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体内特异性阻断白介素17在BALB/c小鼠已建立哮喘模型中作用的研究

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体内特异性阻断白介素17在BALB/c小鼠已建立哮喘模型中作用的研究

作者：车鸾卿大连医科大学

学位级别：硕士

背景和目的：支气管哮喘是一种复杂的气道反应综合征,以气道阻塞、气道炎症和气道高反应性为特点。目前的很多研究表明,T细胞在哮喘的发生和发展过程中发挥了重要的作用。T细胞可以通过产生细胞因子介导炎症细胞聚集和气道高反应性的发... 详细信息

背景和目的：支气管哮喘是一种复杂的气道反应综合征,以气道阻塞、气道炎症和气道高反应性为特点。目前的很多研究表明,T细胞在哮喘的发生和发展过程中发挥了重要的作用。T细胞可以通过产生细胞因子介导炎症细胞聚集和气道高反应性的发生。IL-17是一种新型的细胞因子,目前研究证明IL-17主要由Th-17细胞产生。我们实验小组之前的实验证明：在已建立的（即再激发）小鼠哮喘模型体内,IL-17水平明显升高。目前大部分针对IL-17与哮喘的研究都是采用原发的小鼠哮喘模型,关于IL-17在已建立的小鼠哮喘模型即再激发的小鼠哮喘模型中的作用,还没有人做过研究。本实验的目的是探讨IL-17在再激发小鼠哮喘模型中的作用。即探讨在激发6小时和48小时后,特异性阻断IL-17对气道炎症、气道阻塞和气道高反应性的作用。方法：1、建立再激发小鼠哮喘模型：雌性APF级BALB/c小鼠1d、14d腹腔内注射致敏液（20μg OVA和2.25 mg氢氧化铝）。第28、29、30、70天雾化吸入1% OVA 20分钟。与最后一次激发前24小时和2小时分别给予不同的处理。2、测量气道高反应性：应用flexiVent小动物通气机（SCIREQ, Montreal, PQ, Canada）测量气道高反应性（频率60次/分,潮气量500-μl）。记录基线值和不同乙酰甲胆碱浓度下（3.125,6.25,12.5,5 mg/ml）AHR值。3、细胞切片制作染色及细胞分类：取肺泡灌洗液内沉淀细胞制成切片,晾干后吉姆萨染色。显微镜下进行细胞分类,每张切片至少计数300个细胞。4、细胞因子水平测量：使用试剂盒测量肺泡灌洗液上清液中IL-4、IL-5、IL-13、KC和MIP-2浓度。5、制作肺组织切片和切片染色：提取肺泡灌洗液后,切除小鼠肺组织,保存于浓度为10%的福尔马林溶液中。送于西日本病理研究所进行HE染色和PAS染色。结果：1、成功建立再激发哮喘模型。与对照组相比,哮喘组小鼠出现哮喘速发相反应表现,气道炎症和气道高反应性均显著提升。2、再激发后6小时：IL-17阻断组小鼠与阳性对照组相比,在乙酰甲胆碱浓度为3.125,6.25,12.5mg/ml激发时,差异无统计学意义（P＞0.05）;在乙酰甲胆碱浓度为25 mg/ml激发时,IL-17阻断组小鼠RL%明显降低（P＜0.05）。小鼠肺泡灌洗液中细胞总数及中性粒细胞计数明显低于阳性对照组（P＜0.05）。Th2相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13与阳性对照组相比无明显差别;中性粒细胞相关趋化因子KC、MIP-2与阳性对照组相比明显降低（P＜0.05）,与阴性对照组相比差异无显著性。支气管及伴行血管周围炎症细胞数量减少,支气管管壁水肿减轻,管腔狭窄不明显。3、再激发后48小时：IL-17阻断组与阳性对照组相比,同等剂量乙酰甲胆碱激发（3.125,6.25,12.5,25 mg/ml）实验中,气道反应性检测仅有轻微降低,但无统计学意义（P＞0.05）小鼠肺泡灌洗液中细胞总数及中性粒细胞计数明显低于阳性对照组（P＜0.01）。细胞总数、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞计数无明显差别（P＞0.05）。PAS染色显示杯状细胞减少。结论：体内特异性阻断IL-17可以缓解BALB/c小鼠已建立哮喘模型的气道阻塞、气道炎症、气道高反应性。

关键词： IL-17 哮喘气道炎症

运动激发试验联合呼出气一氧化氮在诊断儿童胸闷变异性哮喘中的应用

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中华医学杂志 2023年第34期103卷 2646-2646页

作者：车鸾卿(编译) 浙江大学医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科

胸闷变异性哮喘(CTVA)是一种不典型的哮喘,以胸闷为唯一表现。由于缺乏典型的哮喘症状,因此需要诊断性检查。本研究的目的是探讨运动激发试验(ECT)和呼出气一氧化氮(FeNO)在儿童CTVA诊断中的价值。

关键词：呼出气一氧化氮运动激发试验诊断性检查胸闷变异性哮喘哮喘症状 CTV 儿童

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儿童胸闷不典型哮喘的危险因素及临床特征

中华医学杂志 2023年第34期103卷 2673-2673页

作者：车鸾卿(译者) 浙江大学医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科

儿童胸闷不典型哮喘以胸闷为唯一症状，尚未得到广泛认识。本研究试图发现该病的危险因素，总结其临床特点，为该病的诊断提供一些建议。

关键词：儿童胸闷不典型哮喘胸闷

IL-1信号通路调控臭氧诱导的IL-17产生与中性粒细胞性气道炎症

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IL-1信号通路调控臭氧诱导的IL-17产生与中性粒细胞性气道炎症

中华医学会呼吸病学年会——2013（第十四次全国呼吸病...

作者：车鸾卿张超金嫣刘娟陈志华李雯沈华浩浙江大学医学院附属二院呼吸与重症医学中心

目的研究IL-1信号通路在中性粒细胞哮喘起到炎症中的作用。方法臭氧暴露建立中性粒细胞哮喘模型;应用IL-1R敲除小鼠阻断IL-1通路,观察其对IL-17的产生以及气道炎症的影响;体外分离对照组和模型组肺组织巨噬细胞,观察其分泌IL-1beta的能力。

关键词：

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中国胸闷变异性哮喘临床研究回顾及启示

中华医学杂志 2023年第34期103卷 2639-2646页

作者：车鸾卿杜旭菲颜伏归黄华琼华雯张弘李娜胡越邵喆婳邵明军姚琛黄佳杞李雯沈华浩刘传合浙江省呼吸疾病诊治及研究重点实验室浙江大学医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科，杭州310009 浙江省中医院呼吸内科，杭州310003 首都儿科研究所附属儿童医院变态反应科，北京100020

胸闷变异性哮喘(CTVA)于2013年由我国学者首次报道并命名。是以胸闷为唯一或主要症状的一种全新哮喘临床类型,没有反复发作的喘息、气促等典型的哮喘表现,患者肺部听诊没有哮鸣音。CTVA目前尚无总体发病率的流行病学数据;其发病机制与... 详细信息

胸闷变异性哮喘(CTVA)于2013年由我国学者首次报道并命名。是以胸闷为唯一或主要症状的一种全新哮喘临床类型,没有反复发作的喘息、气促等典型的哮喘表现,患者肺部听诊没有哮鸣音。CTVA目前尚无总体发病率的流行病学数据;其发病机制与典型哮喘类似,存在嗜酸性粒细胞气道炎症;由于CTVA缺乏典型哮喘的临床表现,部分临床医师对该疾病认知不足等原因容易导致误诊漏诊;目前CTVA的诊断标准是:以胸闷作为唯一或主要症状,无喘息、气促等典型哮喘的症状和体征,同时具备可变气流受限客观检查中的任一条,抗哮喘治疗有效,除外心血管、消化、神经肌肉、精神等其他疾病所引起的胸闷;CTVA治疗参照典型哮喘,但具体疗程不确定,可能需要长期治疗;中医中药对其有一定的治疗效果;多数CTVA患者经积极抗哮喘治疗后预后良好。本文对我国学者2013年以来CTVA相关研究进行回顾,为进一步探索CTVA提供新视角。

关键词：哮喘胸闷变异性哮喘不典型哮喘诊断治疗

腹腔注射TFI通过抑制IL-17保护臭氧诱导的气道炎症

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腹腔注射TFI通过抑制IL-17保护臭氧诱导的气道炎症

2016（第三十八届）浙江省呼吸系病学术年会

作者：车鸾卿张超吴银芳徐峰楼剑张斌应颂敏陈志华李雯沈华浩浙江大学医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科

目的:研究TNFR2-Fc-IL-1ra(TFI)在臭氧诱导的中性粒细胞气道炎症中的作用。方法:臭氧暴露建立中性粒细胞气道炎症模型;TFI腹腔给药干预模型组及对照组小鼠,观察其对气道炎症细胞如巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞绝对值的作用,及其对炎...

目的:研究TNFR2-Fc-IL-1ra(TFI)在臭氧诱导的中性粒细胞气道炎症中的作用。方法:臭氧暴露建立中性粒细胞气道炎症模型;TFI腹腔给药干预模型组及对照组小鼠,观察其对气道炎症细胞如巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞绝对值的作用,及其对炎症因子KC、MIP-2的作用,探讨其对IL-17+淋巴细胞及肺组织IL-17表达的影响。结果:成功建立臭氧介导的中性粒细胞气道炎症模型;TFI腹腔给药有效降低气道灌洗液中巨噬细胞、

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肺血管内皮细胞蛋白酶活化受体通路在脂多糖诱导的急性肺损伤中的作用及机制研究

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肺血管内皮细胞蛋白酶活化受体通路在脂多糖诱导的急性肺损伤中的...

2016（第三十八届）浙江省呼吸系病学术年会

作者：楼剑胡越吴银芳车鸾卿毛园园应颂敏陈志华李雯沈华浩浙江大学医学院附属第二医院

目的:研究肺血管内皮细胞蛋白酶活化受体(PARs)通路在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)中的作用与相关机制。方法:通过流式细胞术及Westernblot法检测观察LPS能否诱导原代C57小鼠肺微血管内皮细胞PARs信号通路的活化;利用Q-PCR及ELISA...

目的:研究肺血管内皮细胞蛋白酶活化受体(PARs)通路在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)中的作用与相关机制。方法:通过流式细胞术及Westernblot法检测观察LPS能否诱导原代C57小鼠肺微血管内皮细胞PARs信号通路的活化;利用Q-PCR及ELISA法检测观察LPS能否上调原代小鼠肺微血管内皮细胞

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嗜酸性粒细胞通过ROS促进造血干细胞动员的研究

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嗜酸性粒细胞通过ROS促进造血干细胞动员的研究

2016（第三十八届）浙江省呼吸系病学术年会

作者：张超易微微李飞朱忱赖天文华雯车鸾卿陈志华李雯应颂敏鞠振宇沈华浩浙江大学医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科杭州师范大学衰老研究所

目的:嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos),是哮喘的特异性炎症效应细胞,发挥重要的病理及调控作用。本研究利用小鼠哮喘模型和IL-5过表达(IL-5 Tg)小鼠深入研究Eos对造血干细胞(LSKs)功能影响的分子学机制。方法:采用多色流式标记的方法分析...

目的:嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos),是哮喘的特异性炎症效应细胞,发挥重要的病理及调控作用。本研究利用小鼠哮喘模型和IL-5过表达(IL-5 Tg)小鼠深入研究Eos对造血干细胞(LSKs)功能影响的分子学机制。方法:采用多色流式标记的方法分析及分选哮喘模型和IL-5 Tg小鼠中的造血干/祖细胞和Eos,将

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稻田螺旋推进车多向磁谐振无线充电装置的设计与试验研究

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稻田螺旋推进车多向磁谐振无线充电装置的设计与试验研究

作者：崔正卿浙江科技大学

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