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芒果苷抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖、迁移及炎性因子的表达

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中国组织工程研究 2024年第11期28卷 1690-1695页

作者：胡梦凡颜秋慧邓梦然梁美美梁亮易思思邓家刚运晨霞广西中医药大学基础医学院广西壮族自治区南宁市530200 广西中医药大学附属瑞康医院广西壮族自治区南宁市530011 广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室广西壮族自治区南宁市530200 广西特色实验动物病证模型重点实验室广西壮族自治区南宁市530200 广西农作物废弃物功能成分研究协同创新中心广西壮族自治区南宁市530200

背景:芒果苷是一种从芒果叶、树皮、根中提取的双苯吡酮类化合物,前期研究表明芒果苷可以通过NF-κB、JAK/STAT等转录因子的活化发挥抗全身性炎症作用。目的:探讨芒果苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast... 详细信息

背景:芒果苷是一种从芒果叶、树皮、根中提取的双苯吡酮类化合物,前期研究表明芒果苷可以通过NF-κB、JAK/STAT等转录因子的活化发挥抗全身性炎症作用。目的:探讨芒果苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synovial cells,RA-FLS)增殖、迁移和炎症因子表达的影响及机制。方法:RA-FLS分为空白组、R848(TLR7/8激动剂)刺激组、芒果苷低、中、高浓度组(2,4,8μg/mL)、阳性对照组(Cu-CPT8,TLR8通路抑制剂)。CCK-8法检测不同质量浓度芒果苷对RA-FLS毒性的影响并筛选最终细胞用药质量浓度,细胞克隆形成实验检测RA-FLS的增殖能力,划痕实验及Transwell迁移实验检测RA-FLS的迁移能力,qRT-PCR检测RA-FLS中白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果与结论:①与空白组比较,2-10μg/mL的芒果苷干预组对RA-FLS活力有抑制趋势,但差异不显著(P>0.05),说明对RA-FLS的毒性影响很小;②与R848刺激组比较,芒果苷低、中、高浓度组RA-FLS克隆数、划痕愈合率及迁移细胞数均降低(P<0.01);芒果苷中浓度和高浓度组白细胞介素1β、白细胞介素6及肿瘤坏死因子αmRNA的表达降低(P<0.01);③与R848刺激组比较,阳性对照组细胞克隆数、划痕愈合率及迁移细胞数以及白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);白细胞介素1βmRNA表达水平无明显差异;④结果表明,芒果苷可能通过TLR7/8信号通路抑制RA-FLS增殖、迁移以及炎症因子表达发挥抗类风湿关节炎的作用。

关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞芒果苷细胞因子增殖迁移

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基于平凹多通腔的非线性脉冲压缩技术

物理学报 2024年第12期73卷 213-220页

作者：李聘滨滕浩田文龙黄振文朱江峰钟诗阳运晨霞刘文军魏志义西安电子科技大学光电工程学院西安710071 中国科学院物理研究所北京凝聚态物理国家研究中心北京100190 中国科学院大学物理学院北京100049 北京邮电大学理学院北京100876

采用平凹多通腔和固体薄片组的非线性脉冲光谱展宽与压缩方案开展了100 W皮秒激光非线性脉冲压缩的研究.以多片熔融石英薄片作为非线性介质,在平凹腔中皮秒激光通过自相位调制将光谱宽度由0.24 nm展宽4.8 nm,用光栅对进行色散补偿压缩,... 详细信息

采用平凹多通腔和固体薄片组的非线性脉冲光谱展宽与压缩方案开展了100 W皮秒激光非线性脉冲压缩的研究.以多片熔融石英薄片作为非线性介质,在平凹腔中皮秒激光通过自相位调制将光谱宽度由0.24 nm展宽4.8 nm,用光栅对进行色散补偿压缩,实现压缩后的脉冲宽度为483 fs,对应压缩比为22,最终输出飞秒激光的平均功率为44.2 W.相对于常规多通腔方案,该平凹腔结构紧凑,光路稳定性好,压缩比高,非常有利于非线性光谱展宽与压缩的实现.

关键词：多通腔自相位调制非线性脉冲压缩超快激光

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基于平凹多通腔的非线性脉冲压缩技术研究

物理学报 2024年

作者：李聘滨滕浩田文龙黄振文朱江峰钟诗阳运晨霞刘文军魏志义西安电子科技大学北京邮电大学理学院中国科学院物理研究所北京凝聚态物理国家实验室中国科学院大学物理学院

采用平凹多通腔和固体薄片组的非线性脉冲光谱展宽与压缩方案开展了100W皮秒激光非线性脉冲压缩的研究。以多片熔融石英薄片作为非线性介质，在平凹腔中皮秒激光通过自相位调制将光谱宽度由0.24nm展宽至4.8nm，用光栅对进行色散补偿压... 详细信息

采用平凹多通腔和固体薄片组的非线性脉冲光谱展宽与压缩方案开展了100W皮秒激光非线性脉冲压缩的研究。以多片熔融石英薄片作为非线性介质，在平凹腔中皮秒激光通过自相位调制将光谱宽度由0.24nm展宽至4.8nm，用光栅对进行色散补偿压缩，实现压缩后的脉冲宽度为483fs，对应压缩比为22，最终输出飞秒激光的平均功率为44.2W。相对于常规多通腔方案，该平凹腔结构紧凑，光路稳定性好，压缩比高，非常有利于非线性光谱展宽与压缩的实现。

关键词：多通腔自相位调制非线性脉冲压缩超快激光

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啮齿类动物类风湿关节炎模型概述

医学研究杂志 2022年第12期51卷 182-185页

作者：李宝莹运晨霞广西中医药大学基础医学院、广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室、广西特色实验动物病证模型重点实验室南宁530000

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的自身免疫系统疾病,其主要特征是关节滑膜组织的慢性炎症和关节软骨的损伤。RA新疗法的研究与开发需要通过临床分析和借助动物模型来展开研究与验证。目前RA模型构建中常用的实验... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的自身免疫系统疾病,其主要特征是关节滑膜组织的慢性炎症和关节软骨的损伤。RA新疗法的研究与开发需要通过临床分析和借助动物模型来展开研究与验证。目前RA模型构建中常用的实验动物是啮齿类动物,主要采用佐剂、Ⅱ型胶原蛋白、链球菌细胞壁、软骨寡聚基质蛋白、降植烷等刺激剂制备不同类型的动物模型,均可从不同病理机制、临床变化等反映RA发病的疾病特点。当研究者为不同研究目的选择RA动物模型时,应根据每种模型在不同诱因下的发病机制,有针对性的选择。本文将几种常用啮齿类动物RA模型的发病特征及构建时需要注意的关键问题等进行概述,为构建啮齿类动物RA模型的研究者提供参考。

关键词：类风湿关节炎啮齿类动物发病机制病理特征

树鼩成纤维样滑膜细胞分离鉴定及TLR8通路相关分子检测方法的建立

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中国组织工程研究 2022年第23期26卷 3721-3727页

作者：周凡琦李宝莹王凯涛谭荃荃运晨霞冷静广西中医药大学基础医学院广西壮族自治区南宁530200 广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室广西壮族自治区南宁530200 柳州人民医院检验科广西壮族自治区柳州545000

背景:成纤维样滑膜细胞在类风湿关节炎病变过程中发挥着重要的作用,当炎症性关节炎发生时滑膜衬里层成纤维样滑膜细胞会大量增殖,释放炎症因子能引起关节炎症和软骨的损伤。目的:建立树鼩膝关节成纤维样滑膜细胞体外分离、培养纯化及鉴... 详细信息

背景:成纤维样滑膜细胞在类风湿关节炎病变过程中发挥着重要的作用,当炎症性关节炎发生时滑膜衬里层成纤维样滑膜细胞会大量增殖,释放炎症因子能引起关节炎症和软骨的损伤。目的:建立树鼩膝关节成纤维样滑膜细胞体外分离、培养纯化及鉴定的方法,并探讨其生物学特性;建立树鼩成纤维样滑膜细胞TLR8通路相关分子的检测方法,初探TLR8通路在细胞中的活化情况。方法:利用组织块贴壁法和连续传代法分离、纯化树鼩成纤维样滑膜细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,苏木精-伊红染色观察细胞形态,免疫细胞化学染色法检测成纤维样滑膜细胞的标志性蛋白(波形蛋白)的表达。经人TLR8配体R848刺激前后,采用Western blot方法检测树鼩成纤维样滑膜细胞与人成纤维样滑膜细胞中TLR8及其信号通路蛋白的表达,采用RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳检测树鼩成纤维样滑膜细胞中TLR8通路及其下游基因mRNA的表达。结果与结论:①倒置显微镜下可见,经过3代的传代培养后,树鼩成纤维样滑膜细胞多为梭形,大小相近,纯度高,在体外生长增殖状况良好;苏木精-伊红染色显示细胞形态多呈梭形,大小相近;免疫细胞化学染色显示,成纤维样滑膜细胞胞浆波形蛋白表达阳性;CCK-8实验结果显示,树鼩成纤维样滑膜细胞生长曲线为“S”型;②Western blot检测显示,经R848刺激48 h后,树鼩成纤维样滑膜细胞中的核因子κB蛋白表达升高(P0.05);人成纤维样滑膜细胞中的p-P38蛋白表达降低(P0.05);③RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳检测显示,经R848刺激48 h后,树鼩成纤维样滑膜细胞中肿瘤坏死因子ɑ、白细胞介素6、干扰素β、TLR9-2、TLR9-1、TLR8-2、TLR8-1、TLR7-2、TLR7-1 mRNA表达无明显变化(P>0.05);④结果表明,采用组织贴壁法可分离树鼩成纤维样滑膜细胞,利用人来源抗体可建立树鼩成纤维样滑膜细胞TLR8通路相关分子检测方法。

关键词：树鼩类风湿关节炎组织贴壁法成纤维样滑膜细胞分离培养细胞鉴定 TLR8信号通路

桃仁总蛋白对荷瘤鼠细胞因子水平及肿瘤细胞凋亡影响的实验研究

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桃仁总蛋白对荷瘤鼠细胞因子水平及肿瘤细胞凋亡影响的实验研究

作者：运晨霞黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

恶性肿瘤严重威胁人类生命和健康，如何防治肿瘤是世界各国关注的焦点。活血化瘀的中药在临床上已经被广泛用于具有“瘀症”的肿瘤的治疗。桃仁是一味重要的活血化瘀药，是各类活血化瘀方剂的重要组成部分，桃仁总蛋白是它重要的化学组... 详细信息

恶性肿瘤严重威胁人类生命和健康，如何防治肿瘤是世界各国关注的焦点。活血化瘀的中药在临床上已经被广泛用于具有“瘀症”的肿瘤的治疗。桃仁是一味重要的活血化瘀药，是各类活血化瘀方剂的重要组成部分，桃仁总蛋白是它重要的化学组成成分之一，约占桃仁比重的50％。我们推测其与桃仁抗瘤效应及免疫调节作用有关。本文选用荷S180肉瘤小鼠动物模型作为研究对象。通过观察桃仁总蛋白对IL-2、IL-4的分泌、T淋巴细胞亚群、体内肿瘤的生长及肿瘤细胞凋亡情况的影响，探讨了免疫调节及抗肿瘤的作用机制。实验结果显示：桃仁总蛋白能促进IL-2、IL-4的分泌，调节CD4／CD8细胞的比值;抑制体内肉瘤的生长，诱导肿瘤细胞凋亡。因此，我们认为桃仁总蛋白可改善机体异常的免疫状态，调节免疫系统的失衡，并促进肿瘤细胞凋亡。从而为其在临床上治疗肿瘤提供理论依据。

关键词：恶性肿瘤,活血化瘀,桃仁总蛋白,免疫调节,细胞凋亡

瑶山亚种树鼩IFN-β和IFN-γ原核表达及其多克隆抗体制备

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南方农业学报 2022年第6期53卷 1713-1723页

作者：曹颖颖李宝莹王婷梁亮运晨霞唐海波冷静广西中医药大学/广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室/广西特色实验动物病证模型重点实验室广西南宁530200

【目的】构建瑶山亚种树鼩IFN-β和IFN-γ基因原核表达载体,并制备IFN-β和IFN-γ多克隆抗体,为进一步研究树鼩病毒感染动物模型打下基础。【方法】以瑶山亚种树鼩外周淋巴细胞为原材料,提取总RNA后经RT-PCR扩增瑶山亚种树鼩IFN-β和IFN... 详细信息

【目的】构建瑶山亚种树鼩IFN-β和IFN-γ基因原核表达载体,并制备IFN-β和IFN-γ多克隆抗体,为进一步研究树鼩病毒感染动物模型打下基础。【方法】以瑶山亚种树鼩外周淋巴细胞为原材料,提取总RNA后经RT-PCR扩增瑶山亚种树鼩IFN-β和IFN-γ基因,亚克隆至质粒pcDNA3.1(+)上构建真核表达载体,并瞬时转染仓鼠肾细胞(BHK 21);同时亚克隆到原核载体pET-28a(+)上构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后以IPTG诱导表达融合蛋白IFN-β和IFN-γ。融合蛋白纯化后免疫小鼠制备多克隆抗体,并利用Western blotting和间接免疫荧光(IFA)检测分析其反应性。【结果】扩增获得的瑶山亚种树鼩IFN-β和IFN-γ基因片段分别为564和501 bp,亚克隆至质粒pcDNA3.1(+)上成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-IFN-β和pcDNA3.1-IFN-γ,亚克隆到原核载体pET-28a(+)上成功构建获得原核表达载体pET-28a-IFN-β和pET-28a-IFN-γ。原核表达载体pET-28a-IFN-β和pET-28a-IFN-γ转化BL21(DE3)感受态细胞后在30℃下以0.5 mmol/L IPTG诱导6 h即获得融合蛋白IFN-β和IFN-γ,且融合蛋白主要以包涵体形式表达,以含2 mol/L尿素的洗涤液洗涤后可获得纯度相对较高的融合蛋白,且损失较少。纯化的融合蛋白IFN-β和IFN-γ经乳化后免疫小鼠,成功制备获得IFN-β和IFN-γ多克隆抗体,Western blotting和IFA检测结果均显示这2个多克隆抗体具有良好的反应性。【结论】通过原核表达系统可在大肠杆菌中成功诱导表达获得瑶山亚种树鼩IFN-β和IFN-γ,复性后的融合蛋白具有良好的反应性和免疫原性,免疫小鼠制备获得的多克隆抗体反应性良好且抗体效价高,可作为检测工具用于研究瑶山亚种树鼩病毒感染模型。

关键词：瑶山亚种树鼩干扰素(IFN) IFN-β IFN-γ 原核表达多克隆抗体

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TLR2抗病毒固有免疫作用研究现状

现代免疫学 2013年第5期33卷 417-420页

作者：王颖君运晨霞冷静广西医科大学免疫学教研室南宁530021 广西中医药大学微生物与免疫学教研室南宁530001

Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)是Toll样受体家族中重要的成员,在多种细胞表达,可识别多种配体使炎症因子释放,参与固有免疫和适应性免疫应答过程,在机体抗病毒感染中发挥重要作用。本文就近五年TLR2及其信号途径参与病毒感染... 详细信息

Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)是Toll样受体家族中重要的成员,在多种细胞表达,可识别多种配体使炎症因子释放,参与固有免疫和适应性免疫应答过程,在机体抗病毒感染中发挥重要作用。本文就近五年TLR2及其信号途径参与病毒感染性疾病发展过程作一综述。

关键词： TLR2 病毒感染固有免疫

将巴斯德精神融入医学微生物与免疫学理论教学的研究

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中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生 2022年第9期 144-146页

作者：易思思张舒农清栋黎明星运晨霞广西中医药大学广西南宁513000

探讨将著名科学家巴斯德的事例融入医学微生物学及免疫学理论课教学中的应用及效果。方法选择广西中医药大学赛恩斯学院2020级中医学专业本科生2个班,2个班随机分为实验组和对照组,实验组采用巴斯德案例教学法融入医学微生物学及免疫... 详细信息

探讨将著名科学家巴斯德的事例融入医学微生物学及免疫学理论课教学中的应用及效果。方法选择广西中医药大学赛恩斯学院2020级中医学专业本科生2个班,2个班随机分为实验组和对照组,实验组采用巴斯德案例教学法融入医学微生物学及免疫学理论课教学,对照组采用常规教师讲授课本内容为主方式进行教学。同时采用自制的调查表调查上课的效果。结果实验组支持此上课方法,觉得巴斯德案例教学法融入课堂学习后,学生的学习兴趣、课堂的趣味性、对课程的应用的了解、爱国情操的提升、科研兴趣的提升,明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组期末关于巴斯德事迹方面的选择题得分率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论巴斯德案例教学法融入医学微生物学及免疫学理论课教学模式,可提升医学理论课的授课效果。

关键词：医学微生物学巴斯德案例教学法教学方法