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建立α-突触核蛋白损伤的帕金森病细胞模型

中国药理学通报 2015年第B11期31卷 70-71页

作者：衡洋闫文芬邵千航陈乃宏苑玉和天然药物活性物质与功能国家重点实验室、中国医学科学院神经科学中心、中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所北京100050 湖南中医药大学长沙410208

目的建立以α-突触核蛋白损伤的帕金森病细胞模型,为创新药物筛选提供模型基础.方法通过聚合酶链式反应（PCR）方法扩增表达人源α-突触核蛋白的目的基因,构建原核表达载体.将载体转化至大肠杆菌内,诱导其表达重组α-突触核蛋白.通过镍... 详细信息

目的建立以α-突触核蛋白损伤的帕金森病细胞模型,为创新药物筛选提供模型基础.方法通过聚合酶链式反应（PCR）方法扩增表达人源α-突触核蛋白的目的基因,构建原核表达载体.将载体转化至大肠杆菌内,诱导其表达重组α-突触核蛋白.通过镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,并通过蛋白免疫印迹和质谱技术进行鉴定.将得到的α-突触核蛋白以不同浓度作用于PC12细胞以及原代神经元,MTT法检测细胞存活率,以确定α-突触核蛋白的合适造模浓度.结果PCR扩增获得的目的基因片段经凝胶电泳分离后显示与理论分子量大小一致,并成功嵌入至载体pET30a中;测序正确的融合载体成功转化至大肠杆菌***21（DE3）.通过改变温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度、宿主菌的增殖状态以及诱导时间等条件,获得高表达目的蛋白表达的实验条件;通过亲和层析方法获得纯化的α-突触核蛋白,纯化蛋白的通过蛋白免疫印迹证明为α-突触核蛋白,质谱结果其分子质量为与目的蛋白理论分子质量基本一致.纯化的α-突触核蛋白刺激PC12细胞及原代神经元细胞后,细胞存活率明显下降,并且存活率的降低程度与α-突触核蛋白刺激浓度呈正相关.结论成功构建了α-突触核蛋白损伤的帕金森病细胞模型,可用于筛选具有抗帕金森病功能的创新化合物.

关键词： α-突触核蛋白帕金森病筛选模型蛋白表达药物靶点

建立以α-突触核蛋白损伤为靶点的细胞筛选模型

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中国药理学通报 2015年第4期31卷 586-590页

作者：闫文芬衡洋邵千航陈乃宏苑玉和天然药物活性物质与功能国家重点实验室中国医学科学院神经科学中心中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

目的建立以α-突触核蛋白损伤为靶点筛选抗帕金森病创新药物的细胞模型。方法通过PCR方法扩增目的基因,分子克隆技术构建原核表达载体。融合载体转化至大肠杆菌诱导后表达重组α-突触核蛋白,亲和层析法纯化目的蛋白并通过蛋白免疫印迹... 详细信息

目的建立以α-突触核蛋白损伤为靶点筛选抗帕金森病创新药物的细胞模型。方法通过PCR方法扩增目的基因,分子克隆技术构建原核表达载体。融合载体转化至大肠杆菌诱导后表达重组α-突触核蛋白,亲和层析法纯化目的蛋白并通过蛋白免疫印迹和质谱技术进行鉴定,MTT法检测细胞存活率。结果α-突触核蛋白基因的c DNA片段与理论分子量大小一致,并成功克隆至载体p ET30a;测序正确的融合载体转化至大肠杆菌***21(DE3)。转化子经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达α-突触核蛋白,通过改变温度、IPTG浓度及宿主菌的增殖状态等条件,获得高表达菌株;宿主菌的裂解液通过亲和层析方法获得纯化的α-突触核蛋白,纯化蛋白通过与不同抗体免疫印迹结果证明为α-突触核蛋白,质谱结果显示其分子质量为15.3ku,与理论分子质量15.5 ku基本一致。纯化的α-突触核蛋白刺激PC12细胞及原代神经元细胞后,细胞存活率明显下降,存活率的降低程度与α-突触核蛋白刺激浓度呈正相关性。结论成功建立了以α-突触核蛋白损伤为靶点的细胞筛选模型,可用于筛选具有抗帕金森病功能的创新化合物。

关键词： α-突触核蛋白毒性作用帕金森病筛选模型蛋白表达药物靶点

天麻联苄类化合物20C通过MAPKs和TLR4/Akt/mTOR通路调节自噬进而发挥抗炎作用

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神经药理学报 2018年第6期 59-60页

作者：邵千航苑玉和中国医学科学院药物研究所

目的:明确20C是否具有抗炎作用以及相关机制的探究。方法:用脂多糖LPS(1μg·m L-1和不同浓度的20C(0.1,1,10μmol·L-1)处理BV-2细胞24小时,采用ELISA方法检测炎症因子TNF-α的表达。免疫印迹法检测炎症介质相关蛋白一氧化氮合酶(iNOS)... 详细信息

目的:明确20C是否具有抗炎作用以及相关机制的探究。方法:用脂多糖LPS(1μg·m L-1和不同浓度的20C(0.1,1,10μmol·L-1)处理BV-2细胞24小时,采用ELISA方法检测炎症因子TNF-α的表达。免疫印迹法检测炎症介质相关蛋白一氧化氮合酶(iNOS),环氧化酶2(COX-2),自噬相关蛋白(Beclin-1,LC3,Atg5)的表达。免疫荧光染色法观察细胞内自噬小体的表达。雷帕霉素(100 nM)提取孵育BV-2细胞2小时,再给予LPS(1μg·m L-1) 24小时,免疫印迹法检测MAPKs通路蛋白(p38,JNK,ERK),TLR4,p-Akt,p-mTOR蛋白的表达。结果:20C可以减少炎症因子以及炎症介质的表达。20C处理细胞明显增加自噬相关蛋白的表达。同时20C和雷帕霉素都可以通过抑制MAPKs和TLR4/Akt/mTOR通路激活来增加自噬。结论:20C通过MAPKs和TLR4/Akt/mTOR通路调节自噬发挥抗炎作用。

关键词： 20C 自噬

瓜子金皂苷己抑制IL-1β的释放及其机制研究

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中国药理学通报 2019年第5期35卷 668-673页

作者：龙倩王莎莎邵千航苑玉和贺文彬陈乃宏山西中医药大学中药学院山西太原030619 湖南省中药饮片标准化与功能工程技术中心湖南长沙410208 中国医学科学院神经科学中心中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050

目的研究瓜子金皂苷己(polygalasaponin F,PS-F)对LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应中炎性因子IL-1β释放的影响及其作用机制。方法实验分为空白组、LPS模型组、LPS+PS-F (0.10、1.00、10.00μmol·L^(-1))给药组。运用ELISA法检测培养... 详细信息

目的研究瓜子金皂苷己(polygalasaponin F,PS-F)对LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应中炎性因子IL-1β释放的影响及其作用机制。方法实验分为空白组、LPS模型组、LPS+PS-F (0.10、1.00、10.00μmol·L^(-1))给药组。运用ELISA法检测培养液上清中IL-1β的分泌量;real-time PCR检测IL-1βmRNA的表达;Western blot检测IL-1β、NLRP3、caspase-1、ASC、caspase-11的蛋白表达量。结果 ELISA、real-time PCR和Western blot结果均表明,PS-F能有效抑制LPS诱导BV2小胶质细胞释放炎性因子IL-1β(P<0.01,P<0.05);Western blot结果表明,PS-F可以下调NLRP3、caspase-1、ASC、caspase-11的蛋白表达,其中ASC、caspase-11所得结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PS-F可以有效抑制LPS诱导BV2细胞炎症反应中炎性因子IL-1β的释放,且与下调NLRP3炎性小体、抑制caspase-11的激活有关。

关键词：瓜子金皂苷己脂多糖神经炎症 IL-1β 炎性小体 BV2细胞

瓜子金皂苷己（PS-F）通过TLR4-PI3K/AKT-NF-κB通路发挥抗炎作用机制的研究

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中国药理学通报 2015年第B11期31卷 28-28页

作者：邵千航陈乃宏苑玉和中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

目的瓜子金皂苷己（PS-F）通过TLR4-PI3K/AKT-NF-κB通路发挥抗炎作用机制的研究.方法对照组小胶质细胞BV-2用脂多糖（LPS）刺激,并分别进行有/无抑制剂进行预处理,实验组小胶质细胞BV-2用LPS刺激并加入PS-F（10μM）.采用酶联免疫吸附... 详细信息

目的瓜子金皂苷己（PS-F）通过TLR4-PI3K/AKT-NF-κB通路发挥抗炎作用机制的研究.方法对照组小胶质细胞BV-2用脂多糖（LPS）刺激,并分别进行有/无抑制剂进行预处理,实验组小胶质细胞BV-2用LPS刺激并加入PS-F（10μM）.采用酶联免疫吸附测定BV-2细胞中TNF-α释放量,细胞活力通过MTT法进行分析评价,通过Westernblot方法测定相关蛋白表达量变化.结果抑制toll样受体（TLR）4（CLI-0951μg·ml-1）,磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）（LY29400210μM）或磷酸化IκBα（BAY11-708210μM）,在不影响细胞生存力的情况下,可以完全阻止LPS诱导肿瘤坏死因子的释放,降低BV-2细胞中AKT和IκB的磷酸化水平,p65核转位减少.而PS-F可以表现出与加入抑制剂相同的变化趋势.结论瓜子金皂苷己PS-F可以通过TLR4-PI3K/AKT-NF-kB通路发挥抗炎作用.

关键词：帕金森病炎症瓜子金皂苷己 TLR4 PI3K/AKT NF-κB

天麻联苄类化合物20C通过MAPK和TLR4/Akt/mTOR通路调节自噬进而发挥抗炎作用

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中国药理学与毒理学杂志 2018年第9期32卷 685-685页

作者：邵千航苑玉和陈乃宏中国医学科学院药物研究所北京100050

目的明确化合物20C是否具有抗炎作用以及相关机制。方法脂多糖(LPS)1 mg·L^(-1)和不同浓度的20C(0.1,1.0和10μmol·L^(-1))同时处理BV-2细胞24 h,采用ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。Western蛋白质印迹法检测炎症介... 详细信息

目的明确化合物20C是否具有抗炎作用以及相关机制。方法脂多糖(LPS)1 mg·L^(-1)和不同浓度的20C(0.1,1.0和10μmol·L^(-1))同时处理BV-2细胞24 h,采用ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。Western蛋白质印迹法检测炎症介质相关蛋白一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶2(COX-2)和自噬相关蛋白(Beclin^(-1), LC3,Atg5和Atg12)的表达,同时免疫荧光法观察细胞内自噬小体的产生。自噬激活剂雷帕霉素(100 nmol·L^(-1))提前孵育BV-2细胞2 h,再给予LPS(1 mg·L^(-1))24 h,Western蛋白质印迹法检测促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)相关通路蛋白(P38, JNK和ERK),Toll样受体4(TLR4), p-Akt和p-mTOR蛋白的表达。结果 20C可以减少炎症因子释放以及炎症介质的表达。20C处理细胞可以明显增加自噬相关蛋白的表达。20C和雷帕霉素均可以通过抑制MAPK和TLR4/Akt/mTOR通路激活来增加自噬。结论 20C通过MAPK和TLR4/Akt/mTOR通路调节自噬进而发挥抗炎作用。

关键词：天麻联苄类化合物20C 自噬促分裂原活化的蛋白激酶

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印度智库对中国台湾问题的研究:动因与启示

智库理论与实践 2024年第2期9卷 150-157页

作者：邵珠航同济大学政治与国际关系学院上海200092

[目的/意义]研究印度智库对中国台湾问题的认知,对把握祖国和平统一进程具有重要现实意义,对推动中印关系健康稳定发展也具有参考价值。[方法/过程]本研究选取8家印度智库发布的26篇代表性文献作为研究样本,梳理分析印度主流智库对印台... 详细信息

[目的/意义]研究印度智库对中国台湾问题的认知,对把握祖国和平统一进程具有重要现实意义,对推动中印关系健康稳定发展也具有参考价值。[方法/过程]本研究选取8家印度智库发布的26篇代表性文献作为研究样本,梳理分析印度主流智库对印台关系的认知及其背后的动因与产生的影响。[结果/结论]研究显示,印度智库主要从地缘政治、经济合作、民主价值观,以及所谓“国际社会利益”等视角看待印台关系,主张在政治、经济、军事、科技、网络安全、教育等领域加强与中国台湾地区的合作。对此,我国应进一步推动两岸融合发展,不断增进中印两国在各层面的交流互动,持续强化一个中国原则在国际上的认可度。

关键词：智库研究中印关系国家安全印度中国台湾

资管新规是否降低了银行风险——基于双重差分模型的实证检验

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北京社会科学 2024年第1期 78-91页

作者：邵梯航孙飞中国人民大学财政金融学院国务院发展研究中心公共管理与人力资源研究所

基于中国商业银行微观视角,利用2014-2020年中国143家银行的面板数据,通过双重差分模型实证检验了资管新规政策对银行风险的影响及作用机制。结果显示,资管新规的实施能够显著降低银行风险。机制检验表明,资管新规通过提升银行资本充足... 详细信息

基于中国商业银行微观视角,利用2014-2020年中国143家银行的面板数据,通过双重差分模型实证检验了资管新规政策对银行风险的影响及作用机制。结果显示,资管新规的实施能够显著降低银行风险。机制检验表明,资管新规通过提升银行资本充足水平及增强银行盈利能力,进而降低银行风险。异质性分析表明,资管新规的实施能够更加有效地降低非国有银行的风险。因此,应继续坚持资管新规对银行的有序规范、提升银行资本充足水平及增强银行盈利能力。

关键词：资管新规银行风险商业银行监管银行资本

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不可切除肝细胞癌治疗药物——替西木单抗

临床药物治疗杂志 2023年第9期21卷 25-29页

作者：李冬莲邵千航封宇飞宫建沈阳药科大学生命科学与生物制药学院沈阳110016 北京大学人民医院药学部北京100044 北京大学人民医院临床试验机构北京100044

替西木单抗是由阿斯利康公司研发的一种细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)全人源化IgG2单克隆抗体,能够抑制帮助肿瘤逃避免疫检查的信号通路。本品与PD-L1单克隆抗体度伐利尤单抗联合,用于治疗不可切除肝细胞癌成人患者。本文就替西... 详细信息

替西木单抗是由阿斯利康公司研发的一种细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)全人源化IgG2单克隆抗体,能够抑制帮助肿瘤逃避免疫检查的信号通路。本品与PD-L1单克隆抗体度伐利尤单抗联合,用于治疗不可切除肝细胞癌成人患者。本文就替西木单抗药理作用及机制、药动学和临床疗效等进行综述,旨在为临床合理用药提供参考。

关键词：肝细胞癌替西木单抗 IgG2单克隆抗体临床评价