貂,期望为国内高感染率貂场的检测和选种提供参考。

关键词：水貂阿留申病阿留申病毒诊断

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狂犬病毒RT-PCR检测方法的建立

特产研究 2007年第1期29卷 12-13,26页

作者：邵西群闫喜军柴秀丽田洪宇中国农业科学院特产研究所吉林吉林132109

根据狂犬病毒保守序列设计引物,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)建立了一种检测狂犬病毒的方法,以期实现对严重危及人和动物生命安全的狂犬病毒直接检测。

关键词：狂犬病毒 RT—PCR检测

犬瘟热病毒临床流行野毒株F蛋白信号肽区分析

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微生物学通报 2008年第4期35卷 533-538页

作者：王凤雪闫喜军柴秀丽吴威邵西群罗国良张海玲易立赵建军中国农业科学院特产研究所吉林132109

根据GenBank上发表的犬瘟热病毒（CDV）融合蛋白基因（F）序列，设计引物扩增F蛋白部分信号肽区，片段长369bp。对2005年～2007年收集的犬瘟热阳性的水貂、狐、貉实质脏器、血液、尿液等样品进行扩增，获得了13个CDVF蛋白部分信号肽区... 详细信息

根据GenBank上发表的犬瘟热病毒（CDV）融合蛋白基因（F）序列，设计引物扩增F蛋白部分信号肽区，片段长369bp。对2005年～2007年收集的犬瘟热阳性的水貂、狐、貉实质脏器、血液、尿液等样品进行扩增，获得了13个CDVF蛋白部分信号肽区基因片段。序列分析发现，CDV野毒F蛋白该区段核苷酸与氨基酸序列与目前我国使用疫苗株CDV，及其他国内外疫苗株比较存在较大差异，与CDV3对应区段的核苷酸同源性在80．7％～83．2％之间，而推导的对应氨基酸序列同源性只有64．8％～71．3％。部分信号肽区的氨基酸疏水性分析，推测其调控功能也发生变化，本研究为CDV遗传变异和分子流行病学提供理论数据。

关键词：犬瘟热病毒融合蛋白信号肽