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杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的比较蛋白质组学分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第2期27卷 102-106页

作者：敬保迁邓世山张仁刚张洁川北医学院免疫学与分子生物学研究所南充637000

目的应用蛋白质组学技术分析杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体蛋白质表达状况。方法分别提取和纯化杜氏利什曼原虫四川SC6株前鞭毛体与纯培养无鞭毛体的总蛋白,分别经pH3～10的预制胶条进行双向电泳分离,凝胶用考马斯亮蓝染色,凝胶图像... 详细信息

目的应用蛋白质组学技术分析杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体蛋白质表达状况。方法分别提取和纯化杜氏利什曼原虫四川SC6株前鞭毛体与纯培养无鞭毛体的总蛋白,分别经pH3～10的预制胶条进行双向电泳分离,凝胶用考马斯亮蓝染色,凝胶图像以PDQuest1.0软件分析,并对主要差异表达蛋白点用电喷雾质谱法进行鉴定。结果等量的前鞭毛体与纯培养的无鞭毛体总蛋白经双向电泳分离后均可获近700个蛋白点,其中超过90%的蛋白点的分布和相对强度基本一致。与前鞭毛体比较,6个蛋白点在无鞭毛体蛋白中明显高表达,3个蛋白点低表达。6个明显高表达的蛋白点中有5个为已知功能蛋白,分别为Reiske铁硫蛋白前体、α微管蛋白、过氧化物酶1、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶前体和甘露糖-1-磷酸瓜氨酸转移酶;3个低表达的蛋白点中有2个为已知功能蛋白,分别为热休克蛋白70和β微管蛋白。这些差异调节表达蛋白与碳水化合物/能量代谢,应激反应,细胞膜和细胞骨架形成相关。结论前鞭毛体与无鞭毛体蛋白质的表达存在差异。

关键词：杜氏利什曼原虫前鞭毛体无鞭毛体比较蛋白质组学

2-DE为基础的蛋白质组学方法在乳腺癌实际研究中的运用

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川北医学院学报 2007年第5期22卷 494-499页

作者：邓世山川北医学院基础医学院人体解剖学教研室四川南充637000

蛋白质组(proteome)是指一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质。以二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)为基础的蛋白质组学技术,在阐明乳腺癌潜在的发生机制、寻找与诊断、治疗、预后、耐药等有关分子靶标的研究中有非常重... 详细信息

蛋白质组(proteome)是指一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质。以二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)为基础的蛋白质组学技术,在阐明乳腺癌潜在的发生机制、寻找与诊断、治疗、预后、耐药等有关分子靶标的研究中有非常重要的地位。目前常用的样本主要有乳腺癌组织、细胞株、乳头吸出液、细胞间质及血清等,蛋白质组学方法对不同的样本蛋白质进行分离鉴定,在一定范围内对某一样本的总蛋白进行分析,是蛋白质组学方法在实际研究中的应用。不同样本来源蛋白具有不同的功能特性,表现形式也存在差异,反映的病理过程也有所不同。通过对不同来源样本的总蛋白进行分析,可从不同的角度对乳腺癌进行阐述,这在乳腺癌研究中具有重要的意义。

关键词：乳腺癌二维聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质组发病机制生物标记

泛素-蛋白酶体系统介导的蛋白质降解在乳腺癌发病机制中的作用

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川北医学院学报 2008年第6期23卷 553-556页

作者：邓世山川北医学院基础医学院人体解剖学教研室四川南充637000

乳腺癌的发病机制目前尚不完全清楚,与乳腺癌发病机制相关的研究与学说很多,其中泛素-蛋白酶体系统介导的蛋白质降解与乳腺癌发病机制关系的研究是一个热点。乳腺癌中泛素-蛋白酶体系统三个主要过程功能均发生改变,该系统功能"失调"与... 详细信息

乳腺癌的发病机制目前尚不完全清楚,与乳腺癌发病机制相关的研究与学说很多,其中泛素-蛋白酶体系统介导的蛋白质降解与乳腺癌发病机制关系的研究是一个热点。乳腺癌中泛素-蛋白酶体系统三个主要过程功能均发生改变,该系统功能"失调"与乳腺癌的发生发展有密切的关系。

关键词：乳腺癌泛素-蛋白酶体系统发病机制

Annexin A5基因沉默对Hep-2细胞凋亡的影响

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2014年第4期49卷 326-329页

作者：刘杨周晓芳文劲松邓世山刘海川北医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科四川省南充市637000 基础医学院解剖教研室四川省南充市637000

目的探索annexinA5基因及其表达沉默后对人喉癌Hep-2细胞凋亡的影响.方法培养人喉癌细胞Hep-2,经Lip2000转染特异siRNA片段沉默annexin A5基因;TRlzol法提取细胞总RNA;RT-PCR法检测annexinA5在mRNA水平的表达是否降低;Western blot法... 详细信息

目的探索annexinA5基因及其表达沉默后对人喉癌Hep-2细胞凋亡的影响.方法培养人喉癌细胞Hep-2,经Lip2000转染特异siRNA片段沉默annexin A5基因;TRlzol法提取细胞总RNA;RT-PCR法检测annexinA5在mRNA水平的表达是否降低;Western blot法检测annexin A5的蛋白表达是否下降;经流式细胞仪AnnexinV-FITC法检测annexin A5基因沉默后的人喉癌Hep-2细胞的凋亡情况.采用SPSS 13.0软件对数据进行单因素方差分析.结果特异siRNA片段成功转入Hep-2细胞;RT-PCR结果显示实验siRNA组、阴性siRNA组、脂质体组及空白细胞组的相对灰度值为0.70±0.03、1.18±0.05、1.17±0.06及1.23±0.07;经统计学分析表明实验组annexin A5在mRNA水平的灰度明显弱于阴性siRNA组（t=-14.77）、脂质体组（t=-13.23）及空白细胞组（t=-12.99）,P值均＜0.05;Western blot结果显示实验siRNA组、阴性siRNA组、脂质体组及空白细胞组的相对灰度值为1.21±0.03、3.88±0.06、3.87±0.02及3.95±0.08;统计学分析表明annexin A5的蛋白的相对灰度值明显弱于阴性siRNA组（t=-70.34）、脂质体组（t=-150.62）及空白细胞组（t=-56.32）,P值均＜0.05;AnnexinV-FITC法结果当annexin A5基因沉默后,人喉癌细胞Hep-2凋亡率实验siRNA组、阴性siRNA组、脂质体组及空白细胞组分别为4.43％±0.12％、13.67％±0.22％、13.66％±0.12％及13.35％±0.13％,实验组细胞凋亡率较阴性siRNA组（t=-62.50）、脂质体组（t=-14.16）及空白细胞组（t=-11.47）明显降低,P值均＜0.05.结论在人喉癌Hep-2细胞中,annexin A5可能促进凋亡,有可能成为喉癌诊断、治疗及预后的新的生物靶标.

关键词：膜联蛋白A5 基因沉默细胞凋亡喉肿瘤

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PBL教学模式在组织学实验教学中的应用

四川解剖学杂志 2012年第1期20卷 66-67页

作者：郭洋邓世山川北医学院形态学研究所南充637000

以临床医学专业2009级本科生为研究对象,探讨PBL教学法在组织学实验课中的影响。结果表明,通过PBL教学能更有效地提高学生的自主学习、分析解决问题能力,调动学生学习的积极性。

关键词： PBL 组织学教学法

AnnexinA1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

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重庆医学 2015年第25期44卷 3488-3490页

作者：钟雪梅陈敏邓世山谢少利川北医学院附属医院内分泌科四川南充637000 川北医学院解剖教研究四川南充637000 川北医学院附属医院乳腺外科四川南充637000

目的通过检测Annexin A1在甲状腺乳头状癌中的表达,探讨其与甲状腺乳头状癌的关系与意义。方法取69例甲状腺乳头状癌患者癌组织及癌旁正常组织切片,使用二步法免疫组织化学染色观察Annexin A1在甲状腺乳头状癌和癌旁正常组织中的表达情... 详细信息

目的通过检测Annexin A1在甲状腺乳头状癌中的表达,探讨其与甲状腺乳头状癌的关系与意义。方法取69例甲状腺乳头状癌患者癌组织及癌旁正常组织切片,使用二步法免疫组织化学染色观察Annexin A1在甲状腺乳头状癌和癌旁正常组织中的表达情况。结果 Annexin A1在癌组织中高表达。癌组织表达61例(88.41%),癌旁正常组织表达6例(8.69%),差异有统计学意义(P<0.05);在淋巴结转移和肿瘤直径大于或等于1cm的患者中,Annexin A1表达高于肿瘤小于1cm的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲状腺乳头状癌组织中Annexin A1的高表达,提示其可能为甲状腺乳头状癌潜在的生物学标记物。

关键词：甲状腺乳头状肿瘤 Annexin A1 免疫组织化学

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AnnexinA2与乳腺癌关系的研究进展

中华临床医师杂志（电子版） 2011年第14期5卷 4206-4208页

作者：侯令密幸天勇邓世山川北医学院附属医院普外三科四川南充637000 川北医学院人体解剖学教研室

Annexin A2又名P36、P39、AnnexinⅡ、CalpactinⅠ重链、LipoeortinⅡ,是Annexin蛋白(磷脂结合蛋白)家族13个成员中的一员,存在于人内皮细胞、单核细胞、巨噬细胞、神经细胞和一些肿瘤细胞,在增生和转化的细胞中高表达,在终末分化的细... 详细信息

Annexin A2又名P36、P39、AnnexinⅡ、CalpactinⅠ重链、LipoeortinⅡ,是Annexin蛋白(磷脂结合蛋白)家族13个成员中的一员,存在于人内皮细胞、单核细胞、巨噬细胞、神经细胞和一些肿瘤细胞,在增生和转化的细胞中高表达,在终末分化的细胞中低表达,最早在急性早幼粒细胞白血病中发现Annexin A2高表达。近年来,Annexin A2越来越多的生物学效应被揭示,

关键词：乳腺癌组织 AnnexinA2 肿瘤细胞

去势大鼠骨髓细胞CD_(44)与骨小梁退变参数变化的相关分析

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四川大学学报（医学版） 2003年第2期34卷 351-352页

作者：王松张晓王凡王中亮邓世山张本斯李瑞祥四川大学华西基础医学与法医学院人体解剖学教研室成都610041 第三军医大学成都军医学院

目的　探讨骨微环境骨髓中 CD4 4表达水平以及与绝经后骨质疏松发生的相关性。方法　成年去势大鼠 5 0只 ,随机分为去势组和假手术组 ,术后 3、5、6、8、 11周各处死一组大鼠。通过免疫组化 SABC法检测 CD4 4的表达水平。利用计算机图... 详细信息

目的　探讨骨微环境骨髓中 CD4 4表达水平以及与绝经后骨质疏松发生的相关性。方法　成年去势大鼠 5 0只 ,随机分为去势组和假手术组 ,术后 3、5、6、8、 11周各处死一组大鼠。通过免疫组化 SABC法检测 CD4 4的表达水平。利用计算机图象分析系统进行骨组织形态计量学测定。结果　相关关系分析提示 :骨髓细胞 CD4 4表达水平与骨小梁退变参数呈正相关。去势大鼠于 6周后 CD4 4的表达明显降低 ,仅限于骨髓中融合的多核巨噬细胞 /破骨样细胞表面表达 ,并且这类细胞的数目呈增加趋势。结论　去势后大鼠骨小梁退变可能与骨髓微环境中 CD4 4表达量减少 ,以致骨髓中融合的多核巨噬细胞 /破骨样细胞数目增多有关。

关键词：骨髓 CD44 骨质疏松骨形态计量学

miR-106b对鼻咽癌细胞凋亡的促进和对增殖的抑制作用

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西安交通大学学报（医学版） 2017年第6期38卷 851-856页

作者：严达忠邓世山李四军严晨甘卫刚川北医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科四川南充637000 川北医学院人体解剖教研室四川南充637000 大连医科大学第一临床学院辽宁大连116000

目的探讨miR-106b对鼻咽癌细胞凋亡和增殖的影响。方法应用miRNA芯片分析获得鼻咽癌组织和癌旁正常组织表达差异的miRNA,TaqMan miRNA检测试剂盒和实时荧光定量PCR分别检测miR-106和RhoC mRNA在鼻咽癌和癌旁组织中的表达,用miRnada预测m... 详细信息

目的探讨miR-106b对鼻咽癌细胞凋亡和增殖的影响。方法应用miRNA芯片分析获得鼻咽癌组织和癌旁正常组织表达差异的miRNA,TaqMan miRNA检测试剂盒和实时荧光定量PCR分别检测miR-106和RhoC mRNA在鼻咽癌和癌旁组织中的表达,用miRnada预测miR-106b和靶基因的结合位点,采用双荧光素酶验证靶基因,Western blot检测miR-106b调控靶基因RhoC的表达水平。用Annexin V-PI和TUNEL检测miR-106b对鼻咽癌细胞凋亡的影响,用MTT检测miR-106b对鼻咽癌细胞增殖的影响。结果 miRNA芯片分析发现鼻咽癌组织中miR-106b的表达较癌旁正常组织低。RT-PCR结果显示miR-106b在鼻咽癌组织中表达减少(P<0.05),RhoC在鼻咽癌组织中表达增加(P<0.05),miR-106b和RhoC在鼻咽癌组织中表达呈负相关(r=―0.586 6,P<0.001)。荧光素酶报告基因实验结果显示miR-106b组荧光素酶活性低于空质粒组(P<0.05),Western blot结果显示miR-106b组鼻咽癌细胞中RhoC的表达较空质粒组降低(P<0.05)。Annexin V-PI和TUNEL结果显示,miR-106b组鼻咽癌细胞凋亡较空质粒组增加(P<0.05);MTT结果显示miR-106b组鼻咽癌细胞增殖能力较空质粒组降低(P<0.05)。结论 miR-106b可能通过下调RhoC的表达诱导鼻咽癌细胞凋亡并抑制鼻咽癌细胞增殖。

关键词： miR-106b 鼻咽癌凋亡增殖 RhoC