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腺病毒六邻体蛋白型间线性化抗原位点的研究

中华实验和临床病毒学杂志 2002年第1期16卷 44-47页

作者：张霆辛若雷张勤包怡华吴建新首都儿科研究所北京市感染与免疫中心实验室北京100020

目的　对人类腺病毒 (adenovirus,AdV)六邻体型间抗原位点的特性进行研究。方法　通过计算机对腺病毒六邻体氨基酸序列进行比较分析 ,结合抗原性的预测结果和六邻体蛋白三维空间结构的肽段暴露状态 ,选定了保守性抗原位点进行多肽合成... 详细信息

目的　对人类腺病毒 (adenovirus,AdV)六邻体型间抗原位点的特性进行研究。方法　通过计算机对腺病毒六邻体氨基酸序列进行比较分析 ,结合抗原性的预测结果和六邻体蛋白三维空间结构的肽段暴露状态 ,选定了保守性抗原位点进行多肽合成或通过构建重组质粒表达蛋白 ,将合成的六邻体肽段和表达纯化的蛋白抗原免疫动物后 ,用免疫印迹和间接免疫荧光方法检测抗血清的免疫特异性。结果　免疫印迹分析显示 ,抗多肽抗体和抗重组蛋白抗体均与腺病毒的六邻体蛋白特异性识别。间接免疫荧光显示 ,腺病毒感染HeLa细胞核内荧光着色 ,并且抗血清有较好的腺病毒型间反应性。合成多肽抗体与含有相同肽段的重组蛋白抗原产生特异性结合。结论　在腺病毒六邻体蛋白中存在有线性化的型间抗原位点。

关键词：腺病毒抗原位点合成多肽基因表达

腺病毒六邻体蛋白部分基因的构建表达及表达产物抗原性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第4期22卷 433-434页

作者：张勤张霆辛若雷包怡华吴建新首都儿科研究所北京100020

腺病毒是人类呼吸道、胃肠道、眼部等部位许多疾患的重要病原之一，引起人的急性呼吸系统疾病、流行性角膜结合膜炎、咽结合膜热等。在儿童急性感染疾病中，2%-7%是由腺病毒引起的，有时可造成一定范围的流行。由于腺病毒型别较多，给... 详细信息

腺病毒是人类呼吸道、胃肠道、眼部等部位许多疾患的重要病原之一，引起人的急性呼吸系统疾病、流行性角膜结合膜炎、咽结合膜热等。在儿童急性感染疾病中，2%-7%是由腺病毒引起的，有时可造成一定范围的流行。由于腺病毒型别较多，给实验室诊断带来一定困难。在临床时行腺病毒感染的快速诊断时常需要获得特异性强的高效价病毒抗体。而传统的纯化病毒方法制备腺病毒抗体费时、费力，且往往难以得到特异性较高的抗体。本研究通过计算机比较腺病毒六邻体氨基酸序列，结合三维结构图提示的多肽暴露情况以及抗原性预测分析，选择性地表达了若干个抗原性较强的多肽，并对其具有免疫原性进行了初步分析。

关键词：基因表达免疫原性间接免疫荧光法免疫印迹法腺病毒六邻体蛋白

北京市未经抗病毒治疗的HIV感染者耐药突变流行性调查

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中华医学杂志 2011年第21期91卷 1453-1456页

作者：叶景荣郭蕾卢红艳辛若雷曾毅中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 北京市疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心

目的了解北京市未经抗病毒治疗的HIV感染者耐药突变流行性情况。方法选取北京市2007年新确认HIV感染者抗凝全血标本150份，提取血浆中的病毒RNA，用反转录PCR和套式PCR扩增HIV的pol基因，并进行序列测定及耐药分析。结果成功扩增出111... 详细信息

目的了解北京市未经抗病毒治疗的HIV感染者耐药突变流行性情况。方法选取北京市2007年新确认HIV感染者抗凝全血标本150份，提取血浆中的病毒RNA，用反转录PCR和套式PCR扩增HIV的pol基因，并进行序列测定及耐药分析。结果成功扩增出111份标本的pol基因；未经抗病毒治疗的HIV感染者的耐药率为8．1％（9／111），蛋白酶抑制剂耐药率为3．6％（4／111），核苷类反转录酶抑制剂耐药率为1．8％（2／111），非核苷类反转录酶抑制剂耐药率为3．6％（4／111）。结论北京市未经抗病毒治疗的HIV感染者耐药性处于相对较高的水平，应当定期进行HIV耐药性监测。

关键词： HIV-1 抗药性流行病学分子

北京地区流行的HIV-1 CRF01AE株基因特征研究

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中华流行病学杂志 2010年第11期31卷 1231-1234页

作者：叶景荣卢红艳白立石辛若雷曾毅中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 北京市疾病预防控制中心

目的分析北京地区HIV-1 CRF01 AE株在的基因特征.方法采集北京地区2006-2008年新确证HIV感染者的抗凝全血标本,分离血浆和提取病毒RNA,用反转录/巢式聚合酶链式反应扩增病毒gag基因,对获得的105条CRF01_AE株序列进行系统进化分析,并... 详细信息

目的分析北京地区HIV-1 CRF01 AE株在的基因特征.方法采集北京地区2006-2008年新确证HIV感染者的抗凝全血标本,分离血浆和提取病毒RNA,用反转录/巢式聚合酶链式反应扩增病毒gag基因,对获得的105条CRF01_AE株序列进行系统进化分析,并通过计算组间距离和Entropy核苷酸多态性差异方法分析病毒株的遗传特征.结果在CRF01 AE株序列系统进化树中存在4个主要的亚簇,Homo-Max亚簇包含67例样本,同参考株CM240组间基因离散率为5.4%,组内离散率为2.8%;Hetero亚簇包含6例样本,组间基因离散率为4.8%,组内离散率为4.2%.Mix亚簇包含8例样本,组间基因离散率为4.2%,组内离散率为5.2%.Homo-Min亚簇包含18例样本,组间基因离散率为4.4%,组内离散率为2.8%.Homo-Max、Hetero和Homo-Min亚簇无其他国家的序列,Mix亚簇与越南和泰国CRF01 AE株关系密切;核苷酸多态性分析结果显示,以Mix亚簇为参照,Homo-Max、Homo-Min和Hetero亚簇分别有37、29和11个位点的核苷酸组成,差异有统计学意义.结论北京地区流行的CRF01_AE病毒株中首次观察到4个独立的亚簇;Homo-Max亚簇株为最主要的CRF01_AE株;Mix亚簇株与来自于泰国和越南的CRF01 AE株有较高同源性.

关键词：人类免疫缺陷病毒亚型巢式聚合酶链式反应

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人流感病毒核蛋白的重组表达及其抗原性分析

中华实验和临床病毒学杂志 2008年第3期22卷 208-210页

作者：包怡华辛若雷邓洁王芳钱渊吴建新张霆首都儿科研究所北京100020

目的探索用原核表达的人甲3型流感病毒核蛋白（NP）免疫小鼠所获得的抗重组蛋白抗体检测甲型流感病毒的可行性。方法用Clustal X，Antheprot等软件，对IFV-A3 NP进行分析，确定保守区并分析其抗原性。RT-PCR获得NP基因，分3段克隆NP... 详细信息

目的探索用原核表达的人甲3型流感病毒核蛋白（NP）免疫小鼠所获得的抗重组蛋白抗体检测甲型流感病毒的可行性。方法用Clustal X，Antheprot等软件，对IFV-A3 NP进行分析，确定保守区并分析其抗原性。RT-PCR获得NP基因，分3段克隆NP基因到PET-28（C），并在BL21中诱导表达。经Ni-Agarose亲和层析柱纯化后，免疫BALB／c鼠制备抗重组蛋白抗体。用Western Blot和免疫组化法检测抗重组蛋白抗体与病毒抗原的反应性。结果重组质粒在BL21中高效表达，表达量为15～20mg／L菌液。Western Blot检测显示，抗NP1、NP2、NP3多克隆抗体（1：2000）均对流感病毒NP具有反应性。免疫组化检测也显示，抗NPI、NP2、NP3多克隆抗体对IFV-A3、-Al感染的MDCK细胞有特异性染色，抗体滴度从1：640到1：1280。结论重组表达的NP能够诱导产生高效价多克隆抗体，所产生的抗体与IFV-A3、Al具有交叉免疫反应性。通过生物信息学分析预测抗原性并制备多克隆抗体是可行的，并可望用于流感病毒感染的早期快速诊断的研究中。

关键词：正黏病毒科基因表达调控病毒抗原免疫组织化学计算生物学

男男性行为人群血液与尿液快速HIV-1抗体检测效力分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第10期40卷 753-756页

作者：李佳辛若雷孙伟东张琴贺淑芳李洁卢红艳北京市疾病预防控制中心北京市预防医学研究中心性病艾滋病防治所 100013

目的比较HIV-1抗体血液与尿液快速检测试剂在男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)中的检测性能,探讨北京市艾滋病防控的适宜技术。方法在北京市疾病预防控制中心艾滋病门诊招募MSM,使用Alere Determine HIV-1/2人类免疫缺陷... 详细信息

目的比较HIV-1抗体血液与尿液快速检测试剂在男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)中的检测性能,探讨北京市艾滋病防控的适宜技术。方法在北京市疾病预防控制中心艾滋病门诊招募MSM,使用Alere Determine HIV-1/2人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂盒(胶体硒法,A试剂盒)、万泰生物HIV-1尿液抗体检测试剂盒(胶体金法,B试剂盒)和上海英旻泰公司(IMT)HIV-1/2免疫印迹试剂盒(Western blot,WB法,C试剂盒)分别进行检测。统计分析HIV-1抗体血液与尿液快速检测试剂在MSM中的敏感性、特异性,比较与WB检测结果的一致率。结果874例MSM中HIV抗体阳性447例(51.14%),阴性427例。A试剂盒漏检1例阳性病例,B试剂盒漏检23例阳性病例,A试剂盒的检出率高于B试剂盒。以C试剂盒为参照,A和B试剂盒的检测敏感性分别为99.78%和94.85%,特异性均为100%,总体符合率分别为99.89%(Kappa=0.998)、97.37%(Kappa=0.947)。结论尿液快速检测试剂敏感性不如血液,但是采样方便、安全性高、可及性强,更适合自我检测,建议在MSM中推广尿液快速检测用于HIV-1抗体筛查检测。

关键词：男男性行为 HIV-1 快速检测尿液

北京市2005-2012年男男性行为者同伴推动抽样法HIV监测分析

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中华流行病学杂志 2016年第10期37卷 1383-1391页

作者：孙燕鸣孙伟东卢红艳辛若雷贺淑芳张琴岳海范新刚马小燕北京市疾病预防控制中心性病艾滋病防治所北京100013

目的探索采用同伴推动抽样法（Respondent-Driven Sampling，RDS）开展MSM HIV监测的可行性及该人群HIV感染趋势分析。方法 2005-2012年每年4-10月采用RDS法在北京征募MSM开展调查，了解目标人群人口学特征、艾滋病相关危险行为以及HI... 详细信息

目的探索采用同伴推动抽样法（Respondent-Driven Sampling，RDS）开展MSM HIV监测的可行性及该人群HIV感染趋势分析。方法 2005-2012年每年4-10月采用RDS法在北京征募MSM开展调查，了解目标人群人口学特征、艾滋病相关危险行为以及HIV和梅毒感染状况。结果 2005-2012年各调查427，540，607，614，616，602，579和600名MSM。HIV感染率由2005年的4.2%（95% CI：1.9-7.0）上升至2012年的10.1%（95% CI：7.2-13.2，P=0.02）。外地户籍、25岁以上和高中及以下教育水平MSM HIV感染率人群估计分别从3.3%（95% CI：1.8-5.4）、6.4%（95% CI：2.2-9.5）和5.5%（95% CI：2.2-8.9）升至2012年的10.7%（95% CI：7.8-14.6，P=0.04）、7.6%（95% CI：5.4-10.3，P=0.04）和10.4%（95% CI：7.2-14.3，P=0.04）。25岁及以下者和高中以上文化程度者HIV感染率分别自2009和2007年起开始上升，从1.7%（95% CI：0.4-3.1）和1.1%（95% CI：0.2-1.7）升至13.7%（95% CI：7.2-20.4）和9.1%（95% CI：4.7-13.8），未达显著性水平。最近6个月有2-9名男性伴者HIV感染率由2005年的4.0%（95% CI：1.0-8.0）上升至2012年的12.6%（95% CI：8.7-16.7，P=0.02）。结论 RDS是一种稳定性较高的隐匿人群抽样方法，可用于长期监测。2005-2012年北京市MSM人群HIV感染率呈上升趋势，应重点关注MSM人群中的年轻人及高学历者。

关键词：艾滋病病毒同伴推动抽样法男男性行为者监测

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北京市HIV抗体检测室间比对发现问题分析

中国卫生检验杂志 2013年第12期23卷 2693-2696,2701页

作者：辛若雷孙伟东李佳赵伟苏雪丽卢红艳北京市预防医学研究中心北京100013 首都医科大学公共卫生学院北京100069 北京市石景山区疾病预防控制中心北京100043

目的了解北京市所辖艾滋病筛查实验室室间比对HIV抗体检测能力差异。方法制备不同浓度梯度的HIV抗体随机盲样,发放给各筛查实验室按要求进行HIV抗体检测。用SPSS 18.0软件计算离散指数。结果 98.8%以上的筛查实验室检测结果正确,并提供... 详细信息

目的了解北京市所辖艾滋病筛查实验室室间比对HIV抗体检测能力差异。方法制备不同浓度梯度的HIV抗体随机盲样,发放给各筛查实验室按要求进行HIV抗体检测。用SPSS 18.0软件计算离散指数。结果 98.8%以上的筛查实验室检测结果正确,并提供较完备和准确的检测原始记录、实验结果和复检化验单等记录文件。部分实验室在临界值计算或设置、质控图制作和弱阳性样本检测等方面存在问题和不足之处。结论随机盲样HIV抗体检测室间比对表明北京市HIV抗体检测队伍过硬、检测结果准确可靠。考评中发现的问题和不规范操作有待于继续加强专业技术培训和实验室督导管理。

关键词：人类免疫缺陷病毒抗体筛查质量控制室间比对

HIV-1 CRF55_01B毒株流行特征的研究进展

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实用预防医学 2022年第6期29卷 766-768,F0003页

作者：梁淑家辛若雷广西壮族自治区疾病预防控制中心广西重大传染病防控与生物安全应急响应重点实验室(21-220-12)广西南宁530028 北京市疾病预防控制中心北京100013

CRF55_01B是我国报道的HIV-1主要流行毒株之一,具有较为独特的流行病学和基因进化特征。近几年HIV-1分子流行病学监测发现CRF55_01B已经成为我国第五个主要流行HIV-1毒株。本研究从他的发现起源、流行情况、致病性和耐药性及参与的重组... 详细信息

CRF55_01B是我国报道的HIV-1主要流行毒株之一,具有较为独特的流行病学和基因进化特征。近几年HIV-1分子流行病学监测发现CRF55_01B已经成为我国第五个主要流行HIV-1毒株。本研究从他的发现起源、流行情况、致病性和耐药性及参与的重组等方面进行综述,并讨论了与其流行密切相关的社会和生物学因素。

关键词： HIV-1 CRF55_01B重组毒株流行特征流行重组型